phương pháp phân tích đạm amin, đạm thối

phương pháp phân tích đạm amin- đạm thối; các phương pháp xác định đạm amin: xác định đạm amin bằng phương pháp chuẩn độ Formol; xác định đạm amin bằng phương pháp Pope- stevens; xác định đạm amin bằng phương pháp chuẩn độ bằng pH kế; các phương pháp xác định đạm thối: xác định đạm thối bằng phương pháp Nesler; xác định đạm thối bằng phương pháp Kjedahl; xác định đạm amin là xác định gì; xác định đạm thối là xác định gì

BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM KHOA CƠNG NGHỆ HĨA HỌC Mơn học: KIỂM TRA CHẤT LƯỢNG LƯƠNG THỰC THỰC PHẨM VÀ AN TOÀN VỆ SINH THỰC PHẨM Chủ đề PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH ĐẠM AMIN - ĐẠM THỐI NỘI DUNG CHÍNH Đạm amin – Phương pháp xác định 01 - Phương pháp chuẩn độ Formol - Phương pháp Pope – Stevens - Phương pháp Sorensen - Phương pháp chuẩn độ pH kế Đạm thối – Phương pháp xác định 02 - Phương pháp Nessler - Phương pháp Kjedahl Đạm amin (Đạm formol)- Phương pháp xác định Xác định hàm lượng nitơ formol xác định hàm lượng tổng số acid amin muối amoni có thực phẩm Trong thực thế, lượng muối amoni ít, nên xem xác định niơ formol chủ yếu xác định acid amin Nguyên tắc:   Các acid amin nước trung tính, phân tử acid amin 1.1 Phương pháp chuẩn độ Formol có chứa nhóm amin nhóm cacboxyl Khi acid amin gặp formol tạo thành nhóm –N=CH2 (metylenic) làm cho tính acid nhóm –COOH tăng lên Có thể định lượng nhóm –COOH dung dịch kiềm chuẩn thị Các phản ứng xảy Phản ứng chuẩn độ kiềm   + 4NH4Cl + 6CH2Khi O (CH 12H2O + 4H có mặt 2)6Ncủa + formaldehyde + Chuẩn lượng H sinh từ phản ứng NaOH dùng thị phenolphalein Để phản ứng xảy hồn tồn pH nằm khoảng ÷ 9,5 Hóa chất & Dụng cụ Formol trung tính Dung dịch Ba(OH)2 Dung dịch Na2HPO4 0,1N Dung dịch phenolphthalein 1% bão hòa Dung dịch Tashiro Alirazin natri BaCl2 khan sunfonat (C14H7NaO7S) Quy trình xác định Xử lý mẫu   Cân xác P (g)/ V (mL) chất thử xay nhuyễn cho vào bình định mức 100mL + 50mL nước cất Lắc Thêm 5mL Ba(OH)2 để kết tủa muối phosphate carbonate mạnh 10 phút Cho nước cất vừa đủ, lắc lọc Thêm 0,5mL dung dịch PP + khoảng 2g BaCl2 + giọt Ba(OH)2 có màu hồng nhạt Tiến hành Hút 20mL dung dịch xác định cho vào bình Xác định lại nồng độ NaOH H2C2O4 0,1N với thị phenolphtalein tam giác 250mL Thêm 20mL dung dịch formol trung tính Chuẩn độ NaOH 0,2N màu đỏ tươi Tính tốn kết  - Đối với mẫu rắn: - Đối với mẫu lỏng: Trong : 0,0028 số gam tương ứng với 1mL NaOH 0,2N n số mL NaOH 0,2N sử dụng m,V số gam hay số mL mẫu thử Hệ thống chưng cất Kjeldahl Thiết bị Quy trình tiến hành Cân khoảng 10g mẫu vào becher sau chuyển vào cối sứ nhỏ Tráng cốc 5mL nước cất, thêm tiếp khoảng 20mL nước cất vào cối sứ Dùng chày sứ nghiền mẫu cối sứ khoảng phút, gạn phần dịch mẫu vào cốc 250mL Sau chuyển phần nước phần bã vào cốc 250mL tiến hành lọc gạn qua giấy lọc băng vàng Chuẩn bị mẫu Quy trình tiến hành Đưa toàn phần dung dịch qua lọc vào bình chưng cất, dùng nước cất lần trung tính để tráng rửa Ở bình hướng dịch có chứa sẵn 20mL H2C2O4 0,1N + giọt thị Tashiro Chuẩn bị mẫu Cho 25mL NaOH 2N qua phễu, sau xả từ từ cịn 1mL, thêm 5mL nước cất, xả Tiến hành cất thu dịch cất – mL khóa lại khoảng 100mL (thử hết NH3) dùng nước để rửa cuống phễu Chuẩn lượng acid dư sau hấp thụ dung dịch cất dung dịch NaOH 0,1N đến dung dịch từ màu tím hồng chuyển sang màu xanh lơ Ghi nhận VNaOH Quy trình tiến hành   Nồng độ (g/l) đạm thối mẫu thực phẩm tính theo cơng thức: Trong đó: V1: thể tích H2C2O4 0,1N cho vào bình hứng (mL) Tính tốn kết V2: thể tích dung dịch NaOH 0,1N tiêu tốn chuẩn