Bài báo này là công bố đầu tiên về nghiên cứu tác nhân gây bệnh héo vàng trên đinh lăng ở Việt Nam. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm chi tiết nội dung nghiên cứu.
Kết nghiên cứu Khoa học BVTV – Số 3/2019 NGHIÊN CỨU TÁC NHÂN GÂY BỆNH HÉO VÀNG TRÊN CÂY ĐINH LĂNG (Polyscia fruticosa (L.) Harms.) Study on the Pathogen Causing Yellow Wilt on Ming Aralia (Polyscia fruticosa (L.) Harms.) 1 Đặng Thị Hà , Chu Thị Mỹ , Tạ Thị Huyền Anh , Lê Thị Thu , 1* Hoàng Diệu Linh Phan Thúy Hiền Ngày nhận bài: 11.05.2019 Ngày chấp nhận: 04.06.2019 Abstract Ming Aralia, Polyscias fruticosa (L.) Harms (Araliaceae), orginate from Polynesia Island, and they are popular same as medicinal plant in Viet Nam Between March and August 2018, fifteen Ming Aralia samples with yellow wilt symtoms were collected in Ha Noi, Hoa Binh, Nam Dinh and Thai Binh provinces in Viet Nam Plant pathogens were isolated, purified and identified down to its species, based on taxonomic keys The pathogen Fusarium oxysporum was consistently isolated from the disease samples on Ming aralia When this pathogen was isolated on CLA and PDA media, microconidia are usually formed abundantly in false – head on short monophialades on hyphae, and oblong to ellipsoid, oval or reniform The macroconiadia are short to medium in leghth, falcate to almost straight, thin walled and usually septate Chlamydospores appear after isolating from 14 to 20 days on the surface of the agar of the CLA plate The identification was confirmed by pathogenicity test ’ following Koch s postulate The optimum conditions for the development of F.oxysporum causing yellow wilt o o diseases are 25 C đến 30 C and pH This is the first report about F.oxysporum in Ming aralia in Viet Nam Keywords: Ming aralia, yellow wilt disease * ĐẶT VẤN ĐỀ Đinh lăng có tên khoa học Polyscia fruticosa (L.) Harms có nguồn gốc từ đảo Polynesia Thái Bình Dương Đinh lăng ưa điều kiện ẩm trung bình khoảng nhiệt độ từ 16-29⁰C (Yen Knoll, 1991) Việt Nam đinh lăng trồng phổ biến toàn quốc, Miền Bắc đinh lăng trồng nhiều tỉnh Nam Định, Thái Bình, Hòa Bình… Do tác dụng y học đinh lăng Theo y học cổ truyền toàn đinh lăng bao gồm rễ, thân, sử dụng làm thuốc có tác dụng thơng huyết mạch, bồi bổ khí huyết, chống dị ứng, ho máu Đinh lăng ngày trồng với diện tích lớn nên bệnh đinh lăng quan tâm nhiều (Đỗ Huy Bích cộng sự, 2004) Trên giới bệnh đinh lăng quan tâm nghiên cứu từ lâu công bố thành phần sâu bệnh hại công bố chưa nhiều Bệnh đốm vi khuẩn vi khuẩn Pseudomonas cichorii Trung tâm nghiên cứu trồng chế biến thuốc Hà Nội - Viện Dược Liệu Học Viện Nông nghiệp Việt Nam * Corresponding author: phanthuyhien@yahoo.com công bố gây hại đinh lăng từ sớm bang Floria, Mỹ chưa có ghi nhận thêm tác hại bệnh thiệt hại kinh tế bệnh gây vùng (Chase Brunk, 1984) Sự xuất bệnh đốm Alternaria nấm Alternaria panax quan sát lần vùng trồng đinh lăng đảo Ogasawara (Bonin), Nhật Bản (Ono, 2004) Nấm Fusarium oxysporum nghi nhận tác nhân bệnh héo vàng lồi Polyscias balfouriana thuộc chi