KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược học FULL (dược LIỆU và dược cổ TRUYỀN) nghiên cứu thành phần hóa học của vỏ hạt đậu xanh

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA VỎ HẠT ĐẬU XANH (Vigna radiata (L).Wilczeck), họ Đậu (Fabaceae) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Nơi thực hiện: Bộ môn dược liệu Trường Đại Học Dược Hà Nội MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1:TỔNG QUAN 1.1 VỀ THỰC VẬT 1.1.1 Vị trí phân loại chi Vigna 1.1.2 Đặc điểm thực vật phân bố chi Vigna 1.1.3 Một số đặc điểm loài Vigna radiata (L.) Wilczeck 1.2 VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC 1.2.1 Đậu xanh toàn hạt 1.2.2 Vỏ hạt đậu xanh .6 1.3 VỀ TÁC DỤNG SINH HỌC .7 1.3.1 Tác dụng bảo vệ thể chống phóng xạ 1.3.2 Tác dụng chống đột biến 1.3.3 Tác dụng điều trị chỗ tổn thương bỏng thực nghiệm thỏ 1.3.4 Tác dụng chống u thực nghiệm chuột nhắt trắng 1.3.5 Tác dụng dược lý toàn hạt đậu xanh 1.3.6 Tác dụng hạ đường huyết dịch chiết Vỏ đậu xanh (MBS) dịch chiết giá đỗ (MBSC) chuột bị tiểu đường typ II 11 1.3.7 Tác dụng chống kích ứng 12 1.3.8 Tác dụng ức chế Cytokin gây viêm đại thực bào bị kích Thích LPS( Polylyposaccarid) 12 1.3.9 Tác dụng ức chế Vitexin Isovitexin hình thành AGEs (advanced glycation endproducts) 13 1.3.10 Tác dụng Virus .13 1.3.11 Tác dụng dịch chiết HHKV 13 1.4 Tính vị, cơng 14 1.5 Công dụng 15 1.6 Bài thuốc có đậu xanh 15 1.7 Một số chế phẩm có đậu xanh 17 CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU, THIẾT BỊ 19 2.1.1 Nguyên liệu 19 2.1.2 Hóa chất dụng cụ 19 2.1.3 Thiết bị nghiên cứu 19 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 21 3.1 MÔ TẢ ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI CỦA MẪU NGHIÊN CỨU .21 3.1.1.Đặc điểm đậu xanh 21 3.1.2 Xác định tên khoa học mẫu nghiên cứu 23 3.1.3 Đặc điểm dược liệu Vỏ hạt đậu xanh 23 3.2 NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC .23 3.2.1 Định tính nhóm chất hữu Vỏ đậu xanh phản ứng hóa học 23 3.2.2 Chiết xuất phân đoạn dịch chiết từ Vỏ đậu xanh 30 3.2.3 Định tính phân đoạn dịch chiết từ Vỏ đậu xanh SKLM 34 3.2.4 Phân lập chất từ phân đoạn dịch chiết VDX1 39 3.2.5 Kiểm tra độ tinh khiết chất phân lập 42 3.2.6 Nhận dạng chất phân lập 45 3.3 BÀN LUẬN 50 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 53 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT MBS Dịch chiết giá đỗ MBSC Dịch chiết vỏ đậu xanh SKLM Sắc ký lớp mỏng VDX Vỏ đậu xanh VDX1, VDX2, VDX3 Cắn vỏ đậu xanh, vỏ đậu xanh 2, vỏ đậu xanh FV1, FV2 Flavonoid1, flavonoid phân lập từ đậu xanh LPS Lypopolysaccarid TNF Yếu tố hoại tử khối u HHKV Dịch chiết gồm thành phần: hà