Nghiên cứu một số thành phần hoá học của cây Chạc chìu (tetracera Scandens)

Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== TRƯờng ĐạI HọC SƯ PHạM Hà NộI KHOA HóA HọC     Phùng thị lan anh Nghiên cứu số thành phần hoá học chạc chìu (tetracera scandens) KhóA LUậN TốT NGHIệP ĐạI HọC Chuyên ngành : Hóa hữu Người hướng dẫn khoa học TS Nguyễn tiến đạt ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Hà nội - 2009 Lời cảm ơn Khoá luận hồn thành giúp đỡ tận tình thầy khoa hố học trường đại học Sư phạm hà nội cán viện hoá học hợp chất thiên nhiên, viện khoa học công nghệ việt nam Em xin bày tỏ lòng biết ơn tới TS Phan Văn Kiệm tạo điều kiện giúp đỡ em hồn thành khố luận Với lịng biết ơn sâu sắc em xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Văn Đạt cán phòng xúc tác hữu tận tình hướng dẫn, bảo em trình hồn thành khố luận Em xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Văn Bằng thầy giáo, giáo khoa hố học trường đại học Sư phạm Hà Nội giúp đỡ em thời gian học tập, tu dưỡng trường Dù có nhiều cố gắng khơng thể tránh khỏi thiếu sót, kính mong đóng góp ý kiến q thầy bạn đọc để khố luận em hồn chỉnh Hà Nội, tháng năm 2009 ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Sinh viên Phùng Thị Lan Anh Lời cam đoan Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu khố luận trung thực Các kết không trùng với cơng trình cơng bố Tơi xin chịu trách nhiệm trước lời cam đoan Sinh viên Phùng thị lan anh ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Mục lục Trang Lời cảm ơn Lời cam đoan mục lục Những chữ viết tắt Danh mục hình bảng Mở đầu…………………………………………………………………… Chương 1: tổng quan………………………………………… … … 1.1 Sơ lược họ Sổ Chi tetracera……………………………………… 1.2 Sơ lược Chạc chìu 1.2.1 Giới thiệu chung……………………………………… 1.2.2 Hình thái thực vật phân bố……………………………… 1.2.3 Tác dụng dược lý Chạc chìu………………………………… 1.2.4 Thành phần hố học có Chạc chìu ……………………………… 1.3 Tổng quan lớp chất flavonoid ……………………………… …… 1.3.1 Giới thiệu chung flavonoid ……………………………… 1.3.2 Cấu trúc phân loại ……………………………… Chương 2: Đối tượng phương pháp nghiên cứu……… 10 2.1 Đối tượng nghiên cứu………………………………………………… 10 2.2 Các phương pháp nghiên cứu ………………………………………… 10 2.2.1 Phương pháp chiết ………………………………………………… 10 2.2.2 Các phương pháp sắc kí ……………………………………… 14 ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== 2.2.3 Các phương pháp xác định cấu trúc hợp chất hữu …………… 18 Chương 3: Thực Nghiệm…………… ………………………… 22 3.1 Phương pháp tách chiết…………………… …………………………… 22 3.2 Các phương pháp phổ……………………………… ………………… 22 3.3 Phân lập chất………………………………………………………… 22 3.3.1 Quá trình phân lập chất…………………………………………… 22 3.3.2 Một số thông số vật lý hai hợp chất thu Chạc chìu Chương 4: kết thực nghiệm 25 4.1 Xác định cấu trúc hoá học hai hợp chất thu Chạc chìu 25 Kết luận…………………………………………………………… 36 Tài liệu tham khảo…………………………………………………… 37 ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Những chữ viết tắt I Các nhóm ankyl Ac Nhóm Axetyl Et Etyl Me Metyl Các phương pháp phổ II UV Phổ tử ngoại IR Phổ hồng ngoại NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân H-NMR 13 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton C-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C HSQC Phổ cộng hưởng từ hạt nhân hai chiều HMBC Heteronuclear Multiple Bond Connectivity ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== III HMQC Heteronuclear Multiple Quantum Conherence MS Phổ khối lượng EI – MS Phổ khối lượng bắn phá điện tử ESI – MS Phổ khối lượng phun mù điện tử DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer Các phương pháp tách chất TLC Sắc kí lớp mỏng CC Sắc kí cột HPLC Sắc kí lỏng hiệu cao MPC Sắc kí lỏng hiệu thấp ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Danh mục hình bảng Trang I Danh mục hình: Hình 1.1: Cây Chạc chìu ………………………………………………… Hình 4.1.1: Phổ ESI-MS …………………………………………… 27 Hình 4.1.2: Phổ 1H-NMR 1…………………………………………… 27 Hình 4.1.3: Phổ 13C-NMR 1………………………………………… 28 Hình 4.1.4: Phổ DEPT 1……………………………………………… 28 Hình A: Cấu trúc hố học Quercetin…………………………………… 29 Hình 4.1.5: Phổ ESI-MS ……………………………………………… 32 Hình 4.1.6: Phổ 1H-NMR …………………………………………… 33 Hình 4.1.7: Phổ 13C-NMR …………………………………………… 34 Hình 4.1.8: Phổ DEPT ……………………………………………… 35 Hình B: Cấu trúc hoá học 35 II Danh mục bảng: Bảng 1.2.4a: Năm isoflavone có Chạc chìu……………………… Bảng 4.1: Số liệu phổ 1H 13C-NMR ……………………………… 25 Bảng 4.2: Số liệu phổ 1H 13C-NMR ……………………………… 30-31 ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Mở đầu Thảm thực vật Việt Nam phong phú đa dạng sinh học xếp vào bậc giới Nó cung cấp nguồn dược liệu vô giá trị Trong hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học đóng vai trị quan trọng việc sử dụng làm thuốc chữa bệnh cho người, vật nuôi, thuốc bảo vệ thực vật, chất kích thích, điều hồ sinh trưởng động thực vật làm nguyên liệu cho công nghiệp thực phẩm, mỹ phẩm Theo thống kê gần Việt Nam có khoảng 3800 loài thực vật dùng làm thuốc Cho đến hàng trăm thuốc khoa học y dược đại chứng minh giá trị chữa bệnh chúng Nhiều loại thuốc chiết xuất từ dược liệu Việt Nam Rutin, D Strophantin, berberin, Palmatin, sản phẩm tinh dầu … sử dụng rộng rãi nước xuất Tuy nhiên nguồn tài nguyên thiên nhiên chứa đựng nhiều bí ẩn mục tiêu nghiên cứu nhà khoa học nước Ngày nước, nước phát triển, với tốc độ nghiên cứu ạt cộng với hỗ trợ khoa học kĩ thuật phát triển, nước lâm vào tình trạng kiệt quệ tài nguyên thiên nhiên có xu hướng tập trung nghiên cứu khám phá tài ngun thiên nhiên nước nghèo Chính nghiên cứu khai thác nguồn tài nguyên thực vật nước kho dược liệu khổng lồ chờ khám phá vấn đề cấp bách không nước ta Với phong phú đa dạng sinh học, tài nguyên thực vật nước ta hứa hẹn nơi phát triển nhiều hợp chất chứa hoạt tính quý báu giúp ích cho yêu cầu loại thuốc mới, hiệu đặc hiệu điều trị bệnh hiểm nghèo ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 10 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== 3’’ 78.20 d 78.16 d 3.44 4’’ 71.42 d 71.37 d 3.28 5’’ 77.25 d 77.15 d 3.50 6’’ 68.56 t 68.55 t 3.42 3.83(d, 10.5) 6-Rha 1’’’ 102.42 d 102.38 d 4.54 (s) 2’’’ 72.12 d 72.06 d 3.67 (s) 3’’’ 72.26 d 72.24 d 3.55 4’’’ 73.94 d 73.93 d 3.32 5’’’ 69.71 d 69.68 d 3.48 6’’’ 17.87 q 17.85 q 1.15 (d, 6.5) a Số liệu từ tài liệu tham khảo Kazuma 2003 ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 45 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Hình 4.1.5 Phổ ESI-MS ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 46 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Hình 4.1.6 Phổ 1H-NMR ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 47 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khố luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Hình 4.1.7 Phổ 13C-NMR ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 48 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khố luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Hình 4.1.8 Phổ DEPT So sánh với tài liệu tham khảo, số liệu phổ NMR hoàn toàn trùng khớp với số liệu hợp chất Rutin, flavonoid glycosid phân lập từ Clitoria ternaea [Kazuma 2003] Hình B Cấu trúc hố học Rutin ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 49 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== OH 3' 2' HO 4' 5' O 1' 6' OH 10 OH O HO O 2'' 1'' OH O OH 6'' O 5''' 1''' 6''' O OH 2''' OH OH ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 50 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== KẾT LUẬN Cây Chạc chìu thuốc q sử dụng từ lâu y học cổ truyền Việt Nam Tuy nhiên Việt Nam lại chưa có cơng trình nghiên cứu thành phần hoá học Luận văn bước đầu nghiên cứu thành phần hóa học Chạc chìu thu hái Tam Đảo, Vĩnh Phúc Từ dịch chiết methanol Chạc chìu, phương pháp sắc ký tách hợp chất thuộc lớp flavonoid Bằng cách sử dụng phương pháp phổ đại gồm ESI-MS 1D NMR, cấu trúc hợp chất xác định flavonol quercetin (1) flavonol flycosit rutin (2) ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 51 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Phạm Hoàng Hộ Cây cỏ Việt nam, 1, Nhà xuất trẻ, 1999 Đỗ Huy Bích cộng Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, trang 634, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, 2004 Đỗ Tất Lợi Những thuốc vị thuốc Việt nam, Nhà xuất Y học, 1999 Võ Văn Chi Từ điển thuốc Việt nam, Nhà xuất Y học, 1997 Tiếng Anh Agrawal PK Carbon-13 NMR of flavonoids Elsevier Science Publisher, Netherlands (1989) Kazuma K, Noda N and Suzuki M Malonylated flavonol glycosides from the petals of Clitoria ternaea, Phytochemistry, vol 62, 229-237 (2003) ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 52 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Lee MS, Kim CH, Hoang DM, Kim BY, Sohn CB, Kim MR, Ahn JS Genistein-derivatives from Tetracera scandens stimulate glucose-uptake in L6 myotubes Biol Pharm Bull 32(3):504-8 (2009) Nguyen MT, Awale S, Tezuka Y, Tran QL, Watanabe H, Kadota S Xanthine oxidase inhibitory activity of Vietnamese medicinal plants Biol Pharm Bull 27(9):1414-21 (2004) Watson L, Dallwitz MJ Dilleniaceae The families of flowering plants: descriptions, illustrations, identification, information retrieval Version: May 2006 http://delta-intkey.com ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 53 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Những chữ viết tắt I Các nhóm ankyl Ac Nhóm Axetyl Et Etyl Me Metyl II Các phương pháp phổ UV Phổ tử ngoại IR Phổ hồng ngoại NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton H-NMR 13 C-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C HSQC Phổ cộng hưởng từ hạt nhân hai chiều HMBC Heteronuclear Multiple Bond Connectivity ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 54 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== HMQC Heteronuclear Multiple Quantum Conherence MS Phổ khối lượng EI – MS Phổ khối lượng bắn phá điện tử ESI – MS Phổ khối lượng phun mù điện tử DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer III Các phương pháp tách chất TLC Sắc kí lớp mỏng CC Sắc kí cột