đinh lăng trồng phổ biến Ấn Độ (Dissanayake Kumari, 2012) Việt Nam, năm gần đinh lăng bắt đầu quan tâm mở rộng trồng với diện tích lớn khắp nước chưa có cơng bố thức thành phần bệnh hại đinh lăng Những năm gần phản ánh người sản xuất, đinh lăng xuất bệnh có triệu chứng héo vàng làm ảnh hưởng nghiêm trọng đến sinh trưởng đinh lăng số vùng Ninh Bình, Thái Bình… chưa có cơng bố tác nhân gây bệnh Bài báo công bố nghiên cứu tác nhân gây bệnh héo vàng đinh lăng Việt Nam 21 Kết nghiên cứu Khoa học VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu, thời gian địa điểm nghiên cứu - Các mẫu bệnh héo vàng đinh lăng thu thập vùng trồng đinh lăng Hà Nội, Ninh Bình, Nam Định Thái Bình năm 2018 - Các vật liệu khác sử dụng nghiên cứu bao gồm: nguyên liệu sử dụng môi trường phân lập, làm nuôi cấy tác nhân gây bệnh [koai tây - đường - agar (PDA), môi trường PDA phần tư độ mạnh có bổ sung kháng sinh (mPDA), thạch - nước cất (WA), môi trường cẩm chướng CLA nguyên liệu sử dụng cho môi trường nhân sinh khối nấm F oxysporum (Burgess cộng sự, 2008) - Các trang thiết bị dụng cụ: Tủ sấy dụng cụ, buồng cấy, nồi hấp, tủ định ôn, dụng cụ nuôi cấy nấm, máy đo pH - Nghiên cứu thực từ tháng đến tháng 12 năm 2018 Trung Tâm Nghiên cứu trồng chế thuốc Hà Nội 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp lấy mẫu Các mẫu bệnh đinh lăng có triệu chứng héo vàng thu thập vùng trồng đinh lăng Hà Nội, Ninh Bình, Nam Định Thái Bình năm 2018 2.2.2 Phương pháp phân lập Mẫu bệnh đinh lăng có triệu chứng héo vàng điển hình sau thu thập từ đồng ruộng loại bỏ thần rửa vòi nước Cắt phận gốc thân củ bị bệnh thành miếng nhỏ cho miếng cắt nằm ranh giới mô bệnh mô khỏe Khử trùng miếng cắt ethanol 70% giây, sau rửa nước cất vô trùng, dùng dao cấy khử trùng cắt vết bệnh thành miếng nhỏ x mm cấy lên môi trường mPDA Khi nấm phát triển với kích thước đường kính tản nấm 1- cm, cấy truyền sang mơi trng WA Nấm làm cách cấy đỉnh sinh trưởng sợi nấm từ môi trường WA sang môi trường PDA CLA ni cấy phòng thí nghiệm o điều kiện 25 C với 12h chiếu sáng xen kẽ 12 h tối (Burgess cộng sự, 2008) 2.2.3 Phương pháp giám định Sau ngày nuôi cấy, nấm giám định dựa vào hình thái quan sát kính hiển vi quang học (Banett Hunter, 1998) Các mẫu nấm giám định dựa vào khóa giám định Leslie cộng (2006) 22 BVTV – Số 3/2019 2.2.4 Phương pháp lây b nh nhân tạo Phương pháp lây bệnh qua đất tiến hành theo Burgess cộng (2008) Cây đinh lăng sử dụng cho thí nghiệm năm tuổi khỏe mạnh, khơng có biểu bị bệnh trồng chậu thí nghiệm chứa giá thể đất khử trùng 15 đinh lăng khỏe mạnh sử dụng cho lần nhắc lại thí nghiệm lây bệnh Nguồn nấm lây bệnh nhân sinh khối giá thể hạt kê - trấu phòng thí nghiệm Trộn hạt kê vỏ trấu theo tỷ lệ 1: thể tích ngâm nước để qua đêm tủ lạnh, sau chắt bỏ phần nước Cho 150ml hỗn hợp giá thể vào bình tam giác dung tích 250ml, nút chặt hấp khử trùng Để bình nguội, sau cấy miếng thạch có sợi nấm vào giá thể bình tam giác Lắc bình tam giác 2-3 ngày sau cấy để đảm bảo nguồn bệnh phân bố giá thể Nấm nhân ni bình tam giác 