Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử SSR trong chọn giống bạch đàn lai e urophylla x e exserta

i VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT NGUYỄN THỊ LINH ĐAM NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ SSR TRONG CHỌN GIỐNG BẠCH ĐÀN LAI (EUCALYPTUS UROPHYLLA x E EXSERTA) LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội, 2017 ii VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT NGUYỄN THỊ LINH ĐAM NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ SSR TRONG CHỌN GIỐNG BẠCH ĐÀN LAI (EUCALYPTUS UROPHYLLA x E EXSERTA) LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60 42 01 14 \ NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC TS Nguyễn Việt Cƣờng Hà Nội, 2017 i LỜI CẢM ƠN Tơi xin tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến TS Nguyễn Việt Cường – Trưởng môn Lai giống sinh học hạt phấn trực tiếp hướng dẫn, giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn lãnh đạo Viện Nghiên cứu Giống Cơng nghệ sinh học Lâm nghiệp, phịng đào tạo sau đại học Viện sinh thái Tài nguyên sinh vật – Viện hàn lâm khoa học công nghệ Việt Nam, thầy giáo tồn thể anh chị em đồng nghiệp tạo điều kiện cho tơi hồn thành tốt chương trình học luận văn Cuối cùng, tơi xin tỏ lịng biết ơn đến gia đình, bạn bè đơn vị cơng tác giúp đỡ tơi q trình thực luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Học viên Nguyễn Thị Linh Đam ii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN………………………………………………………… …….i MỤC LỤC ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC HÌNH ẢNH v DANH MỤC BẢNG BIỂU vi ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU A Ngoài nƣớc 1.1 Những nghiên cứu chọn giống bạch đàn 1.2 Giới thiệu thị SSR số ứng dụng chọn giống 1.2.1 Giới thiệu thị SSR (Simple Sequence Repeat) 1.2.2 Ưu điểm chọn giống thị phân tử 1.2.3 Một số ứng dụng thị phân tử chọn giống B Trong nƣớc 15 1.3 Những nghiên cứu chọn giống bạch đàn Việt Nam 15 1.4 Ứng dụng thị phân tử chọn giống Việt Nam 17 CHƢƠNG II MỤC TIÊU, NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 Mục tiêu 20 2.2 Nội dung 20 2.3 Vật liệu nghiên cứu 20 2.3.1 Vật liệu sử dụng để sàng lọc cặp mồi SSR đa hình 20 2.3.2 Vật liệu sử dụng để phân tích liên quan cặp mồi SSR với tính trạng sinh trưởng bạch đàn lai 21 2.3.3 Các cặp mồi SSR sử dụng nghiên cứu 24 2.4 Hóa chất thiết bị 24 iii 2.4.1 Hóa chất 24 2.4.2 Thiết bị 25 2.5 Phương pháp nghiên cứu 25 2.5.1 Phương pháp tách chiết ADN tổng số từ mẫu 25 2.5.2.Phương pháp đo nồng độ quang phổ kế 26 2.5.3 Phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) 26 2.5.4 Phương pháp điện di gel agarose 1% 27 2.5.5 Phương pháp điện di gel polyacrylamide 5% 27 2.5.6 Phương pháp phân tích xử lý số liệu 29 CHƢƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 32 3.1 Thu thập thơng tin trình tự từ mồi SSR có liên quan đến lồi bạch đàn 32 3.2 Sàng lọc cặp mồi SSR để tìm cặp mồi SSR đa hình 34 3.2.1 Tách chiết ADN tổng số điện di