HPLC Sắc kí lỏng hiệu cao MPC Sắc kí lỏng hiệu thấp ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 55 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Mục lục Trang Lời cảm ơn Lời cam đoan mục lục Những chữ viết tắt Danh mục hình bảng Mở đầu…………………………………………………………………… Chương 1: tổng quan………………………………………… … … 1.1 Sơ lược họ Sổ Chi tetracera……………………………………… 1.2 Sơ lược Chạc chìu 1.2.1 Giới thiệu chung……………………………………… 1.2.2 Hình thái thực vật phân bố……………………………… 1.2.3 Tác dụng dược lý Chạc chìu………………………………… 1.2.4 Thành phần hố học có Chạc chìu ……………………………… 1.3 Tổng quan lớp chất flavonoid ……………………………… …… 1.3.1 Giới thiệu chung flavonoid ……………………………… 1.3.2 Cấu trúc phân loại ……………………………… Chương 2: Đối tượng phương pháp nghiên cứu……… 10 ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 56 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== 2.1 Đối tượng nghiên cứu………………………………………………… 10 2.2 Các phương pháp nghiên cứu ………………………………………… 10 2.2.1 Phương pháp chiết ………………………………………………… 10 2.2.2 Các phương pháp sắc kí ……………………………………… 14 2.2.3 Các phương pháp xác định cấu trúc hợp chất hữu …………… 18 Chương 3: Thực Nghiệm…………… ………………………… 22 3.1 Phương pháp tách chiết…………………… …………………………… 22 3.2 Các phương pháp phổ……………………………… ………………… 22 3.3 Phân lập chất………………………………………………………… 22 3.3.1 Quá trình phân lập chất…………………………………………… 22 3.3.2 Một số thông số vật lý hai hợp chất thu Chạc chìu 23 Chương 4: kết thực nghiệm 25 4.1 Xác định cấu trúc hoá học hai hợp chất thu Chạc chìu 25 Kết luận…………………………………………………………… 36 Tài liệu tham khảo…………………………………………………… 37 ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 57 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Danh mục hình bảng Trang II Danh mục hình: Hình 1.1: Cây Chạc chìu ………………………………………………… Hình 4.1.1: Phổ ESI-MS …………………………………………… 27 Hình 4.1.2: Phổ 1H-NMR 1…………………………………………… 27 Hình 4.1.3: Phổ 13C-NMR 1………………………………………… 28 Hình 4.1.4: Phổ DEPT 1……………………………………………… 28 Hình A: Cấu trúc hố học Quercetin…………………………………… 29 Hình 4.1.5: Phổ ESI-MS ……………………………………………… 32 Hình 4.1.6: Phổ 1H-NMR …………………………………………… 33 Hình 4.1.7: Phổ 13C-NMR …………………………………………… 34 Hình 4.1.8: Phổ DEPT ……………………………………………… 35 Hình B: Cấu trúc hố học 35 II Danh mục bảng: Bảng 1.2.4a: Năm isoflavone có Chạc chìu……………………… ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 58 Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp ====================================================================================================== Bảng 4.1: Số liệu phổ 1H 13C-NMR ……………………………… 25 Bảng 4.2: Số liệu phổ 1H 13C-NMR ………………………………… 3031 ====================================================================================================== Phùng Thị Lan Anh K31A - Hoá 59 ... tượng nghiên cứu cho đề tài là: ? ?Nghiên cứu số thành phần hoá học Chạc chìu (tetracera scandens (L.) Merr)’’ Nội dung chủ yếu khóa luận gồm: Nghiên cứu tách chiết chất từ Chạc chìu Nghiên cứu xác... thuốc q sử dụng từ lâu y học cổ truyền Việt Nam Tuy nhiên Việt Nam lại chưa có cơng trình nghiên cứu thành phần hoá học Luận văn bước đầu nghiên cứu thành phần hóa học Chạc chìu thu hái Tam Đảo,... tồn nguồn tài nguyên nước tập trung nghiên cứu thành phần hố học Chạc chìu thuốc sử dụng rộng rãi dân gian, góp phần đại hoá y học cổ truyền nước ta Cây Chạc chìu thuốc quý, sử dụng rộng rãi dân