HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN CÓ HOẠT TÍNH SINH HỌC GLYXIT TRỢ TIM OLEANDRIN

BÁO CÁO HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN CĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC GLYXIT TRỢ TIM- OLEANDRIN Đà Nẵng, Tháng năm 2016 MỤC LỤC Giới thiệu chung glucozit tim………………………………………………… 1.1 Định nghĩa……………………………………………………………… 1.2 Nguồn gốc……………………………………………………………… 1.3 Cấu trúc hóa học, phân loại……………………………………………… 1.3.1 Phần khơng đường…………………………………………………… 1.3.2 Phần đường…………………………………………………………… 1.4 Tính chất…………………………………………………………………….5 1.5 Phân bố…………………………………………………………………… Giới thiệu Oleandrin……………………………………………………… .6 2.1 Định nghĩa…………………………………………………… 2.2 Phân bố……………………………………………………………… 2.2.1 Giới thiệu Trúc đào…………………………………………… 2.2.2 Oleandrin Trúc đào…………………………………… 2.3 Cấu trúc hóa học……………………………………………………… .8 2.4 Tính chất………………………………………………………………… 2.4.1 Tính chất vật lý…………………………………………………… .9 2.4.2 Tính chất hóa học………………………………………………… .9 2.4.3 Hoạt tính sinh học………………………………………………………9 2.5 Quy trình chiết tách………………………………………………… 10 2.5.1 Sơ đồ quy trình chiết tách……………………………………… 10 2.5.2 Thuyết minh quy trình………………………………………… 11 Giới thiệu chung Glycozit tim 1.1 Ðịnh nghĩa: Glycozit tim glycozit steroid có tác dụng đặc biệt lên tim, liều điều trị có tác dụng cường tim, làm chậm điều hoà nhịp tim Nếu liều gây nơn làm chảy nước bọt, mờ mắt, tiêu chảy, yếu cơ, loạn nhịp tim, giảm sức co bóp tim cuối làm ngừng tim thời kỳ tâm thu tim ếch tâm trương động vật máu nóng Glycozit tim cịn gọi glycozit digitalic glycozit digitan (Digitalis) dùng lâm sàng để chữa 1.2 bệnh tim Nguồn gốc: Glycozit tim có 45 loài thực vật chủ yếu thuộc họ: Apocynaceae, Asclepiadaceae, Celastraceae (Dây gối) , Cruciferae, Euphorbiaceae, Fabaceae, Liliaceae, Meliaceae, Moraceae, Ranulculaceae, Scrophulariaceae, Sterculiaceae, Tiliaceae (Ðay), số trùng Ở glycozit tim có 1.3 phận: lá, hoa, vỏ thân, rễ, thân rễ, nhựa mủ Cấu trúc hoá học, phân loại Glycozit tim glycozit khác cấu trúc hoá học gồm hai phần: phần đường phần không đường (aglycon) 1.3.1 Phần khơng đường Phần khơng đường chia thành hai phần nhỏ: phần hydrocacbon mạch nhánh vòng lacton Phần hydrocacbon dẫn chất 10,13-dimetyl xyclopentanopehydrophenantren (steroid)(10,13-dimethyl-hexadecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthrene) Đính vào nhân cịn có nhóm chức có chứa oxy Vịng lacton : Phần aglycon glycozit tim ngồi khung hydrocacbon nói đặc biệt cịn có vịng lacton nối vào vị trí C-17 khung Vòng lacton coi mạch nhánh Hầu hết chất có tác dụng dược lý có vịng lacton hướng b Dựa vào vòng lacton nối vào vị trí C-17 người ta chia glycozit tim thành hai nhóm: - Nếu vịng lacton có cacbon có nối đơi vị trí a-b Những aglycon có vịng lacton có 23 cacbon glycozit tim thuộc nhóm cardenolid - Nếu vịng lacton có cacbon , có hai nối đơi -> aglycon có 24 cacbon ->glycozit tim thuộc nhóm bufa dienolid 1.3.2 Phần đường: Phần đường nối vào -OH C-3 aglycon Cho đến người ta biết khoảng 40 loại đường khác Ngoài đường thơng thường D-glucose, Lramnose, D-fucose, D-xylose có gặp nhóm glycozit khác, cịn lại đường gặp glycozit tim Trong đường này, đáng ý đường 2,6-desoxy Dưới số đường 2,6-desoxy hay gặp: Những đường có đặc tính sau: dễ bị thuỷ phân, cho phản ứng màu với thuốc thử Kele-Kiliani, thuốc thử Xanthydrol Mạch