thủ đỏ, hồng kỳ, kim ngân, vỏ đậu xanh SKLM Sắc ký lớp mỏng PĐ1,PĐ2,PĐ3 Phân đoạn 1, phân đoạn 2, phân đoạn sau chạy cột STT Số thứ tự Ast Ánh sáng thường h Hàm ẩm H Hiệu suất m Khối lượng cắn phân đoạn M Khối lượng dược liệu ban đầu cân để chiết MDA Malonadialdehyd DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Các Flavonoid có Vỏ hạt đậu xanh Bảng 3.1: Kết định tính nhóm chất Vỏ đậu xanh phản ứng hóa học .29 Bảng 3.2: Hiệu suất chiết xuất phân đoạn từ Vỏ đậu xanh 32 Bảng 3.3: Kết phân tích SKLM VDX1, VDX2, VDX3 khai triển với hệ dung môi 34 13 Bảng 3.4: Số liệu phổ C-NMR, H-NMR FV1 46 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 3.1: Ảnh chụp đặc điểm đậu xanh .22 Hình 3.2: Sơ đồ chiết xuất phân đoạn dịch chiết từ Vỏ đậu xanh .33 Hình 3.3: Ảnh chụp sắc ký đồ VDX1, VDX2, VDX3 khai triển với hệ dung môi 37 Hình 3.4: Ảnh chụp sắc ký đồ VDX1 khai triển với hệ dung mơi 38 Hình 3.5: Ảnh chụp sắc ký đồ phân đoạn (PĐ2) 38 Hình 3.6: Ảnh chụp sắc ký đồ FV2 hệ dung mơi khác .43 Hình 3.7: Ảnh chụp sắc ký đồ FV1 hệ dung mơi khác .44 Hình 3.8: Cấu trúc hóa học Isovitexin 48 Hình 3.9: Cấu trúc hóa học Vitexin 49 ĐẶT VẤN ĐỀ Đậu xanh trồng thuộc họ Đậu ( Fabaceae) gần gũi với nhân dân ta Cũng loài đậu đỗ khác, hạt đậu xanh loại thực phẩm có giá trị dinh dưỡng cao, cung cấp nhiều glucid, lipid, vitamin đặc biệt cung cấp nguồn protid thực vật quan trọng cho nhứng người ăn kiêng, ăn chay, người bị đái tháo đường, tăng lipid máu…Từ xa xưa, nhân dân ta trồng đậu xanh để lấy hạt loại lương thực chữa số bệnh thường gặp Theo kinh nghiệm dân gian, đậu xanh có vị ngọt, lạnh, tính mát, vào kinh tâm vị, có tác dụng nhiệt, giải độc, trừ phiền nhiệt [7] Ngồi cịn có tác dụng tiêu thử, lợi thủy, giải độc [36] Vỏ hạt đậu xanh có vị ngọt, tính mát, khơng độc, có tác dụng nhiệt giải độc tốt hai mầm [33] Cũng theo kinh nghiệm dân gian, vỏ đậu xanh phơi khô dùng làm gối có tác dụng rút mồ hơi, làm mát đầu gáy, chống bẹp đầu cho trẻ sơ sinh Theo "Nhật hoa tử thảo"[50] vỏ đậu xanh dùng làm gối kê trị bệnh đầu phong, đầu thống, cao huyết áp, nhiệt ngừa say nắng, giảm bứt rứt, giúp sáng mắt… Năm 1996, nhóm nghiên cứu Trần Lưu Vân Hiền cộng công bố kết cho thấy, thành phần chủ yếu vỏ đậu xanh flavonoid, vitexin chiếm 90,5% iso vitexin chiếm 9,5% [1818],[36] Sau loạt cơng trình nghiên cứu tác dụng sinh học Flavonoid vỏ đậu xanh có tác dụng bảo vệ thể chống phóng xạ, chống đột biến nhiễm sắc thể, nhiệt, ức chế rõ rệt phản ứng peroxide hóa thể…Phịng khám đa khoa Đại học Y dược TP HCM chiết xuất thành công chất flavonoid từ vỏ đậu xanh sản xuất thành biệt dược chữa viêm gan B,C mang tên Vitex Vitexin [51] Để góp phần