kiểm tra 34 3.2.2 Xác định điều kiện PCR tối ưu cho việc nhân đoạn SSR 36 3.2.3 Kết phân tích đa hình điện di gel polyacrylamide 38 3.3 Xác định cặp mồi SSR liên quan đến sinh trưởng nhanh 47 3.4 Kiểm chứng thị có liên quan đến tính trạng sinh trưởng 53 CHƢƠNG IV KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 59 Kết luận 59 Kiến nghị 59 PHỤ LỤC 67 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TT Chữ viết tắt Giải thích ADN Acid Deoxyribonucleic AFLP Amplified Fragments Length Polymorphism ARN Acid Ribonucleotide bp Cặp base (base pair) C:I Chloroform : Isoamyl Alcolhol CTAB Cetyl trimethylammonium bromide dNTPs Deoxynucleotide triphosphate EDTA Ethylene Diamin Tetra Acetate OD Optical density 10 PCR Polymerase Chain Reaction 11 RAPD 12 QTL Quantative trait locus 13 RFLP Restriction Fragment Length Polymorphism 14 SSR Simple sequence repead 15 TAE Tris acetic EDTA 16 TBE Tris boric EDTA 17 UV Tia tử ngoại (Ultraviolet) 18 UC Bạch đàn lai Uro Camal 19 UE Bạch đàn lai Uro Eserta Random Amplified Polymorphic ADN v DANH MỤC HÌNH ẢNH Bảng Nội dung Trang Hình 3.1 Kết điện di ADN tổng số mẫu bạch đàn lai 35 Hình 3.2 Kết điện di sản phẩm PCR với cặp mồi SSR 56°C 37 Hình 3.3 Kết điện di sản phẩm PCR với cặp mồi SSR 58°C 37 Hình 3.4 Mức độ đa hình số cặp mồi EMBRA 39 Hình 3.5 Kết điện di sản phẩm PCR mẫu với thị EMBRA39 Hình 3.6 Kết điện di dịng bạch đàn lai với EMBRA229 Hình 3.7 Hình 3.8 Kết điện di dịng bạch đàn lai với EMBRA78 gel polyacrylamide 5% Kết điện di dòng bạch đàn lai với EMBRA209 gel polyacrylamide 5% 46 55 56 56 vi DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng Nội dung Trang 2.1 Danh mục 22 mẫu sử dụng để sàng lọc cặp mồi SSR đa hình 20 2.2 Các dịng bạch đàn lai sinh trưởng nhanh chậm Bầu Bàng Bình Dương (2002-2012) 21 2.3 Các dòng bạch đàn lai sử dụng nghiên cứu 22 2.4 Thành phần phản ứng PCR 26 3.1 Kết đo OD mẫu ADN tổng số 35 3.2 3.3 3.4 Nhiệt độ bắt cặp 205 cặp mồi EMBRA sau tối ưu sử dụng nghiên cứu (chi tiết phụ lục 2) Số alen hệ số PIC 106 cặp mồi có đa hình 53 thị SSR có độ đa hình cao sử dụng để sàng lọc thị SSR liên kết với sinh trưởng nhanh 38 40 42 3.5 Các kiểu gen 104 phân tích thị EMBRA39 43 3.6 Kết điện di cặp mồi liên quan đến sinh trưởng với 60 dòng 47 3.7 Tương quan cặp mồi EMBRA với suất bạch đàn lai 50 3.8 3.9 Các dòng bạch đàn lai thể suất cao thấp trường khảo nghiệm Bầu Bàng Bình Dương (2002-2010) Sự liên kết thị SSR với tính trạng (NS - suất) 54 54 ĐẶT VẤN ĐỀ Cải thiện sinh trưởng (năng suất) rừng mục tiêu chọn giống quan trọng nhiều chương trình nghiên cứu lâm nghiệp, nhiên suất có hệ số di truyền thấp Năng suất tính trạng số lượng phức tạp thể qua thơng số đường kính chiều cao, tổng hợp nhiều tính trạng khác nhau, ảnh hưởng lớn yếu tố môi trường Sự khác biệt suất phân li hai gen mà phân li nhiều gen, với ảnh hưởng gen nhỏ Tính trạng số lượng khơng phân li thành nhóm cụ thể, ta khơng thể đơn giản sử dụng nguyên lí di truyền Mendel để nghiên cứu