đường monosacarit oligosacarit Gitoxin-xelobiozit có digitan tía có mạch đường với đơn vị đường đơn: Gitoxin-xelobiozit = Gitoxygenin + (digitoxoza)3 + (glucose)2 Ví dụ, số genin Glycozit trợ tim thường gặp : Hình 1.1 Một số genin Glycozit trợ tim 1.4 Tính chất: Các glycozit tim chất kết tinh, không màu, vị đắng, có suất quay cực, tan nước, cồn, không tan benzen,ete,… Các glycozit tim nhạy cảm với thay đổi pH môi trường, glycozit tim có đường 2-desoxy dễ thuỷ phân đun với acid vô 0,05 N metanol 30 phút, glycozit khác điều kiện khơng thuỷ phân Trong môi trường kiềm cacdenolid chuyển thành dẫn chất iso dây nối este bị cắt ( có) Glycozit dễ bị thuỷ phân enzim.Thường enzim có sẵn cây, có khả cắt bớt phần glucose để chuyển thành glycozit thứ cấp Ví dụ: digilanidaza digitan lơng, digipuapidaza digitan tía, strophantobiaza hạt Strophanthus courmonti, xilarenaza Scilla maritima 1.5 Phân bố: Glycozit tim phân bố hầu hết thực vật Một số dược liệu chứa glycozit tim: Dương địa hoàng, Hành biển, Thơng thiên, Trúc đào, Strophanthus, Đay … Glycozit tim có thân ,lá ,quả ,rể ,củ,cành ,vỏ toàn Giới thiệu Oleandrin: 2.1 Định nghĩa: Oleandrin glycozit tim, chứa trung tâm steroid, vị trí C17 có gắn nhóm lacton khơng bão hịa, vị trí C16 có gắn nhóm acetyloxy C3 có nhóm arabinose dideoxy 2.2 Phân bố: 2.2.1 Giới thiệu về trúc đào Cây trúc đào có tên khoa học Nerium oleander L., Họ Trúc đào – Apocynaceae, cịn có tên gọi khác Giáp trúc đào Gốc vùng Địa Trung Hải, trồng làm cảnh khắp vùng nhiệt đới có Việt Nam Trúc đào nhỡ, cao 4- 5m, có trồng thành bụi Cành mềm dẻo Lá trúc đào mọc đối hay mọc vòng cụm lá, thuộc loại đơn, mép nguyên, cuống ngắn, phiến hình mác, dài – 10cm, rộng – 4cm, dai, cứng, mặt màu xanh sẫm, mặt màu nhạt Hoa màu hồng, cụm hoa mọc hai đầu cành Trúc đào lồi thực vật có độc tính cao chứa nhiều hợp chất có độc, nhiều hợp chất số gây tử vong người, đặc biệt trẻ em Độc tính trúc đào coi cao có nhiều thơng báo cho thấy số trường hợp cần lượng nhỏ đủ gây hậu tử vong hay cận kề tử vong (Goetz 1998) Đáng kể số chất độc oleandrin neriin, cácglicozit tim mạch (Goetz 1998) Chúng có mặt toàn phận loài này, chủ yếu tập trung nhựa Người ta cho trúc đào cịn chứa nhiều hợp chất chưa rõ hay chưa nghiên cứu khác chúng có tác động cịn nguy hiểm (Inchem, 2005) Toàn này, bao gồm nhựa màu trắng sữa độc phận gây phản ứng có hại cho sức khỏe Ăn phải trúc đào gây triệu chứng đường ruột tim mạch Các triệu chứng đường tiêu hóa bao gồm buồn nơn nơn mửa, tiết nhiều nước bọt, tổn thương vùng bụng, tiêu chảy lẫn hay khơng lẫn máu, đặc biệt ngựa đau bụng (Inchem 2005) Các triệu chứng đường tim mạch bao gồm loạn nhịp tim, với đặc trưng nhịp nhanh sau chậm mức bình thường.Tim đập thất thường khơng có dấu hiệu nhịp cụ thể Các trường hợp nghiêm trọng dẫn tới nhợt nhạt da lạnh tuần hoàn máu hay không ổn định Các tác động ngộ độc lồi tác động tới hệ thần kinh trung ương Các triệu chứng bao gồm thờ thẫn, run rẩy chân tay cơ, tai biến ngập máu, xẹp chí mê dẫn tới tử vong Nhựa trúc đào gây tấy rát da, sưng, tấy rát mắt nghiêm trọng phản ứng dị ứng đặc trưng viêm da 2.2.2 Oleandrin trúc đào Lá trúc đào chứa hoạt chất glycozit tim, có đến 17 glycozit tim khác với hàm lượng tồn phần 0,5% Trong đáng lưu ý glycozit: oleandrin, deacetyloleandrin, neriantin, adynerin Oleandrin gọi với tên khác như: Neriolin, Folinerin hay