HUỲNH ĐĂNG KHOA NGHIÊN cứu PHÂN BIỆT HAI LOÀI mắc mật DÙNG làm THUỐC ở VIỆT NAM LUẬN văn THẠC sĩ dược học hà nội 2016

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HUỲNH ĐĂNG KHOA NGHIÊN CỨU PHÂN BIỆT HAI LOÀI "MẮC MẬT" DÙNG LÀM THUỐC Ở VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HUỲNH ĐĂNG KHOA NGHIÊN CỨU PHÂN BIỆT HAI LOÀI "MẮC MẬT" DÙNG LÀM THUỐC Ở VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 60.72.04.06 Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Nguyễn Viết Thân HÀ NỘI 2016 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn ơn sâu sắc tới: PGS TS Nguyễn Viết Thân n n n đầu ti n đến Tôi xin trân trọn ời t ầ đ t n t n it i nt i n u n ớn n iúp đỡ t i t n n y ám ơn TS N u ễn Quốc Bình ThS L Thị Kim Ngân, phịng Sinh học, bảo tàng Thiên nhiên Vi t Nam đ iúp đỡ xá định tên khoa học m u nghiên cứu xin ám ơn DS Trần Thi n Thanh, DS N V n T ắn đ iúp đỡ q trình thu m u Tơi xin trân trọn ám ơn Ban Giám Hi u P òn Đ tạ Sau đại học, thầy cô m n D ợc li u - D ợc cổ truyền thầ iá tr ờng Đại họ D ợc Hà Nội đ tru ền đạt cho tảng kiến thứ để hồn thành q trình học t p, nghiên cứu tr ờng T i xin ám ơn n đạ tr ờn Ca đẳng Y tế Huế đơn ị nơi t i n tác, cám ơn đồng nghi p đ tạ điều ki n iúp đỡ suốt trình học t p nghiên cứu V u n uối n t i độn n tối muốn gửi ời ảm ơn sâu sắ tới ia đ n i n iúp đỡ t i tr n Tôi xin chân t n ạn đ uộc sống học t p ảm ơn H Nội n t án n m Học viên Huỳn Đ n K a MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Nghiên cứu thực vật Vị trí p ân ại Đặ điểm t ự t p ân ố ọ Cam (Ruta eae Juss.) Đặ điểm t ự t p ân ố K óa địn an i t uộ i Hồn (Clausena Burm.f.) i Clausena Burm.f Vi t Nam 1.2 Một số loài Mắc mật Việt Nam Mắ m t núi Mắ m t r n CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 Đối tượng nghiên cứu 20 2.2 Phương tiện nghiên cứu 20 Hóa ất ụn ụ 20 T iết ị má mó 20 2.3 Phương pháp nghiên cứu 20 N i n ứu đặ điểm t ự N i n ứu óa ọ 22 Địn tín n óm Sắ ý ớp mỏn N i n ứu tin t 20 ất ằn p ản ứn ị óa ọ 22 iết 22 ầu 23 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM 26 3.1 Nghiên cứu thực vật 26 Đặ điểm t ự t 26 N óm m u 26 N óm m u 27 Đặ điểm i p u 32 3.1.2.1 Clausena indica (Dalz.) Oliv 32 3.1.2.2 Clausena excavata Burm f 34 Đặ điểm ột 38 3.1.3.1 Clausena indica (Dalz.) Oliv 38 3.1.2.2 Clausena excavata Burm f 40 3.2 Nghiên cứu thành phần hóa học 44 N i n ứu tin ầu 44 3.2.1.1 Độ ẩm tr n 3.2.1.2 H m ợc li u 44 ợng tinh dầu 45 3.2.1.3 Phân tích thành phần tinh dầu 46 P ơn p áp sắc ký lớp mỏng 46 P ơn p áp sắc ký khí kết hợp khối phổ (GC-MS) 49 Xá địn sơ ộ t n p ần óa ọ Địn tín i Mắ m t 52 ị iết ằn sắ ý ớp mỏn 55 Địn tín ị iết t n p ần 55 3.2 Địn tín ị iết r f rm 58 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 65 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 73 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AND Acid nucleotide C Clausena DD Dung dịch DĐVN D ợ điển Vi t Nam EtOH Ethanol GC-MS Gas Chromatography - Mass Spectrometry HCC Hepatocellular carcinoma IC50 Inhibition concentration at 50% MeOH