15 ngày, lấy trộn với đất xung quanh gốc cần lây bệnh (mật độ bào tử nấm 10 cfu/1ml hỗn hợp giá thể) Theo dõi trình hình thành, phát triển triệu chứng lây bệnh hàng ngày Mẫu bệnh có triệu chứng điển hình từ thí nghiệm lây bệnh tái phân lập theo quy tắc Koch Thời điểm lây bệnh nhân tạo: tháng năm 2018 Chỉ tiêu theo dõi: Thời gian từ lây bệnh đến xuất triệu chứng, thời gian từ lây bệnh đến chết, tỷ lệ nhiễm bệnh, khả phục hồi 2.2.5 Nghiên cứu ảnh hưởng củ nhi t độ pH đến phát triển củ tản nấm Chọn mẫu nấm làm thuần, cắt tản nấm thành miếng cấy tròn có đường kính 5mm, cấy môi trường PDA, công thức lặp lại lần Đối với thí nghiệm ảnh hưởng nhiệt độ mẫu nấm nuôi cấy tủ định ôn điều kiện nhiệt độ 20, 25, 30 o 35 C Đối với thí nghiệm ảnh hưởng pH, nấm nuôi cấy môi trường PDA có điều chỉnh pH mức 4,5,6, điều kiện nhiệt độ o 25 C Các công thức thí nghiệm nhiệt độ pH nhắc lại lần, lần đĩa petri có đường kính cm Chỉ tiêu theo dõi: Đường kính tản nấm sau cấy 24 giờ, 48 giờ, 72 giờ, … KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Phân lập nấm gây bệnh héo vàng đinh lăng Mười năm mẫu đinh lăng có triệu chứng héo vàng thu thập Hà Nội, Nam Định, Kết nghiên cứu Khoa học Ninh Bình Thái Bình Hai phận rễ củ thân mạch dẫn có triệu chứng bị thâm nâu BVTV – Số 3/2019 phân lập môi trường mPDA Kết phân lập trình bày bảng hình Bảng Phân lập nấm gây bệnh héo vàng đinh lăng (Trung tâm nghiên cứu trồng chế biến thuốc Hà Nội, năm 2018) STT Ký hiệu mẫu Địa điểm thu thập Ngày thu thập Kết 01 ĐL 01 Thanh Trì - Hà Nội 15/03/2018 + 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 ĐL 02 ĐL 03 ĐL 04 ĐL 05 ĐL 06 ĐL 07 ĐL 08 ĐL 09 ĐL 10 ĐL 11 ĐL 12 ĐL 13 ĐL 14 ĐL 15 Nho Quan- Ninh Bình Hải Hậu, Nam Định Thanh Trì – Hà Nội Nho Quan – Ninh Bình Nho Quan – Ninh Bình Nho Quan – Ninh Bình Thái Hưng – Thái Bình Thái Hưng – Thái Bình Thanh Trì – Hà Nội Thanh Trì – Hà Nội Nho Quan – Ninh Bình Nho Quan – Ninh Bình Hải Hậu – Nam Định Nghĩa Hưng – Nam Định 22/03/2018 22/03/2018 19/03/208 22/03/2018 19/05/2018 19/05/2018 10/04/2018 10/04/2018 19/06/2018 19/06/2018 24/8/2018 24/08/2018 24/08/2018 24/08/2018 + + + + + + + + + - Ghi Cây đinh lăng năm tuổi Cây vườn ươm Cây năm tuổi Cây năm tuổi Cây năm tuổi Cây năm tuổi Cây vườn ươm Cây năm tuổi Cây năm tuổi Cây vườn ươm Cây năm tuổi Cây năm tuổi Cây năm tuổi Cây năm tuổi Cây năm tuổi Ch thích: (+): Các mẫu phân lập nấm Fusarium oxysporum, (-) Mẫu không phân lập nấm Fusarium sp Từ 15 mẫu đinh lăng có triệu chứng héo vàng 66,7 % tỷ lệ mẫu thu có nấm Fusarium sp nấm gây bệnh héo vàng có phổ ký chủ rộng trồng cạn Từ kết phân lập cho thấy toàn mẫu thu thập Ninh Bình xuất nấm Fusarium sp., 50% số mẫu thu thập Hà Nội phân lập nấm Fusarium sp., 75% số a mẫu thu thập Nam Định phân lập nấm Fusarium sp Các mẫu thu thập Thái Bình khơng phân lập nấm Fusarium sp.