Đang tải... (xem toàn văn)
Trắc nghiệm, bài giảng pptx các môn chuyên ngành Y dược hay nhất có tại “tài liệu ngành Y dược hay nhất”; https://123doc.net/users/home/user_home.php?use_id=7046916. Slide kiểm nghiệm seminar về sắc ký hiện đại ppt dành cho sinh viên ngành Y dược. Trong bộ sưu tập có trắc nghiệm kèm đáp án chi tiết các môn, giúp sinh viên tự ôn tập và học tập tốt môn kiểm nghiệm seminar về sắc ký hiện đại bậc cao đẳng đại học ngành Y dược và các ngành khác
ỨNG DỤNG KỸ THUẬT UPCC-MS/MS ĐỂ PHÂN TÍCH THƠNG LƯỢNG CAO 19 NỘI TIẾT TỐ ANDROGEN STEROID Nhóm 14 NỘI DUNG GIỚI THIỆU THỰC NGHIỆM KẾT QUẢ THẢO LUẬN KẾT LUẬN UPCC-MS/MS Nhóm 14 GIỚI THIỆU GIỚI THIỆU Điều hòa cân nước điện giải Điều hòa chức sinh sản Hormone steroid Điều hòa viêm Điều hòa phản ứng stress Điều hịa chuyển hóa GIỚI THIỆU Tăng sản tuyến thượng thận bẩm sinh (CAH) Ung thư Cần định lượng xác hormon steroid Hội chứng Cushing Rối loạn sản xuất hormone steroid Bệnh aldosteron nguyên phát Hội chứng buồng trứng đa nang (PCOS) GIỚI THIỆU Androgen C19 tuyến thượng thận Androgen mạnh, so sánh với testosterone DHT Nghiên cứu chứng minh được: hiệu hệ thống UPCC-MS / MS, làm rõ vai trị chất chuyển hóa steroid phát triển CRPC khối u phụ thuộc androgen khác GIỚI THIỆU Sắc ký hội tụ siêu hiệu (UPCC) Tăng tính linh hoạt độ chọn lọc Sắc ký lỏng siêu tới hạn (SFC) Kết hợp Sắc ký khí-khối phổ (GC-MS) Sắc ký lỏng khối phổ lần (LCMS/MS) GIỚI THIỆU UPCC: Ultra-performance convergence chromatography CO2 siêu tới hạn, hỗn hịa DMHC có độ phân cực từ hexane (0,009) đến metanol (0.762) Phân tích định lượng hormon phức tạp UPCC Tương thích nhiều loại hạt pha tĩnh Kết hợp với đầu dò khối phổ song song có độ nhạy cao UPCC-MS/MS Nhóm 14 THỰC NGHIỆM THỰC NGHIỆM 2.1 Thuốc thử Steroid chuẩn 5 –dione A4 11K-5 -dione 11KA4 DHT epiAST 11OH-5 -dione T 11KAST 10 11OHA4 11 11KepiAST 12 11KDHT 13 -adiol 14 11OHAST 15 11KT 16 11OHepiAST 17 11OHDHT 18 11K-3 -adiol 19 11OHT KẾT QUẢ 3.2 Khối phổ Dung môi rửa giải Dung môi bổ sung (methanol chứa 1% acid formic) Hiệu tối ưu KẾT QUẢ 3.3 Hiệu suất đánh giá So sánh UPCC -MS Xevo TQ-S với UPLC- MS Xevo TQ Độ nhạy: 50 lần steroid dễ ion hóa (T A4) lần steroid khó ion hóa (DHT) Dù thể tích tiêm thấp 10 lần => UPCC-Xevo TQ-S cho phép định lượng steroid nồng độ mà trước không thực được Phạm vi hiệu chuẩn: Xevo TQ Độ nhạy được cải thiện Xevo TQ-S 100 ng/mL 500 ng/mL KẾT QUẢ 3.3 Hiệu suất đánh giá Độ xác Cả Độ Chính xác 15% nồng độ 50 100 ng.mL-1 (trung bình cao) KẾT QUẢ 3.3 Hiệu suất