ương nuôi ấu trùng cua biển (Scylla paramamosain) 2 giai đoạn (ZOEA-1 đến ZOEA-5 và ZOEA-5 đến CUA-1) với các mật độ và quy mô khác nhau
Trang 1Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
TRNG I H C C N THKHOA TH Y S N
NGUY N TRNG SINH
NG NUÔI U TRÙNG CUA BI N (Scylla paramamosain)
LU N V N T T NGHI P CAO H CNGÀNH NUÔI TR NG TH Y S N
CÁN B HNG D NTs TR N NG C H I
Trang 2Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
I C M N
Tác gi xin chân thành cám n n Th y h ng d n, Ti n s Tr n Ng c H i ãquan tâm dìu d t, t n tâm h ng d n và t o u ki n thu n l i trong th i gianth c hi n tài Xin chân thành cám n Th y, Ti n s V Ng c Út và Th y,Ti n s Nguy n V n Hòa ã t n tâm góp ý ch nh s a c ng tài cth c hi n hoàn ch nh.
Xin chân thành c m n Ban Giám Hi u Tr ng i h c C n Th , Ban ChNhi m Khoa Th y s n, B môn K thu t nuôi H i s n, B môn Th y sinh h c
ng d ng và quý Th y, Cô trong Khoa Th y s n, Tr ng i h c C n Th Xin chân thành c m n Ban Giám Hi u Tr ng i h c Trà Vinh, Ban Chnhi m Khoa Nông nghi p - Th y s n, Phòng Nghiên c u khoa h c, Phòng Kho ch – Tài v , Phòng Qu n tr - Thi t b ã t o u ki n thu n l i trong th igian th c hi n tài này.
Nhân ây tác gi c ng g i l i cám n n gia ình, các b n ng nghi p, t pth l p Cao h c Th y s n khóa 13 ã nhi t tình h tr trong su t th i gian h ct p c ng nh th c hi n tài.
Trà Vinh, ngày 09 tháng 9 n m 2009
Tác gi
Nguy n Tr ng Sinh
Trang 3Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
phù h p nh t cho ng nuôi là 200 u trùng Z1/L và 30 u trùng Z5/L ng d ng vào s n xu t quy mô b l n (500 L và 4000 L) K t qu cho th y, tl s ng và n ng su t t u trùng n giai o n Cua-1 khá cao và có nhi u tri nv ng ng d ng vào s n xu t th c t
Trang 4Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
In order to improve productivity and efficiency in rearing larvae of mud crab,
a research on “Rearing mud crabs (Scylla paramamosain Estampador,
1949) larvae applying two-stage culture methods (Zoea-1 to Zoea-5 and
Zoea-5 to Crab-1) with different densities and scales” were conducted from
April, 2008 to June, 2009 at Experimental Hatchery of Faculty of Agricultureand Aquaculture, Tra Vinh University These experiments were used open-water system The first experiment studied on the effects of rearing densitieson mud crabs larval development, survivals and productivity from Zoea-1stage to Zoea-5 stage and found that rearing density of 200 larvae/L gave thehighest survival rate and productivity of Zoea-5 (61,0±4,55%) The secondexperiment studied on the effects of rearing densities on development,survivals and productivity of mud crab larvae from Zoea-5 larvae stage toCrab-1 stage The best results was obtained from the treatment of density of 30ind/L From the results of the above experiments, a large scale trial wasconducted applying rearing densities of 200 Zoea-1 larvae stage/L and 30Zoea-5/L Results showed that survival rate and productivity from the larvaestage to crab stage were relatively high and promising for applications inproduction practice.
Keywords: Mud crabs, Scylla paramamosain, rearing mud crabs larvaeTitle: Rearing mud crabs (Scylla paramamosain Estampador, 1949) larvae
aplying two-stage culture methods (1 stage to 5 stage and 5 stage to Crab-1 stage) at different densities and scales.
Trang 5Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
CAM K T K T QU
Tôi xin cam k t lu n v n này c hoàn thành d a trên các k t qunghiên c u c a tôi và các k t qu nghiên c u này ch a c dùng cho b tc lu n v n cùng c p nào khác.
Ký tên
Nguy n Trng Sinh
Trang 6Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
Trang 7Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
Trang 8Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
Trang 9Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
DANH SÁCH B NG
B ng 2.1: Khu v c phân b c a 4 loài cua 5
B ng 2.2: Các giai n phát tri n c a u trùng cua bi n 7
B ng 2.3: Các giai n thành th c c a cua cái 8
B ng 2.4: Tóm t t quá trình phát tri n phôi 9
B ng 4.1: Bi n ng m t s y u t môi tr ng n ctrong th i gian thí nghi m 27
B ng 4.2: Ch s bi n thái c a u trùng t giai n Zoea-1 n Zoea-5 30
B ng 4.3: Chi u dài (mm) các giai o n u trùng t Zoea-1 n Zoea-5 30
B ng 4.4: T l s ng (%) các giai n u trùng t Zoea-1 n Zoea-5 31
B ng 4.5: T l s ng và n ng su t t c n giai n Zoea-5 các m t ng 31
B ng 4.6: Bi n ng m t s y u t môi tr ng n ctrong th i gian thí nghi m 33
B ng 4.7: Ch s bi n thái c a u trùng t giai n Zoea-5 n Cua-1 35
B ng 4.8: Kích c (mm) các giai n u trùng t Zoea-5 n Cua-1 35
B ng 4.9: T l s ng (%) các giai n u trùng t Zoea-5 n Cua-1 36
Trang 10Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
Hình 3.4: o chi u r ng mai cua (OCW) d i kính lúp i n có tr c vi th kính 25
Hình 3.5: ng u trùng giai o n Z1 n Z5 v i quy mô b l n 25
Hình 3.6: ng u trùng giai o n Z5 n C1 v i quy mô b l n 26
Hình 4.1: Th i gian bi n thái các giai n u trùng t Zoea-1 n Zoea-5 29
Hình 4.2: Th i gian bi n thái các giai n u trùng t Zoea-5 n Cua-1 31
Hình 4.3: Th i gian bi n thái các giai n u trùng t Zoea-1 n Zoea-5trong b l n 38
Hình 4.4 Th i gian bi n thái các giai n u trùng t Zoea-5 n Cua-1c a 4 b ng 41
Trang 11Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
LC50 Lethal concentration at 50% endpoint
LSI Larval Stage Index (Ch s giai n phát tri n c a u trùng)OCW Chi u r ng mai tính t mút gai (Outer Carapace Wide)SGR Specific Growth Rate (T c t ng tr ng c thù)TAN Total Ammonia Nitrogen (T ng m amôn)
Z1 Giai o n Zoea-1Z2 Giai o n Zoea-2Z3 Giai o n Zoea-3Z4 Giai o n Zoea-4Z5 Giai o n Zoea-5
Trang 12Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
Ph n 1:T V N
1.1 Gi i thi u
Cua bi n (Scylla paramamosainEstampador, 1949) là m t trong nh ng loài cua
quan tr ng trong khai thác và nuôi tr ng thu s n n c ta, cua bi n là m thàng xu t kh u em l i giá tr cao, c ng t ó ngh nuôi cua bi n ng b ngSông C u Long ( BSCL) nói riêng và n c ta nói chung c hình thànhvà phát tri n các t nh BSCL, các mô hình nuôi k t h p cua-tôm-r ng vàcua-tôm không ng ng phát tri n Tuy nhiên, nh ng n m tr c ây ngu n cuagi ng c thu gom t t nhiên ch áp ng c 10-20% nhu c u cho ng inuôi, ph n còn l i kho ng 80% ang hy v ng vào k t qu sinh s n nhân t o(Nguy n C Th ch, 1998).