Oleandrosid Việc chiết tách Oleandrin từ trúc đào nhằm mục đích điều trị bệnh suy tim, hở van tim, nhịp tim nhanh kịch phát theo chế: làm chậm, làm mạnh điều hòa nhịp tim Ngoài ra, y học dân gian Ấn Độ, trúc đào dùng để chữa bệnh phát ban da Nước sắc dùng để diệt giòi vết thương Cao nước lá, cành, rễ hoa đọc số loại sâu bọ Cây trúc đào dùng làm bã chuột Châu Âu Mật từ nhụy hoa trúc đào có độc Ngồi cao trúc đào cịn người dân Thổ Nhĩ Kỹ dùng để điều trị bệnh số nước khác dùng để chữa bệnh Eczema chống nhiễm khuẩn 2.3 Cấu trúc hóa học: Oleandrin có CTPT C32H46O9, thuỷ phân cho đường oleandrose aglycon oleandrigenin Hàm lượng oleandrin khô 0,08% – 0,15% (Theo D A Muraviôva hàm lượng không 0,2%) .Theo Dược điển Việt Nam I 1g oleandrin phải chứa 3600 – 4500 đơn vị MeO 2.4 Tính chất: 2.4.1 Tính chất vật lý: - Là glucozit khơng màu, có tinh thể hình kim, vị đắng - Ít tan nước benzen, tan cloroform, cồn etylic metylic, độ tan rượu metylic rượu etylic - Khối lượng phân tử ~577 g/mol - Điểm nóng chảy 245-250oC - Năng suất quay cực ad=-50-51o1 (trong rượu metylic) 2.4.2 Tính chất hóa học: - Thuỷ phân với axit HCl 0,1N cho phần không đường gọi oleandrigenin (hay 16 axetyl gitoxigenin) chất đường oleandroza - Thủy phân với axit HCl 0,5N thu chất dianhydrogitoxigenin - Thủy phân dung dịch kiềm lỗng desaxetyloleandrin 2.4.3 Hoạt tính sinh học: Oleandrin có tính ưa mỡ, dễ dàng hấp thu đường tiêu hóa sau liều uống với Cmax 20 phút (nghiên cứu dược độc học oleandrin chuột) Do tính chất glycozit trợ tim, oleandrin tác động vào số quy trình thiết yếu tế bào, quan trọng ức chế Na K- ATP Protein 2.5 Quy trình chiết tách: 2.5.1 Sơ đồ quy trình chiết tách 10 g trúc đào,tán nhỏ Thêm100ml cồn 25% Ngâm 24h Bình nón 250 ml Gạn dịch chiết vào khuấy ml bình 100 Thêm3ml chì acetat 30% Khuấy Lọc Chiết cloroform lần, lần ml Loại nước natrisulfat khan Dịch chiết Tiến hành phản ứng định tính, định lượng 2.5.2 Thuyết minh quy trình Cân khoảng 10g Trúc đào khô tán nhỏ cho vào bình nón dung tích 250ml Thêm 100ml cồn 25% ngâm 24 Gạn dịch chiết vào cốc có mỏ dung tích 100ml Thêm vào dịch chiết 3ml chì acetat 30%, khuấy Lọc qua giấy lọc gấp nếp vào cốc có mỏ dung tích 100ml Nhỏ vài giọt dịch lọc vào ống nghiệm, thêm giọt chì acetat Nếu xuất tủa ngừng lọc, thêm khoảng 1ml chì acetat 30% vào dịch chiết, khuấy đều, lọc lại tiếp tục thử đến dịch lọc khơng cịn tủa với chì acetat Chuyển tồn dịch lọc vào bình gạn dung tích 100ml Chiết glycosid tim cách lắc với cloroform lần, lần 8ml Gạn lớp cloroform vào cốc có mỏ sấy khô Gộp dịch chiết chloroform loại nước natrisulfat khan Chia dịch chiết vào ống nghiệm nhỏ sấy khô Đặt ống nghiệm lên giá bốc nồi cách thủy đến khô Cắn thu đem tiến hành làm phản ứng định tính sắc ký lớp mỏng 10 11 ... học……………………………………………………… .8 2 .4 Tính chất………………………………………………………………… 2 .4. 1 Tính chất vật lý…………………………………………………… .9 2 .4. 2 Tính chất hóa học………………………………………………… .9 2 .4. 3 Hoạt tính sinh học………………………………………………………9... có hai nối đơi -> aglycon có 24 cacbon ->glycozit tim thuộc nhóm bufa dienolid 1.3.2 Phần đường: Phần đường nối vào -OH C-3 aglycon Cho đến người ta biết khoảng 40 loại đường khác Ngồi đường... Oleandrin glycozit tim, chứa trung tâm steroid, vị trí C17 có gắn nhóm lacton khơng bão hịa, vị trí C16 có gắn nhóm acetyloxy C3 có nhóm arabinose dideoxy 2.2 Phân bố: 2.2.1 Giới thiệu về trúc