Đánh giá hoạt tính ức chế enzyme tyrosinase từ loài rong đông (hypnea pannosa) ở khánh hòa và ứng dụng chống biến đen trên tôm thẻ chân trắng

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM _ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYME TYROSINASE TỪ LỒI RONG ĐƠNG (Hypnea pannosa) Ở KHÁNH HỊA VÀ ỨNG DỤNG CHỐNG BIẾN ĐEN TRÊN TÔM THẺ CHÂN TRẮNG Giảng viên hướng dẫn: TS Khổng Trung Thắng TS Nguyễn Thế Hân Sinh viên thực hiện: Nguyễn Thị Tuyết Như Mã số sinh viên: 57131391 Khánh Hòa-năm 2019 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan nghiên cứu thân Các số liệu, kết nghiên cứu trình bày đồ án hồn tồn trung thực chưa có cơng bố nghiên cứu khoa học Khánh Hòa , Ngày tháng năm 2019 Sinh viên thực Nguyễn Thị Tuyết Như LỜI CẢM ƠN Trong thời gian làm đồ án tốt nghiệp, em nhận nhiều giúp đỡ, đóng góp ý kiến bảo nhiệt tình Thầy Cơ, gia đình bạn bè Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Thầy TS Khổng Trung Thắng TS Nguyễn Thế Hân tận tình hướng dẫn, bảo em suốt q trình làm khóa luận Em xin cảm ơn Thầy/Cơ quản lý phịng thí nghiệm tạo điều kiện để em hoàn thành đề tài Em chân thành cảm ơn Thầy Cơ trường Đại học Nha Trang nói chung, Thầy Cơ ngành Cơng nghệ thực phẩm nói riêng tận tình dạy truyền đạt cho em kiến thức môn đại cương môn chuyên ngành Cuối cùng, em xin chân thành cảm ơn gia đình bạn bè ln tạo điều kiện quan tâm giúp đỡ, động viên em suốt q trình học tập hồn thành đồ án tốt nghiệp Tuy có nhiều nỗ lực cố gắng với kiến thức cịn hạn chế viết khơng tránh khỏi sai sót Rất mong nhận lời góp ý Q Thầy Cơ để đồ án tốt nghiệp em hoàn thiện tốt Xin kính chúc Q Thầy Cơ trường Đại học Nha Trang lời chúc sức khỏe, thành công thịnh vượng sống Khánh Hòa, Ngày tháng năm 2019 Sinh viên thực Nguyễn Thị Tuyết Như MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN……………………………………………………………… LỜI CẢM ƠN…………………………………………………………………… MỤC LỤC……………………………………………………………………… DANH MỤC BẢNG…………………………………………………………… DANH MỤC HÌNH……………………………………………………………… DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT…………………………10 LỜI MỞ ĐẦU………………………………………………………………… 11 Chương 1: TỔNG QUAN………………………………………………… 14 1.1 1.2 1.3 Tổng quan rong 14 1.1.1 Tổng quan rong đỏ Hypnea pannosa 14 1.1.2 Phương pháp tách chiết 16 1.1.3 Một số yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết 17 TỔNG QUAN VỀ TÔM 18 1.2.1 Tình hình ni trồng xuất tôm 18 1.2.2 Tổng quan tôm thẻ chân trắng 19 1.2.3 Biến đổi tôm sau chết 20 Tổng quan enzyme tyrosinase tượng biến đen tôm 22 1.3.1 Tyrosinase 22 1.3.2 Các chất ức chế tyrosinase có nguồn gốc từ thiên nhiên 23 1.3.3 Các chất ức chế có nguồn gốc tổng hợp 25 1.3.4 Hiện tượng biến đen tôm 25 1.3.5 Tình hình nghiên cứu tyrosinase biến đen tôm 26 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU…………………………………………………………………………… 32 2.1 2.2 Nguyên vật liệu 32 2.1.1 Nguyên liệu rong 32 2.1.2 Tôm thẻ chân trắng 32 2.1.3 Hóa chất thuốc thử 32 Bố trí thí nghiệm 32 2.2.1 Bố trí thí nghiệm tổng quát 32 2.2.2 Thí nghiệm xác định thời gian chiết 34 2.2.3 Thí nghiệm xác định nhiệt độ chiết 35 2.2.4 Tách phân đoạn qua loại dung mơi có độ phân cực khác đánh giá hoạt tính ức chế enzyme tyrosinase qua phân đoạn 37 2.2.5 Thí nghiệm bảo quản tôm dịch chiết từ rong đông (Hypnea pannosa) 38 2.2.6 Phương pháp phân tích 41 2.2.7 Phương pháp xử lý số liệu 42 2.2.8 Phương pháp đánh giá cảm quan 42 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN…………… 44 3.1 Khảo sát khả ức chế enzyme tyrosinase rong đông (Hypnea pannosa) Error! Bookmark not defined 3.2 Ảnh hưởng thời gian chiết đến khả ức chế enzym tyrosinase49 3.3 Ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến khả ức chế enzym tyrosinase51 3.4 Đánh giá khả ức chế enzyme tyrosinase dịch chiết rong đông phân đoạn 52 3.5 Thí nghiệm bảo quản tôm dịch chiết rong đông kết hợp bảo quản lạnh… 55 3.6 Thí nghiệm bảo quản tơm dịch chiết rong đông kết hợp bảo quản lạnh………… 61 3.7 Xác định thành phần hóa học rong đơng hypnea pannosa 44 3.7.1 Định lượng thành phần hóa học rong đông (hypnea pannosa) 44 3.7.2 Định tính nhóm chất hữu rong đơng (Hypnea Pannosa) 44 Chương 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 65 4.1 KẾT LUẬN: 65 4.2 KIẾN NGHỊ: 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO……………………………………………………… 66 PHỤ LỤC……………………………………………………………………… 75 DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1: Phần trăm ức chế enzyme tyrosinase mẫu rong đông (Hypnea pannosa) nồng độ khác Các chữ khác khác có ý nghĩa thống kê (p