Vi c s n xu t nhân t o gi ng cua bi n là m t v n b c thi t ch ngcung c p con gi ng cho ngh nuôi và có th ng n ch n vi c khai thác quám c V i m c ích này, Ong (1964) b t u th c hi n nghiên c u v sinh s ncua bi n Malaysia và k t qu b c u ã mô t c các giai n pháttri n c a u trùng K t ó, các Vi n, Tr ng c a các qu c gia trên th gi ic ng ã và ang ti n hành nghiên c u nh ng k t qu c ng còn r t h n ch
Vi t Nam, vi c s n xu t gi ng cua bi n c ng c nhi u nhà nghiên c u vth y s n quan tâm và ã có nhi u công trình c công b tài “B c uth nghi m nuôi v cua m và ng u trùng cua xanh Scylla serrata” c a hai
tác gi oàn V n u và Nguy n C Th ch c báo cáo t i H i ngh sinhv t bi n toàn qu c l n th nh t vào n m 1997 ã m ra c h ng nghiênc u v s n xu t gi ng cua bi n Vi t Nam Bên c nh ó, tài “Th nghi m
sinh s n và s n xu t gi ng cua xanh S serrata vùng bi n Nam B ” c aHoàng c t (1997) ã b c u xây d ng c quy trình s n xu t gi ngcua bi n nh ng còn nhi u h n ch ch a ng d ng c vào th c t s n xu t.T n m 1998, B Khoa h c công ngh và môi tr ng ã giao cho Trung tâmnghiên c u Th y s n III (nay là Vi n nghiên c u Nuôi tr ng Th y s n III)th c hi n tài “Nghiên c u sinh s n nhân t o cua bi n loài S serrata và
c u xây d ng quy trình k thu t s n xu t gi ng nhân t o cua bi n” Qua3 n m th c hi n tài này, ch nhi m tài, Nguy n C Th ch ã xây d ngc quy trình s n xu t gi ng cua bi n t ng i hoàn ch nh và ã t ch c t phu n chuy n giao cho nhi u t ch c, cá nhân trong c n c Tuy nhiên, trong
Trang 13Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứuquá trình s n xu t v n còn m t s h n ch nh t l s ng r t th p và không n
nh d n n n ng su t và hi u qu kinh t ch a cao.
Tr n Ng c H i và Tr ng Tr ng Ngh a (2004) ã nghiên c u v s nh h ngc a m t ng lên s phát tri n và t l s ng c a u trùng cua bi n (Scylla
paramamosain) trong mô hình n c xanh thu c k t qu t t nh t v i t ls ng 9,11% m t ng 100 con/L Tuy nhiên, các công trình nghiên c u
ã nêu trên ch nghiên c u ng nuôi u trùng cua bi n m t giai n t 1 n cua b t có th ch a ánh giá c nh ng h n ch c a quy trình ngnuôi riêng cho t ng giai n Vì th vi c th c hi n tài ng nuôi u
Zoea-trùng cua bi n (Scylla paramamosain Estampador, 1949) theo hai giai
o n (Zoea-1n Zoea-5 và Zoea-5n Cua-1) v i các m t và quy môkhác nhau” là r t c n thi t nh m góp ph n nâng cao ng su t và hi u qus n xu t gi ng, áp ng nhu c u con gi ng cho s phát tri n c a ngh nuôicua.
(2) Th nghi m ng u trùng cua bi n v i quy mô b l n theo 2 giai o n:Zoea-1 n Zoea-5 và Zoea-5 n Cua-1 v i m t thích h p.
Trang 14Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
Ph n 2:
T NG QUAN TÀI LI U
2.1 C M SINH H C
2.1.1 Hình thái c u t o và phân lo i cua bi n
Vi c phân lo i cua bi n Scylla spp g p r t nhi u khó kh n và nh m l n áng
k trong nhi u th p k qua G n ây, b ng ph ng pháp i n di và hình thái
gi i ph u, Keenan và ctv (1998) ã i n k t lu n cua bi n gi ng Scylla có 4
loài: Scylla serrata,Scylla paramamosain,Scylla olivacea,Scyllatranquebarica.
H th ng phân lo i c a 4 loài cua bi n c trình bày nh sau:Ngành Arthropoda
Ngành ph CrustaceaL p Malacostraca
B DecapodaH Portunidae
Gi ng Scylla
Loài : S paramamosain (Estampador, 1949)
S serrata (Forskal, 1755) S olivacea (Herbst, 1796)
S tranquebarica (Fabricius, 1798)
Khi thu m u cua ng B ng Sông C u Long, Keenan và ctv (1998) k tlu n: loài cua xanh s ng khu v c c a sông Mekong là loài S paramamosain.
Trang 15Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứuHình 2.1: Hình d ng các loài cua bi n Scylla sp theo phân lo i c a Keenan và ctv (1998)Theo mô t c a Nguy n Thanh Ph ng và Tr n Ng c H i (2004), c th cua
c phân chia thành ph n u ng c và ph n b ng Ph n u ng c là s liênh p c a 5 t u và 8 t ng c n m phía d i mai u g m có m t, antenvà ph n ph mi ng Mai cua to, phía tr c có nhi u r ng, m t có 2 h c ch am t, cu ng m t, c p râu nh A1 và râu l n A2 Trên mai chia thành nhi uvùng b ng nh ng m nh trung gian, m i vùng là v trí c a m i c quan M tb ng c a ph n u ng c có t m ng c và làm thành vùng lõm gi a ch aph n b ng g p vào Ph n b ng phân t và tùy theo gi i tính mà có hình d ngvà s phân t khác nhau Cua cái tr c th i k thành th c sinh d c ph nb ng có hình h i vuông, khi thành th c y m phình r ng v i 6 t phân bi t vàcác kh p c ng bình th ng Cua c có y m h p hình ch V; các t 1, 2,6 th y rõ và c ng bình th ng; còn các t 3, 4, 5 liên k t v i nhau vàkhông c ng c gi a các kh p.
S olivacea (Herbst, 1796)S serrata (Forskal, 1755)
S paramamosain (Estampador, 1949)S tranquebarica (Fabricius, 1798)
Trang 16Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
2.1.2 c m phân b
Cua bi n Scylla phân b kh p khu v c n - Thái Bình D ng (Keenan và
ctv, 1998) S phân b c a nh ng loài này c tóm t t qua b ng sau:B ng 2.1: Khu v c phân b c a 4 loài cua
S serrata
n - Tây Thái Bình D ng, H ng H i, Nam Phi,Tây Úc, Bi n ông Úc, Thái Bình D ng: o Frij,Solomon và New Caledonia, V nh Carpentaria,Philippines, Okinawa (Nh t B n).
S paramamosain
ng B ng Sông C u Long (Vi t Nam), Trung Java(Indonesia), Bi n Nam Trung Qu c: Xiamen,HongKong, Singapore, Cambodia.
-Bi n Nam Trung Qu c: Malaysia; Singapore.
Theo Stephenson (1962), S serrata là loài cua l n phân b r ng vùng c a
sông khu v c n - Thái Bình D ng Loài S olivacea c tìm th y ph n
l n Philippines và Malaysia C S olivacea và S tranquebarica u xu t
hi n t p trung Bi n Nam Trung Qu c, n i mà loài S serrata h u nh không
xu t hi n (Keenan, 1999).
Vi t Nam, c bi t vùng BSCL, theo Keenan và ctv (1998) có hai loàich y u là S paramamosain (cua sen) và S olivacea (cua l a), tr c âyth ng b nh m l n là S serrata (Hoàng c t, 1992) Loài S serrata
không c tìm th y BSCL c ng nh Vi t Nam S paramamosainchi m trên 95% trong qu n th Scylla, trong khi ó S olivacea ch chi m
kho ng 5% (Le Vay, 2001).
Trang 17Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
2.1.3 Vòngi
Ong (1964) ã mô t các giai n u trùng cua l n u tiên trên th gi i utrùng sau khi n là Zoea-1 (Z1) , tr i qua 4 l n l t xác tr thành Zoea-5 (Z5)trong kho ng 17 - 20 ngày Zoea 5 bi n thái thành Megalopa và giai o n nàykéo dài 8-11 ngày, sau ó u trùng tr thành cua con Cua con tr i qua 16-18l n l t xác n a tr c khi thành th c, th i gian này ít nh t ph i m t 338 - 523ngày (Ong, 1966).