(Hình hình 2) Bệnh héo vàng nấm Fusarium sp gây bệnh cho đinh lăng giai đoạn vườn ươm ruộng sản xuất đến năm tuổi b c Hình Triệu chứng bệnh héo vàng đinh lăng (a: Tri u chứng bị héo đồng ruộng; b,c: Tri u chứng mạch dẫn đinh lăng bị thâm nâu) 23 Kết nghiên cứu Khoa học BVTV – Số 3/2019 3.2 Đặc điểm hình thái nguồn nấm gây bệnh héo vàng đinh lăng Các chủng nấm phân lập đinh lăng trồng Hòa Bình, Hà Nội Nam Định giám định dựa đặc điểm hình thái nấm cấy môi trường PDA CLA lồi Fusarium oxysporum Lồi có đặc điểm hình thái điển sau: Tản nấm chủng nấm cấy môi trường PDA sau đến ngày có màu từ trắng đến tím nhạt, chủng nấm tạo sắc tố mơi trường từ trắng đến tím Các nguồn nấm sau phân lập tiến hành cấy truyền, nguồn nấm bệnh làm quan sát đặc điểm hình thái màu sắc tản nấm Khi quan sát chủng nấm gây bệnh héo vàng đinh lăng môi trường CLA sau ngày quan sát bào tử nhỏ nấm hình thành sau cấy từ đến ngày o điều kiện nhiệt độ phòng 25 C Bào tử phân sinh nhỏ (Microconidia) hình thành bọc giả (fall head) cành bào tử phân sinh đơn dạng monophialide (có lỗ sinh bào tử) ngắn Bào tử phân sinh nhỏ đa dạng hình thái (hình oval, elip, thận), thường đơn bào, đơi có vách ngăn (Hình 2.c) Bào tử phân sinh lớn (Macroconidia) hình thành mơi trường CLA có kích thước trung bình dài, phần lớn có vách ngăn mỏng, đầu nhọn thon nhọn, đầu hình bàn chân (Hình a,b) Nấm hình thành bào tử hậu (chlamydospores) mơi trường CLA sau 14 đến 20 ngày Bào tử hậu hình cầu, nhẵn, thường hình thành đơn lẻ sợi nấm (Hình d) Các đặc điểm hình thái chủng nấm phân lập mẫu bệnh héo vàng đinh lăng phù hợp với mô tả đặc điểm hình thái lồi Fusarium oxysporum (Theo mơ tả Leslie cộng sự, 2006; Banett Hunter, 1998) a c Hình Đặc điểm hình thái nấm Fusarium oxysporum phân lập từ mẫu đinh lăng bị bệnh héo vàng a, b: Bào tử phân sinh lớn; c: bào tử phân sinh nhỏ dạng bọc giả gắn cành BTPS monophi lide; d: Bào tử hậu môi trường CLA 24 b d Kết nghiên cứu Khoa học BVTV – Số 3/2019 3.3 Kết lây bệnh nhân tạo nấm Fusarium oxysporum đinh lăng Sau phân lập nấm F.oxysporum, lây bệnh nhân tạo tiến hành chậu vại với đinh lăng năm tuổi không bị bệnh, kết lây nhiễm nhân tạo tập hợp bảng Bảng Kết lây bệnh nhân tạo nấm Fusarium oxysporum đinh lăng (Trung tâm nghiên cứu trồng chế biến thuốc Hà Nội, tháng năm 2018) Chỉ tiêu theo dõi Thời gian ủ bệnh (ngày) Tỷ lệ nhiễm bệnh (%) Thời gian từ nhiễm bệnh đến chết (ngày) Khả phục hồi (%) Công thức lây bệnh 2-5 ngày 100% 17 - 21 ngày Công thức đối chứng - a c b d Hình Cây đinh lăng bị nhiễm bệnh sau lây bệnh nhân tạo 17 ngày : Hình ảnh đinh lăng trước lây nhiễm; b: đinh lăng s u lây b nh 17 ngày; c: đinh lăng đối chứng; d: Hình ảnh bổ đơi thân đinh lăng bị nhiễm b nh đinh lăng đối chứng 25 Kết nghiên cứu Khoa học BVTV – Số 3/2019 Khi lây nhiễm nấm Fusarium oxysporum đinh lăng tỷ lệ nhiễm bệnh cao có thời gian tiềm dục ký chủ ngắn – ngày bắt đầu xuất triệu chứng héo sau 17 đến 21 ngày bị héo hồn tồn, biến vàng cơng thức đối chứng sinh trưởng phát triển bình thường Khi kiểm tra mạch dẫn lây nhiễm nấm F.oxysporum toàn rễ mạch dẫn bị thâm nâu triệu chứng không phát đối chứng khơng lây bệnh (Hình 3) Kết tái phân lập mẫu bệnh thu loài F.oxysporum Kết khẳng định, nấm F.oxysporum tác nhân gây bệnh héo vàng