Các nghiên cứu chọn giống trồng lâm nghiệp nước quốc tế có trợ giúp cơng nghệ sinh học có thành cơng định, nghiên cứu ứng dụng thị phân tử chọn giống bạch đàn (E globulus, E nitens) Bundock cộng 2008; Freeman cộng 2009 cho thấy thị SSRs, RAPDs có tương quan đến sinh trưởng đường kính với mức đóng góp biến dị kiểu hình từ 3,8 đến 17,9%, ngồi tác giả số tính trạng chất lượng mật độ gỗ, hàm lượng xenlulơ, lignin đóng góp cho mức biến dị từ 5,6 - 12,3% [20] [28] Theo Brondani cộng sự, (2006) đồ liên kết cho loài E grandis, số 172 thị có 153 (89%) thị giữ ngun vị trí đồ chung cho Eucalyptus Trong đồ liên kết cho lồi E urophylla có 140 152 (92%) thị giữ nguyên vị trí đồ chung [19] Anand Raj Kumar Kullan cộng (2012) nghiên cứu di truyền tính trạng tăng trưởng, tỷ trọng gỗ biểu gen hai gia đình lai trở lại lồi Bạch đàn urơ Bạch đàn grandis xác định QTL đường kính thân 12 QTL cho tỷ trọng gỗ Các QTLs cho đường kính tỷ trọng gỗ cho thấy mức đóng góp biến đổi kiểu hình 3,1 - 12,2% Như tính trạng chất lượng lẫn số lượng nghiên cứu đóng góp 18% biến dị cho tính trạng nghiên cứu Một gợi ý Bala R Thumma cộng 2010 nghiên cứu chọn giống truyền thống có trợ giúp cơng nghệ sinh học (chỉ thị phân tử liên kết với tính trạng sinh trưởng) để tăng hiệu lựa chọn cho tính trạng số lượng có di truyền thấp, suất cách tiếp cận có hiệu Đây hướng đề tài“ Nghiên cứu ứng dụng thị phân tử SSR chọn giống bạch đàn lai (E urophylla x E exserta)” đề xuất thực [41] Luận văn phần đề tài “Nghiên cứu chọn giống bạch đàn lai thị phân tử” giai đoạn 2012-2016, TS Nguyễn Việt Cường làm chủ nhiệm đề tài cộng tác viên đề tài 85 Phụ lục 02: Nhiệt độ bắt cặp cặp mồi EMBRA sau tối ƣu sử dụng nghiên cứu 205 cặp mồi Mồi EMBRA2 Trình tự lặp lại (AG)15 Trình tự mồi (5' đến 3') CgTgACACCAggACATTAC Nhiệt độ Kích Nhóm gắn mồi thƣớc liên (ºC) (bp) kết 56 121 11 56 88 56 98 56 115 56 127 56 94 56 95 10 56 97 56 98 56 109 56 97 56 315 56 120 11 56 135 56 178 56 204 11 58 138 58 148 56 65 ACAAATgCAAATTCAAATgA EMBRA5 (AG)22 ATgCTggTCCAACTAAgATT ACAAATgCAAATTCAAATgA EMBRA6 (AG)19 AgAgAATTgCTCTTCATggA gAAAAgTCTgCAAAgTCTgC EMBRA7 (AG)15 CACACCgTgTCAgTTAgC AATAAggAggATTCCATgg EMBRA8 (AG)21 CACAACTAAAAATCAAAACCC AAAgAgCAgATTATTACAgAAgC EMBRA9 (AGA)3(AG)28 AgTgAgAgAgATATTCgCgT CCAATACAATCATCAATCCA EMBRA10 (CCT)3(AG)14 gTAAAgACATAgTgAAgACATTCC AgACAgTACgTTCTCTAgCTC EMBRA11 (AG)4GG(AG)13 gCTTAgAATTTgCCTAAACC gTAAAATCCATgggCAAg EMBRA12 (AG)22 AggATTTgTggggCAAgT gTTCCCCATTTTCATgTCC 10 EMBRA14 (AG)8AAC(AG)25 gCCTCAAACCAATTCAAAT CATgATTCATCCCACTCCTC 11 EMBRA20 (AG)19 gTgAgTgggTATCCATCg gCTggAACTggTCTTgAg 12 EMBRA25 (AG)27TAG (AG)4 TCATCAggTTCgCTCgTT AgTTgAgTgAACACgCgg 13 EMBRA26 (AG)19 CCCACAACAAAAggAAAg AgAggTgTTCgATTCAATTC 14 EMBRA27 (AG)24 ATAACCACACCAATCTgCA TATAgCTCgAACgCTCAAC 15 EMBRA28 (AG)25 CAAgACATgCATTTCgTAgT ACTCTTgATgTgACgAgACA 16 EMBRA29 (AG)18AGA (AG)18 CTTCgCTCACATCAgTCTC CAATCgAgTCAATAACATTC 17 EMBRA30 (AG)22 TTAgTTgAATCCAACCATTg TATATAAggTgCAAATAATAAACg 18 