ĐẶT VẤN ĐỀ
1.1. Về thực vật
1.1.3. Số lƣợng và sự phân bố các loài thuộc chi Aconitum L. Trên thế giới:
Tại Việt Nam:
1.1.4. Xác định tên khoa học của loài thuộc chi Aconitum L. bằng giải trình tự ADN
1.2. Thành phần hóa học một số loài thuộc chi Aconitum L.
1.2.1. Thành phần hóa học của một số loài thuộc chi Aconitum trên thế giới
* Alcaloid C18-diterpenoid
* Alcaloid C19-diterpenoid
* Alcaloid C20-diterpenoid
Alcaloid bisditerpenoid
Alcaloid thuộc nhóm khác
* Nhóm dẫn chất quercetin
1.2.2. Thành phần hóa học của cây Ô đầu trồng ở Việt Nam
1.3. Tác dụng sinh học, độc tính và công dụng một số loài thuộc chi Aconitum L
1.3.1.1. Tác dụng giảm đau
1.3.1.2. Tác dụng tăng cường miễn dịch
1.3.1.3. Tác dụng chống oxy hóa
1.3.1.4. Tác dụng gây hạ đường huyết
1.3.1.5. Tác dụng chống tăng sinh tế bào, chống ung thư
1.3.1.6. Tác dụng trên tim mạch
1.3.1.7. Tác dụng trên huyết áp
1.3.1.8. Tác dụng chống viêm
1.3.1.9. Một số tác dụng khác
1.3.1.10. Độc tính
1.3.2. Công dụng
1.3.3. Một số sản phẩm sản xuất từ một số loài thuộc chi Aconitum L.
Chƣơng 2. NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. Nguyên liệu
2.2. Động vật thí nghiệm
2.3. Trang thiết bị và hóa chất
2.3.2. Hóa chất
2.4. Phƣơng pháp nghiên cứu
2.4.1. Nghiên cứu về thực vật
* Tách chiết ADN tổng số:
*Khuếch đại ADN bằng PCR:
Điện di ADN trên gel agarose
Phƣơng pháp tinh sạch ADN
* Phƣơng pháp giải trình tự
* So sánh trình tự ADN
2.4.2. Nghiên cứu thành phần hoá học
2.4.3. Nghiên cứu tác dụng sinh học
2.4.3.1. Thử độc tính cấp
2.4.3.2. Nghiên cứu tác dụng giảm đau
* Nghiên cứu tác dụng giảm đau trên mô hình “mâm nóng” (hot plate) [51], [136]
* Nghiên cứu tác dụng giảm đau bằng máy tail-flick [136], [138]
* Nghiên cứu tác dụng giảm đau trên mô hình gây quặn đau bằng acid acetic [52], [142]
2.4.3.3. Nghiên cứu tác dụng tăng cường miễn dịch
Các giai đ oạn nghiên cứu
+ Mẫn cảm kháng nguyên:
+ Điều trị thuốc thử:
+ Các chỉ số chung:
+ Các thông số đánh giá ĐƢMD dịch thể:
+ Các thông số đánh giá miễn dịch qua trung gian tế bào:
2.4.4. Phƣơng pháp xử lý số liệu
Chƣơng 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
3.1. Kết quả nghiên cứu về thực vật cây Ô đầu trồng ở tỉnh Hà Giang
3.1.1. Đặc điểm hình thái thực vật
3.1.2. Xác định tên khoa học
3.2. Kết quả nghiên cứu về thành phần hóa học
3.2.1. Xác định thành phần hóa học trong cây Ô đầu
Định lƣợng flavonoid:
Định lƣợng polysaccahrid:
3.2.2. Chiết xuất và phân lập các hợp chất từ Ô đầu, Phụ tử
3.2.2.1. Chiết xuất và phân lập các hợp chất từ Phụ tử [109]
3.2.2.2. Chiết xuất và phân lập các hợp chất từ Ô đầu [124]