đinh lăng 3.4 Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh thái nấm Fusarium oxysporum gây bệnh héo vàng đinh lăng Trong số bệnh nấm có nguồn gốc đất hại vùng rễ trồng bệnh héo vàng loài nấm Fusarium oxysporum phát sinh gây hại phổ biến nguy hiểm đến trồng Vì vậy, để hiểu rõ đặc điểm phát triển nấm Fusarium oxysporum đinh lăng, sâu nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh thái lồi nấm này, tù làm sở để đưa biện pháp phòng trừ kịp thời hợp lý 3.4.1 Ảnh hưởng củ nhi t độ đến sinh trưởng củ sợi nấm Fus rium oxysporum gây b nh héo vàng đinh lăng Để tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng mức nhiệt độ khác đến sinh trưởng tản nấm F.oxysporum gây bệnh héo vàng đinh lăng , tản nấm F.oxysporum cấy môi trường PDA đặt tủ định ôn A B o o o o mức nhiệt độ 20 C, 25 C, 30 C,35 C tiến hành theo dõi phát triển tản nấm sau 24 giờ, 48 giờ, 72 Kết trình bày bảng hình ảnh Bảng Ảnh hƣởng nhiệt độ đến phát triển tản nấm Fusarium oxysporum môi trƣờng PDA (Trung tâm nghiên cứu trồng chế biến thuốc Hà Nội, tháng 10 năm 2018) Ngưỡng nhiệt độ o ( C) 20 25 30 35 LSD0,05 CV% Đường kính trung bình tản nấm (mm) Sau 24h Sau 48h Sau 72h c a c 7,20 14,40 21,80 b b b 7,87 17,54 25,73 a a a 9,90 20,96 28,42 c c c 7,12 14,13 21,55 0,36 0,68 1,10 2,3 2,0 2,3 * Ghi ch : Các công thức cột có chữ giống nh u khác nh u khơng có ý nghĩ với độ tin cậy 95% Qua kết bảng hình ảnh cho thấy nấm F.oxysporum sinh trưởng tốt ngưỡng o o nhiệt độ 25 C 30 C, nấm sinh trưởng o o nhiệt độ 20 C 35 C ngưỡng nhiệt o độ 35 C mơi trường có tượng bị tạp Sau 72h ni cấy đường kính trung bình tản nấm o ngưỡng nhiệt độ 30 C cao 28,42mm, o ngưỡng nhiệt độ 35 C tản nấm phát triển đạt 21,55mm môi trường bị tạp nhiều Như tản nấm F.oxysporum có khả sinh trưởng phạm vi tương đối rộng thuận o lợi ngưỡng nhiệt độ ấm áp từ 25 đến 30 C D C o Hình Đƣờng kính tản nấm F.oxysporum cấy mơi trƣờng PDA nhiệt độ 20 C o o o (A), nhi t độ 25 C (B), nhi t độ 30 C (C),nhi t độ 35 C (D) s u 72 nuôi cấy 26 Kết nghiên cứu Khoa học BVTV – Số 3/2019 3.4.2 Ảnh hưởng củ pH đến phát triển củ nấm Fusarium oxysporum gây b nh héo vàng đinh lăng Ngoài yếu tố nhiệt độ pH đất yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến phất triển nhiều loài nấm đất Để tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng mức pH khác đến sinh trưởng nấm F.oxysporum gây bệnh héo vàng đinh lăng, nấm F.oxysporum cấy môi trường PDA chuẩn độ mức pH 4,5,6,7 tiến hành so sánh phát triển tản nấm sau 24 giờ, 48 giờ, 72 Kết ảnh hưởng pH đến phát triển nấm F.oxysporum gây bệnh héo vàng đinh lăng thể bảng Đường kính đĩa petri = 90 mm Từ kết bảng hình cho thấy, sau cấy 24 đường kính tản nấm F.oxysporum gây bệnh đinh lăng mơi trường có pH = 5,50mm, pH = 7,42mm, pH = 10,15mm pH = 10,84mm Sau 96 theo dõi tản nấm môi trường pH = phát triển tốt 53,18mm tản nấm mơi trường pH = 4,5,6 40,73mm, 42,54mm A B 48,49mm Như vậy, nấm F.oxysporum có khả phát triển tất mức pH từ – mức pH = nấm phát triển tốt nhất, pH - kích thước tản nấm phát triển