Hình 2.2 Vòng i c a cua bi n Scylla sp (Truong Trong Nghia, 2004)
Hoàng c t (2004) mô t : u trùng m i n là Z1, có ôi m t kép và s c ten u trùng Zoea tr i qua 5 giai o n, m i giai n m t 2- 3 ngày, riênggiai o n Z5 m t 3- 4 ngày Sau giai o n Z5, u trùng bi n thái thànhMegalopa và s ng bám vào giá th T giai n này, chúng m t kho ng 7- 11ngày bi n thái thành cua con.
Nhìn chung, chu k s ng c a cua c chia ra làm 4 giai o n chính: Giaio n u trùng, giai o n cua con có chi u r ng c a giáp u ng c (CW) t 20n 80 mm, giai n ti n tr ng thành (CW: 75-150 mm), giai o n tr ngthành (CW > 150 mm) (Heasman và Fielder, 1983) Theo Ong (1966), cua cáithu c h Portunidea có th là nhóm giáp xác duy nh t hoàn t t quá trình sinh
Trang 18Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứuB ng 2.2: Các giai n phát tri n c a u trùng cua bi n
Giai o n
Th i giansau khi n
Zoea -2 3 -6 2,18
M t có cu ng Nhánh ngoài c a chânhàm 1 và 2 mang 6 lông t Có 5 tb ng.
Nhánh ngoài c a chân hàm 1 mang 8lông t , chân hàm 2 mang 9 lông t Có 6 t b ng Gai bên c a t b ng 3,4, 5 dài h n.
Zoea-4 8 - 11 3,54
Nhánh ngoài c a chân hàm 1 mang 10lông t ; c a chân hàm 2 mang 10 lôngdài và 1-2 lông ng n M m chân b ngxu t hi n trên các t b ng 2 – 6
Zoea-5 10 - 16 4,5
Nhánh ngoài c a chân hàm 1 mang 11lông dài, 1- 4 lông ng n, nhánh ngoàic a chân hàm 2 mang 12 lông dài và 2– 3 lông ng n Chân b ng trên các tb ng 2 – 6 r t phát tri n, nhánh ngoàic a chân b ng mang t 1 – 2 lông t
Megalopa 15 - 23 4,01
M t gai l ng Gai trán r t ng n M t to.Telson không còn ch 2 mà thành d ngb u và có nhi u lông trên chân uôi.Chân b ng r t phát tri n và có nhi ulông trên các nhánh Xu t hi n 2 càng.Cua b t
( C1) 23 - 30
2- 3(CW)
Cua có hình d ng nh cua tr ngthành, m c dù carapace h i tròn.
(Ngu n: Tr n Ng c H i, 2007)
Trang 19Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
2.1.4 c m sinh s n
Theo Hartnoll (1965), s giao ph i Scylla ch có th x y ra gi a con c cóv c ng và con cái có v m m trong th i gian cua cái l t xác ti n giao v Theo Chen (1990), cua bi n thành th c trong n m u tiên có chi u r ng mai100 mm tr lên S giao v u tiên x y ra trong su t quá trình l t xác cu icùng c a cua cái tr c khi thành th c sinh s n M t vài ngày tr c khi l t xác giao v có s b t c p gi a cua c và cua cái Ngay sau khi cua cái v a l txác xong và tr c khi v m i l t tr nên c ng, túi tinh c a cua c c avào túi ch a tinh c a cua cái gi a g c chân bò th t và th n m và cgi trong nhi u tu n, có th c dùng th tinh cho cua cái qua nhi u l nsinh s n (m t l n giao ph i có th th tinh cho cua cái 1-3 l n tr ng) Khicon cái tr ng thì tinh trùng cùng lúc c gi i phóng th tinh cho tr ng.Ph n l n tr ng ra c p trong xoang y m c a cua m (cua ôm tr ng) nkhi n Cua m p tr ng nh ng n i có m n cao, nhi t n nh Trongi u ki n thu n l i, tr ng có th n ng lo t trong kho ng 3-6 gi (Nguy n
Th ch, 1998; Hoàng c t, 2004).B ng 2.3: Các giai o n thành th c c a cua cái
Giai o n III Cua ang thành th c, noãn bào n r ng, chi m kho ng ½ ¾ di n tích gan t y Noãn bào có màu cam GSI: 2,5-8,0%.
-Giai o n IV
Túi ch a tinh l i lên Noãn bào màu cam hay , n r ngchi m h t di n tích gan t y và c khoang ru t Có th nhìnth y màu vàng t phía sau gi a giáp u và y m GSI t15,85% cua s n sàng tr ng.
(Ngu n: Nguy n C Th ch, 2001)
Theo Chen (1990), cua mang tr ng c tìm th y ài Loan quanh n mnh ng phong phú nh t là t tháng 4 n tháng 6 Cua cái l n có th mangtr ng 2 ho c 3 l n/n m và cho t 800.000 n 4 tri u tr ng trong m t l n
Trang 20Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứuB ng 2.4: Tóm t t quá trình phát tri n phôi
Các giai o n phát tri n phôi Màu s c tr ng Kích th c tr ng(µm)Sau khi tr ng kho ng 1 gi tr ng
Khi tu i phôi t 12-17 ngày thì timphôi b t u xu t hi n, nh p tim t ngd n s l n p V ng c, chân hàm,các t b ng c hình thành, c b tu co bóp, các ph n ph c a u trùngã phát tri n hoàn thi n Phôi ho tng trong v tr ng m nh d n, c ng ho t ng t ng liên t c cho n khiv tr ng v ra và u trùng xu t hi n.K t thúc th i gian phát tri n phôi t 15– 17 ngày u ki n nhi t 26 –30oC, m n 30 - 35 ‰ và i u ki nkhác n m trong ph m vi cho phép.
(Ngu n: Nguy n C Th ch, 2001)
Ho t ng sinh s n c a S serrata x y ra quanh n m v th p và theo mùa v cao (Quinn và Kojis, 1987) và chúng d ng nh gi m d n i v inh ng cua l n (già) và có chi u r ng mai t 190 mm tr lên (Prasad vàNeelakantan, 1989).
Mùa v sinh s n c a S serrata t nh cao nh t t cu i tháng 5 n cu itháng 9 Philippines (Arriola, 1940) Theo Quinn và Kojis (1987), s l ngcua tham gia sinh s n nhi u nh t Papua New Guinea t tháng 4 n tháng 6và t tháng 9 n tháng 10 Các tác gi c ng cho r ng S serrata sinh s n
quanh n m.
Trang 21Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
Theo Robertson và Kruger (1994), mùa sinh s n c a S serrata Nam Phi x y
ra quanh n m v i nh cao t cu i mùa xuân n u mùa thu M c dù sinh
s n quanh n m, S serrata c ng xu t hi n 2 nh i m sinh s n: t tháng 12
n tháng 3 và t tháng 9 n tháng 11.
vùng bi n phía Nam n c ta, cua th ng b t u di c vào tháng 7, 8 vàmùa sinh s n chính b t u t tháng 10 n tháng 2 n m sau, vùng bi n phíaB c cua ôm tr ng xu t hi n nhi u t tháng 4 n tháng 7 (Hoàng c t,1992).
2.1.5 c m dinh dng
Cua bi n có tính n t p, tính n c a cua bi n thay i theo t ng giai n pháttri n c a chúng Th c n ch y u c a cua con (CW<70 mm) là mùn bã h u, c a cua ti n tr ng thành (CW = 81 – 110 mm) và tr ng thành (CW>110mm) ch y u là giáp xác và cá (Prasad và Neelakantan, 1989) Jajamanne(1992) cho r ng cua con (CW = 20 – 70 mm) n ch y u giáp xác, cua ti ntr ng thành (CW = 70-130 mm) thích n nhuy n th hai m nh v và các loàichân b ng trong khi cua l n h n th ng n cua nh và cá C ng nh h u h t
giáp xác, cua Scylla có t p tính ki m n vào ban êm (Hill, 1976; Joel và Raj,
Trong i u ki n nuôi, kh u ph n n h ng ngày c a u trùng và cua con c nc b sung acid béo và cholesterol nâng cao t l s ng và t ng tr ng.