EMBRA31 (AG)6TTTCCC(AG)19 AATTgCCCgAgTCAAAATAC ggAACAATgTggTTTggg 19 EMBRA32 (AG)22 ATCAgCCTCCACgTTCTA 86 ggAgAAggAAggTgTATCAA 20 EMBRA33 (AG)19 CAATTTgCATgTCCAgTTTg 58 122 10 56 104 56 205 56 155 56 124 56 126 10 56 146 11 56 141 10 56 198 56 127 56 145 56 208 56 102 56 106 56 132 58 115 56 130 56 144 58 149 56 115 56 143 gCAgAAgTTgATTgAAAgCA 21 EMBRA34 (AG)21 TCAAAACCCTCTCTCTCAT AATAAACATTTTCTTTgAACAgA 22 EMBRA35 (AG)24(TCC)9 ATTTTTgAgAgAAAAATCTTATCC gTggTgTgAACgAACgAT 23 EMBRA36 (AG)29 TTATCgTCAATTCTTgCTTg AATTCAgCTCAAgATTTggT 24 EMBRA37 (AG)16 CACCTCTCCAAACTACACAA CTCCTCTCTCTTCACCATTC 25 EMBRA38 (AG)11(TA)4 ggTTCTCTAgTgAAAATgTCg ATACATCCATCAAAgCACAA 26 EMBRA39 (AG)9(CA)11 gCATTCgTACTCATTTTCAA gCATCgAgAgTggATTAgTT 27 EMBRA40 (AG)19(CA)4 AAAgTATCTTCACgCTTCAT TCCCAATCATgATCTTCAg 28 EMBRA41 (AG)13 ATgATTTTgTgCgTggAC TCAggTgAAAggATggAg 29 EMBRA42 (AG)15 gAgTAAAAATTggTTTTgAgTg CCCTCTTTTCATTTTgTCTT 30 EMBRA43 (AG)14 TCCAggTTCATATTCACATC CATCTCAAgTTCCTCCCT 31 EMBRA44 (AG)16 ggggTTTgTTCTgCTTAg CAAAAgAgTTCAgCTgTg 32 EMBRA45 (AG)18 gTCATTTgCACACAgTTTTC AgTTCATAgAATgCAgAAAATg 33 EMBRA47 (AG)24 AgAACCCTCTATAAAACCCC gggCTAgACATgATggAg 34 EMBRA49 (AG)20 ATTATTggTTCATATTgAAAACC AgATAgAgATTgAgTgAgACCC 35 EMBRA51 (AG)20 gATgCATTCCTTTTTTTCC CATTCTCTTgCATCTggAC 36 EMBRA53 (AG)17GT(AG)5 ATTAgCTTTTCTgTAACCCg gAATggACAAgCTCTgATg 37 EMBRA54 (AG)17 TgTATgAggTACATCCgg CAATCgAgTCAATAACATTC 38 EMBRA56 (AG)23(CA)8 TCATTgACATgCTgACTgT ACTAACAgTTgAAAAggTAAAgC 39 EMBRA57 (AG)28 CCTTCTCTCTCTTggAATAC ATAgCCAgTgAAAgTgAgg 40 EMBRA58 (AG)20 CACCAACTggTACTATgAggAT 87 TTggCTTAgggTAgAACACT 41 EMBRA59 (GA)6GG(GA)3AA(GA)9 gTTgTgCATgggCCTCTTg 56 106 56 139 11 56 121 56 110 58 107 56 70 58 105 56 65 56 58 56 223 56 96 11 56 197 11 56 84 56 288 56 178 58 106 58 89 56 195 58 98 10 56 160 10 CgACggCCAgTgAATTgTAA 42 EMBRA62 (AG)18 TAggACCTACAggACCAT gTTATACTgCggTgAAggCT 43 EMBRA69 (AG)5TT(AG)19 ACCTTgTgATggATgAAgC CCCgACAAggATgAgAAA 44 EMBRA71 (AG)39 gCgAATTTgCTAACAACC gACACACCTCTACACACACC 45 EMBRA78 (TC)24 TATTATCCAAAACgTCATTAgC TAgAggCAggTgTTAgCTg 46 EMBRA81 (CT)21 CATgAgTTACTgCAAgAAAAg ACAgCCAAAAACCAAATC 47 EMBRA82 (GA)27 ggAgACAgACATTTTgTCg TAAgATTCCTTgAATgCACA 48 EMBRA83 (CT)23 TggCTTCTATATCCTCCTTC ATggTgATCgAgTgAgTTg 49 EMBRA84 (CT)24 AATgACgACgCAAATAgAATAAT TACgCTCAgTTTTTCAgggT 50 EMBRA85 (CT)3CCCCTCCCC(CT)8 C(CT)9 TgATCCATAATTAgggTTACACA CCgATgTCCAATgACTCC 51 EMBRA86 (GA)25 CTATACTgCgAATCAAAgCA CATCAgATAATCAAgCAAgC 52 EMBRA87 (CT)17AGA (CT)18 CTTCgCTCACATCAgTCTC CATCAgATAATCAAgCAAgC 53 EMBRA88 (TC)21 gCCCTTTATTAgTTTgCAAC AAAgAATTTgAAAATCgAgTg 54 EMBRA89 (CT)17 AACAgTTTCgATTTgAAggT gAgATTgTggAggAATCAAT 55 EMBRA92 (GA)24 CCCAACTTAgAAACCCTAAA AAgAAgTggTAggAAgAATAgg 56 EMBRA97 (CT)21 TgCAAgAAAAgCATAAAgAA CAgACTTCAggATTTCATTTC 57 EMBRA99 (GA)24 CTAATCATgAgggggAAg CTTTCTCTCAgACggTCAC 58 EMBRA100 (CT)26 TgTgTTCTCggTTTCAAAACT TgTgAAgTgATgCgAAgC 59 EMBRA101 (AG)12A(AG)8 TgATAgAgAggTACATggAgC TAAgACTCATgTgAACTAATTgg 60 EMBRA102 (CT)29 