mức trung bình phát triển mức pH = Bảng Ảnh hƣởng pH đến đặc điểm phát triển nấm F.oxysporum đinh lăng mức pH khác (Trung tâm nghiên cứu trồng chế biến thuốc Hà Nội, tháng 11 năm 2018) Ngưỡn g pH LSD0,05 CV% Đường kính trung bình tản nấm (mm) 24 48 72 96 c d d c 5,50 17,08 27,82 40,73 c c c c 7,42 20,95 30,28 42,54 b b b b 10,15 22,00 32,17 48,49 a a a a 10,84 23,34 36,06 53,18 0,53 0,65 1,09 1,70 3,6 1,6 1,7 1,8 Ghi ch : Các cơng thức cột có chữ giống nh u khác nh u khơng có ý nghĩ với độ tin cậy 95% C D Hình Đƣờng kính tản nấm F.oxysporum cấy mơi trƣờng PDA có pH = (A), pH = (B), pH = (C), pH = (D) s u 96 nuôi cấy KẾT LUẬN Kết giám định dựa vào hình thái cho thấy bệnh héo vàng đinh lăng Ninh Bình, Nam Định Hà Nội nấm Fusarium oxysporum gây Bệnh gây triệu chứng điển bị héo rũ héo vàng, mạch dẫn thân củ bị thâm nâu Bệnh gây hại đinh lăng vườn ươm đồng ruộng sản xuất đinh lăng đến năm tuổi Nhiệt độ thích hợp cho nấm Fusarium o oxysporum phát triển từ 25- 30 C pH Kết nêu báo đề cập đến nghiên cứu bệnh héo vàng đinh lăng Ninh Bình, Nam Định Thái Bình Cần có nghiên cứu sâu nấm gây bệnh héo vàng sản xuất để đưa biện pháp phòng trừ thích hợp TÀI LIỆU THAM KHẢO Banett H.L and Hunter B.B, 1998 Illustrated genera of imperfect fungi”, The American Phytopathological Society, St.Paul, Minnesota, pp.218 Burgess L.W., Knight T.E., Tesoriero L and Phan H T., 2008 Diagnostic manual for plant diseases in Vietnam”, ACIAR Monograph No 129, 210pp ACIAR: Canberra 27 Kết nghiên cứu Khoa học BVTV – Số 3/2019 Chase, A R.; Brunk, D D, 1984 Bacterial leaf blight incited by Pseudomonas cichorii in Schefflera arboricola and some related plants”, Plant Disease, 68, 1, pp 73-74 Dissanayake, M L M C.; Kumari, W K M T, 2012 Efficacy of various plant extracts to control Fusarium wilt of Polyscia balfouriana variety Marginata”, Asian Journal of Experimental Biological Science, 3,1, pp129-135 Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thuận Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập, Trần Toàn, Viện dược liệu, 2004 Cây thuốc động vật làm thuốc Vi t Nam, Nhà xuất khoa học kỹ thuật Hà Nội, 2004, Tập II, Tr 430 – 435 Leslie JF, Summerell BA, 2006 The Fusarium Laboratory Manual Blackwell Publishing, USA p 369 Pereira, T B C.; Dally, E L.; Davis, R E.; Banzato, T C.; Bedendo, I P.(2016), “Ming Aralia (Polyscias fruticose), a new host of a phytoplasma subgroup 16SrVII-B strain in Brazil”, American Phytopathological Society (APS Press), St Paul, USA, 100, 3, pp 645 Ono, T, 2004 Occurrence of Alternaria leaf spot in ming aralia and geraniumleaf aralia caused by Alternaria panax on Ogasawara (Bonin) Islands”, Kanto-Tosan Plant Protection Society, Tsukuba, Japan, No.51, pp 67-69 Yen, T T; Knoll, J., 1991 Extension of lifespan in mice treated with Dinh lang (Policias fruticosum L.) and (-) deprenyl Acta Physiologica Hungarica 79 (2): 119–124 Phản biện: TS Hà Minh Thanh NHỮNG LOÀI CƠN TRÙNG CÁNH CỨNG (COLEOPTERA) CĨ GIÁ TRỊ BẢO TỒN VÀ BIỆN PHÁP BẢO TỒN, PHÁT TRIỂN Ở KHU BẢO TỒN