Xác định diễn biến một số hormone sinh sản nhằm ứng dụng trong chẩn đoán, phòng, trị hiện tượng chậm thành thục tính và chậm động dục lại sau đẻ ở bò sữa do nguyên nhân bệnh lý buồng trứng

luận văn, thạc sĩ, tiến sĩ, cao học, khóa luận, đề tài

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI NGUYỄN LINH XÁC ðỊNH DIỄN BIẾN MỘT SỐ HORMONE SINH SẢN NHẰM ỨNG DỤNG TRONG CHẨN ðOÁN, PHỊNG, TRỊ HIỆN TƯỢNG CHẬM THÀNH THỤC TÍNH VÀ CHẬM ðỘNG DỤC LẠI SAU ðẺ Ở BÒ SỮA DO NGUYÊN NHÂN BỆNH LÝ BUỒNG TRỨNG LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : THÚ Y Mã số : 60.62.50 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS TRẦN TIẾN DŨNG HÀ NỘI - 2010 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp i LỜI CAM ðOAN Tơi xin cam đoan rằng: Các kết nghiên cứu luận văn trung thực, khách quan chưa ñược sử dụng ñể bảo vệ học vị Mọi giúp ñỡ cho việc thực luận văn cảm ơn thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà nội, tháng 12 năm 2010 Tác giả luận văn Nguyễn Linh Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp i LỜI CẢM ƠN Trong suốt hai năm học tập hoàn thành luận văn, với nỗ lực thân, tơi nhận giúp đỡ, hướng dẫn tận tình nhiều cá nhân tập thể, cho phép tơi tỏ lịng biết ơn cảm ơn chân thành tới: Ban Giám hiệu Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội, ban lãnh ñạo viện ðào tạo Sau ñại học, ban chủ nhiệm khoa Thú y ñã giúp ñỡ, tạo ñiều kiện thuận lợi ñể học tập, tiếp thu kiến thức chương trình học ðặc biệt tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới thầy hướng dẫn khoa học PGS.TS Trần Tiến Dũng ñã tận tình hướng dẫn tơi q trình nghiên cứu xây dựng luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể Phịng cơng nghệ tế bào động vật Viện cơng nghệ sinh học, đặc biệt TS ðỗ Thị Thảo Xin chân thành cảm ơn Ban giám ñốc, tập thể cán công nhân viên Trung tâm nghiên cứu bị đồng cỏ Ba Vì Xin chân thành cảm ơn tập thể cán kỹ thuật, công nhân Nơng trường Phù ðổng Nhân dịp hồn thành luận văn, cho phép tơi gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, người thân bạn bè động viên giúp đỡ tơi vượt qua khó khăn suốt q trình học tập, nghiên cứu, thực đề tài Hà Nội, tháng 12 năm 2010 Tác giả Nguyễn Linh Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt v Danh mục bảng biểu vi Danh mục hình vii MỞ ðẦU 1.1 ðặt vấn đề 1.2 Mục đích nghiên cứu ñề tài 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cơ sở khoa học việc nghiên cứu khả sinh sản bị 2.2 Tình hình nghiên cứu đề tài ngồi nước ðỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG 27 PHÁP NGHIÊN CỨU 31 3.1 ðối tượng nghiên cứu 31 3.2 Nội dung nghiên cứu 31 3.3 Phương pháp nghiên cứu 32 3.4 Phương pháp xử lý số liệu 41 3.5 Thời gian ñịa ñiểm nghiên cứu 41 3.6 Nguyên liệu 41 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 42 4.1 Kết ñiều tra thực trạng khả sinh sản đàn bị lai hướng sữa Ba Vì – Hà Nội 42 4.1.1 Tuổi phối giống lần đầu khối lượng thể đàn bị lai hướng sữa 4.1.2 Tuổi ñẻ lứa ñầu khối lượng thể đàn bị lai hướng sữa Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp iii 43 46 4.1.3 Thời gian động dục lại sau đẻ bị lai hướng sữa 48 4.1.4 Khoảng cách hai lứa ñẻ 49 4.1.5 Hệ số phối giống 51 4.1.6 Tỷ lệ thụ thai 53 4.2 Hiện tượng rối loạn sinh