nghiên cứu đầy đủ loại dược liệu này, tiến hành đề tài ― Nghiên cứu thành phần hóa học Vỏ hạt đậu xanh (Vigna radiata (L).Wilczeck)‖, họ Đậu (Fabaceae) với nội dung sau: 1) Định tính nhóm chất Vỏ hạt đậu xanh phản ứng hóa học 2) Chiết xuất phân đoạn dịch chiết từ Vỏ đậu xanh Định tính phân đoạn dịch chiết sắc kí lớp mỏng 3) Phân lập số chất từ Vỏ đậu xanh 4) Sơ nhận dạng chất phân lập CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 VỀ THỰC VẬT 1.1.1 Vị trí phân loại chi Vigna Theo Võ Văn Chi tài liệu [2],[7],[8],[24],[38] chi Vigna có vị trí phân loại sau: Giới Plantae Ngành Ngọc Lan (Magnoliophyta) Lớp Ngọc Lan (Magnoliopsida) Phân lớp Hoa Hồng ( Rosidae) Bộ Đậu (Fabales) Họ Đậu (Fabaceae) Chi Vigna (Savi, Nouovo Giorn) Theo hệ thống phân loại thực vật trước [38], đậu xanh thuộc chi Phaseolus Tuy nhiên, theo hệ thống phân loại nay, đậu xanh xếp vào chi Vigna[23], [29] 1.1.2.Đặc điểm thực vật phân bố chi Vigna Theo ‗Thực vật chí Trung Quốc‖ [3939], chi Vigna có đặc điểm sau: Cây leo mọc thẳng đứng, bụi thấp Lá hình lơng chim, có chét, kèm hình khiên có mấu gốc, có thùy, hình tim cắt vát Cụm hoa nách ngọn, mấu cuống thường dày có tuyến Lá bắc bắc rụng vào thời kỳ định hàng năm Đài 5, có cưa, gồm mơi Tràng hoa màu vàng, xanh tía; cánh bên ngắn cánh cờ, cánh thìa dài gần cánh bên,được uốn cong vào không cuộn lại đỉnh khơng có mỏ dài xoắn ốc Nhị xếp thành bó, bao phấn đồng nhất, bầu nhụy khơng có cuống, vịi nhụy hình chỉ, có chùm lơng gần đỉnh ,có ngạnh có lơng rậm theo chiều dọc bên Núm 1‘‘ 73,18 73,2 4,57,1H,d,9.5Hz 4.60 (1H, d, J = 9.7 Hz, H1′′) 2‘‘ 69,90 70,2 4,112 3‘‘ 78,74 78,9 3,643 4‘‘ 67,20 70,4 3,663 5‘‘ 81,16 81,4 3,386 6‘‘ 61,03 61,4 3,87 13 Từ kết liệu phổ C-NMR 1H-NMR so sánh với isovitexin chuẩn [45], ta thấy có nhiều điểm phù hợp Trên phần khung flavonoid, FV1 có carbon bậc IV cộng hưởng 181,545 đặc trưng nhóm carbonyl C4 Cùng với carbon mang oxy C2 C9 ( cộng hưởng 163,165 156,154 ppm) tín hiệu cộng hưởng δC 102,402 ppm (C3) carbon bậc cho thấy FV1 flavon (khơng có nhóm OH C3) Phổ 13 C-NMR 1H-NMR cho thấy có cặp carbon proton cộng hưởng δC 128,119 115,850 proton tương ứng cộng hưởng δH 7,896(2‖) 8,901 (3‘‘); δH 7,885(2‖) 6,901(6‖), chứng tỏ FV1 có cấu trúc đối xứng vịng B có nhóm vị trí C4‘ Ngồi cặp cacbon đối xứng này, khung flavonoid FV1 carbon bậc ( δC 108,838 ) chứng tỏ vòng A FV1 có nhóm vị trí khơng có nhóm (Carbon bậc 3).Vị trí số cho δH 13,525 vùng cộng hưởng thấp, δC 161,148 chứng tỏ có nhóm OH vị trí Vị trí Carbon bậc có δC 163,165ppm Phần đường gắn vào C6 13 Trên phổ C-NMR, có tín hiệu cộng hưởng từ vùng 61,037-81,168 ppm đặc trưng phần đường Dự đốn FV1 flavonoid