Trắc nghiệm, bài giảng pptx các môn chuyên ngành Y dược hay nhất có tại “tài liệu ngành Y dược hay nhất”; https://123doc.net/users/home/user_home.php?use_id=7046916. Slide kiểm nghiệm seminar về sắc ký hiện đại ppt dành cho sinh viên ngành Y dược. Trong bộ sưu tập có trắc nghiệm kèm đáp án chi tiết các môn, giúp sinh viên tự ôn tập và học tập tốt môn kiểm nghiệm seminar về sắc ký hiện đại bậc cao đẳng đại học ngành Y dược và các ngành khác
Ứng dụng kỹ thuật sắc ký lỏng đại ỨNG DỤNG KĨ THUẬT UPLC-MS TRONG PHÂN TÍCH ĐỊNH LƯỢNG CÁC ALCALOID PYRROLIZIDINE TỰ NHIÊN TỪ DỊCH CHIẾT CÂY PETASITES HYBRIDUS ( ZE 339 ) Nội dung Tóm tắt, Giới thiệu (Abstract, Introduce) Nguyên liệu - Phương pháp (Material - Method) Kết bàn luận (Result and discussion) Tóm tắt - Giới thiệu PETASITES HYBRIDUS Điều trị nhiễm trùng, sốt, cúm, cảm lạnh dị ứng Tạp cây: alcaloid pyrrolizidine -1,2 không bão hịa (PA) Độc tính: độc tính gan, nhiễm độc gen gây ung thư Kiểm soát chặt chẽ chế phẩm thuốc thảo dược Phương pháp UPLC TOF MS có độ nhạy cao để định lượng mẫu PA 1 Tóm tắt - Giới thiệu ◎ Các PA tiêu chuẩn: Senkirkine (Độ tinh khiết 98% ) Senecionine, seneciphylline, seneciphylline-N-oxide (Độ tinh khiết >99%) Senocionine-N-oxide (Độ tinh khiết 89% ) Nguyên liệu – Phương pháp: 2.1: Nguyên liệu: ◎ Phương pháp chiết xuất : chiết CO2 từ P hybridus sấy khô cắt với tỷ lệ chiết xuất thuốc thông thường (DER) 50-100:1 => Dịch chiết => loại bỏ hoàn toàn PA cách sử dụng kỹ thuật hấp thụ Nguyên liệu – Phương pháp: 2.2 Dung dịch chất (matrix): Sơ đồ : Các bước chuẩn bị dung dịch chất 1.5g P hybridus ( no PA)+ 2ml dichloromethane Trộn máy lắc ống nghiệm + 4ml acid acetic 10% (v / v) • Trộn 10 phút (30 vịng / phút) • Ly tâm phút (5000 vịng / phút) • Loại pha nước Chuẩn nội, ngoại methanol 10 μg/mL 500 μg/mL acetic acid 10% 40, 125, 300 ng/mL + 4ml acid acetic 10% (v / v) • Loại dichloromethane • Gộp pha nước lại với + 1ml ammoniac 25% Dung dịch chất 0.3, 0.6, 1.3, 3.0, 6.3, 9.0, 12.5, 15.0, 22.5 30.0 ng/mL Nguyên liệu – Phương pháp: 2.2 Dung dịch chất (matrix): Bảng số liệu : Nồng độ dung dịch 0,3 0,6 1,3 3,0 6,3 9,0 12,5 15,0 2,0 4,0 8,3 20,0 41,7 60,0 83,3 100,0 22,5 30,3 (ng / mL) Dung dịch chất 150,0 200,0 (ppb) Nguyên liệu – Phương pháp: 2.3 Sắc kí lỏng: Hệ thống H-Class UPLC (Waters, Milford, MA, USA) Cột sắc ký: BEH C18, 1.7 µm , 75x 2.1 mm (Waters, Manchester, UK) Pha động: đệm Amoni acetat mM (pH 8,5) (A) + Acetonitril (B) Nhiệt độ cột: 500C Pha động Tốc độ dòng: 0,6 mL/min Thời