Youzhu và ctv (2001) báo cáo r ng nâng cao hàm l ng acideicosapentaenoic (EPA) và acid decoxahexaenoid (DHA) s làm t ng t ls ng và t ng tr ng c a u trùng cua S serrata Sheen (2000) c ng cho r ngcua con loài S serrata có nhu c u v cholesterol c i thi n t l s ng và t ngtr ng Nhu c u cholesterol trong kh u ph n n t i u là 0,5%.
2.1.6c m sinh trng
Cua l t xác bi n thái và t ng tr ng i v i cua Scylla sp., cua c t ngtr ng nhanh h n cua cái (Mangampa và ctv., 1987) T ng tr ng trung bìnhc a cua c kho ng 1,3 g/ngày trong khi cua cái ch t ng tr ng 0,9 g/ngày.
Trang 22Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứutr ng c thù (Specific Growth Rate - SGR) cao h n m t cách có ý ngh a so
v i cua cái C ng theo Trino và ctv (1999), nuôi chung cua c và cua cái thìcua t ng tr ng ch m h n so v i cua c và cua cái c nuôi riêng (nuôi ntính).
Quá trình t ng tr ng c a cua bi n th ng nh h ng b i nhi t V i s giang nhi t n c trong kho ng thích h p thì cua con Scylla sp l t xác
th ng xuyên và t ng tr ng nhanh chóng (Luo và Wei, 1986) Lee (1992)cho r ng t ng tr ng c a cua bi n ng ng l i vào mùa ông, khi nhi t gi mxu ng 20oC Theo Ong (1966), t ng tr ng trung bình c a cua Scylla uki n t nhiên nhanh h n trong i u ki n ng nuôi trong phòng thí nghi m.K t lu n này c ng ã c Manjulatha và Babu (1998) ng h v i nh n nhng tr ng c a cua bi n trong ao nuôi cao h n trong phòng thí nghi m, m cdù ch t l ng n c trong phòng thí nghi m t t h n.
Cua tr i qua nhi u l n l t xác trong su t quá trình sinh tr ng c a chúngnh ng t n s l t xác và s t ng tr ng sau m i l n l t xác thì không gi ng nhau m i giai n (Ong, 1966) Sau m i l n l t xác, cua giai n nh l nnhanh h n và t ng tr ng gi m d n nh ng giai n cua ã l n Nh ng cáth trong cùng giai o n, kích th c c a chúng c ng bi n ng Khi nghiênc u t ng tr ng c a cua bi n Scylla sp. n , Thomas và ctv (1987) ã k tlu n r ng S serrata có th t ng tr ng v chi u r ng mai (CW) n 112;151,5 và 187,5 mm t ng ng cho n m th nh t, n m th hai và n m th ba.Theo Manjulatha và Babu (1998), nhi t và n ng mu i có nh h ng l n
n s l t xác và t ng tr ng c a cua Nhi t n c th p h n 24oC và trên34oC làm gi m t p tính n, kéo dài th i gian l t xác c a cua Th ng 26- 31
C, t p tính n và l t xác c a cua bi n bi u hi n bình th ng Khi ng utrùng Megalopa, giai o n này kéo dài kho ng 11- 12 ngày m n 29-33ppt, trong khi giai o n này ch kéo dài 7 -8 ngày khi ng m n 21 -27ppt.
Stephenson và Campell (1960) ( c trích d n b i Ong,1966) ã ghi nh n
r ng nh ng m u cua Scylla thu t t nhiên có chi u r ng mai (CW) kho ng
190mm con c và 165 mm con cái, và Scylla mang tr ng có CW trong
kho ng 92 – 151 mm i u này ch ng t t ng tr ng c a cua v n ti p t c ccua c và cua cái sau khi chúng ã t m c thành th c.
Trang 23Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
2.2 S N XU T GI NG CUA BI N2.2.1 Tuy n ch n cua m
Ch t l ng cua m s nh h ng r t l n n s c sinh s n, kh n ng phát tri nphôi, t l n và t l s ng c a u trùng sau này Cua m nuôi v ph i kh em nh; có y càng, chân bò, chân b i; màu s c t i sáng; có nhi u g ch;tr ng l ng t 350 -450 g là t t nh t (Nguy n C Th ch, 2001).
2.2.2 Nuôi v cua m
Cua m ã qua khâu v sinh, t m formol 200 ppm) c nuôi v trong các hcimennt có th tích 3x4x1,2m ho c 4x5x1,2m M t cua m nuôi t 2-3con/m2; 1/3 áy h nuôi c l p cát dày t 20- 30 cm.
Th c n cho cua m là cá Li t (60 - 70% kh u ph n n); tôm, m c, nhuy n th(30- 40% kh u ph n n) Hàng ngày cho cua n 2 l n, sáng t 5 - 7 gi vàchi u t 17- 18 gi Th ng xuyên thay i các lo i th c n và cho n d th a
cua m s d ng t i a c l ng th c n (Nguy n C Th ch, 2001).Hàng ngày thay 1/3 ng n c c , b sung n c m i; 3 ngày m t l n thay100% n c c c p n c m i M i bu i sáng tr c khi cho n c n lo i b toànb th c n d th a Khi cua m có bu ng tr ng phát tri n vào cu i giai o nIV, ti n hành thay, kích n c t o kích thích cho cua Duy trì m t s y ut môi tr ng trong h nuôi cua m nh : pH = 8,0 - 8,5; m n = 30 - 35‰ ;H2S, NH3,NO2 < 0,01 mg/L; s c khí 24/24 gi (Nguy n C Th ch, 2001).Theo Truong Trong Nghia (2004), Vi t Nam ang áp d ng 3 h th ng nuôiv cua m g m: b composite 70 L t trong nhà, che ph t i hoàn toàn và n iv i b l c sinh h c 700 L; b cement có th tích 100 L t trong nhà và cb o v b ng t m tole nh a, d i áy b có lót m t l p cát dày 5 cm và th 3 làh th ng nuôi v cua b m trong ao t có di n tích 60 m2.
2.2.3 Kích thích sinh s n
Theo k t qu nghiên c u c a m t s tác gi nh Davis (2003), Mann và ctv.(1999), William và ctv (1998), trên 80 % cua m t t nhiên bình th ngtrong vòng 40 ngày sau khi th nuôi trong phòng thí nghi m ho c trong tr igi ng Thêm vào ó, vi c c t m t có th rút ng n giai n sinh s n(Marichamy và Rajapackiam, 2001) Cua có th trong vòng 5 ngày sau khic t m t Tuy nhiên, c ng có tr ng h p kéo dài n 111 ngày m i và m ts con không (Tr n Ng c H i và ctv., 2002).
Trang 24Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứuti n hành kích thích cua m b ng cách t o dòng n c ch y gây h ng ph ncho cua (Nguy n C Th ch, 2001).
Failaman, 2001; Hamasaki, 2002; Mann và ctv., 1999a; Truong Trong Nghia,
2004) Trong quá trình p tr ng, cua cái th ng th i tr ng (Hoang Duc Dat,1999) Tr ng có th b nhi m nhi u lo i ký sinh trùng và n m n u ch t l ng
c p kém (Churchill, 2003; Hamasaki và Hatai, 1993).