với phần đường carbon Căn vào số liệu phổ MS NMR, so sánh với liệu phổ tinh khiết Isovitexin chúng tơi xác định FV1 Isovitexin có cơng thức cấu tạo trình bày hình 3.8 HO 6'' HO (R) 5'' 4'' (S) (R ) (R) 3' ' HO O (R) O 10 1'' 2'' HO 2' 3' 4' 1' 6' OH 5' O OH OH Hình 3.8: Cấu trúc hóa học Isovitexin 3.2.6.2.Xác định cấu trúc hóa học FV2 FV2 chất bột màu vàng nhạt, tan tốt DMSO, khai triển lên mỏng có huỳnh quang màu đỏ cam UV 365 huỳnh quang hơ NH3 - Kết phổ khối LC-MSD FV2 cho giá trị phổ [M ] 430,5 Phổ âm bị trừ proton nên sau làm trịn khối lượng phân tử FV2 432 Như vậy, từ liệu phổ MS cho thấy khối lượng phân tử FV2 FV1 Tuy nhiên, sắc ký đồ thấy FV1 FV2 có Rf màu sắc khác dự đốn FV2 có cấu trúc giống FV1 đồng phân FV1 Tham khảo tài liệu [18],[23] thấy Vỏ đậu xanh Isovitexin cịn có Vitexin, Vitexin có khối lượng phân tử 432 có phần đường gắn vào vị trí khác (C8) Như từ liệu phổ MS tài liệu, chúng tơi dự đốn FV2 Vitexin có cấu trúc hóa học trình bày hình 3.9 HO 3'' HO 6'' 4'' (R) (S) (R ) (R ) O 2'' (R) HO 1'' OH 5'' 2' 3' O HO 10 OH 4' 1' 5' 6' O Hình 3.9: Cấu trúc hóa học Vitexin OH 3.3 BÀN LUẬN Vỏ đậu xanh nguyên liệu dễ kiếm, rẻ tiền, dư phẩm trình sản xuất đậu xanh tách vỏ Tổng quan tài liệu cho thấy Vỏ đậu xanh có nhiều tác dụng sinh học : bảo vệ thể chống phóng xạ, chống đột biến, chống oxy hóa, ức chế hình thành phát triển khối u, hạ cholesterol, hạ đường huyết chuột bị đái tháo đường, tác dụng chống kích ứng, ức chế Cytokin gây viêm, ức chế hình thành AGEs, giải độc… Do Vỏ đậu xanh dược liệu có nhiều tác dụng quý Trong thực tế, việc sử dụng nguồn nguyên liệu chưa ý mức tương xứng với tác dụng mà cơng trình khoa học cơng bố Vì cần phải có định hướng đắn để khai thác sử dụng nguồn nguyên liệu với nhiều tác dụng quý xưa vốn dùng làm thức ăn cho gia súc Sau thu mẫu dược liệu, mơ tả đặc điểm hình thái xác định tên khoa học mẫu nghiên cứu Vigna radiata (L.) Wilczeck var radiata, họ Đậu (Fabaceae) Đây lần đậu xanh xác định tên khoa học đến đơn vị thứ Đây đóng góp đề tài So sánh kết định tính nhóm chất hữu Vỏ đậu xanh phản ứng hóa học với tài liệu cơng bố tác giả Hoàng Quỳnh Hoa [2323] cho thấy Flavonoid tanin, Vỏ đậu xanh cịn có polysaccarid, acid hữu cơ, đường khử So sánh kết SKLM với tài liệu tác giả Trần Vân Hiền [18] Hoàng Quỳnh Hoa [23] cho thấy, Isovitexin Vitexin vết ( tương ứng với vết 10 sắc ký đồ), sắc ký đồ phân đoạn VDX1, VDX2, VDX3 cịn có chất cho huỳnh quang rõ ( vết 7, 8) chất có màu vàng tươi UV365 sau phun thuốc thử AlCl33%/EtOH Sau chiết xuất flavonoid từ vỏ đậu xanh phương pháp chiết nóng hồi lưu cách thủy, dung môi EtOH 80% , thu phân đoạn VDX1, VDX2, VDX3, kết định tính