XÁC ĐỊNH DIỄN BIẾN MỘT SỐ HORMONE SINH SẢN NHẰM ỨNG DỤNG TRONG CHẨN ĐOÁN, PHÒNG, TRỊ HIỆN TƯỢNG CHẬM THÀNH THỤC TÍNH VÀ CHẬM ĐỘNG DỤC LẠI SAU ĐẺ Ở BÒ SỮA DO NGUYÊN NHÂN BỆNH LÝ BUỒNG TRỨNG
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI NGUYỄN LINH XÁC ĐỊNH DIỄN BIẾN MỘT SỐ HORMONE SINH SẢN NHẰM ỨNG DỤNG TRONG CHẨN ĐOÁN, PHỊNG, TRỊ HIỆN TƯỢNG CHẬM THÀNH THỤC TÍNH VÀ CHẬM ĐỘNG DỤC LẠI SAU ĐẺ Ở BÒ SỮA DO NGUYÊN NHÂN BỆNH LÝ BUỒNG TRỨNG LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : THÚ Y Mã số : 60.62.50 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS TRẦN TIẾN DŨNG HÀ NỘI - 2010 ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng: Các kết nghiên cứu luận văn trung thực, khách quan chưa sử dụng để bảo vệ học vị Mọi giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà nội, tháng 12 năm 2010 Tác giả luận văn Nguyễn Linh i LỜI CẢM ƠN Trong suốt hai năm học tập hoàn thành luận văn, với nỗ lực thân, nhận giúp đỡ, hướng dẫn tận tình nhiều cá nhân tập thể, cho phép tỏ lòng biết ơn cảm ơn chân thành tới: Ban Giám hiệu Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội, ban lãnh đạo viện Đào tạo Sau đại học, ban chủ nhiệm khoa Thú y giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi để học tập, tiếp thu kiến thức chương trình học Đặc biệt tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy hướng dẫn khoa học PGS.TS Trần Tiến Dũng tận tình hướng dẫn tơi q trình nghiên cứu xây dựng luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể Phịng cơng nghệ tế bào động vật Viện cơng nghệ sinh học, đặc biệt TS Đỗ Thị Thảo Xin chân thành cảm ơn Ban giám đốc, tập thể cán cơng nhân viên Trung tâm nghiên cứu bị đồng cỏ Ba Vì Xin chân thành cảm ơn tập thể cán kỹ thuật, công nhân Nông trường Phù Đổng Nhân dịp hoàn thành luận văn, cho phép gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, người thân bạn bè động viên giúp đỡ tơi vượt qua khó khăn suốt q trình học tập, nghiên cứu, thực đề tài Hà Nội, tháng 12 năm 2010 Tác giả Nguyễn Linh ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt v Danh mục bảng biểu vi Danh mục hình vii MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích nghiên cứu đề tài 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cơ sở khoa học việc nghiên cứu khả sinh sản bò 2.2 Tình hình nghiên cứu đề tài nước ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG 27 PHÁP NGHIÊN CỨU 31 3.1 Đối tượng nghiên cứu 31 3.2 Nội dung nghiên cứu 31 3.3 Phương pháp nghiên cứu 32 3.4 Phương pháp xử lý số liệu 41 3.5 Thời gian địa điểm nghiên cứu 41 3.6 Nguyên liệu 41 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 42 4.1 Kết điều tra thực trạng khả sinh sản đàn bò lai hướng sữa Ba Vì – Hà Nội 42 4.1.1 Tuổi phối giống lần đầu khối lượng thể đàn bò lai hướng sữa 43 iii 4.1.2 Tuổi đẻ lứa đầu khối lượng thể đàn bò lai hướng sữa 46 4.1.3 Thời gian động dục lại sau đẻ bò lai hướng sữa 48 4.1.4 Khoảng cách hai lứa đẻ 49 4.1.5 Hệ số phối giống 51 4.1.6 Tỷ lệ thụ thai 53 4.2 Hiện tượng rối loạn sinh sản đàn bò lai hướng sữa Ba Vì 54 4.3 Kết ứng dụng kỹ thuật ELISA định lượng FSH progesterone 56 4.3.1 Kết định lượng FSH 56 4.3.2 Kết định lượng Progesterone 62 4.4 Kết ứng dụng số hormone chế phẩm hormone sinh dục để điều trị vài tượng rối loạn sinh sản bò sữa nguyên nhân buồng trứng 70 4.4.1 Kết ứng dụng chế phẩm prostaglandin (PGF2α) điều trị bị vàng tồn lưu 70 4.4.2 Kết ứng dụng GnRH