1. ĐỊNH NGHĨA Rutin là một flavoniod thuộc nhóm Euflavoniod, có tác dụng làm bền và giảm tính thấm của mao mạch, tăng sự bền vững của hồng cầu, hạ thấp trương lực cơ và chống co thắt 2. PHÂN BỐ TRONG THỰC VẬT
HỢP CHẤT RUTIN TỪ CÂY HOA HÒE ĐỊNH NGHĨA Rutin flavoniod thuộc nhóm Euflavoniod, có tác dụng làm bền giảm tính thấm mao mạch, tăng bền vững hồng cầu, hạ thấp trương lực chống co thắt PHÂN BỐ TRONG THỰC VẬT Người ta tìm thấy Rutin có 62 họ thực vật với khoảng 150 lồi có 70 loài thuộc 28 họ thực vật Trong Rutin phân bố chủ yếu số phận định hoa (hoa Hòe), (bạch đàn) Tuy Rutin có nhiều có số chứa Rutin với hàm lượng cao có khả dùng làm nguyên liệu để chiết Rutin như: - Ruta graveolens L có khoảng 2% Fagopyrum esculentum Moench có khoảng 6% Fagopyrum tataricum L có khoảng 6% Eucalyptus Macrorrhyncha F.Muell có khoảng 8% Sophora japónica L có khoảng 18% Các nguồn nguyên liệu để sản Rutin giới là: xuất - Cây Hòe – Sophora japónica L: Trung Quốc, Việt Nam, Nhật Bản, Pháp - Eucalyptus Macrorrhyncha F.Muell: Anh, Mỹ, Úc - Fagopyrum tataricum L Fagopyrum esculentum Moench: Pháp, Mỹ, Việt Nam Hình Cây Hịe Sophora japónica L CẤU TRÚC HĨA HỌC, PHÂN LOẠI 3.1 Cấu trúc hóa học: Rutin có cơng thức hóa học là: C27H30O16 Được đọc theo cơng thức cấu tạo là: 3,3’,4’,5,7 pentahydroxy flavone-3Rutinosid Hình Cơng thức cấu tạo Rutin Khi thủy phân Rutin tạo thành: quercetin, glucose rhamnose + H2 O + + 3.2 Phân loại Rutin flavonoid thuộc nhóm Euflavoniod Người ta xếp flavonoid vào nhóm có cấu tạo khung kiểu C6-C3-C6 hay nói cách khác khung gồm vòng benzen A B nối với qua mạch cacbon Phần lớn flavonoid xem dẫn xuất có gốc phenyl nhân Sự phân loại flavonoid dựa vào vị trí gốc aryl (B) mức độ oxy hóa mạch 3C Người ta chia thành Euflavoniod,isoflavonoid, neoflavonoid, biflavoniod, triflavoniod, flavolignan Hợp chất Rutin thuộc nhóm Euflavoniod Đây nhóm flavonoid có gốc aryl vị trí C4 bao gồm nhóm: HĨA 4.1 vật lí: Rutin bột màu hay xanh, Để ngồi có màu Tinh thể phân tử chuyển sấy 12h suất giảm TÍNH CHẤT VẬT LÍ, HỌC, HOẠT TÍNH SINH HỌC Tính chất kết tinh vàng vàng ánh không mùi ánh sáng sẫm lại ngậm nước sang dạng khan 1100c áp (10mmHg) Rutin khó tan nước lạnh (1/10000), tan nước sơi (1/200), khó tan cồn (1/650), tan cồn sôn (1/60), tan methanol, isopropanol dung dịch kiềm loãng, không tan eceton, ether, cloroform, ether dầu hỏa, benzen, acid Do cấu trúc giống glucosid nên rutin dễ bị thủy phân men có sẵn dược liệu acid Với dung dịch kiềm bị ảnh hưởng, dung dịch kiềm đặc nhiệt độ cao cấu trúc Rutin bị phá vỡ, cụ thể vòng C mở tạo thành dẫn xuất acid thơm dẫn xuất phenol 4.2 Tính chất hóa học 4.2.1 Định tính Rutin: Phản ứng Cyanidin: dung dịch rutin cồn thêm bột Mg HCl đặc cho màu tím đỏ Phản ứng với dung dịch NaOH: cho màu vàng từ nhạt đến đậm tùy vào độ kiềm thời gian, đặc biết phản ứng với dung dịch NaOH 1% cho màu vàng chanh Phản ứng với dung dịch FeCl3 5% : dung dich rutin cho màu xanh lục Định tính phương pháp Sắc ký: gồm có sắc ký mỏng sắc ký giấy