Truong Trong Nghia (2004) khuy n cáo r ng sau khi , cua c t m b ngformol 100 µL/L trong 1 gi và chuy n sang b p 70 L k t n i v i h th ngl c sinh h c thì an toàn và hi u qu trong vi c ng a n m và ký sinh trùng.Khi nghiên c u nh h ng c a nhi t , m n và m t p tr ng lên kh
ng n c a tr ng cua bi n (Scylla sp.) trong i u ki n p t nhiên và nhânt o, Tr n Ng c H i và ctv (2002) nh n th y khi nhi t n c dao ng 25-26 oC, th i gian p tr ng kéo dài n 12 ngày m i b t u n Ng c l i,nh ng tháng nóng, nhi t dao ng 28-30oC, th i gian p tr ng ch kéo dài 9ngày m n có nh h ng r t l n n t l n và th i gian p c a tr ng.Tr ng có th n trong ph m vi m n 20 - 40‰, tuy nhiên m n t t nh tcho p tr ng là 30‰ Ngoài ra, vi c p tr ng trong u ki n nhân t o là có thv n d ng c nh ng m t p không nên v t quá 762 tr ng/L.
Trong kho ng th i gian u c a quá trình phát tri n phôi, t l phôi ch tkhông có s khác bi t khi m n dao ng t 15- 35‰ là do tr ng có c u t oc bi t: tr ng cua có 2 l p màng, l p ngoài dày làm ch c n ng b o v vàhình thành cu ng tr ng, l p trong m ng h n, gi a 2 l p có kho ng tr ng ch aniêm d ch Khi m i , tr ng cua có kích th c kho ng 270 µm, trong th igian này l p màng ngoài cùng còn dày có kh n ng u ti t áp su t th m th ugi a môi tr ng trong và ngoài, m b o không b nh h ng trong quá trìnhphát tri n phôi khi có s tác ng do chênh l ch áp su t th m th u gi a môitr ng trong và ngoài Khi phôi phát tri n qua giai n phôi v và b t uhình thành các m m ph n ph (t ngày th 6 tr i) kích th c phôi t ng t270 lên 350 µm, s t ng kích th c làm giãn m ng màng b o v bên ngoàid n n kh n ng u ch nh cân b ng áp su t th m th u c a màng b o v bênngoài b gi m ho c m t kh n ng u ch nh, lúc này n u có s thay i l n v
Trang 25Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu m n thì s l ng phôi ch t ng lên c tính này cho phép cua m có th
tr ng m n không thích h p nh ng có kh n ng di c n n i có m n thích h p phôi phát tri n t t (Nguy n C Th ch, 2001).
Ngoài ra, u trùng Zoea còn c thu b ng cách: gi m th t nh s c khí saocho toàn b ch t b n (tr ng h , lông t , nh y, loa kèn, u trùng y u, u trùngch t) l ng xu ng áy b ; sau ó dùng v t m n, m m có ng kính 15 cm v tnh u trùng Z1 t n i trên m t, không nên thu u trùng y u, l l ng t nggi a và g n áy Cách này s h n ch r t l n s xâm nh p c a m m b nh tcua m vào b ng nuôi (Truong Trong Nghia, 2004).
2.2.6ng nuôi u trùng cua bi n
2.2.6.1nh hng c a m t và th tích bng
Zeng (1998), Baylon và Failaman (2001) ã báo cáo r ng u trùng cua bi nc ng trong b có th tích t 0,5 - 5 L trong i u ki n thí nghi m có tht t l s ng t 60- 90% giai n Megalopa Emilia và ctv (1999) nghiên
c u ng nuôi u trùng cua bi n v i m t 50 Z1/L trong b ng có th tích3 L b ng nhi u lo i th c n khác nhau cho c k t qu v t l s ng n giaio n Megalopa các nghi m th c dao ng t 0,91- 2,52% Zainodin (1991)nghiên c u ng nuôi u trùng cua bi n v i m t t 20 - 30 Z1/L t t ls ng trung bình n giai o n cua b t là 4,45%.
Tr n Ng c H i và Tr ng Tr ng Ngh a (2004) ã nghiên c u nh h ng c am t ng lên s phát tri n c a u trùng cua bi n (S paramamosain) khi
ng trong mô hình n c xanh (t o c gây nuôi t cá rô phi) nh sau: Thínghi m g m 3 nghi m th c v i m t ng 50, 75, 100 u trùng Z1/L cb trí trong các b composite áy hình chóp ch a 50 L n c; m i nghi m th c
Trang 26Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứutrùng v i m t 30- 40 con/mL; giai o n Z3 tr i c cho n b ng
Artemia v i m t 8 - 10 con/mL K t qu cho th y, sau 24 ngày h u h t utrùng các nghi m th c u chuy n sang cua con, s bi n thái và t l s ng t
u trùng sang C1 nghi m th c m t ng 100 con/L là t t nh t (t l s ngt 9,11±1,29%).
2.2.6.2nh hng c a th c n
Li và ctv (1999) cho r ng u trùng cua bi n m i n có kh n ng b t th c n
ngay, tuy nhiên, Lumasag và Quinitio (1998) nh n th y u trùng sau khi n 24gi mà không c cho n c ng không gây nh h ng n t l s ng N u kéodài th i gian trên 48 gi thì d n n t vong cao (Djunaidah và ctv., 2003).
Còn Mann và Palato (1995) c ng nghiên c u v n này và cho bi t u trùng
Z1 c a S serrata không cho n có th s ng n 142 gi nh ng không th l txác qua giai o n Z2.
D a trên các k t qu nghiên c u v h ng th c v t phù du phân b ngoài tnhiên, Nguy n C Th ch (2001) ã ti n hành nghiên c u ch n l a các lo ith c n ng nuôi u trùng cua bi n t giai n Z1 n Z5 Thí nghi mc th c hi n có 4 nghi m th c t ng ng v i 4 nhóm th c n: nhóm 1 cho
n hoàn toàn b ng Artemia; nhóm 2 cho n hoàn toàn b ng luân trùng; nhóm 3cho n k t h p gi a luân trùng và Artemia; nhóm 4 cho n k t h p 3 lo i th cn g m t o, luân trùng, Artemia Trong quá trình ng nuôi, th c n ccung c p sao cho m b o c t n s b t g p gi a u trùng và th c n là caonh t nh ng không làm b n môi tr ng nuôi Qua thí nghi m, k t qu c rútra nh sau:
u trùng c cho n k t h p 3 lo i th c n cho t l s ng cao nh t(16,1±6,16%) T ó tác gi k t lu n: luân trùng là lo i th c n r t phù h p giai o n Z1 và u Z2 nh ng không phù h p các giai n k ti p.
Nauplius c a Artemia cho n giai n u Z2 n u Z4, Artemia cho n
t giai n u Z4 n h t Z5 T o (Chaetoceros, Platidomonas, Chlorella)
cho n t u n h t giai o n Zoea.
Baylon và Failaman (1999) nghiên c u nh h ng c a các lo i th c n lênt ng giai n khác nhau ã ch ra r ng th c n thích h p các giai n Zoea
là luân trùng k t h p Artemia, còn th c n thích h p cho giai n Megalopa
và cua b t là Artemia. u trùng Z1 m i n cho n luân trùng ngay v i m t ít nh t là 10 cá th /mL và duy trì m t này trong su t giai n Zoea;
Artemia c b sung thêm v i m t 1 cá th /mL ngay tr c khi u trùngchuy n sang giai n Z2 và duy trì n h t Z3; t ng m t Artemia t 5- 10
Trang 27Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứucá th /mL khi u trùng t giai o n Z4 và duy trì m t này n giai n
Megalopa (Baylon và ctv., 1999).
