SEMINAR phân tích hàm lượng 3 MCPD trong nước tương (dược PHÂN TÍCH)

BÁO CÁO DƯỢC PHÂN TÍCH ĐỀ TÀI : 3MCPD TRONG NƯỚC TƯƠNG NỘI DUNG I ĐẶT VẤN ĐỀ I.1 Tình hình nước tương có chứa 3-MCPD giới I.2 Tình hình nhiễm 3-MCPD nước tương thị trường Việt Nam II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP II.1 Đối tượng II.2 Phương pháp II.2.1 Nguyên lý II.2.2 Dấu hiệu nhận biết 3-MCPD a.Cơng thức cấu tạo b.Tính chất vật lý c.Tính chất hóa học d.Ảnh hưởng 3MCPD II.2.3 Dụng cụ, thiết bị, hóa chất II.2.4 Cách tiến hành III TÍNH TỐN IV NHẬN XÉT V TÀI LIỆU THAM KHẢO VI PHỤ LỤC I ĐẶT VẤN ĐỀ  Thực phẩm yếu tố quan trọng song hành với sinh tồn loài người Cùng với tiến triển khoa học công nghệ, công nghệ chế biến thực phẩm phát triển Nguy tác hại đến sức khoẻ thực phẩm từ nguồn thức ăn thô nguy tự nhiên đến từ thành phần chứa thực phẩm tạp nhiễm môi trường  Các kỹ thuật đánh giá mối nguy hại thực phẩm sức khoẻ đòi hỏi phải phát triển để bắt kịp với công nghệ chế biến thức ăn nhằm phát loại trừ bớt nguy tác hại đến thể người tiêu dùng Đánh giá nguy tác hại đến sức khoẻ 3-MCPD hoá chất sản sinh khâu chế biến sản phẩm nước tương dầu hào vấn đề người tiêu dùng quan tâm I ĐẶT VẤN ĐỀ I.1.Tình hình nước tương có chứa 3-MCPD giới Năm 2001, WHO quy định thể tiêu thụ tối đa 2µg/kg trọng lượng Do tình hình tiêu thụ sản phẩm có chứa 3-MCPD vùng , nước khác nên có nồng độ cho phép diện chất khác : Quốc gia Nồng độ 3-mcpd cho phép 1kg nước tương (mg/kg) Canada, Phần Lan, Áo, tiểu vương quốc Ả Rập Mỹ Úc, Newzealand 0,2 Hà Lan,Bồ Đào Nha,Malaysia,Thụy Điển Anh 0,02 Việt Nam (1000ppb) 0,01 I ĐẶT VẤN ĐỀ I.2 Tình hình nhiễm 3-MCPD nước tương thị trường Việt Nam Cho đến 11/2001, lần Việt Nam kiểm nghiệm 3MCDP tiến hành xác định nồng độ chất có mặt số sản phẩm nước tương thị trường Việt Nam cao ngưỡng cho phép nhiều I.ĐẶT VẤN ĐỀ II ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP II.1 Đối tượng : nước tương dầu hào II.ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP II.2 Phương pháp : Xác định hàm lượng 3-monoclo propan-1,2-diol (3-MCPD) sắc ký khí/khối phổ Gas Chromatography Mass Spectometry (GC/MS) II ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP II.2.1.Nguyên lý:  Mẫu cho hấp phụ qua cột extrelut, giải hấp 3-MCPD dietyl ête Sau cho tạo dẫn xuất với dung dịch acid toluen-4-sulfonic aceton thành 4-(clometyl)-2,2-dimetyl-1,3-dioxolan, phản ứng thực 400C, 90 phút  Sau đo máy sắc ký khí với detector khối phổ (GC/MS) Giới hạn phát phương pháp: 4,01 ppb; Giới hạn định lượng: 13,37ppb II.2.2 Dấu hiệu nhận biết 3MCPD a Công thức cấu tạo: 3-MCPD(3-monochloropropane-1,2-diol) Thuộc nhóm chlorapropanols CTPT: C3H7O2Cl II ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP b.Tính chất vật lí Chất lỏng khơng màu có vị Nhiệt độ nóng chảy: -630C độ sôi: 610C Chiết suất: 1,4459 200C, 589 nm Tỷ trọng: 1,48 g / cm3 c Tính chất hố học Phân hủy bị chiếu sáng Khơng có khả phản ứng với hợp chất peroxyde, kiềm mạnh, kim loại Mg, Al tác nhân oxi hóa mạnh Tạo phức với Cu điều kiện thường tạo thành hợp chất màu xanh đặc trưng II ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP d Ảnh hưởng 3MCPD người động vật: 3-MCPD gây hại đến hầu hết quan: Cản trở thể sản xuất testosterol dẫn đến giảm khả tình dục, làm teo tinh hồn, Xuất u hạt viêm, gây bệnh thận mãn tnh, tăng đường niệu, giảm tế bào máu suy tủy, Tăng nguy ung thư vú của giống đực, có khả nắng gây ung thư Có thể làm thay đổi q trình nhân gene Khi vào thể người, 3-MCPD biến đổi thành số chất khác, tất chúng đều gây nguy hiểm cho sức khoẻ người II ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP II.2.3 Dụng cụ, thiết bị, hóa chất a Dụng cụ Cân phân tch Bình định mức 100-50-20-10ml Bình cầu cất 250ml Cốc thủy tinh 10-50-100ml Pipet 1ml, 2ml, 3ml, 4ml, 5ml Ống thủy tinh có nắp vặn 5-10ml Xylanh, Đũa thủy tinh Phễu lọc, giấy lọc II.ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP b Thiết bị Bộ cất quay chân khơng Hệ thống máy sắc ký khí khối phổ Yêu cầu hệ thống GC-MS Có thể sử dụng hệ thống Trace GCTrace MS Plus đầu dò khối phổ Bộ phận tiêm mẫu chia/ khơng chia dịng chương trình Cột nhiệt độ sắc ký mao quản SBP-1701, dài 30m, đường kính 0,25mm, lớp film 0.25µm Máy tính điều khiển thiết bị xử lý liệu II ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP Điều kiện chạy máy: Điều kiện sắc ký: Chương trình nhiệt độ cột : + Nhiệt độ đầu 45oC, giữ phút’ Sau tăng lên 120oC với tốc độ gia nhiệt 6oC/ phút Tiếp tục tăng nhiệt độ lên đến 250oC với tốc độ gia nhiệt 15oC / phút , giữ phút Tiêm mẫu : Tiêm mẫu với chế độ khơng chia dịng + Nhiệt độ phận tiêm mẫu : 2500 C + Thể tch mẫu tiêm : 2µ l Tốc độ khí mang He : 1,5 ml/phút Điều kiện khối phổ: MS Tune file: + Nguồn Ion hóa : EI + Năng lượng ion hóa : 70eV + Nhiệt độ nguồn ion : 1800C + Nhiệt độ Interface : 200 0C +Giá trị khuếch đại Multiplier : 300 – 500V II ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP  MS method + Chế độ quét Fullscan + Chế độ quét Ion chọn lọc SIM c Hóa chất, thuốc thử Hố chất, thuốc thử Hóa chất có độ tinh khiết phân tch Dung môi dung môi dùng cho sắc ký a) Chất chuẩn 3-MCPD b) Diethyl ete loại dùng cho sắc ký c) Aceton loại dùng cho sắc ký d) Acid toluen -4-Sulfonic II ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP e) Cột Extrelut: Dùng xylanh 60ml, nhồi thủy tinh vào đầu ống xylanh Sau cho từ từ 10g hạt Extrelut vào xy lanh, dùng đũa thủy tinh gõ nhẹ vào thành ống cho hạt xuống chặt g) Natri clorua: Dung dịch bão hồ nước h) Khí Nitơ 99,999% i) Khí Hêli 99,999% 04/08/21 II ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP Pha chế dung dịch a) Dung dịch acid toluen - - sulfonic Aceton (1g/L): Cân xác 0,1000g acid toluen - - sulfonic cho vào bình định mức 100ml, định mức đến vạch aceton, lắc b) Dung dịch chuẩn 3-MCPD 100ppm: Cân xác 0,0100g 3MCPD cho vào bình định mức 100ml, định mức đến vạch ethyl acetat, lắc c) Dung dịch chuẩn 3-MCPD 10ppm: Hút 1ml dung dịch 3-MCPD 100ppm vào bình định mức 10ml Định mức đến vạch ethyl acetat, lắc d) Dung dịch chuẩn 3-MCPD 200ppb: Hút 1ml dung dịch 3-MCPD 10ppm vào bình định mức 50ml Định mức đến vạch ethyl acetat, lắc đ) Dung dịch chuẩn 3-MCPD 20ppb: Hút 2ml dung dịch 3-MCPD 200ppb vào bình định mức 20ml Định mức đến vạch ethyl acetat, lắc II ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP II.2.4 Tiến hành xác định a Chuẩn bị mẫu Cân 4g mẫu, xác đến 0,001g vào cốc thủy tinh 50ml.Thêm vào 8g dung dịch NaCl bão hịa khuấy Cho tồn dung dịch vào cột extrelut Để ổn định 15 phút cho toàn nước chất dung dịch phân bố bề mặt hạt extrelut Rửa giải 3-MCPD 150ml dietyl ête Thu dịch rửa giải vào bình cầu cất Sau đem quay chân khơng đến gần cạn, dùng khí nitơ thổi khơ b Dẫn xuất hóa Hút 2ml dung dịch acid Toluen-4-sulfonic