độ (mL) N: đương lượng dung dịch NaOH 0,1N F: hệ số điều chỉnh dung dịch NaOH V: thể tích mẫu (mL) Nguyên tắc: Đẩytácamoniac thể MgO, cấtkiềm kéocho nước vàcóđịnh Amoniac dụng với thuốc thử tự Nessler môi trường sản phẩm màu lượng vàng Đo độ 2.2 Phương pháp Nessler amoniac với thuốc thử Kali Mercuri – Iodua (thuốc thử Nessler), so màu hấp thu dung dịch phản ứng xảy sau 10 phút λ = 430nm vàng hình thành với thang mẫu quang sắc kế Cường độ màu phụ 2K HgI + NH3 + 3KOH  (NH2)Hg-O-HgI + 7KI + 2H2O thuộc vào lượng NH23 có4trong mẫu ( màu vàng ) Phương pháp Nessler áp dụng cho mẫu có nồng độ N-NH3 (Ammonia-nitrogen) nhỏ 20µg/L Điều kiện xác định Để đảm bảo phương pháp so màu xác cần phải tránh: − − − Sự phân hủy dễ dàng phức chất “amoniac + kali mercuri – iodua” ( K 2HgI4) Sự kết tủa phức chất lượng amoniac thừa Sự vón cục kết tủa lắc mạnh Do cần phải tiến hành định lượng mơi trường kiềm có muối kép natri kali tactrat (C 4H4KNaO6) Dung dịch amoniac clorua tiêu Nước cất (4) chuẩn (1) Dung dịch muối natri kali tactrat Hàm lượng nitơ ống (µg) (5) kiềm (2) Thuốc thử Nessler (3) Hàm lượng NH3 ống (µg) (6) Hóa chất Dung dịch amoniac clorua tiêu chuẩn (1) Hòa tan 3,82g NH4Cl nguyên chất 1mL dung dịch vào 1000mL nước cất chứa 10µg nitơ amoniac Hóa chất Dung dịch muối natri kali tactrat kiềm (2) Hóa chất Hịa tan muối kép Để n ngày, natri kali tactrat vào lúc có cặn đáy nước cất, cho thêm chai , sử dụng hút NaOH KOH nước mặt Thuốc thử Nessler (3) Hòa tan khoảng 45,5g HgI2 Cho thêm dung Cho nước vừa 35g KI tinh khiết dịch KOH với đủ 1000mL, để vào khoảng 100mL yên khoảng 15mL nước cất hai ngày nước cất Lúc có cặn đáy chai, dùng hút nước bên Thuốc thử giữ năm, bảo quản tránh ánh sáng mặt trời Hóa chất Quy trình tiến hành Cần thiết làm song song mẫu Cho thử vàvào thang thuốc thử, hóa chất, phải khơngthử có amoniac Chuẩn bị thang mẫu: 10mẫu ốngCác nghiệm Nessler lầnnước lượtcất thuốc sau:   - (1)   - (2)   - (3)   - (4)   - (5)   - (6) Số Số Số Số Số Số Số Số Số Số 10 0,5 0,1 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0                     2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0                     2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0                     50,0 50,0 50,0 50,0 50,0 50,0 50,0 50,0 50,0 50,0                     5,0 10,0 15,0 20,0 25,0 30,0 35,0 40,0 45,0 50,0                     6,07 12,14 18,21 24,28 30,36 36,43 42,50 48,56 54,63 60,71     Quy trình tiến hành Cân hút xác mẫu vào bình với lượng MgO cần thiết để tạo môi trường kiềm Cất kéo nước hứng dịch cất vào bình nón có sẵn 10 – 20 mL H2SO4 0,1N Sau hết ammoniac, ngừng cất chuyển dịch sang bình định mức Trung hòa dung dịch NaOH 0,1N 0,05N sau cho nước cất vào định mức tới vạch, lắc Chuẩn bị mẫu thử Quy trình tiến hành Cho vào ống Nessler khác 50mL dịch thử pha, thêm 2mL muối natri kali tactrat kiềm 2mL thuốc thử Nessler Lắc nhẹ để 10 phút so sánh với thang mẫu Chuẩn bị mẫu Thank you for your listening ... Đạm amin – Phương pháp xác định 01 - Phương pháp chuẩn độ Formol - Phương pháp Pope – Stevens - Phương pháp Sorensen - Phương pháp chuẩn độ pH kế Đạm thối – Phương pháp xác định 02 - Phương pháp. .. chuẩn độ pH kế Đạm thối – Phương pháp xác định 02 - Phương pháp Nessler - Phương pháp Kjedahl 1 Đạm amin (Đạm formol)- Phương pháp xác định Xác định hàm lượng nitơ formol xác định hàm lượng tổng... dụng phương pháp phải loại bỏ đồng phosphate dư dung dịch nghiên cứu, làm tăng kết chuẩn độ Ưu điểm phương pháp định lượng nitơ amin acid amin có lượng nhỏ amoniac lượng lớn ure 1.3 Phương pháp