u trùng th ng c cho n b ng luân trùng trong su t giai n Z1 và Z2
(Li và ctv., 1999; Mann và ctv., 1999b; Takeuchi và ctv., 2000) Artemia ccho n t giai n Z3 tr v sau (Li và ctv., 1999; Nghia và ctv., 2001) N u
giai o n Z3 không c cho n Artemia thì t l s ng và t ng tr ng c a u
trùng gi m (Suprayudi và ctv., 2002) M c dù u trùng cua bi n m i n c
cho n b ng Artemia, nh ng b sung luân trùng vào kh u ph n n thì t l
s ng c a u trùng th ng gia ng (Baylon và Failaman, 1997; Ong, 1996).Truong Trong Nghia (2004) cho bi t u trùng cua bi n giai n Z1 khôngth b t s l ng l n Artemia m i n có th do s di chuy n nhanh và kích
luân trùng và Artemia c giàu hóa và không c giàu hóa, m t luân
trùng và Artemia c s d ng cho thí nghi m l n l t là 45 và 25 con/mL;k t qu cho th y th c n thích h p cho giai n Z1, Z2 là luân trùng cgiàu hóa và ng nuôi v i h th ng n c xanh tu n hoàn cho t l s ng cao
Ch t l ng dinh d ng c a luân trùng và Artemia có th c c i thi n b ngcách giàu hóa chúng (Kanazawa và Koshio, 1994) u trùng cua S serrata
c cho n luân trùng ã c giàu hóa b ng n-3 acid béo không no v i li ung 3 - 8 mg/L thì t l s ng c c i thi n có ý ngh a Tuy nhiên, khi giàuhóa luân trùng b ng n-3 acid béo không no v i li u l ng trên 31 mg/L s gâyt l ch t cao trong quá trình bi n thái t Megalopa sang cua b t.
Trang 28Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
2.2.6.3nh hng c a y u t môi trng
Marichamy và Rajapackiam (1991) nghiên c u ng nuôi u trùng cua bi n các nhi t khác nhau cho c k t qu t t nh t khi ng nuôi nhi t t 28-30 oC v i th i gian ng là 26-30 ngày và t l s ng t c là 6,32%.nhi t 25- 27oC th i gian ng kéo dài 28- 30 ngày và t l s ng t 4,09 %.Còn nhi t 22- 24 oC, u trùng ch t n t i n giai n Z4 Chen và Jeng(1980) nh n th y nhi t càng cao thì th i gian l t xác bi n thái càng nhanh.Churchill (2003) cho r ng, giai n t Z1 n Z4 c a gi ng Scylla th ng
c ng m n t 30 - 35‰ Kho ng m n thích h p cho u trùng Z1n Z3 là 27-35 ‰; m n thích h p cho giai n Z4 n Megalopa là 23 –31‰ và m n thích h p nh t cho s phát tri n su t th i k u trùng kho ng
27‰ (Wang và ctv., 1997) Tuy nhiên, m n c dùng ng u trùngkhác nhau t ng loài nh Nh t, loài S tranquebarica c ng m n
25‰ (Djunaidah và ctv., 1998; Mann và ctv., 2001; Quinitio và ctv., 2001).
m n d i 10‰ thì s bi n thái c a u trùng cua S serrata kéo dài và t ls ng th p (Zhongli và ctv., 2001) Vi c gi m m n giai n Z5 xu ng 20-24‰ i v i loài S tranquebarica và 20‰i v i loài S olivacea s c i
thi n s bi n thái sang giai n Megalopa (Baylon và Failaman, 2001;
Quinitio và ctv., 2001) và gi m m n t 30‰ xu ng 25‰ s nâng cao t lbi n thái c a Z5 i v i loài S paramamosain (Hoang Duc Dat, 1999).
m n thích h p cho quá trình phát tri n phôi là 30 -35 ‰, cho ng nuôicác giai o n Zoea là 30‰ và cho ng nuôi giai o n Megalopa là 27-29‰
(Nguy n C Th ch, 2001) Tr n Ng c H i và ctv (2002) c ng nh n nh
m n t t nh t p tr ng cua là 30 ‰ m n thích h p cho quá trình t ngtr ng, l t xác và t l s ng c a cua con (t C1 n C8) loài S paramamosain
là 28 -30 ‰ m n 6 -12‰ th ng xu t hi n b y l t xác và n l n nhau vìquá trình l t xác không ng u m n 0 ‰ cua v n ch u ng c trongvòng 2 ngày sau ó s ch t (Tran Ngoc Hai, 1997).
Theo Ong (1964) u trùng cua bi n có th c ng nhi t 24,5 – 31,5
C và m n là 29- 33 ‰ Nhi t và m n quá th p hay quá cao c ng nhng n t l s ng c a u trùng, u trùng phát tri n t t nhi t 27oC và m n 27- 33‰ (Heasman và Fielder, 1983; Hamasaki, 2002) Zeng và Li(1992) c ng cho bi t kho ng nhi t và m n thích h p nh t cho ng nuôiu trùng là 26- 30oC và 25 -30 ‰ Khi m n d i 17,5 ‰ trong i u ki nnhi t 25oC thì u trùng b ch t áng k
Trang 29Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
Ánh sáng
nh h ng c a c ng ánh sáng n s phát tri n c a u trùng cua v i cácnghi m th c che t i hoàn toàn và d i mái nh a trong su t, u trùng cng trong môi tr ng n c xanh và cho n luân trùng ã c nghiên c ub i Tran Ngoc Hai (1997) Tác gi k t lu n: Trong i u ki n c ng ánhsáng 4.500 – 6.000 lux ho c i mái che trong su t, th i gian chi u sángtrong ngày là 12 gi cho k t qu bi n thái và t l s ng c a u trùng cao nh t.ng ánh sáng cao n 250.000 lux vào gi a mùa hè s làm pH và oxygia t ng m nh (Cowan, 1984) u trùng giai o n Z1, Z2 h ng quang r tm nh và u trùng t giai n Z3 n Megalopa có t p tính n nhau nên c ng thích h p cho ng u trùng là 1.800-4.000 lux (Mann và ctv., 2001) T l
s ng và t ng tr ng sau giai n Z3 b nh h ng n u nh c ng ánhsáng d i 50 lux (Takeuchi và ctv., 2000; William và ctv., 1998) Tuy nhiên,
trong quá trình ng nuôi, u trùng có th không c n ánh sáng trong m t th igian mà không nh h ng n t l s ng c a u trùng (Djunaida và ctv.,1998) Theo Truong Trong Nghia và ctv (2001), u trùng không b nh h ngkhi không có ánh sáng trong kho ng th i gian t 12 -18 gi
K t qu thí nghi m cho th y LC50-24 gi c a NH3 i v i u trùng giai o nZ1 là 4,05 mg/L và i v i u trùng giai o n Z5 là 6,64 mg/L hàm l ng6,54 mg NH3/L thì 100% u trùng Megalopa b ch t sau 24 gi ng th i k tqu cho th y NH3 không nh h ng n s phát tri n c a u trùng cua.
Mary Lynn Seneriches-Abiera và ctv (2007) thí nghi m v c c p tính
c a nitrite lên u trùng cua S serrata cho th y u trùng càng l n thì kh n ng
ch u ng v i t nitrite càng cao; c th là LC50-96 gi c a nitrite i v iu trùng Z1 là 41,58 mg/L; Z2 là 63,04 mg/L; Z3 là 25,54 mg/L; Z4 là 29,98mg/L và Z5 là 69,93 mg/L.
Trang 30Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
Giá th
Giai o n Megalopa n cua b t, u trùng có t p tính n l n nhau nên vi c sd ng dây nylon (Marichamy và Rajapackiam, 1991) ho c l i nh a (Wickinsvà Lee, 2002) làm giá th s nâng cao c t l s ng c a u trùng Megalopavà cua b t Khi ng nuôi t giai n cua b t lên cua gi ng, s d ng g chng và v nghêu làm giá th s cho t l s ng cao nh t (Tr n Th H ng H nh,2003).