sản đàn bị lai hướng sữa Ba Vì 54 4.3 Kết ứng dụng kỹ thuật ELISA ñịnh lượng FSH progesterone 56 4.3.1 Kết ñịnh lượng FSH 56 4.3.2 Kết ñịnh lượng Progesterone 62 4.4 Kết ứng dụng số hormone chế phẩm hormone sinh dục ñể ñiều trị vài tượng rối loạn sinh sản bò sữa nguyên nhân buồng trứng 70 4.4.1 Kết ứng dụng chế phẩm prostaglandin (PGF2α) điều trị bị vàng tồn lưu 70 4.4.2 Kết ứng dụng GnRH kết hợp với PGF2α điều trị bị có buồng trứng phát triển 72 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 74 5.1 Kết luận 74 5.2 ðề nghị 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO 77 MỘT SỐ HÌNH ẢNH 83 Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp iv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ag: Antigen Cs: Cộng ðVC: ðơn vị chuột ELISA: Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay FBS: Fetal Bovine Serum FSH: Follicle Stimulating hormone FRH: Folliculin Releasing hormone GnRH: Gonadotropin Releasing hormone HCG: Human Chorionic Gonadotropin HF : Holstein Friesian KN: Kháng nguyên KT: Kháng thể LH: Luteinizing hormone LRH: Lutein Releasing hormone LTH: Luteo Tropic hormone OD: Optical Density PGF2α: Prostaglandin F2 alpha PMSG: Pregnant Mare Serum Gonadotropin PRH: Prolactin Releasing hormone RIA: Radio Immuno Assay TB: Trung bình TMB: Tetrametyl benzidin Tr: Trang Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp v DANH MỤC BẢNG BIỂU STT Tên bảng Trang 2.1 Các giai ñoạn pha ñộng dục 11 4.1 Cơ cấu ñàn bò sữa Trung tâm nghiên cứu bò ñồng cỏ Ba Vì 43 4.2 Tuổi phối giống lần ñầu khối lượng thể bò lai hướng sữa ni Ba Vì Nơng trường Phù ðổng 4.3 45 Khối lượng thể tuổi ñẻ lứa đầu bị lai hướng sữa ni Ba Vì Nơng trường Phù ðổng Hà nội 47 4.4 Thời gian ñộng dục lại sau ñẻ bò lai hướng sữa 48 4.5 Khoảng cách hai lứa đẻ bị lai hướng sữa 50 4.6 Hệ số phối giống tỷ lệ thụ thai đàn bị lai hướng sữa 52 4.7 Phân loại nguyên nhân bệnh lý buồng trứng gây tượng rối loạn sinh sản bò lai hướng sữa 55 4.8 Hàm lượng FSH chu kỳ ñộng dục bình thường bị sữa 56 4.9 Hàm lượng FSH trường hợp rối loạn sinh sản bệnh lý buồng trứng bị 4.10 Kết chẩn đốn nguyên nhân gây rối loạn sinh sản bò sữa ñịnh lượng FSH kết hợp khám buồng trứng qua trực tràng 4.11 63 Hàm lượng Progesterone trường hợp rối loạn sinh sản bệnh lý buồng trứng bò 4.13 61 Hàm lượng Progesterone chu kỳ động dục bình thường bị sữa 4.12 59 66 Kết chẩn đốn rối loạn sinh sản bị sữa định lượng Progesterone kết hợp khám buồng trứng qua trực tràng 69 4.14 Hiệu ứng dụng PGF2α gây động dục bị lai hướng sữa 71 4.15 Hiệu sử dụng GnRH kết hợp PGF2α gây ñộng dục bò lai hướng sữa Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp vi 73 DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang 2.1 ðồ thị sóng nang chu kỳ 2.2 Hypothalamus ñiều khiển hoạt ñộng hệ nội tiết 13 2.3 Cơ chế thần kinh thể dịch ñiều hồ chu kỳ động dục bị 16 3.1 Sơ đồ bố trí mẫu vào giếng phản ứng ELISA 35 3.2 Mối tương quan mật ñộ quang học (OD) nồng ñộ FSH 36 3.3 Cơ chế phản ứng ELISA cạnh tranh 37 3.4 Trường hợp nồng ñộ progesterone máu cao 38 3.5 Trường hợp nồng ñộ progesterone máu thấp 39 3.6 Mối tương quan mật ñộ quang học (OD) nồng ñộ Progesterone 40 4.1 ðộng thái FSH chu kỳ động dục bình thường bị sữa 57 4.2 Hàm lượng FSH