Sắc ký lớp mỏng: Bản mỏng chất hấp phụ sillicagel G Dung môi thường dùng là: Benzen- AtOAc (1:3), CH 3CI3- MeOH (15:1), Benzenaceton (9:1), Toluen-aceton (19:1), CH3CI3- CH3COOH (9:1), MeOH 80% Sắc ký giấy: Giấy sắc ký: What man số 1, số Các dung môi thường dùng: TB A: n-BuOH-CH3COOH-H2O (3:1:1) BAW: n-BuOH-CH3COOH-H2O ( 4:1:5) Forestal: CH3COOH-HCl-H2O (30:3:10) Benzen: CH3COOH-H2O (125:72:3) -CH3CI3- CH3COOH -H2O (13:6:1) Benzen- H2O (3:1) Dung dịch màu đèn tử ngoại (UV) bước sóng 366 nm amoniac soi đèn tử ngoại (UV) 4.2.2 Định lượng Rutin Để xác định hàm lượng rutin chế phẩm dược liệu, người ta thường dùng phương pháp sau: Phương pháp cân: Nguyên tắc: chiết suất rutin cồn sau thủy phân rutin dung dịch acid loãng quercetin lọc lấy kết tủa, sấy đem cân, tính hàm lượng rutin Phương pháp đo quang: Nguyên tắc: rutin tạo màu với kiềm số thuốc thử khác như: amoni molidat, tiến hành phản ứng cyanidin đo quang Phương pháp quang phổ: Nguyên tắc : rutin hòa tan ethanol có đỉnh hấp phụ cực đại 362,5 nm Người ta dựa vào tính chất để định lượng rutin Ngồi người ta cịn dùng số phương pháp khác để định lượng như: phương pháp đo iot, phương pháp sắc ký cao áp CHIẾT TÁCH Các phương pháp chiết xuất dựa tính chất có khả hịa tan khát dung mơi rutin 5.1 Phương pháp chiết nước: Dựa vào độ tan rutin nước sôi nước lạnh Dùng nước sơi để chiết rutin hoa hịe, để nguội dịch chiết xuất kết tủa rutin Nguyên liệu - Rửa sạch, thêm HCl 5%, khuấy - Sau đó, rửa sạch, sấy khơ xay thơ Ngun liệu xử lí - Ngun liệu thêm vào bình chiết Chiết xuất - Đun sôi 100oC 20 phút Rút dịch chiết - Để nguội, xuất kết tủa tự nhiên Rutin thô - Nghiền thành bột, Tinh chế - Hịa tan cồn 950C bình sinh hàn hồi lưu - Lọc, rửa sạch, sấy khô ,nghiền mịn Rutin tinh 5.2 Phương pháp chiết cồn 600C Nguyên liệu - Rửa sạch, thêm HCl 5%, khuấy - Sau đó, rửa sạch, sấy khơ xay thơ Ngun liệu xử lí - Cho vào bình chiết, thêm cồn - Đun cách thủy có sinh hàn hồi lưu, thu dịch chiết Rutin thô - Nghiền mịn Tinh chế - Hịa tan nước sơi, lọc qua phiễu, để nguội Rutin tinh chế 5.3 Phương pháp chiết với dung môi MeOH Nguyên liệu - Rửa sạch, thêm HCl 5%, khuấy - Sau đó, rửa sạch, sấy khơ xay thơ Ngun liệu xử lí - Trích ly Soxhlex với MeOH đến màu - Cơ dịch, trích li đến thể tích cịn Dịch chiết - Thêm CCl4 gạn lắc để loại chất béo - Thêm nước, chlorophyl, để lắng, tách lớp CCl4 phía Dịch chiết tinh - Để nguội Thu Rutin kết tủa ... khả hịa tan khát dung môi rutin 5.1 Phương pháp chiết nước: Dựa vào độ tan rutin nước sôi nước lạnh Dùng nước sôi để chiết rutin hoa hịe, để nguội dịch chiết xuất kết tủa rutin Nguyên liệu - Rửa... xuất phenol 4.2 Tính chất hóa học 4.2.1 Định tính Rutin: Phản ứng Cyanidin: dung dịch rutin cồn thêm bột Mg HCl đặc cho màu tím đỏ Phản ứng với dung dịch NaOH: cho màu vàng từ nhạt đến đậm tùy... 4.2.2 Định lượng Rutin Để xác định hàm lượng rutin chế phẩm dược liệu, người ta thường dùng phương pháp sau: Phương pháp cân: Nguyên tắc: chiết suất rutin cồn sau thủy phân rutin dung dịch acid