ggCTAgTgATCCAAACATg gTCTCTCTCgCgTATgACA 88 61 EMBRA104 (CT)11 CACCgATCTCCACTATgC 56 99 58 92 56 123 10 56 123 58 73 11 56 130 56 n.a 58 90 10 56 132 58 99 56 100 10 58 109 56 78 58 232 56 215 10 56 116 56 115 10 58 273 56 185 58 218 56 176 TTTTTTCAAggCAAAAgTg 62 EMBRA105 (CT)21 ggAACgCATgTTCTTTTC TgTCTgCTTTggAATgTg 63 EMBRA107 (GA)n AATACAATTgAggggTCTC ACCAAAAACAAATgTCgT 64 EMBRA111 (AG)15A(AG)16 CACAATggACCCAgCATA gCATCgAgAgTggATTAgTT 65 EMBRA113 (TC)22 TAAgATAACgggAAgCCA TgTTATCTgACTgATCAAgg 66 EMBRA114 (GA)26 AggCgATgACTgTTATCAA ACTTCCAAAATTCCCCAC 70 EMBRA120 (TC)17 TgTCATTTTCAAgAACTTgC TCAggTgAAAggATggAg 71 EMBRA124 (TC)34 TgTggACATgATAgATgAAgT AATTATTTCgATAgAAACggA 72 EMBRA125 (CT)29 TTCAAgAAATCATCgACAAA TCgCATCATAgAAgTCgTC 73 EMBRA126 (TCCTC)4TCC (CT)18 gTAgTCCCTgACgCAAAC AgTACgATATTTTCgCgAgT 74 EMBRA127 (CT)16CGG (TC)15 CAAgCTgTAgggTTCCTTT gTATAAgACCCAAAgACCCA 75 EMBRA129 (TC)22 AAATgCTCgTCCTATTTgAT AgATATAggTCAAATCCCTCC 76 EMBRA131 (TG)9GGTGTATA(TG)15 ACTTAACATCTATACATATTTg TgTCCTATCTggCTCA 77 EMBRA132 (TG)13 gAACgCTATTCCTCggATgA CATgATTACgCCAgCTCg 78 EMBRA133 (TG)28 CggTCgTTgTCggAATCTC AgTTgggTAACgCCAggTTT 79 EMBRA135 (AG)15AAT (AG)10 CTgACTTggCCggTACATA AgTTCATAgAATgCAgAAAATg 80 EMBRA136 (TC)26CC(TC)3 gTTATgTTTggTTgAAAggAg AgACACCATgTCCCCAgg 81 EMBRA137 (AG)n CTCgTCTTgCACgCTCTCTT gAgAgTgTgTTCATgCggCT 82 EMBRA138 (AG)n TCTggTTCgTCgACAATC AAAgTTATCAgCgAgAgTTC 83 EMBRA139 (GA)32 CCAATgCAAgCCATAATgT ggATCCggCTTCACTCTT 84 EMBRA140 (CT)15 ggTTTgATAggTggATTggg ggTTgATgACTgAgAgATgAAgg 89 85 EMBRA142 (CT)28 gAAgCCgTATgCCTACTgTT 56 259 56 189 56 107 56 204 56 218 56 114 56 146 58 165 56 122 56 215 10 56 247 1.6 56 144 10 56 146 56 150 56 89 58 175 56 129 11 56 102 56 124 55 82 58 127 ATgTgCgAgTgggAgATg 86 EMBRA143 (GA)20 CCgTgAggATgTggATgT gAACCCACAgTTATTTCC 87 EMBRA146 (GA)n gAATCCTCTTggAgCACTAC CCATTAggCCgAgTAgAA 88 EMBRA147 (AG)n gCACggTACTCgATCATAgA TgAgATAggATTgCgCgT 89 EMBRA148 (TC)26 gATTACAAgCCACACCgT AgCCAAgTTgTATCAgAACC 90 EMBRA149 (AG)n ggAgAgATTgAAgggAAA ACTCATCAAgCCATAgCTC 91 EMBRA150 (AG)n CgTCACTgAgAAgAgATAA TCACTACTgAgAAgACTAgg 92 EMBRA151 (AG)n gTCAgTTgACggCgTAAg CCATTCggTTgAgAgAgA 93 EMBRA152 (AC)24 TCTCCTCTggCTCTTCTA AgCTCCCTTCACAgTgTA 94 EMBRA153 (CT)24 CACACTTCTAgTCCATCC ggAgTATAgAACgATTgTg 95 EMBRA154 (CT)19 TggATggTCAACggCgTA CATgCATTggCCATTggT 96 EMBRA155 (TC)n ggTTgTCggTTCACTCTTgT ATAggATTgCgTCATgAAgC 97 EMBRA156 (GA)25 gTCAgATTggATCTATgC gAACAAgTAgATCCTCgTA 98 EMBRA157 (GT)16 TgCCAgAATgTATCgTCC TCTggCTTCTTTCTTgTTg 99 EMBRA160 (GA)12 ggTTgAACAAgTTggTCT ATCATCATTggAgggAA 100 EMBRA162 (GA)22 TgTCACCATACTTAgCAAgg ggTACTTCTCATTTgCACg 101 EMBRA165 (CT)2C(CT)23 AAgAACATgCAgCggAgA CTgCAATACATATCTTCTCC 102 EMBRA166 (GA)19 AACgTgAACgTAggTAg ACAgATCAAAgTCTCTCTC 103 EMBRA167 (TC)19 ggAgAAgTCTCTACTgCT ATggCCTTTgTCACCTCT 104 EMBRA168 (GA)12 ggAgTgAAgACggTAAAT gATTCAATATgTgTgCTTgg 105 EMBRA169 (CT)17 TgCTTCTgACACCgATCT AgTCAATAACATTCAAgACTgC 90 106 EMBRA170 (GA)20 CgAgTggCATCgCgAATA 56 124 54 105 