THIÊN NHIÊN PÙ LNG, TỈNH THANH HĨA The List of The Value Bettle Species and The Available Solutions for Conservation, Development in The Pu Luong Natural Reserve, Thanh Hoa Province 1 Phạm Hữu Hùng , Nguyễn Thế Nhã , Lê Văn Ninh , Lại Thị Thanh , Hoàng Thị Hằng Ngày nhận bài: 12.04.2019 Ngày chấp nhận: 02.05.2019 Abstract The results of the study showed that the most effective methods is line thinning, in which there are 75 species (accounting for 74.26% of total species) of 14 genus (accounting for 93.33% of total genus); Shannon index H = 2.5 and the highest relative abundance is 17.7 percent The next method is additional planting method, it has the corresponding index of 70 species (accounting for 63.37%), which belongs to 14 families (accounting for 93.33%); H = 2.3 and the highest relative abundance is 15.6 percent Forest protection finds out 62 species, accounting for 61.39% belonging to 13 families accounting for 86.67%; Shannon H = 2.2 and the highest relative abundance is 17.3 percent Without impact, the corresponding index are 37 species (accounting for 36.63%), 11 families (accounting for 73.33%); H = 1.9 and the highest relative abundance is 16.2 percent, respectively The species need to be conserved and developed including 43 species of families associated with 7; 4; 11; 4; and 17, which belong to Lucanidae, Passlidae, Scarababidae, Coccinellidae and Carabidae, respectively In order to conserve and develop these species, three major methods could be applied Silviculture technical measures are aimed to adjust and create the suitable habitats, therfore, it is necessary to combine different methods together such as habitat protection; oriented protection and labour-assisted regeneration; oriented protection and labour-assisted regeneration with supplemented planting, forest maintenance, enrichment planting, restocking forest land, afforestation and household garden development, respectively For biological approach, it is possible to feed some species of Lucanidae, Passlidae, Scarababidae, Coccinellidae by semi-artificial method The consequences is also suggest that the building a monitoring program on these species, their habitat and human impact is one of the important appoachs for conservation and development of the beetle fauna Trường Đại học Hồng Đức Keywords: Coleopera, Value Bettle, Reswe, Trường Đại học Lâm nghiệp Việt Nam Pulung, Thanh Hóa 28 ... - Ghi Cây đinh lăng năm tuổi Cây vườn ươm Cây năm tuổi Cây năm tuổi Cây năm tuổi Cây năm tuổi Cây vườn ươm Cây năm tuổi Cây năm tuổi Cây vườn ươm Cây năm tuổi Cây năm tuổi Cây năm tuổi Cây năm... thái cho thấy bệnh héo vàng đinh lăng Ninh Bình, Nam Định Hà Nội nấm Fusarium oxysporum gây Bệnh gây triệu chứng điển bị héo rũ héo vàng, mạch dẫn thân củ bị thâm nâu Bệnh gây hại đinh lăng vườn... 72 giờ, … KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Phân lập nấm gây bệnh héo vàng đinh lăng Mười năm mẫu đinh lăng có triệu chứng héo vàng thu thập Hà Nội, Nam Định, Kết nghiên cứu Khoa học Ninh Bình