Methanol MIC Minimum Inhibitory Concentration NXB Nhà xuất SKLM Sắc ký lớp mỏng SKK Sắc ký khí S Staphylococus TT Thuốc thử DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang Bảng 1.1 Một số ợp ất t uộ n óm umarin đ ợ p ân p t i Clausena excavata Burm f 11-13 Bảng 1.2 Một số ợp ất t uộ n óm a a i đ ợ p ân p t i Clausena excavata Burm f 14-15 Bảng 3.1 Phân bi t đặc điểm thực v t hai loài Clausena excavata Burm f Clausena indica (Dalz.) Oliv 28-29 Bảng 3.2 Phân bi t hai loài Clausena indica (Dalz.) Oliv Clausena excavata Burm f dựa tr n đặ điểm vi ph u cành 37 Bảng 3.3 Phân bi t hai loài Clausena indica (Dalz.) Oliv Clausena excavata Burm f dựa tr n đặ điểm vi ph u bột 44 Bảng 3.4 Độ ẩm hai loài C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f 44 Bảng 3.5 Độ ẩm vỏ hai loài C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f 45 Bảng 3.6 H m ợng tinh dầu hai loài C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f 45 Bảng 3.7 H m ợng tinh dầu vỏ hai loài C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f 46 10 Bảng 3.8 Kết phân tích tinh dầu hai lồi C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f GC-MS 50 11 Bảng 3.9 Kết phân tích tinh dầu vỏ hai loài C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f GC-MS 51 12 Bảng 3.10 Kết định tính nhóm chất hai loài C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f 53 13 Bảng 3.11 Kết định tính nhóm chất có vỏ thân hai lồi C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f 54 DANH MỤC CÁC HÌNH STT Tên bảng Hình 1.1 Cấu tạo ph n hoa số lồi thuộc chi Clausena Trang Hình 3.1 Một số đặ điểm thực v t Clausena indica (Dalz.) Oliv 30 Hình 3.2 Một số đặ excavata Burm f 31 Hình 3.3 Ảnh chụp vi ph u Clausena indica (Dalz.) Oliv 33 Hình 3.4 Ảnh chụp vi phẩu cành Clausena indica (Dalz.) Oliv 34 Hình 3.5 Ảnh chụp vi ph u Clausena excavata Burm f 36 Hình 3.6 Ảnh chụp vi ph u cành Clausena excavata Burm f 36 Hình 3.7 Ảnh chụp đặ điểm bột Clausena indica (Da z.) O i ới kính hiển vi 39 Hình 3.8 Ảnh chụp đặ điểm bột vỏ thân Clausena indica (Da z.) O i ới kính hiển vi 40 10 Hình 3.9 Ảnh chụp đặ điểm bột Clausena excavata Burm f ới kính hiển vi 42 11 Hình 3.10 Ảnh chụp đặ điểm bột vỏ thân Clausena excavata Burm f ới kính hiển vi 43 12 Hình 3.11 Hình ảnh sắ ý đồ tinh dầu hai loài C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f triển khai h dung môi Toluen : Ethylacetat (95 : 5) 48 13 Hình 3.12 Hình ảnh sắ ý đồ tinh dầu vỏ hai loài C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f triển khai h dung môi Toluen : Ethylacetat (9 : 1) 49 14 Hình 3.13 Hình ảnh sắ ý đồ dịch chiết toàn phần C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f triển khai 56 điểm thực v t Clausena h dung môi Toluen : Ethyl acetat : Acid formic (6 : : 0,5) 15 Hình 3.14 Hình ảnh sắ ý đồ dịch chiết tồn phần vỏ thân C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f triển khai h dung môi Cloroform : Methanol (17 : 1) 57 16 Hình 3.15 Hình ảnh sắ ý đồ dịch chiết cloroform C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f