55 102 54 81 60 138 11 60 154 56 134 56 77 59 211 58 158 56 186 56 180 56 143 56 114 - 56 207 11 56 145 52 250 56 146 10 58 272 57 279 58 264 CTCTTCCTCggCCCTgAAT 107 EMBRA171 (GA)4AA(GA)19 AATggTgCCAgATTgAA CAACTCAgTggCTCAgTg 108 EMBRA173 (GA)20 CTgTCAATACACACgCAC ggATTCACTTgTTAgCTg 109 EMBRA175 (CT)16 CAACAACTggATgAATgg ACgTTAATggCAgACACC 110 EMBRA176 (GA)19 CCgAACTgAACATCTgTgAC ggTCCTTgTCCAACTCTCTC 111 EMBRA177 (CT)7CC(CT)7 CCTCACTTggCCgAATAC CTTgCATgTCCTCCAACAC 112 EMBRA179 (GA)9 gTCggCTCACAgCATgAA gCCTCCAgTAgTTAACAgACg 113 EMBRA180 (GA)16 ATCAACgACACATATgCAgC ggATgCTTgggTgATTgT 114 EMBRA182 (GA)22 gCATACTTAgCAAggAATAg gCTAAggAAATATCCAgg 115 EMBRA185 (GA)18 gACgTACATTACgTTCTATTCC TACACATTAAggCCCgTC 116 EMBRA186 (GA)27 ggAAggCTTTgAgATAAC ACCgAgACCAgTTgAgAg 117 EMBRA188 (CT)25 gAgCgAgATCTAATCTTC AAAAgTTTggCTgATggg 118 EMBRA189 (CT)17A(CA)14 CgTgCTTTTgAggCTCT gATTgAggATgAgTggTC 119 EMBRA190 (TC)20 TTgTCTCTTCCTgCCTCCC gAgACCTTgCTCAAgCTCC 120 EMBRA191 (CT)23(CATA)5 gATCCAgCTgTgTACATC CTTCgTgCTATAATCAggTC 121 EMBRA192 (CT)22CCT(TC)5 ggATgCAgTTCTAgAgAg gAgCgAgATCTAATCTTC 122 EMBRA193 (TC)15 TTCgCCATCgTCgTAgTC gAgAgATATTCgCgTgCAg 123 EMBRA194 (CT)17 AAgATAggTggCgCTTgAg gggCATgTAgAAACTCTTCg 124 EMBRA196 (GA)46 gTgAAgCTCAACCTgTTgTCT gTgACCgATCATgTgTggACT 125 EMBRA197 (TC)21 gCAgCAACgTCTACCTCTTCC CTACTgTACgTTgAgCgAAgC 126 EMBRA198 (GA)40 gTAAgAgCAATATTATCAgC CggTCCATTCAATACTATC 91 127 EMBRA199 (GA)17 gCgTggACATTAggCAAg 56 105 57 348 56 147 57 182 57 316 58 225 58 116 56 153 57 213 56 232 56 151 56 128 57 217 2.1 57 268 58 157 58 200 56 164 56 310 56 181 56 173 56 104 CCgCCTCCAACATTCTCT 129 EMBRA203 (TC)21 CAgCAACgTCTACCTCTTCC TgATCCAgTTCCgACTAgTg 130 EMBRA204 (TC)25 CTCgTgTggTTATgTgAACT gCTTgTCTACTATgCACATgA 131 EMBRA205 (GA)21 AggAAggCggATTgATgAgg gAACggACggAggTgAgCTA 132 EMBRA206 (GA)8AA(GA)11 gAACAgCTACTCgTCgATTC gTAACCAggCTTggACgAT 133 EMBRA207 (CT)12 gATATTCCTCggTCTCTCTg TCCTCTTgTTgTCgCCTC 134 EMBRA208 (CT)28 AAgCTATTggTgTCACCgAA AAAgAggAggggAATTACTC 135 EMBRA209 (TC)22 TgCCTTCCACTTCTTCAg AAATCTAgTCggTCTCAAAgC 136 EMBRA210 (TC)25 CgTgTggTTATgTgAACT CCTAACAATgCATAAgCTC 137 EMBRA213 (CT)17 AgTgAATgCTgTggAgAACC ggAgAAgCAAgACCAggAgT 139 EMBRA214 (TC)22 CCTTCCACTTCTTCAggT AgAgCAACACACggAggT 141 EMBRA217 (TC)25 CgTgTggTTATgTgAACT ATgAgTATATgCCTgTgg 142 EMBRA218 (TC)17 TCAgTAATCAgATTTgCgCT CTCTCAggCgATTgATggT 143 EMBRA219 (GA)17 gATTCCACTgCggCCAgACA CgAACgTAAgACTAggTCCgAAgA 144 EMBRA223 (GA)16GG(GA)4 TggATgTgAAgggAgAgTg gAgTgCTgTgTCgTAggCT 145 EMBRA224 (GA)20 TAAgATAgAgACgggCCAgC TgCAATACAAgTCTgAgAgCCA 146 EMBRA225 (GA)5GT(GA)8 AgTgCAgCATTgAgTTCC AAgAggTggCTCCAgAAg 147 EMBRA227 (GA)13 CgAATgCCATAgATTgTCAg CAggCATCTCgTACgTggA 148 EMBRA229 (GA)20 AgAACgTTAACTCCTAAggT gCATgTACACTAACgACg 149 EMBRA230 (GA)30 gTACTTAATCTgTggCAATC gATCCTTgCATTATCgAC 150 EMBRA232 (AG)12 TCCTTATCgTCAATTCTTgC ggTCTAgCgTgATTCATCCT 92 151 EMBRA233 (AG)14 gATgCACTTATCTCCACCAA 56 160 56 123 56 185 58 189 56 97 11 56 172 n.s 60 165 n.s 58 