đánh giá Độ xác Cả Độ Chính xác 15% nồng độ 50 100 ng.mL-1 (trung bình cao) KẾT QUẢ 3.3 Hiệu suất đánh giá Độ xác Độ nồng độ thấp dao động từ 10-17% 0,25 ng.mL-1, 7–20% 2.5 ng.mL 8–20% 25 ng.mL-1 KẾT QUẢ 3.3 Hiệu suất đánh giá Độ xác Độ xác nồng độ thấp dao động từ - 14% 0.25 ng.mL-1 , 4–19% 2.5 ng.mL-1 2–15% 25 ng.mL-1 KẾT QUẢ 3.3 Hiệu suất đánh giá Tỷ lệ thu hồi, hiệu ứng hiệu trình Tỷ lệ thu hồi từ 54,7 đến 78,1% nồng độ thấp (2.5 ng.mL-1 ) Tỷ lệ thu hồi khoảng 74,9 - 121.1% nồng độ trung bình cao (50 100 ng.mL KẾT QUẢ 3.3 Hiệu suất đánh giá Tỷ lệ thu hồi, hiệu ứng hiệu trình Hiệu ứng dao động từ 18,7% ức chế ion 11KDHT đến 20,8% tăng cường ion 11KepiAST KẾT QUẢ 3.3 Hiệu suất đánh giá Tỷ lệ thu hồi, hiệu ứng hiệu trình Hiệu trung bình, kết hợp tỷ lệ thu hồi hiệu ứng nền, nằm khoảng 55,4 - 78,5% nồng độ 2,5 ng.mL-1 73,6 - 114,7% nồng độ 50 & 100 ng.mL-1 UPCC-MS/MS Nhóm 14 THẢO LUẬN THẢO LUẬN Sắc ký đồ phân tách 11KA4 (1), 11KT (2), 11OHA4 (3), 11OHT (4), A4 (5) T (6) UPLC MS/MS UPCC-MS/MS THẢO LUẬN Hạn chế cho tăng độ nhạy phạm vi tuyến tính giảm bão hịa máy dò nồng độ cao Điều này, dễ dàng khắc phục cách pha loãng mẫu Độ nhạy tăng cho phép nhà phân tích nghiên cứu chuyển hóa steroid ni cấy tế bào nồng độ sinh lý lần thử nghiệm Tăng độ nhạy đạt cách sử dụng thể tích tiêm µL, phương pháp MS / MS UPLC thơng thường dựa vào thể tích tiêm -20 µL Giảm thể tích tiêm mẫu lợi mẫu sinh học cho phép thực nhiều lần tiêm từ mẫu UPCC-MS/MS Nhóm 14 KẾT LUẬN KẾT LUẬN Tăng độ chọn lọc giảm thời gian chạy => định lượng đồng thời nhiều chất chuyển hóa steroid Giảm chất gây nhiễm trung tính, kết hợp với hệ thống tăng độ nhạy thích hợp việc định lượng hormone steroid nồng độ sinh lý phù hợp với nhiều ứng dụng in vitro in vivo CO2 siêu tới hạn tốn dung mơi hữu tác động đến mơi trường Phương pháp mở khả cho ứng dụng mới, nhờ vào phân tách ưu việt khả phát đạt UPCC-MS / MS Nhóm 14 Cảm ơn theo dõi ... KẾT QUẢ 3.1 Khả phân tách UPCC Sắc ký UPC2-MS / MS mô tả thứ tự rửa giải các steroid C19 - UPCC- MS/MS nhận diện 19 steroid định lượng 15 steroid C19 - Mặc dù gồm bốn steroid mới: 11KepiAST,... tích tiêm mẫu μL THỰC NGHIỆM 2.4 Thiết bị điều kiện sắc ký Detector Xevo TQ-S triple quadrupole mass spectrometer Pha động 1% formic methanol Tốc độ dịng 0.2 mL.min-1 Kỹ thuật phân tích: sử dụng. .. Tốc độ dịng khí bay 1000 L.h-1 1000 L.h-1 Tốc độ phun 150 L.h-1 150 L.h-1 Detector Kỹ thuật phân tích: sử dụng nguồn ion hóa tia điện dương (ESI+) UPCC- MS/MS Nhóm 14 KẾT QUẢ KẾT QUẢ 3.1 Khả phân