gian A (%) B (%) Thể tích tiêm: 4µL 0-8 98 - 66 - 34 Chương trình gradient: ◎ ◎ 8.1 – 11.00 10 90 11.1 – 15.00 98 Nguyên liệu – Phương pháp: 2.4 Khối phổ: ◎ Phổ khối thực điện cực dương ◎ Máy khối phổ có độ phân giải cao G2 S HDMS: đầu dị TOF, dải động học tuyến tính với tỷ lệ 5000: 1, độ phân giải khối lượng tối thiểu 30.000 FWHM (chiều rộng cực đại nửa cực đại) m / z = 400, phận phân tích tứ cực (triple quadrupole) kDa ◎ Khí bay (desolvation gas) (45oC, 800 L / h) khí phun (nebulizer gas) (6.0 bar) sử dụng khí nitơ ◎ Tốc độ dịng khí lạnh : 50 L / h ◎ Điện áp mao quản : 0,50 kV ◎ Nhiệt độ nguồn : 120o C ◎ Phổ khối thu vùng : 50-600 Da ◎ Tốc độ thu phổ : 0,1s / mẫu Kết bàn luận: 3.1 Kết quả: Bảng : Alcaloid tiêu chuẩn tham khảo sử dụng Nhóm PA Rt (phút) [M + H]+ Sencionine-type PA Senecionine 6.8 336.182 Senecionine-N-oxide 4.2 352.176 Seneciphylline 6.1 334.165 Seneciphylline-N-oxide 3.5 350.160 Otosenine-type PAs Senkirkine 4.5 366.191 Rt = thời gian lưu 10 Kết bàn luận: 3.1 Kết quả: ◎ Công thức: Trong đó : - y = diện tích tương ứng diện tích hiệu chỉnh theo tiêu chuẩn - b = giao điểm - m = độ dốc đường cong tiêu chuẩn - V = thể tích mẫu (mL) - 1000 = hệ số chuyển đổi từ mg sang µg - iw = trọng lượng ban đầu tính mg 11 luận: 3.1 Kết quả: PA 2.0 ppb 4.0 ppb 20 ppb 60 ppb 150 ppb Senecionine 88.3 95.5 80.8 89.0 84.9 Senecionine-N-oxide 89.5 78.8 82.5 89.5 88.3 Seneciphylline 141.9 109.2 87.9 89.5 90.2 Seneciphylline-N-oxide 91.0 88.8 88.0 93.2 89.6 Senkirkine 108.3 109.0 89.8 94.3 98.3 Bảng : Độ phục hồi (%) PA mức kiểm soát chất lượng (ppb) Tỷ lệ hồi phục seneciphylline nồng độ ppb cao hơn, tương ứng với kết khác phân tích vết 12 luận: 3.1 Kết quả: Nồng độ (ppb) 20 60 150 Senecionine Senecionine-N- 2.0/5.4 4.0/23.7 20.2/1.9 60.6/4.1 151.5/4.4 1.7/13.8 3.4/22.8 17.0/1.5 50.9/3.3 127.1/3.5 2.0/3.6 4.0/7.2 20.1/1.7 60.2/3.8 150.4/4.6 1.9/11.3 3.8/12.8 19.0/1.2 57.1/1.7 142.9/2.5 1.9/5.4 3.7/23.7 18.7/1.9 56.2 / 4.2 140.5/2.5 oxide Seneciphylline Seneciphylline-Noxide Senkirkine Bảng : Độ xác trung gian (Độ lặp lại) (N = 6) (ppb) / (CV%) Độ xác thấp 5%, ngoại trừ có mức thấp 24% Phương sai đồng , giá trị trung bình khơng khác biệt đáng kể Hệ số biến thiên độ xác trung gian nằm trongtmức chấp nhận loại bỏ hoàn toàn PA cách sử dụng kỹ thuật hấp thụ Nguyên... giải cao G2 S HDMS: đầu dò TOF, dải động học tuyến tính với tỷ lệ 5000: 1, độ phân giải khối lượng tối thiểu 30.000 FWHM (chiều rộng cực đại nửa cực đại) m / z = 400, phận phân tích tứ cực (triple