158 n.s 58 208 n.s 56 94 n.s 56 155 n.s 60 112 n.s 56 214 n.s 56 178 n.s 60 115 n.s 56 311 n.s 56 348 n.s 56 271 n.s 54 262 n.s 56 348 n.s 56 150 n.s TgTAgCACCAgAATgTCAgg 152 EMBRA237 (GA)25 TgCCAAgAACCTATTAATCg ATCATCATTggAgggAA 153 EMBRA238 (GA)35 TgAgTATgCAggCAAgTCTAgC TTAgggATgTCggCATCAC 155 EMBRA241 (CT)19 AAgAAgTACCTCTCTCTCTC TgACgTgATATCTCAgTTg 156 EMBRA236 (GA)28 CCCTAATAgTgTgACCTTgA ggTCCTTgTCCAACTCTCTC 157 EMBRA257 (CT)28 CCTTCTCTCTCTTggAATAC CACCTAgAATAgCCAgTgA 158 EMBRA258 (AG)15 CTgACTTggCCggTACAT TCTAgTCggTCTCAAggCA 159 EMBRA263 (GA)n CTTCgAATCAAgCCgTC TTCAggAggTggAggAg 160 EMBRA269 (TC)15(AC)16 TCAACTgCAATCCTTACC CCTgCAgTgTCAgTgTgT 161 EMBRA277 (TC)23 CTACCAATgCATCTCgTC gTAgCgTAACTCAACgTg 162 EMBRA278 (AG)18 CCTTCAgACgACATTACTATC CCgCATCATTgAAgTCAT 163 EMBRA288 (GA)22 AAgTCCgAACgTgAgAgA AgCgAggAAgATgAACAg 164 EMBRA290 (GA)15 CggCAATATCgTgAATgg TCACgTTgAgTTAggCTACC 165 EMBRA291 (GA)24 CAAACAACgTggACgAAgAAA TCggTTTCggCAACATgg 166 EMBRA292 (GA)20 TTCCTgTgCCTggTgA TgCCAgAAgTCCTCTCTC 167 EMBRA296 (CT)23 ACAATgAgATAAgCAgCTCC ACTggTggCATgTCATgg 168 EMBRA298 (CT)21 CAgCAACgTCTACCTCTTCC TgATCCAgTTCCgACTAgTg 169 EMBRA303 (CT)20 gCgACTgCgTAgCATgTATCT AgCTgCAAATgCCATCAA 170 EMBRA304 (GA)35(GGA)4 gTCCTACTTCAATCACAgAg CAggAggTgAACATCgAg 171 EMBRA313 (GA)26 TgATCAATATCTAACCAgC gAgCgATgAgAgATTgAg 172 EMBRA318 (GA)28 CCCTCCATTATCgACACAAA gCCATTATTAgCTgCCgT 93 173 EMBRA321 (TC)20 ggACAAgTCCAgCAgATATg 56 230 n.s 56 166 n.s 54 356 n.s 56 218 n.s 52 189 n.s 56 276 n.s 54 148 n.s 54 217 n.s 56 97 n.s 58 98 n.s 58 83 n.s 58 72 n.s 56 132 58 96 n.s 58 200 n.s 58 322 n.s 56 n.a n.s 56 91 n.s 54 109 n.s 56 119 n.s 58 98 n.s CgATCAgAgAAgATAggCgA 174 EMBRA324 (TC)20 gCAAgAgACTTTgTgACACC CCTAgATCAACCgTCATCg 176 EMBRA332 (GA)11 TggTCCATggTgTTgTTgAg CTTCATgCAgACATACCgTg 177 EMBRA333 (TC)7AG(TC)5 CTATTAgCCTgCAgTTgACC ggATgTTCATgTgACCTCCA 178 EMBRA337 (TC)20 AgTAgAAgTAAATCgTgCggT CAgCAgATCAATAAgCCTCg 180 EMBRA341 (TC)22 CCTCACACTCCACgAACACg CTgTgTTTCgATggTgATgC 183 EMBRA351 (GA)26 CTAggTgAgggAAATgAAA CCAgACAACAAgAAgAAAgT 184 EMBRA352 (GA)24 CATACgTTgTACCTTgCTCC AgAACCAAgAgCTgTgAgTC 185 EMBRA356 (CT)35 gCTTCATCTATAACATTACTCAgA AgAAgAATCCATAgTTgTTTCC 186 EMBRA358 (CT)31 TgATggTTgAATATgACCC ATggCgTTATTTATAgAgTgTg 187 EMBRA359 (CT)19 TAgAATgTTgCCCTTTTTTT ATCCTCCATAATTCTTTgTTg 188 EMBRA360 (GA)13 ACATCAAggTCAAAATAgTgg gAggAAAAgTCATgTCACg 189 EMBRA361 (AG)14 gTTCgCCATCgTCgTAgT ATCATCCgTATCAgCCgA 190 EMBRA362 (TC)3TT(TC)18(AC)13 TgCCTgTggTTCAAgTTA ACATTTggTgTgTgTgTgT 191 EMBRA363 (AG)29 ACAAgCCATgATTgATCTg AgTgTgAAAAgggCACAg 192 EMBRA364 (TC)40 TTTTggTgAgCTACgTACA TggAggAggAAATATATACATATA 195 EMBRA369 (CT)6TT(CT)9TT(CT) gATTTTgggATCAATACCAC TTggAgCTTTCAAAAAATg 197 EMBRA372 (AG)18 ACTTTggATTACCCgCTATA CATTCTgATTCCACCgTATA 198 EMBRA374 (GA)29 TTTAAAgAAATggTCATAATTTg AAgCACACAgACgTCATC 199 EMBRA375 (AG)18 CggTTACTTgCTTCATTCg gTACggATgggTggACAC 200 EMBRA377 (TC)24 CCTATCACAAgCACCgTAg CCTAAgACATgAggTCgC 94 201 EMBRA378 (TC)24 