sắc ký lớp mỏng cho thấy phân đoạn chứa phần lớn vết 10 Trong cắn VDX VDX3 chứa chlorophyl cắn VDX2 Dùng dung mơi n hexan để hòa tan lại cắn VDX2, lọc lấy phần khơng tan thu cắn có chlorophyl hơn.Tuy nhiên, q trình thực nghiệm chúng tơi sử dụng cắn VDX để phân lập hàm lượng chất FV1 FV2 nhiều Qui trình chiết xuất tốn thời gian dung mơi hóa chất, mà thu cắn có hàm lượng flavonoid cao Nếu dịch chiết cồn làm bay dung môi áp suất giảm, sau hịa tan lại nước nóng lắc với ethylacetat nhiều lần theo tài liệu [9], tốn nhiều thời gian dung môi so với việc làm giảm hàm lượng chất cách loại riêng tủa Từ Vỏ đậu xanh phân lập chất, xác định chất vitexin (FV1) Chất lại (FV2) lượng nên đủ đo phổ MS cho khối lượng phân tử FV2 vitexin (432 g/mol) Theo nghiên cứu trước Trần Lưu Vân Hiền cộng sự, chất thứ isovitexin Điều phù hợp với việc khó tách FV1 FV2 phương pháp sắc ký lọc gel FV2 Isovitexin FV2 FV có khối lượng phân tử nhau, có cấu trúc hóa học khơng sai khác nhiều ( Ở FV1 phần đường đính vào vị trí C8, FV2 phần đường đính vào vị trí C6 khung Apigenin) nên phân đoạn qua cột Sephadex Việc chiết xuất phân lập Isovitexin từ Vỏ đậu xanh đóng góp đề tài, hàm lượng Isovitexin loài Vigna radiata thứ radiata cao so với hàm lượng vitexin Điều khác biệt so với nghiên cứu trước đó[18], [23] Qua kết SKLM phân lập chất nhận thấy, hàm lượng Vitexin Vỏ đậu xanh lớn Đây nguồn nguyên liêụ có giá trị kinh tế ý nghĩa thực tế lớn để chiết xuất Vitexin làm chất chuẩn chất đối chiếu kiểm nghiệm tiêu chuẩn hóa Dược liệu CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT KẾT LUẬN Sau thời gian làm thực nghiệm thu số kết sau: - Đã xác định tên khoa học mẫu nghiên cứu đến đơn vị thứ Vigna radiata (L.) Wilczeck var radiata, họ Đậu (Fabaceae) - Định tính nhóm chất hữu Vỏ đậu xanh cho thấy, vỏ đậu xanh chứa Flavonoid, tannin, acid hữu cơ, đường khử, tinh bột Trong thành phần Flavonoid - Chiết xuất phân đoạn dịch chiết từ Vỏ đậu xanh, định tính phân đoạn SKLM cho thấy phân đoạn VDX1, VDX2, VDX3 có vết đậm rõ sắc ký đồ Flavonoid - Đã phân lập chất tinh khiết FV1, FV2 từ Vỏ đậu xanh phương pháp sắc ký lọc gel kết hợp với phương pháp sắc ký lớp mỏng điều chế - Dựa liệu phổ MS, 1H NMR, 13C NMR, HSQC so sánh với phổ tham khảo nhận dạng FV1 Isovitexin - Dựa liệu phổ khối tham khảo tài liệu [45] chúng tơi dự đốn FV2 Vitexin ĐỀ XUẤT Tiếp tục xác định cấu trúc hóa học FV2 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Trịnh Văn Bảo, Nguyễn Thị Hà (1994), ―Tính chất sinh học số chất chống oxy hóa thử nghiệm với lympho bào người ni cấy‖, Tạp chí Thơng tin Y học, trường Đại học Y Hà Nội, (3), tr 22-27 Nguyễn Tiến Bân (1997), Cẩm nang