trường hợp rối loạn sinh sản bệnh lý buồng trứng bò 4.3 ðộng thái Progesterone chu kỳ động dục bình thường bò sữa 4.4 59 64 Hàm lượng Progesterone trường hợp rối loạn sinh sản buồng trứng bị Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp vii 66 MỞ ðẦU 1.1 ðặt vấn ñề Trong năm gần đây, ngành chăn ni nước ta có bước phát triển ñáng kể ðặc biệt việc ñời nhiều nhà máy sản xuất thức ăn chăn nuôi, nhiều công ty phân phối thuốc thú y, nhiều trang trại chăn ni với quy mơ lớn đáp ứng lượng thực phẩm lớn cho nhu cầu thực phẩm nước phần xuất Nhiều hình thức chăn ni kỹ thuật cao xuất Việt Nam ðây tín hiệu đáng mừng ngành chăn ni Cùng với phát triển đó, ngành chăn ni ln địi hỏi kỹ thuật cao chăn ni bị sữa phát triển ñáng kể ðược quan tâm ðảng nhà nước “cách mạng trắng” nước ta có thành cơng ban đầu Tuy nhiên, ngành chăn ni bị sữa Việt Nam nói non trẻ, giống bị sữa cao sản thường khơng thích nghi với khí hậu nước ta, kỹ thuật chăn ni thấp …đã mang lại khơng khó khăn cho người chăn ni Sự nóng vội nhập bị ngoại cộng với cơng tác chuẩn bị khơng tốt làm cho số dự án bị sữa nhà nước trắng, với người dân khơng khơng thể xóa đói giảm nghèo nhờ chăn ni bị sữa mà cịn vỡ nợ từ dự án Tuy chưa có báo cáo cụ thể phần lớn nguyên nhân dẫn tới trường hợp thất bại người dân bò mua mắc bệnh sinh sản buồng trứng vô sinh, chậm thành thục tính, chậm động dục lại sau đẻ, … ngồi bị sữa mắc phải số bệnh khác quan sinh sản Như biết q trình thành thục tính rụng trứng chủ yếu ñiều khiển hormone sinh sản FSH, LH, Oestrogene, Progesterone, … việc bị chậm thành thục tính, hay chậm ñộng dục lại sau ñẻ chủ yếu rối loạn hormone Ở Việt Nam, nghiên cứu hormone gia súc chưa nhiều, chưa có cơng bố cụ thể Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp tồn diện đồ hormone trường hợp sinh lý bình thường định lượng hormone trình bệnh lý buồng trứng gia súc Vì vậy, để mở đầu việc góp phần xây dựng ñồ hormone, ứng dụng chẩn đốn, phịng trị số tượng rối loạn sinh sản đàn bị sữa ni Việt Nam chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Xác định diễn biến số hormone sinh sản nhằm ứng dụng chẩn đốn, phịng, trị tượng chậm thành thục tính chậm động dục lại sau đẻ bị sữa nguyên nhân bệnh lý buồng trứng” 1.2 Mục ñích nghiên cứu ñề tài - Xác ñịnh diễn biến hormone FSH Progesterone bị sữa có chu kỳ sinh dục bình thường góp phần xây dựng ñồ diễn biến hormone dùng chẩn ñoán bệnh - Xác định diễn biến hormone FSH Progestrone bị sữa bệnh lý, yếu tố nội tiết từ nguyên nhân buồng trứng - Ứng dụng ñưa số phác ñồ ñiều trị hormone - ðưa khuyến cáo ñiều trị hormone Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... loạn sinh sản đàn bị sữa ni Việt Nam chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài: ? ?Xác định diễn biến số hormone sinh sản nhằm ứng dụng chẩn đốn, phịng, trị tượng chậm thành thục tính chậm động dục lại. .. Kết ứng dụng số hormone chế phẩm hormone sinh dục ñể ñiều trị vài tượng rối loạn sinh sản bò sữa nguyên nhân buồng trứng 70 4.4.1 Kết ứng dụng chế phẩm prostaglandin (PGF2α) điều trị bị vàng... ñồ diễn biến hormone dùng chẩn ñoán bệnh - Xác định diễn biến hormone FSH Progestrone bị sữa bệnh lý, yếu tố nội tiết từ nguyên nhân buồng trứng - Ứng dụng ñưa số phác ñồ ñiều trị hormone - ðưa