ACTTTgTggCATTCATCA 56 190 n.s 56 239 n.s 58 85 n.s 56 166 n.s 58 212 n.s TgACgAgAggAgAAAACC 202 EMBRA379 (AG)17 TCTgAATggAggAgATgg AAATAATTTCCTTgCCCAT 203 EMBRA382 (CT)17 AgTCATTACgTAgCCACgg TCTgCAgATgCTgTTgCT 204 EMBRA385 (CT)31 TCATCTTCCATgTTACTCACA TggATgTCgAgAAgAgTAAA 205 EMBRA386 (TC)24AAA (TC)24 CCAAACACTCTTCCCATAT CCATAAACCAATCAAATCA 95 Phụ lục 03 : Sinh trƣởng dòng bạch đàn lai Bầu Bàng Bình Dƣơng (8/2002 - 8/2006) TT Công thức D1.3 (cm) Xtb Sd V(dm3/Cây) Hvn (m) V% Xtb Sd V% Xtb Sd V% Năng suất Tỷ lệ (m3/ha/năm) sống(%) UE3 13.07 1.52 11.63 14.27 0.53 3.71 98.50 6.77 6.87 27.09 86.7 UC1 13.02 1.71 13.13 13.25 1.02 7.70 93.00 7.11 7.65 25.58 90.0 PN2 13.05 2.43 18.60 12.20 1.58 12.93 91.50 7.77 8.49 25.16 56.7 UE27 12.59 1.73 13.74 13.88 0.95 6.82 91.00 7.15 7.86 25.03 56.7 UC90 13.14 1.64 12.48 12.53 1.22 9.74 88.70 6.68 7.53 24.39 86.7 UE33 12.29 1.32 10.74 12.56 0.58 4.62 76.50 6.17 8.07 21.04 76.7 UE24 11.59 1.19 10.26 13.38 0.50 3.71 74.00 6.02 8.14 20.35 76.6 U6 12.09 1.37 11.33 12.15 0.64 5.27 73.70 6.35 8.62 20.27 46.7 UU9 12.13 0.69 12.57 1.07 8.51 72.50 4.87 6.72 19.94 13.3 10 UE30 11.55 1.48 12.80 12.72 0.89 7.03 69.20 6.60 9.54 19.03 33.3 11 UE85 11.51 1.17 10.16 12.71 1.89 14.87 69.20 5.81 8.40 19.03 76.7 12 PN14 12.15 1.07 11.56 0.79 6.83 69.10 5.52 7.99 19.00 33.3 13 UE26 11.38 1.32 11.58 12.52 0.94 7.49 66.60 6.22 9.34 18.32 76.7 14 UE86 10.89 0.56 13.56 0.59 4.35 64.10 3.80 5.93 17.63 23.3 15 UE59 11.67 1.98 16.97 11.02 0.59 5.35 63.10 6.48 10.27 17.35 33.3 16 UE73 10.85 1.23 11.37 12.73 0.54 4.24 61.10 5.79 9.48 16.80 80.0 17 UU15 10.58 1.22 11.53 11.80 0.77 6.53 60.70 5.36 8.83 16.69 26.7 18 UC77 10.43 0.73 6.95 12.31 0.53 4.31 59.10 4.73 8.00 16.25 70.0 19 UC2 11.07 0.70 6.31 12.05 0.28 2.32 58.60 4.88 8.33 16.12 76.7 20 UE31 10.52 1.49 14.16 12.60 0.89 7.06 57.50 6.31 10.97 15.81 76.7 21 UE25 10.41 1.26 12.06 12.82 0.85 6.59 56.50 5.93 10.50 15.54 20.0 22 UE35 10.26 1.68 16.37 12.00 0.23 1.94 56.50 6.34 11.22 15.54 36.7 23 UE23 10.16 1.91 18.83 12.00 1.30 10.80 55.90 6.78 12.13 15.37 50.0 24 UE34 10.08 1.10 10.93 12.73 0.95 7.46 54.10 5.68 10.50 14.88 53.3 25 UU16 10.48 1.00 9.54 11.41 0.47 4.12 53.60 4.01 7.48 14.74 53.3 26 UE5 10.25 0.94 9.13 12.30 0.67 5.45 52.70 5.26 9.98 14.49 86.7 27 UE84 10.03 1.14 11.34 12.71 0.67 5.27 52.10 5.22 10.02 14.33 56.7 28 UU11 10.16 1.81 17.80 11.30 0.17 1.50 48.20 5.90 12.24 13.26 33.3 29 UC80 9.43 1.17 12.41 11.48 0.81 7.06 47.90 5.31 11.09 13.17 90.0 30 UU8 9.73 1.94 19.94 1.98 20.48 41.00 6.51 15.88 11.28 16.7 31 GU 94 9.32 1.72 18.44 10.60 1.00 11.11 56.7 5.65 8.80 5.11 9.67 9.43 40.40 6.14 15.20 96 32 UC78 9.41 0.55 5.89 11.41 0.69 6.05 40.30 4.42 10.97 11.08 90.0 33 GU 92 9.38 1.22 12.99 10.67 0.91 8.57 39.80 4.62 11.61 10.95 46.7 34 UE4 9.23 0.97 10.47 11.44 0.64 5.59 39.70 4.87 12.27 10.92 86.7 35 UC81 8.27 0.97 11.73 11.12 0.79 7.10 30.90 4.69 15.18 8.50 73.3 36 UC18 7.69 1.54 20.03 1.26 13.03 25.30 5.54 21.90 6.96 73.3 9.67 Fpr