Đang tải... (xem toàn văn)
Trắc nghiệm, bài giảng pptx các môn chuyên ngành Y dược hay nhất có tại “tài liệu ngành Y dược hay nhất”; https://123doc.net/users/home/user_home.php?use_id=7046916. Slide kiểm nghiệm seminar về sắc ký hiện đại ppt dành cho sinh viên ngành Y dược. Trong bộ sưu tập có trắc nghiệm kèm đáp án chi tiết các môn, giúp sinh viên tự ôn tập và học tập tốt môn kiểm nghiệm seminar về sắc ký hiện đại bậc cao đẳng đại học ngành Y dược và các ngành khác
ỨNG DỤNG KĨ THUẬT UPLC/MS - TOF TRONG PHÂN TÍCH ĐỊNH LƯỢNG CÁC PYRROLYZIDINE ALKALOID (PA) TỰ NHIÊN TỪ DỊCH CHIẾT XUẤT CÂY Petasites hybridus Tác giả: Alexander Schenk, Beate Siewert, Stephan Toff, Jurgen Drewe Schenk, A., Siewert, B., Toff, S., & Drewe, J (2015) UPLC TOF MS for sensitive quantification of naturally occurring pyrrolizidine alkaloids in Petasites hybridus extract (Ze 339), Journal of Chromatography B, 997, 23–29 Nội dung Đặt vấn đề Nguyên liệu & Phương pháp Kết bàn luận Kết luận Click icon to add picture ĐẶT VẤN ĐỀ Đặt vấn đề Một số độc tính Những năm 1970: phát pyrrolizidine alkaloid 1,2 chưa bão hòa pyrrolizidine alkaloid (PA): • Độc gan (tắc tĩnh mạch) • Độc gen • Có thể gây ung thư Moreira, R., Pereira, D., Valentão, P., & Andrade, P (2018). Pyrrolizidine Alkaloids: Chemistry, Pharmacology, Toxicology and Food Safety International Journal of Molecular Sciences, 19(6), 1668 Đặt vấn đề Lượng PA 1,2-chưa bão hòa cho phép đưa vào thể từ thực phẩm chế phẩm có nguồn gốc thảo dược: Cơ quan Hợp chất Giới hạn cho phép/ ngày EFSA PA 1,2-chưa bão hịa / thực phẩm 70 µg/kg cân nặng Cần phương pháp phân tích PA ANZFA PA µg/kg cân nặng COT PA 0,007 µg/kg cân nặng ICH M7 Chất gây độc gen 1,5 µg HMPC (EMA) PA 0,35 µg (≤ 14 ngày) • • Đặc hiệu Độ nhạy cao Đặt vấn đề Các phương pháp phân tích PA nhược điểm: • Sắc ký khí (GC) dùng đầu dị FID NPD: PA-N-oxid không phát trực tiếp, cần khử để tạo base tự tương ứng • Sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) sử dụng đầu dị UV: bước sóng (220nm) thấp khơng đặc hiệu để phát PA lựa chọn dung môi bị hạn chế Đặt vấn đề Việc xác định PA dịch chiết bị ảnh hưởng đáng kể thành phần khác (các chất nền) Giảm nồng độ dung dịch thử (sử dụng khối phổ kế đại nhạy hơn) Tăng nồng độ chất cần phân tích (sử dụng chiết pha rắn SPE) Các hướng giải Sử dụng khối phổ lần (MS–MS), kỹ thuật kiểm soát phản ứng lựa chọn/đa phản ứng (SRM/MRM) MS với độ độ phân giải cao Đặt vấn đề Hạn chế phương pháp phân tích Định lượng PA bị ảnh Nồng độ cần phân tích hưởng nhiều chất nhỏ UPLC/MS - TOF Click icon to add picture NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP Nguyên liệu Petasites hybridus Ze 339 • Phương pháp trích ly CO2 từ khơ P hybridus - tỷ lệ chiết xuất 50-100 : • Ứng dụng: dịch chiết Petasites hybridus Ze 339 điều trị viêm mũi dị ứng Thụy Sĩ quốc gia khác 10 Kết bàn luận 22 Kết bàn luận Tỷ lệ phục hồi Tỉ lệ phục hồi (%) PA nồng độ khác (ppb) N=5 23 Kết bàn luận Độ Nồng độ trung bình (N=6) hệ số phân tán nồng độ (CV%) < 24% ( Khơng có lơ định lượng nồng độ PA khơng bão hịa ppb Giới hạn định lượng ( LOQ) Tóm lại, nghiên cứu phát triển phương pháp UPLC /MS - TOF có độ nhạy cao cho phép xác định nồng độ PA dịch chiết P hybridus 88.9 – 141.9% Độ thu hồi 3.5 – 13.6% Độ lập lại Ze 339 cách đáng tin cậy, phù hợp để theo dõi nồng độ PA theo yêu cầu quy định – 200ppb Miền giá trị Hệ số tương quan 0.9995 – 0.9998 Hệ số phân tán 7.44 – 8.56% Tính tuyến tính 35 Click icon to add picture 36 ... Việc xác định PA dịch chiết bị ảnh hưởng đáng kể thành phần khác (các chất nền) Giảm nồng độ dung dịch thử (sử dụng khối phổ kế đại nhạy hơn) Tăng nồng độ chất cần phân tích (sử dụng chiết pha... rắn SPE) Các hướng giải Sử dụng khối phổ lần (MS–MS), kỹ thuật kiểm soát phản ứng lựa chọn/đa phản ứng (SRM/MRM) MS với độ độ phân giải cao Đặt vấn đề Hạn chế phương pháp phân tích Định lượng PA... CO2 từ khô P hybridus - tỷ lệ chiết xuất 50-100 : • Ứng dụng: dịch chiết Petasites hybridus Ze 339 điều trị viêm mũi dị ứng Thụy Sĩ quốc gia khác 10 Nguyên liệu Alkaloid chuẩn Độ tinh khiết Senecionine