kết hợp với PGF2α điều trị bò có buồng trứng phát triển 72 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 74 5.1 Kết luận 74 5.2 Đề nghị 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO 77 MỘT SỐ HÌNH ẢNH 83 iv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ag: Antigen Cs: Cộng ĐVC: Đơn vị chuột ELISA: Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay FBS: Fetal Bovine Serum FSH: Follicle Stimulating hormone FRH: Folliculin Releasing hormone GnRH: Gonadotropin Releasing hormone HCG: Human Chorionic Gonadotropin HF : Holstein Friesian KN: Kháng nguyên KT: Kháng thể LH: Luteinizing hormone LRH: Lutein Releasing hormone LTH: Luteo Tropic hormone OD: Optical Density PGF2α: Prostaglandin F2 alpha PMSG: Pregnant Mare Serum Gonadotropin PRH: Prolactin Releasing hormone RIA: Radio Immuno Assay TMB: Tetrametyl benzidin Tr: Trang v DANH MỤC BẢNG BIỂU STT 2.1 Tên bảng Các giai đoạn pha động dục Trang 11 4.1 Cơ cấu đàn bò sữa Trung tâm nghiên cứu bò đồng cỏ Ba Vì 43 4.2 Tuổi phối giống lần đầu khối lượng thể bò lai hướng sữa ni Ba Vì Nơng trường Phù Đổng 4.3 45 Khối lượng thể tuổi đẻ lứa đầu bị lai hướng sữa ni Ba Vì Nơng trường Phù Đổng Hà nội 47 4.4 Thời gian động dục lại sau đẻ bò lai hướng sữa 48 4.5 Khoảng cách hai lứa đẻ bò lai hướng sữa 50 4.6 Hệ số phối giống tỷ lệ thụ thai đàn bò lai hướng sữa 52 4.7 Phân loại nguyên nhân bệnh lý buồng trứng gây tượng rối loạn sinh sản bò lai hướng sữa 4.8 55 Hàm lượng FSH chu kỳ động dục bình thường bị sữa 56 4.9 Hàm lượng FSH trường hợp chậm sinh bệnh lý buồng trứng bị 4.10 59 Kết chẩn đốn nguyên nhân gây rối loạn sinh sản bò sữa định lượng FSH kết hợp khám buồng trứng qua trực tràng 61 4.11 Hàm lượng Progesterone chu kỳ động dục bình thường bị sữa 4.12 63 Hàm lượng Progesterone trường hợp chậm sinh bệnh lý buồng trứng bò 4.13 4.14 66 Kết chẩn đốn rối loạn sinh sản bị sữa định lượng Progesterone kết hợp khám buồng trứng qua trực tràng 69 Hiệu ứng dụng PGF2α gây động dục bò lai hướng sữa 71 vi 4.15 Hiệu sử dụng GnRH kết hợp PGF2α gây động dục bị lai hướng sữa 73 vii DANH MỤC HÌNH STT 2.1 Tên hình Đồ thị sóng nang chu kỳ Trang 2.2 Hypothalamus điều khiển hoạt động hệ nội tiết 13 2.3 Cơ chế thần kinh thể dịch điều hồ chu kỳ động dục bị 16 3.1 Sơ đồ bố trí mẫu vào giếng phản ứng ELISA 35 3.2 Mối tương quan mật độ quang học (OD) nồng độ FSH 36 3.3 Cơ chế phản ứng ELISA cạnh tranh 37 3.4 Trường hợp nồng độ progesterone máu cao 38 3.5 Trường hợp nồng độ progesterone máu thấp 39 3.6 Mối tương quan mật độ quang học (OD) nồng độ Progesterone 40 4.1 Động thái FSH chu kỳ động dục bình thường bị sữa 57 4.2 Hàm lượng FSH trường hợp chậm sinh bệnh lý buồng trứng bò 4.3 59 Động thái Progesterone chu kỳ động dục bình thường bò sữa 4.4 64 Hàm lượng Progesterone trường hợp chậm sinh buồng trứng bò 66 viii ... cứu đề tài: ? ?Xác định diễn biến số hormone sinh sản nhằm ứng dụng chẩn đoán, phịng, trị tượng chậm thành thục tính chậm động dục lại sau đẻ bò sữa nguyên nhân bệnh lý buồng trứng? ?? 1.2 Mục đích... Kết ứng dụng số hormone chế phẩm hormone sinh dục để điều trị vài tượng rối loạn sinh sản bò sữa nguyên nhân buồng trứng 70 4.4.1 Kết ứng dụng chế phẩm prostaglandin (PGF2α) điều trị bị vàng... động dục lại sau đẻ, … ngồi bị sữa mắc phải số bệnh khác quan sinh sản Như biết trình thành thục tính rụng trứng chủ yếu điều khiển hormone sinh sản FSH, LH, Oestrogene, Progesterone, … việc bò chậm