aceton (1g/L) vào bình cầu cất, lắc chuyển toàn dung dịch vào ống nghiệm có nút II ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP Đặt ống nghiệm vào bếp cách thủy 40oC 90 phút, lấy để nguội nhiệt độ phịng, sau chuyển vào chai 1,5ml để đo máy GC/MS (dịch thử) c Chuẩn bị mẫu chuẩn Các mẫu chuẩn theo nồng độ xác định chuẩn bị hướng dẫn cụ thể theo bước bảng sau:   3-MCPD chuẩn (20ppb) cho vào cột extrelut Dung dịch sau rửa giải dietyl ête Dung dịch acid Toluen-4-Sulfonic aceton (1g/L)     Nồng độ 3-MCPD chuẩn (ppb) ống 1ml ống 2ml ống 4ml ống 6ml Cô quay chân không đến gần cạn, thổi khô khí Nitơ ml Lắc đều, đặt ống nghiệm vào bếp cách thủy 40oC 90 phút Để nguội nhiệt độ phòng, chuyển vào lọ 1,5ml để đo máy GC/MS 10 20 40 60 II ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP d Xây dựng đường chuẩn Kiểm tra thiết bị chạy ổn định, tiêm mẫu chuẩn chuẩn bị mục Ghi lại diện tch pic tương ứng với nồng độ Dựa vào nồng độ diện tch pic chuẩn, thiết lập phương trình biểu diễn tương quan tuyến tnh nồng độ chuẩn diện tch pic e Tiến hành phân tch Tiến hành tiêm mẫu phân tch vào máy, ghi lại sắc ký đồ lần tiêm mẫu Ghi lại diện tch có thời gian lưu phổ khối tương ứng với thơì gian lưu phổ khối chất chuẩn Dựa vào phương trình biểu diễn tương quan tuyến tnh nồng độ chuẩn diện tch pic, tnh nồng độ 3-MCPD có dịch thử III TÍNH TỐN Hàm lượng 3-MCPD mẫu thử tnh theo công thức sau : C(ppm) = (CX V F) / m Trong : CX : Nồng độ 3-MCPD dịch thử (ppm) m : Khối lượng mẫu đem phân tch (g) V : Thể tch cuối (ml) F : Hệ số pha lỗng đo (F=1: khơng pha lỗng) IV NHẬN XÉT   Sắc ký khí ghép khối phổ (GC/MS) một trong những phương pháp sắc ký đại nhấthiện với độ nhạy, độ đặc hiệu cao sử dụng nghiên cứu và phân tch kết hợp Hiệu suất thu hồi tnh % (X) theo công thức:  X = (XR – X0) / XA  Trong đó : XR : Lượng hoạt chất tìm thấy trong mẫu trắng cho thêm hoạt chất X0 : Lượng hoạt chất tìm thấy trong mẫu trắng XA : Lượng hoạt chất đưa vào mẫu trắng Hiệu suất thu hồi đạt 90% 04/08/21 V SẮC KÍ ĐỒ VÀ PHỔ KHỐI CỦA CHUẨN 3-MCPD IV TÀI LIỆU THAM KHẢO Quá trình hình thành 3-mcpd thực phẩm, Ths Tôn Nữ Minh Nguyệt http://luanvan.net.vn/luan-van/nghien-cuu-ve-3-mcpd-38672/  D.C.Meierhans, S.Bruehlmann, J.Meili, C.Taeschler, Sensitive method for the determination of 3-Chloropropane –1,2-diol and Chloropropane – 1,3-diol by capillary gas chromatography with mass spectrometric detection, Journal of Chromatography A., 325-333, 1998 Food Law News – EU – 2001 http://www.fst.rdg.ac.uk/foodlaw/news/eu-01125.htm  Nguyễn Thanh Khuyến, Giáo trình giảng dạy lý thuyết sắc ký, 1998, Trường Đại học Khoa học tự nhiên, Tp.HCM Trung Tâm Kỹ Thuật – Kỹ thuật sắc ký khối phổ  Tiêu chuẩn ngành Y tế 52TCN TQTP 0010:2005 ... pháp: 4,01 ppb; Giới hạn định lượng: 13, 37ppb II.2.2 Dấu hiệu nhận biết 3MCPD a Công thức cấu tạo: 3- MCPD (3- monochloropropane-1,2-diol) Thuộc nhóm chlorapropanols CTPT: C3H7O2Cl II ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG... tác hại đến sức khoẻ 3- MCPD hoá chất sản sinh khâu chế biến sản phẩm nước tương dầu hào vấn đề người tiêu dùng quan tâm I ĐẶT VẤN ĐỀ I.1.Tình hình nước tương có chứa 3- MCPD giới Năm 2001, WHO... tối đa 2µg/kg trọng lượng Do tình hình tiêu thụ sản phẩm có chứa 3- MCPD vùng , nước khác nên có nồng độ cho phép diện chất khác : Quốc gia Nồng độ 3- mcpd cho phép 1kg nước tương (mg/kg) Canada,