tra cứu nhận biết họ thực vật hạt kín Việt Nam, NXB Nông Nghiệp, Hà Nội Bộ môn Dược liệu trường Đại học Dược Hà Nội (1999), Thực tập dược liệu - phần hóa học, Trung Tâm thơng tin trường Đại học Dược Hà Nội Bộ Y tế (2007), Bài giảng Dược liệu, Tập 1, NXB Y Học, Hà Nội Bộ Y tế (2007), Bài giảng Dược liệu, Tập 2, NXB Y Học, Hà Nội Bộ Y tế (2007), Thực vật Dược, Tập 1,NXB Y Học, Hà Nội Võ Văn Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Khoa học kỹ thuật, tr 467-471 Võ Văn Chi, Dương Đức Tiến (1978), Phân loại học thực vật, thực vật bậc cao, NXB Đại học Trung Học chuyên nghiệp, Hà Nội, tr 323341 Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985), Phương pháp nghiên cứu hóa học thuốc, NXB Y học,tr 299-420 10.Lê Văn Đông (1997), ― Khảo sát tác dụng điều trị chỗ tổn thương bỏng thực nghiệm thỏ Flavonoid chiết xuất từ củ ráy vỏ đậu xanh‖, TT Bỏng, (1), tr 27-30 11.Mai Văn Điển (1996), ―Tác dụng số tiêu miễn dịch chuột nhắt trắng bị chiếu xạ liều Gy hiệu bảo vệ phóng xạ Flavonoid chiết xuất từ vỏ đậu xanh (vigna aureus Roxb)‖, Luận án PTS khoa học Y Dược, Học Viện Quân Y 12.Mai Văn Điển, Nguyễn Thế Dân cộng (1996), ảnh hưởng flavonoid vỏ đậu xanh thay đổi mô học số quan miễn dịch lách, hạch, tuyến ức chuột nhắt trắng sau chiếu xạ liều Gy, Kỷ yếu cơng trình nghiên cứu khoa học Viện Y Học cổ truyền Việt Nam, tr 308-311 13.Mai Văn Điển, Trần Vân Hiền cộng sự, Nghiên cứu độc tính cấp flavonoid chiết xuất từ vỏ đậu xanh (1996), Kỷ yếu cơng trình nghiên cứu khoa học Viện Y Học cổ truyền Việt Nam,tr 286-288 14.Mai Văn Điển, Trần Vân Hiền, Phạm Mạnh Hùng, Tác dụng bảo vệ flavonoid chiết xuất từ vỏ đậu xanh tế bào nội mạc động vật bò nguyên bào sợi gây tổn thương H2O2 hệ thống tạo gốc tự Hypoxanthin/Xanthinoxydase(1996), Kỷ yếu cơng trình nghiên cứu khoa học Viện Y Học cổ truyền Việt Nam 15.Mai Văn Điển, Tạ Thị Phòng cộng sự, Khả ức chế peroxyd hóa lipid gan, lách, ruột non chuột nhắt trắng bị chiếu xạ liều Gy Flavonoid chiết xuất từ vỏ đậu xanh (1996), Kỷ yếu cơng trình nghiên cứu khoa học Viện Y Học cổ truyền Việt Nam, tr.281-285 16.Nguyễn Thị Hà, Nguyễn Thị Thu Huyền (2007), ― Nghiên cứu tác dụng đậu xanh tồn phần q trình peroxyd hóa invitro invivo‖ , Tạp chí nghiên cứu Y học, (3), tr 83-89 17.Trịnh Hữu Hằng, Lưu Thị Thu Phương (2002), ―Tác dụng dịch chiết HHKV hình thành phản xạ có điều kiện chuột‖, Tạp chí sinh lý học, 6(3), tr 39-44 18.Trần Vân Hiền (1998), Kết nghiên cứu Flavonoid từ Vỏ đậu xanh phương pháp hóa lý kết phân tích chất hóa học chế phẩm ( vitexin isovitexin), Kỷ yếu cơng trình nghiên cứu khoa học, viện y học cổ truyền Việt Nam 19.Trần Vân Hiền, Tạ Thị Phòng (2002), ―Tác dụng bảo vệ tế bào não chuột nhắt trắng chịu stress oxy hóa dịch chiết HHKV‖, Tạp chí sinh lý học, 6(1), tr 52-58 20.Trần Lưu Vân Hiền, Văn Quốc Hoa (2002), ―Tác dụng chống u thực nghiệm chuột nhắt trắng Flavonoid Vitexin‖, Tạp chí sinh lý học, 6(1), tr 52-58 21.Trần Lưu Vân Hiền, Nguyễn Thị Vân Thái (2000), ―Thăm dò tác dụng antistress Flavonoid vitex chuột nhắt trắng‖, Tạp chí sinh lý học, 4(2), tr.32-36 22.Trần Lưu Vân Hiền, Vũ Tân Trào (2002), ―Tác dụng bảo vệ dịch chiết HHKV tế bào lympho người cao tuổi chịu stress oxy hóa‖, Tạp chí y học thực hành,(12), tr 67-68 23.Hoàng Quỳnh Hoa (1999), Nghiên cứu thực vật, hóa học số tác dụng sinh học loài đậu xanh Vigna radiate Wilczeck đậu đỏ Phaseolus vulcaris L., Luận án tốt nghiệp thạc sĩ dược học, Trường Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội 24 Phạm Hoàng Hộ (1999), Cây cỏ Việt Nam, NXB Trẻ, tr 958-964 25.Nguyễn Bội Hương, Trần Thúy, Trần Lưu Vân Hiền (2007), ―Tác dụng nhiệt chế phẩm Antioxidant- vitexin bệnh nhân ung thư vú sau xạ trị‖, Tạp chí nghiên cứu YDHCT Việt Nam, (16), tr 19-23 26.Nguyễn Bội Hương, Vũ Tân Trào (2003), ―Tác dụng phục hồi đáp ứng chuyển dạng lympho bào vitexin bệnh nhân ung thư vú qua điều trị tia xạ‖, Tạp chí dược liệu, 8(2), tr 52-54 27.Nguyễn Bội Hương, Trần Vân Hiền, Vũ Tân Trào (2002), ―Hàm lượng MDA huyết đáp ứng chuyển dạng lympho bào bệnh nhân ung thư vú điều trị tia xạ kết hợp với chế phẩm antioxidant-vitexin‖, Tạp chí Y học thực hành, (12),tr 7-8 28.Lê Khả Kế, Võ Văn Chi, Vũ Văn Chuyên cộng (1973), Cây cỏ thường thấy Việt Nam, Tập 3,NXB Khoa học kỹ thuật, 51-53, 145147 29.Nguyễn Đăng Khôi (1979), Nghiên cứu thức ăn gia súc Việt Nam, tập 1, NXB Khoa học kỹ thuật, tr 129-180 30.Đỗ Tất Lợi (1999), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, 263,t r 932-933 31.Trần Đức Phấn (1998), Nghiên cứu hậu di truyền nhiễm độc hóa chất bảo vệ thực vật nhóm phospho hữu cơ, thăm dò biện pháp khắc phục, Luận án tiến sĩ y học, chuyên ngành di truyền học, trường đại học Y Hà Nội, tr 141-142 32.Lương Ngọc Toản (1977), Phân loại học thực vật, NXB Giáo Dục,Hà Nội, tr 116-120 33.Lê Khánh Trai (1994), ―Đậu xanh thức ăn thông dụng, vị thuốc nhiệt giải độc‖, Tạp chí Dược học,(3), tr 12-14 34.Vũ Tân Trào (2003),‖Tác dụng bảo vệ dịch chiết HHKV tế bào lympho bệnh nhân ung thư người khỏe mạnh chịu stress oxy hóa invitro‖, Tạp chí Y học thực hành, (3), tr.26-28 35.Cung Bỉnh Trung, Huỳnh Thu Lương (1993), ― Nghiên cứu tác dụng đậu xanh cam thảo dây phòng chống đột biến chất 2,4,5,T gây hồng cầu máu ngoại vi người nuôi cấy‖, Chất diệt cỏ chiến tranh, tác hại lâu dài với người thiên nhiên, Hội thảo quốc tế lần thứ II, tr 