3.2.2.3. Chiết xuất polysaccharid từ Phụ tử và Ô đầu [44], [46]
3.2.3. Chiết xuất và phân lập các hợp chất từ lá cây Ô đầu [49], [57]
3.2.4. Xác định cấu trúc hóa học của các hợp chất phân lập đƣợc từ cây Ô đầu trồng ở tỉnh Hà Giang
Hợp chất OD8: Fuzilin
Hợp chất OD9: Delcosin
Hợp chất OD10: Karacolin
Hợp chất OD4: 3-hydroxypropan-1,2-diyl dihenicosanoat
Hợp chất OD3: acid 8-clorohexadecanoic
Hợp chất OD1: acid 9-clorooctadecanoic
Hợp chất F3: Quercetin 3-O--L-rhamnopyranosid (quercitrin)
Hợp chất F6: 7,4′-O-dimethylluteolin 5-O-[α-L-arabinofuranosyl-(1→6)-β-D- glucopyranosid]
Hợp chất F7: Daucosterol
3.3. Kết quả nghiên cứu về độc tính và tác dụng sinh học
3.3.1. Kết quả nghiên cứu độc tính cấp
3.3.1.1. Độc tính cấp của phân đoạn chứa alcaloid chiết từ Phụ tử
LD50 = 27.257 ± 7.071 (mg/kg)
LD50 = 991.36 ± 176.78 (mg/kg)
3.3.1.3. Độc tính cấp của phân đoạn chứa polysaccharid chiết từ Phụ tử
3.3.2. Kết quả nghiên cứu tác dụng sinh học
3.3.2.1. Tác dụng giảm đau của phân đoạn chứa alcaloid chiết từ Phụ tử
Kết quả nghiên cứu tác dụng giảm đau của phân đoạn E bằng mô hình mâm nóng
Kết quả nghiên cứu tác dụng giảm đau của PĐ E bằng máy tail-flick
Kết quả nghiên cứu tác dụng giảm đau của PĐ E bằng phương pháp gây đau bởi acid acetic
3.3.2.2. Tác dụng tăng cường miễn dịch của phân đoạn chứa polysaccharid chiết từ Phụ tử
* Kết quả đánh giá tình trạng chung của hệ miễn dịch
* Kết quả đánh giá miễn dịch dịch thể
* Kết quả đánh giá miễn dịch qua trung gian tế bào
+ Giải phẫu vi thể tuyến ức:
3.3.2.3. Tác dụng chống oxy hóa, bảo vệ gan của phân đoạn chứa flavonoid
*Tác dụng bảo vệ gan của phân đoạn chứa flavonoid (PĐ C)
*Tác dụng chống oxy hoá của phân đoạn chứa flavonoid (Phân đoạn C)
Chƣơng 4. BÀN LUẬN
4.1. Về thực vật
4.2. Về thành phần hóa học
Về định tính, định lƣợng nhóm chất trong cây Ô đầu trồng ở tỉnh Hà Giang
Xác định hàm lƣợng các nguyên tố kim loại nặng trong Ô đầu, Phụ tử:
*Về chiết xuất phân lập các hợp chất từ cây Ô đầu
- Chiết xuất phân lập alcaloid:
- Chiết xuất phân lập flavonoid:
- Chiết xuất polysaccharid từ Ô đầu, Phụ tử
4.3. Về độc tính cấp và tác dụng sinh học
4.3.2. Về tác dụng sinh học
Về tác dụng giảm đau của phân đoạn dịch chiết chứa alcaloid (PĐ E)
Về tác dụng tăng cường miễn dịch của phân đoạn dịch chiết chứa polysaccharid
Về tác dụng chống oxy hóa, bảo vệ gan của phân đoạn dịch chiết chứa flavonoid
Kết luận
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
Về thành phần hóa học:
Về thử độc tính cấp và tác dụng sinh học:
+ Thử tác dụng sinh học:
Kiến nghị
DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG