Bài viết trình bày kết quả nghiên cứu xác định thành phần saponin có tính axit có trong hạt quả gấc trồng trên địa bàn thành phố Đà Nẵng. Sự có mặt của nhóm chức axit cacboxylic trong dịch chiết hạt quả gấc bằng dung môi etanol được xác định bằng phổ hồng ngoại (IR).
UED Journal of Sciences, Humanities & Education – ISSN 1859 - 4603 TẠP CHÍ KHOA HỌC XÃ HỘI, NHÂN VĂN VÀ GIÁO DỤC Nhận bài: 01 – 03 – 2015 Chấp nhận đăng: 25 – 06 – 2015 http://jshe.ued.udn.vn/ NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN SAPONIN CĨ TÍNH AXIT TRONG HẠT QUẢ GẤC TRỒNG TRÊN ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ ĐÀ NẴNG Võ Kim Thành Tóm tắt: Bài báo trình kết nghiên cứu xác định thành phần saponin có tính axit có hạt gấc trồng địa bàn thành phố Đà Nẵng Sự có mặt nhóm chức axit cacboxylic dịch chiết hạt gấc dung môi etanol xác định phổ hồng ngoại (IR) Thành phần, cấu trúc hàm lượng cấu tử hạt gấc xác định phương pháp phân tích sắc ký kết hợp khối phổ (GC-MS) Kết thu cho thấy số cấu tử có hạt gấc là: 2-Methoxyphenol; 2-Methoxy-4-Vinylphenol; 4-Methoxybenzoic; n-Hexadecanoic; Dibutylphtalat; 9,12Octadecandienoic; trans-13-Octadecenoic; Ethyloleat; Ethyloctadecanoiat Từ khóa: chiết tách saponin; saponin có tính axit; hạt gấc; thành phần hóa học hạt gấc; điều trị vết bầm Đặt vấn đề Gấc loài thực vật trồng nhiều Việt Nam Quả sử dụng để chế biến thực phẩm đời sống ẩm thực, y học [1,4] Các nhà khoa học gọi gấc “trái đến từ thiên đường” nguồn dinh dưỡng dồi có Màng bọc hạt gấc có chứa vị thuốc quý carotene (tiền sinh tố A) có tác dụng điều trị quáng gà, làm sáng mắt; nhân hạt gấc có tác dụng làm tan vết bầm chấn thương, dùng để cầm máu, giúp vết thương bị nhiễm khuẩn mau lành Tuy nhiên, việc nghiên cứu loại dược liệu quý chưa đầy đủ so với khả ứng dụng rộng rãi Một vài nghiên cứu gần cho thấy thành phần hóa học nhân hạt gấc chứa nhóm saponin mang nhóm chức axit -COOH có hoạt tính sinh học cao nên có khả ứng dụng làm dược phẩm [2, 3] Vì vậy, hướng nghiên cứu liên quan đến chiết tách phân lập hoạt chất có hoạt tính sinh học từ hạt gấc được nhà khoa học nước tập trung nghiên cứu [5, 6, 7] Bài báo trình bày kết xác định có mặt saponin mang nhóm chức axit –COOH, xác định thành phần hợp chất hóa học hạt gấc trồng Đà Nẵng với mong muốn đóng góp thêm hiểu biết đánh giá đầy đủ nguồn dược liệu quý Thực nghiệm 2.1 Nguyên liệu, hóa chất nghiên cứu - Nguyên liệu nghiên cứu hạt gấc thu hái địa bàn Thành phố Đà Nẵng Hạt gấc tách bỏ lớp vỏ cứng bên ngoài, phần nhân bên sấy khô xay nhỏ thành dạng bột mịn Mẫu đậy kín, bảo quản điều kiện khơ bình thủy tinh tối màu - Các dung môi sử dụng nghiên cứu bao gồm: etanol, axeton, ete dầu hỏa, Đây hóa chất tinh khiết phân tích sử dụng trực tiếp mà khơng phải tinh chế lại 2.2 Qui trình chiết tách * Liên hệ tác giả Võ Kim Thành Trường Đại học Sư phạm, Đại học Đà Nẵng Email: Vokimthanhsp@gmail.com Điện thoại: 0913474666 16 | Tạp chí Khoa học Xã hội, Nhân văn & Giáo dục, Tập 5, số (2015),16-20 Tạp chí Khoa học Xã hội, Nhân văn & Giáo dục, Tập 5, số (2015), 1-3 Qui trình chiết tách thực theo sơ đồ Hình Hình Sơ đồ nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học hạt gấc 2.3 Xác định độ ẩm bột hạt gấc Kết thảo luận Độ ẩm bột hạt gấc xác định cách sấy lượng mẫu nghiên cứu (m1 gam) tủ sấy 150oC đến khối lượng không đổi (m2 gam) Phần trăm (%) ẩm xác định theo cơng thức: % ẩm = 100 × (m1 – m2)/m1 2.4 Tối ưu điều kiện chiết tách 3.1 Xác định độ ẩm bột hạt gấc Cân 3g bột hạt gấc qua xử lý, ngâm chiết 30ml dung môi nghiên cứu: etanol, nước, axeton nhiệt độ phòng thời gian 12 giờ; định mức đến 100ml Lấy 10ml mẫu, axit hóa với lượng xác thể tích axit H2SO4 0,1M, đun nóng 30 phút, chuẩn độ dung dịch NaOH 0,01N với thị phenolphtalein để xác định hàm lượng axit tổng (bao gồm axit H2SO4 làm xúc tác cho phản ứng thủy phân axit hữu từ hợp chất hữu saponin chiết tách được) Tiến hành chiết soxhlet với dung môi chọn khoảng thời gian nghiên cứu; thực nghiệm tương tự để xác định thời gian chiết tối ưu 2.5 Xác định saponin mang nhóm chức axit – COOH thành phần hóa học dịch chiết từ bột hạt gấc Sự có mặt saponin mang nhóm chức axit –COOH có dịch chiết xác định phổ hồng ngoại (IR) Thành phần hóa học dịch chiết hạt gấc xác định sắc kí khí ghép khối phổ (GC-MS) 17 | Chúng tiến hành lấy mẫu để xác định độ ẩm bột hạt gấc Hàm lượng ẩm trung bình xác định 25,417% Với độ ẩm này, chất lượng mẫu đảm bảo khoảng thời gian thí nghiệm, khơng ảnh hưởng đến kết nghiên cứu 3.2 Kết lựa chọn dung môi thời gian chiết Điều kiện tối ưu trình chiết tách bột hạt gấc xác định dựa vào thể tích dung dịch NaOH 0,01N cần dùng để chuẩn độ 10 ml dịch chiết từ dung môi nghiên cứu Kết trình bày Hình cho thấy thể tích dung dịch NaOH 0,01N dùng để chuẩn dịch chiết dung môi etanol cao dung mơi sử dụng Điều có nghĩa etanol 96o có khả chiết tách hiệu saponin có tính axit hạt gấc trồng địa bàn TP Đà Nẵng điều kiện nghiên cứu Hình Ảnh hưởng dung môi để chiết tách bột hạt gấc Tạp chí Khoa học Xã hội, Nhân văn & Giáo dục, Tập 5, số (2015),16-20 Võ Kim Thành chiết, hàm lượng saponin có tính axit chiết tăng không đáng kể chiết kiệt gần hồn tồn sau 9h 3.3 Xác định thành phần hóa học hạt gấc Hình Ảnh hưởng thời gian chiết đến hàm lượng saponin có tính axit chiết từ bột hạt gấc dung môi etanol 96o Kết khảo sát thời gian chiết tối ưu dung mơi etanol phương pháp chiết soxhlet trình bày Hình Kết nghiên cứu cho thấy khả chiết tách thành phần saponin có tính axit tăng mạnh khoảng thời gian ban đầu từ 3h đến 5h Sau 5h Để khẳng định có mặt saponin có tính axít dịch chiết, chúng tơi tiến hành cô quay chân không, thu lấy cao chiết phân tích phổ hồng ngoại IR Kết ghi phổ hồng ngoại trình bày Hình Phổ hồng ngoại IR Hình cho thấy có xuất dao động tần số 1733,3 cm-1 3407,4 cm-1, đặc trưng cho dao động nhóm C=O -OH axit cacboxylic tương ứng Ngoài ra, phổ đồ thu trình bày Hình từ cao chiết dung mơi etanol hồn tồn tương tự với phổ đồ mẫu saponin có chứa nhóm axít chuẩn (có pic đặc trưng 1783 cm-1 nhóm C=O 3407,4 cm-1 nhóm -OH nhóm chức –COOH) Kết phân tích cho phép khẳng định có mặt saponin có tính axít mẫu nghiên cứu Hình Phổ IR dịch chiết từ hạt gấc dung mơi etanol 96o Hình Phổ IR dịch chiết từ hạt gấc saponin 18 ISSN 1859 - 4603 - Tạp chí Khoa học Xã hội, Nhân văn & Giáo dục, Tập 5, số (2015),16-20 Hình Phổ GC-MS dịch chiết etanol từ hạt gấc Thành phần hóa học dịch chiết etanol hạt gấc xác định phổ sắc kí khí kết hợp khối phổ (GC-MS) Kết nghiên cứu trình bày Hình Từ phổ đồ GC-MS (Hình 7), số cấu tử dịch chiết hạt gấc xác định định danh 17 cấu tử; cấu tử có hàm lượng gồm Trans-13-octadecenoic acid (6,79 %); Octadecaneoic acid (5,47 %); n-hexadecanoic acid (3,89 %); 9,12-octadecatrienoic acid, ethyl este, (z,z,z)(2,63%); Ethyl oleate (2,69%); z,z-10,12-hexadecadien1-ol acetat (4,45%) Kết luận Hạt gấc trồng địa bàn Thành phố Đà Nẵng có chứa saponin mang nhóm chức axít Hàm lượng saponin chiết tách có hiệu dung môi etanol 96 o 17 cấu tử thuộc họ saponin có mẫu nghiên cứu xác định kĩ thuật phân tích sắc kí khí, kết hợp khố phổ GC-MS Trong số cấu tử định danh, nhiều cấu tử có hoạt tính sinh học cao với hàm lượng lớn Vì vậy, sử dụng bột hạt gấc ứng dụng để làm dược phẩm Hình Kết xác định cấu tử có dịch chiết dung môi etanol hạt gấc trồng Tp Đà Nẵng phương pháp phân tích GC-MS 19 Võ Kim Thành Tài liệu tham khảo [1] Đỗ Tất Lợi (2004), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học Hà Nội [2] Nguyễn Văn Đàn (1985), Phương pháp nghiên cứu hóa học thuốc, NXB Y học Hà Nội [3] Nguyễn Văn Đàn, Ngô Ngọc Khuyến (1999), Hợp chất thiên nhiên dùng làm thuốc, NXB Y học Hà Nội [4] Võ Văn Chi, Trần Hợp (2000), Cây cỏ có ích Việt Nam, NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội [5] Jung K cs (2013), Tác dụng chống viêm loét dày làm lành vết thương hạt gấc hoạt chất momordica saponin, Immunopharmacology and Immunotoxicology, 126-132 [6] Ittawan Kubola cs (2011), Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính chống oxy hóa phần khác (vỏ, thịt, hạt, màng hạt) gấc trồng Thái Lan, Food Chemistry, 1138–1145 [6] Hoang V Chuyen cs (2015), Quả gấc: Một nguồn giàu hợp chất hoạt tính sinh học có lợi cho sức khỏe, International Journal of Food Science and Technology, (50) 567–577 DETERMINATION OF ACIDIC SAPONIN EXTRACTED FROM THE SEEDS OF THE MOMORDICA COCHINCHINENSIS PLANTED IN DANANG CITY Abstract: This paper presents the results of determination of acidic saponin in the seeds of the Momordica Cochinchinensis planted in Danang city The presence of the carboxylic acid group in the ethanol solvent was determined via infrared spectroscopy (IR) The composition, structures and content of the main constituents in the sample were determined by Gas chromatography combined with mass spectrometry (GC-MS) Some key constituents in the sample were found as follows: 2-Methoxyphenol; 2Methoxy-4-Vinylphenol; 4-Methoxybenzoic; n-Hexadecanoic; Dibutylphtalat; 9,12-Octadecandienoic; trans-13-Octadecenoic; Ethyloleat; Ethyloctadecanoiat Key words: saponin extraction; acidic saponin; Momordica Cochinchinensis seeds; chemical composition in Momordica Cochinchinensis seeds; bruise treatment 20 ... luận Hạt gấc trồng địa bàn Thành phố Đà Nẵng có chứa saponin mang nhóm chức axít Hàm lượng saponin chiết tách có hiệu dung môi etanol 96 o 17 cấu tử thuộc họ saponin có mẫu nghiên cứu xác định. .. đồ Hình Hình Sơ đồ nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học hạt gấc 2.3 Xác định độ ẩm bột hạt gấc Kết thảo luận Độ ẩm bột hạt gấc xác định cách sấy lượng mẫu nghiên cứu (m1 gam) tủ sấy... sử dụng Điều có nghĩa etanol 96o có khả chiết tách hiệu saponin có tính axit hạt gấc trồng địa bàn TP Đà Nẵng điều kiện nghiên cứu Hình Ảnh hưởng dung môi để chiết tách bột hạt gấc Tạp chí Khoa