triển khai h dung môi Toluen : Ethylacetat : Acid formic (5 : : 0,5) 59 17 Hình 3.16 Hình ảnh sắ ý đồ dịch chiết cloroform C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f triển khai h dung môi Cloroform: Methanol (15 : 1) 60 18 Hình 3.17 Hình ảnh sắ ý đồ dịch chiết cloroform vỏ thân C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f triển khai h dung môi Toluen : Ethylacetat : Acid formic (7 : : 0,5) 61 19 Hình 3.18 Hình ảnh sắ ý đồ dịch chiết cloroform vỏ thân C indica (Dalz.) Oliv C excavata Burm f triển khai h dung môi Cloroform : Methanol (18 : 1) 63 Hình 4.1 Hình ảnh lồi C excavata Burm f 20 Hình 4.2 Hình trích t kết xá địn 21 66 tài li u [17] thực tế loài C indica (Dalz.) Oliv tinh dầu t tài li u [26] m ợng 67 ĐẶT VẤN ĐỀ Vi t Nam quốc gia có khí h u nhi t đới gió mùa ẩm đâ điều ki n thu n lợi để phát triển thảm thực v t p n p ú đa ạng, nguồn nguyên li u quan trọng nhiều ĩn ự đặc bi t D ợc phẩm Ngày có nhiều lồi thực v t đ ợc nghiên cứu ứng dụng D ợc li u làm nguyên li u bán tổng hợp thuốc Chi Clausena chi họ Cam (Rutaceae) với khoảng 30 loài phân bố châu Á, châu Phi, Australia, Vi t Nam có 10 in Clausena indica, Clausena lansium, Clausena excavata, Clausena heptaphylla… Hi n nay, giới đ có số cơng trình nghiên cứu thành phần hóa họ ũn n tác dụng lá, vỏ quả, vỏ thân, vỏ rễ thuộc chi Clausena nhiên Vi t Nam v n hạn chế Nhiều lồi chi có chứa ợt trội n alkaloid coumarin có tác dụng ức chế tiêu di t tế un t kháng khuẩn, kháng nấm, bảo v tế bào não, ức chế phát triển virus HIV Cây Mắc m t đ đ ợc sử dụng phổ biến t x a để m n n i òn đ ợc sử dụng với tác dụn n ơn i u a cảm cúm, nhứt đầu đau ụng, tinh dầu xoa bóp ch a sai khớp, Mắc m t ũn đ đ ợc chứng minh có tác dụng kích thích tiêu hóa, bảo v gan có tiềm n n sản xuất thành thực phẩm n n ảo v gan Hi n nay, Mắc m t đan đ ợc trồng ngày nhiều Vi t Nam đặc bi t tỉnh miền Bắc Ở Vi t Nam ũn n t ế giới đ ó số nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng Mắc m t n đề tài nghiên cứu thành phần hóa học Tuy nhiên, có số lồi thuộc chi Clausena ũn mang tên Mắc m t có nhiều đặ điểm thực v t t ơn đối giống nhau, lồi lại có nhiều tên gọi địa p ơn n au ễ gây nhầm l n Điều n ũn t ể hi n qua vi c số nghiên cứu tài li u tr n n ớc có nhầm l n tên khoa họ ũn n đặ điểm thực v t công dụng gi a loài Hi n Vi t Nam v n Tinh dầu vỏ Clausena indica (Dalz.) Oliv Tinh dầu Clausena excavata Burm f Tinh dầu vỏ Clausena excavata Burm f ... ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HUỲNH ĐĂNG KHOA NGHIÊN CỨU PHÂN BIỆT HAI LOÀI "MẮC MẬT" DÙNG LÀM THUỐC Ở VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 60.72.04.06... ũn n tiến hành so sánh phân bi t loài với Vì v y chúng tơi chọn đề tài "Nghiên cứu phân bi t hai loài "Mắc m t" dùng làm thuốc Vi t Nam " với mục tiêu: Phân bi t loài Mắc m t Vi t Nam đặ điểm... sản xuất thành thực phẩm n n ảo v gan Hi n nay, Mắc m t đan đ ợc trồng ngày nhiều Vi t Nam đặc bi t tỉnh miền Bắc Ở Vi t Nam ũn n t ế giới đ ó số nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng Mắc m t