279-282 36.Viện dược liệu (2004), Những thuốc động vật làm thuốc Việt Nam,NXB Khoa Học Kỹ thuật,tr 771-774 Tài liệu tiếng Anh 37.A.E Mubarak (2005), ―Nutritional composition and antinutritional factors of mung bean seeds (Phaseolus aureus) as affected by some home traditional processes‖, Food chemistry, (89),pp.489—495 38.Amal Kumar Mondal1 and Sanjukta Mondal (Parui) (2011), Circumscription of the families within Leguminales as determined by cladistic analysis based on seed protein, Africal of biotechnology, vol.10(15),pp 2850-2856 39.Jiang dou shu, Wu Delin, Mats Thulin, Flora of china 10 (2010) ,pp 2005-2009 40.Neil McKinney (2003), A Handbook of Naturopathic Care of Cancer Patients, Trafford Press 41.JO B.-K AHN G.-W ; JEONG J.-H ; HWANG (2006), Clinical studies on the anti-irritation effects of mung bean (Phaseolus aureus) extract in cosmetics, vol.132, No° 1-2, pp.8-16 42.Suk-Jun Lee, Ji Hye Lee, Han-Hyung Lee, Seul Lee, Sae Hun Kim, Taehoon Chun and Jee-Young Imm (2011), ―Effect of mung bean ethanol extract on pro-inflammtory cytokines in LPS stimulated macrophages‖ , Food Science and Biotechnology, 20(2), pp.519-524 43.Xiaofang Peng, Zongping Zheng, Ka-Wing Cheng, Fang Shan, GuiXing Ren, Feng Chen and Mingfu Wang (2008), ―Inhibitory effect of mung bean extract and its constituents vitexin and isovitexin on the formation of advanced glycation endproducts‖,Food chemistry, 106(2), pp.475-481 44.Yang Yao, Feng Chen, Mingfu Wang, Jiashi Wang and Guixing Ren (2008), ― Antidiabetic acitivity of Mung Bean Extracts in diabetic KKy A Mice‖, journal of agricultural and food chemistry, 56(9), pp.88698873 45.ZHANG Jing1, WANG Ying, ZHANG Xiao-Qi, ZHANG Qing-Wen , YE Wen-Cai1(2009), ― Chemical constituents from the leaves of Lophatherum glacile‖, Chinese Journal of Natural Medicines, 7(6), 428−431 Một số Website 46 http://www.mdidea.com 47 http://www.tcpharma.vn 48 http://duoclieu.net 49 www.faqs.org 50 www.yhoccotruyen.htmedsoft.com 51 www.vietduchospital.edu.vn 52 http://www.techmartvietna m.vn 2009, ... NGHIÊN CỨU .21 3.1.1.Đặc điểm đậu xanh 21 3.1.2 Xác định tên khoa học mẫu nghiên cứu 23 3.1.3 Đặc điểm dược liệu Vỏ hạt đậu xanh 23 3.2 NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC .23... nghiên cứu đầy đủ loại dược liệu này, tiến hành đề tài ― Nghiên cứu thành phần hóa học Vỏ hạt đậu xanh (Vigna radiata (L).Wilczeck)‖, họ Đậu (Fabaceae) với nội dung sau: 1) Định tính nhóm chất Vỏ hạt. .. [7],[30],[36],[37] 1.2.2 Vỏ hạt đậu xanh Việc nghiên cứu thành phần hóa học vỏ đậu xanh thu hút quan tâm số tác giả Theo nghiên cứu Trần Vân Hiền cộng [18] ,[36], phương pháp hóa lý xác định hàm lượng