Theo Tr n Ng c H i và Tr n Minh Nh t (2008), k t h p 2 lo i giá th làchùm nylon và l i áy b trí vào b ng u trùng gh xanh cho c k tqu v t l s ng cao h n s d ng n l t ng lo i giá th
Trang 31Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
- B tròn (Xô) 80 L
- B hình chóp 500 L, 1000 L, 4000 L- Khúc x k
- Nhi t k r u- Máy o pH
- Máy so màu quang ph- Kính hi n vi
- Kính lúp i n (có tr c vi th kính)- Cân i n t , chính xác 0,01 g- Máy nén khí Ozone
- Các d ng c khác: ng khí, máy s c khí,…
3.2.2 Hoá ch t
- Thu c tím- Chlorine- Formol
- Các lo i hóa ch t dùng trong phòng thí nghi m (dùng o nitrite vàTAN),…
Trang 32Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
3.2.3 Ngu n nc thí nghi m
c c s d ng trong quá trình thí nghi m l y t 2 ngu n: c bi n có m n 30‰ và n c sinh ho t có m n 0‰ u c x lý, l ng l c tr ckhi c p vào h th ng.
3.2.4 Ngu n cua thí nghi m
Cua m bu ng tr ng t giai o n 3, 4 c tuy n ch n t các ghe ánh b tngoài bi n a v tr i nuôi v , cho và p tr ng u trùng m i n c sd ng b trí thí nghi m.
3.2.5 Ngu n th c n ti s ng
3.2.5.1 T o Chlorella
T o Chlorella gi ng c v n chuy n v t Khoa Th y s n, Tr ng i h cC n Th và c nuôi trong bình nh a trong su t ch a 20 L n c bi n ã quax lý, l ng, l c T o c cung c p d ng ch t b ng các dung d ch c a môitr ng Walne.
3.2.5.2 Luân trùng
Luân trùng (Brachionus rotudiformis) gi ng c v n chuy n v t KhoaTh y s n, Tr ng i h c C n Th và c nuôi trong b composite 500 L.Luân trùng c cung c p th c n b ng men bánh mì (0,25 g men bánh mì/1tri u luân trùng cho ngày u tiên và 0,38 g cho t ngày th 2 tr i) và t o
Chlorella (1tri u t bào/mL) Luân trùng c thu ho ch vào ngày th 5.
*Phng pháp giàu hóa Luân trùng:
Dùng nc bi n ã x lý có m n 30‰ cho vào xô nh a (ho c thùng nh acó kích c phù h p) và b trí s c khí m nh B trí luân trùng vào v i m t kho ng 2000 cá th /mL, sau ó cho DHA plus ã l c qua v t Z1 vào v i n ng
500 ppm Th i gian giàu hóa cho luân trùng là 5 gi Sau khi giàu hóaxong, cho c luân trùng và dung d ch giàu hóa vào bng cung c p cho
u trùng cua.
3.2.5.3 Artemia sinh kh i
Tr ng bào xác Artemia c p không t y v v i l ng sao cho m b o m t nuôi c a nauplius kho ng 500 con/L n c b nuôi Nauplius sau khi n 1-2 gi c thu t b p, r a s ch qua n c ng t, sau ó cho vào b nuôi Vi ccho n c ti n hành ngay sau th gi ng b ng th c n t ng h p (Lansy) vàb t u nành v i li u l ng sau cho n c có trong 15 cm Sau 2 tu n nuôi,
Trang 33Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
Artemia s t giai n ti n tr ng thành ho c tr ng thành và ti n hành thuho ch.
Hình 3.1: H th ng b ng u trùng trong thí nghi m 1
N c ng có m n 30‰, c l y t n c bi n ã qua x lý, l ng, l c utrùng c cung c p th c n nh sau:
Giai o n Z1, u Z2 c cho n b ng Luân trùng (Brachionus rotudiformis)
ã c giàu hóa DHA plus (10 - 20 cá th /mL) T o Chlorella c b sungvào b ng v i m t kho ng 10.000 t bào/mL cho giai o n này.
Giai o n Z2 cho n Artemia bung dù v i m t 10-15 cá th /mL và ng ng
cung c p t o Chlorella.
Giai o n Z3 và u Z4 cho n nauplius Artemia v i m t 5-10 cá th /mL.
Giai o n cu i Z4 và Z5 cho n Artemia ã c giàu hóa DHA plus (5- 10 cáth /mL).
Trang 34Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
*Phng pháp giàu hóa Artemia:
Dùng nc bi n ã x lý có m n 30 cho vào xô nh a (ho c thùng nh acó kích c phù h p) và b trí s c khí m nh B trí nauplius Artemia (sau khin 8 gi ) vào v i m t kho ng 300 cá th /mL, sau ó cho DHA plus ã càqua v t Z1 vào v i n ng 500ppm Th i gian giàu hóa cho Artemia là 12gi Sau khi giàu hóa xong, cho c Artemia và dung d ch giàu hóa vào b
ng cung c p cho u trùng.
Trong quá trình ng nuôi, các y u t môi tr ng nh : nhi t c ki m trahàng ngày vào lúc 6 gi và 14 gi b ng nhi t k u; pH c ki m tra hàngngày vào lúc 6 gi và 14 gi b ng pH k n t ; t ng m amôn (TAN) co m i tu n m t l n b ng ph ng pháp Indophenol blue; Nitrite c o m itu n m t l n b ng ph ng pháp Griess lossvay, Diazonium Ch s c khíc u ch nh cho phù h p t ng giai n phát tri n c a u trùng Zoea.Siphon, thay n c ( c th c hi n bu i sáng) vào th i m trong b ng có2/3 l ng u trùng chuy n sang giai n k ti p.
Hình 3.2: Theo dõi các y u t môi tr ng n c b ng
Bi n thái c a u trùng c xác nh b ng cách quan sát b ng (dùng c cth y tinh 250 mL thu 3 i m/b và quan sát) Khi ó, ch s giai n pháttri n c a u trùng (LSI) c xác nh b ng công th c sau:
LSI =∑(S l ng u trùng giai n ni x ni) / s l ng u trùng m u thu
Trong ó: i = 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 (t ng ng cho giai o n Z1, Z2, Z3, Z4, Z5,Megalopa, C1).
ng tr ng c a u trùng c xác nh b ng cách thu m u 5 u trùng/b vàoth i m u trùng ã chuy n giai n hoàn toàn và o d i kính lúp n (cótr c vi th kính) T l s ng c a u trùng m i giai n (sau khi chuy n giaio n hoàn toàn) c xác nh b ng cách thu và m s u trùng trong 1 L
c ng, l p l i 3 l n cho m i b
Trang 35Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
3.3.2 Thí nghi m 2:ng nuôiu trùng Zoea-5n Cua-1 v i các m t khác nhau
Thí nghi m g m 4 nghi m th c có m t ng khác nhau là 10, 30, 50, 70 utrùng /L c b trí ng u nhiên v i 4 l n l p l i cho m i nghi m th c.
Hình 3.3: B trí thí nghi m 2
u trùng Z5 c thu t k t qu c a thí nghi m 1 c b trí chung trong b4m3, sau ó b trí l i b ch a 50 L c có m n 30‰ u trùng c qu nlý, ch m sóc nh sau:
Giai o n Z5 c cho n Artemia ã c giàu hóa DHA plus (5- 10 cáth /mL) Khi u trùng b t u chuy n sang giai n Megalopa, b ng cb trí giá th là chùm nylon v i m t 3 chùm/b Trong 4 ngày u c a giaio n Megalopa, u trùng c cho n Artemia ã c giàu hóa DHA plus (5- 10 cá th /mL) ng th i b sung Artemia sinh kh i vào b ng v i m t
c duy trì là 20 - 25 cá th /L Khi u trùng Megalopa phát tri n c 5
ngày, thay th c n là Artemia ã c giàu hóa DHA plus b ng th c n t ngh p V8-Larvae No3 v i li u ng 0,1g cho b ch a 50 L n c ng.
Trang 36Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứuHình 3.4: o chi u r ng mai cua (OCW) d i kính lúp n có tr c vi th kínhTrong giai o n Megalopa, m n c gi m xu ng và duy trì m c 26-27‰ Giá th là i th a c b sung khi trong b ng xu t hi n C1 Môitr ng n c và u trùng c theo dõi nh thí nghi m 1, riêng i v i giaio n C1, t l s ng c xác nh sau khi thu toàn b Siphon, thay n c khitoàn b u trùng chuy n sang giai n Megalopa.
3.3.3 Thí nghi m 3:ng nuôi u trùng cua bi n v i quy mô b l n3.3.3.1ng u trùng giai o n Zoea-1n Zoea-5
Thí nghi m c th c hi n sau khi có c k t qu t thí nghi m 1 u trùngc ng trong b composite hình chóp có th tích 500 L, ch a 400 L n cng và c l p l i 4 l n v i m t t i u t k t qu c a thí nghi m 1 Môitr ng n c và u trùng c theo dõi và qu n lý nh thí nghi m 1.
Hình 3.5: ng u trùng giai o n Zoea-1 n Zoea-5 v i quy mô b l nBi n thái c a u trùng c xác nh gi ng nh thí nghi m 1 ng tr ngc a u trùng c xác nh b ng cách thu m u 50 u trùng/b vào th i mu trùng ã chuy n giai n hoàn toàn và o d i kính lúp n (có tr c vi thkính) T l s ng c a u trùng m i giai n (sau khi chuy n giai n hoàn
Trang 37Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứutoàn) c xác nh b ng cách thu và m s u trùng trong 10 L n c ng,l p l i 3 l n cho m i b
3.3.3.2ng u trùng giai o n Zoea-5n Cua-1
Thí nghi m c th c hi n sau khi có c k t qu t thí nghi m 2 u trùngc ng trong b composite có th tích 4000 L, ch a 2500 L n c và cl p l i 4 l n v i m t t i u t k t qu c a thí nghi m 2 Môi tr ng n c và
u trùng c theo dõi và qu n lý nh thí nghi m 2.
Hình 3.6: ng u trùng giai o n Zoea-5 n Cua-1 v i quy mô b l nBi n thái c a u trùng c xác nh gi ng nh thí nghi m 2 T ng tr ngc a u trùng c xác nh b ng cách thu m u 50 u trùng/b , quan sát và oi kính hi n vi T l s ng c a u trùng giai n Megalopa c xácnh b ng cách thu và m s u trùng trong 50 L n c ng, l p l i 3 l n chom i b Giai n C1, t l s ng c xác nh sau khi thu toàn b
3.4 Phng pháp x lý s li u
S li u c x lý th ng kê b ng ph n m m SPSS 15.0 v i m c ý ngh aP<0,05.
Trang 38Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứu
B ng 4.1: Bi n ng m t s y u t môi tr ng n c trong th i gian thí nghi mM t
( utrùng/L)
Th ii m theo
Nhi t
(oC) pH
TAN(mg/L)Sáng 28,73± 0,457,64±0,090,38±0,122,82±0,85100
Chi u 30,07±0,258,17±0,07
Sáng 28,70±0,447,64±0,100,32±0,112,28±0,48200
Chi u 30,07±0,258,18±0,07
Sáng 28,71±0,447,61±0,090,59±0,113,18±0,69300
Chi u 30,09±0,288,21±0,07
Sáng 28,71±0,447,62±0,090,64±0,123,25±0,66400
Chi u 30,09±0,288,21±0,07
pH bu i sáng các nghi m th c dao ng t 7,61- 7,64 và pH bu i chi u daong t 8,17 n 8,21 Nhìn chung giá tr pH các nghi m th c trong thínghi m này khác nhau không nhi u Theo Hoàng c t (2004) thì pH thíchh p cho ng nuôi u trùng cua bi n là 7,5 n 8,5 Nh v y pH n c b ng
Trang 39Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứutrong quá trình thí nghi m r t phù h p cho sinh tr ng và phát tri n c a utrùng.
V i m t ng 200 con/L thì có hàm l ng nitrite và TAN th p n cácnghi m th c còn l i Có th m t ng 200 con/L u trùng s d ng th cn tri t ; m t 100 con/L u trùng s d ng th c n không h t nên phátsinh nhi u nitrite và TAN; còn m t 300 con/L và 400 con/L, nitrite vàTAN c t o ra nhi u do ch t th i t s l ng u trùng nhi u h n.
c tính c a NH3 i v i m t s loài giáp xác ã c nghiên c u: n ng0,09 mg/L NH3 làm gi m s sinh tr ng c a tôm càng xanh (Macrobrachium
rosenbergii); n ng 0,45 mg/L làm gi m 50% s sinh tr ng c a các loàitôm he Ngoài ra, LC50-24 gi và LC50-96 gi c a NH3 i v i tôm sú
(Penaeus monodon) h u u trùng là 5,71 mg/L và 1,26 mg/L (Chin và Chen,
1987 Trích d n b i Tr ng Qu c Phú, 2005).
Luke L Neil và ctv (2005) th c hi n thí nghi m v c c p tính và mãntính c a NH3lên u trùng cua bi n Scylla sarata cho th y LC50-24 gi c aNH3 i v i u trùng giai o n Z1 là 4,05 mg/L và i v i u trùng giai o nZ5 là 6,64 mg/L ng th i k t qu cho th y NH3 không nh h ng n sphát tri n c a u trùng cua.
Mary Lynn Seneriches-Abiera và ctv (2007) thí nghi m v c c p tính
c a nitrite lên u trùng cua S serrata cho th y u trùng càng l n thì kh n ng
ch u ng v i t nitrite càng cao, c th là LC50-96 gi c a nitrite i v iu trùng Z1 là 41,58 mg/L; Z2 là 63,04 mg/L; Z3 là 25,54 mg/L; Z4 là 29,98mg/L; Z5 là 69,93 mg/L.
D a trên k t qu LC50-96 gi và h s 0.1 xác nh n ng an toàn cho ngu trùng là 4,16 mg/L i v i u trùng Z1; 6,30 mg/L i v i u trùng Z2;2,55 mg/L i v i u trùng Z3; 2,99 mg/L i v i u trùng Z4 và 6.99 mg/L
i v i Z5.
Trong thí nghi m c a tài này, hàm l ng NH3 c tính toán d a theo giátr pH và TAN o c) u cao h n m c khuy n cáo và có th ã gây nhng b t l i n u trùng nh t là các nghi m th c có hàm l ng TAN cao.Trong khi ó hàm l ng nitrite các nghi m th c u n m trong kho ng antoàn theo nh khuy n cáo Nhìn chung, các y u t môi tr ng trong thínghi m này t ng i thích h p cho ng nuôi u trùng cua bi n.
4.1.2 Bi n thái c a u trùng
Trang 40Trung tâm Học liệu ĐH Cần Thơ @ Tài liệu học tập và nghiên cứuth c u chuy n sang giai n Z5, tuy nhiên nghi m th c 1 và 2, u trùngchuy n giai n ng lo t và s m h n các nghi m th c còn l i có th là do utrùng c ng m t v a ph i thì u trùng s d ng th c n t t h n vài u ki n môi tr ng s ng thu n l i h n nghi m th c 4, vào ngày ng th5, 9, 12 u trùng trong b ng t n t i c 3 giai n và có th ây là nguyênnhân d n n kích th c u trùng và t l s ng nghi m th c này (không tb ng) th p h n so v i các nghi m th c còn l i.
Nghi m th c 1 (100 u trùng/L)
123456789 10 11 12 13 14 15Ngày ng
Nghi m th c 2 (200 u trùng/L)
1 2345678910 11 12 13 14 15Ngày ng
Nghi m th c 3 (300 u trùng/L)
123456789 10 11 12 13 14 15Ngày ng
Nghi m th c 4 (400 u trùng/L)
123456789 10 11 12 13 14 15Ngày ng
Hình 4.1: Th i gian bi n thái các giai n u trùng t Zoea-1 n Zoea-5Ch s bi n thái c a u trùng (LSI) các nghi m th c g n nh ng ngnhau qua các l n thu m u u này cho th y, các m t khác nhau t 100n 400 u trùng/L khi ng t Z1 n Z5 ch a nh h ng l n n s bi nthái c a u trùng (B ng 4.2).