PHẠM THỊ HỒNG NHUNG xây DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG GLICLAZID TRONG VIÊN nén GLICLAZID 30 MG GIẢI PHÓNG kéo dài KHOÁ LUẬN tốt NGHIỆP dƣợc sĩ

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI - oOo - PHẠM THỊ HỒNG NHUNG XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG GLICLAZID TRONG VIÊN NÉN GLICLAZID 30 MG GIẢI PHĨNG KÉO DÀI KHỐ LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI – 2019 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI PHẠM THỊ HỒNG NHUNG Mã sinh viên: 1401456 XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG GLICLAZID TRONG VIÊN NÉN GLICLAZID 30 MG GIẢI PHÓNG KÉO DÀI KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS Nguyễn Thị Kiều Anh ThS Bùi Thị Lan Phƣơng Nơi thực hiện: Phịng Phân tích - Kiểm nghiệm Tƣơng đƣơng sinh học, Viện Công nghệ dƣợc phẩm Quốc gia HÀ NỘI - 2019 LỜI CẢM ƠN Trong thời gian thực hồn thành khố luận này, em nhận đƣợc nhiều giúp đỡ tận tình mặt từ thầy cơ, từ anh chị hƣớng dẫn động viên từ bạn bè, gia đình Với lịng biết ơn sâu sắc nhất, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến PGS TS Nguyễn Thị Kiều Anh ThS Bùi Thị Lan Phƣơng, ngƣời trực tiếp hƣớng dẫn, dành nhiều tâm sức thời gian giúp em hồn thành khố luận Cùng với đó, em xin cảm ơn anh chị Phịng Kiểm nghiệm - Phân tích Tƣơng đƣơng sinh học - Viện Công nghệ dƣợc phẩm Quốc gia, ThS Ngô Quang Trung, NCS Phạm Thị Hiền, ThS Đỗ Ngọc Cƣơng, DS Vũ Thị Hoa, DS Nguyễn Thị Huyền, tạo điều kiện để em có khơng gian thực nghiệm tốt giúp đỡ em giải đƣợc nhiều vấn đề khúc mắc Xin gửi lời biết ơn chân thành tới Ban giám hiệu Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội, tới thầy cô – ngƣời truyền đạt kiến thức dìu dắt em hành trình năm học trƣờng Và cuối cùng, em xin biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè – ngƣời ln theo sát, động viên, giúp đỡ, ln ủng hộ giúp em hồn thành khoá học khoá luận Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Sinh viên Phạm Thị Hồng Nhung LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG I: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan gliclazid 1.1.1 Hoạt chất gliclazid 1.1.2 Tình hình nghiên cứu hoạt chất gliclazid 1.1.3 Các phương pháp định lượng gliclazid 1.2 Tổng quan HPLC 10 1.2.1 Nguyên tắc trình sắc ký 10 1.2.2 Cấu tạo hệ thống HPLC 11 1.2.3 Các thông số đặc trưng 12 1.2.4 Một số phương pháp định lượng HPLC 14 CHƢƠNG II: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Điều kiện thực nghiệm 16 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 16 2.1.2 Hố chất, dung mơi 16 2.1.3 Dụng cụ, thiết bị 16 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 17 2.2.1 Xây dựng phương pháp định lượng gliclazid HPLC 17 2.2.2 Thẩm định phương pháp 17 2.3 Ứng dụng phƣơng pháp định lƣợng xây dựng xác định hàm lƣợng gliclazid viên nén gliclazid giải phóng kéo dài 19 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 20 3.1 Chuẩn bị mẫu 20 3.1.1 Mẫu chuẩn 20 3.1.2 Mẫu thử 20 3.2 Lựa chọn dung môi pha mẫu điều kiện sắc ký 20 3.2.1 Lựa chọn dung môi pha mẫu 20 3.2.2 Lựa chọn điều kiện sắc ký 21 3.3 Thẩm định phƣơng pháp định lƣợng 21 3.3.1 Độ đặc hiệu 21 3.3.2 Độ phù hợp hệ thống 23 3.3.3 Xây dựng đường chuẩn 24 3.3.4 Độ lặp lại 25 3.3.5 Độ xác trung gian 26 3.3.6 Độ 28 3.4 Ứng dụng phƣơng pháp xây dựng định lƣợng hàm lƣợng gliclazid 29 BÀN LUẬN 34 KẾT LUẬN 36 KIẾN NGHỊ 37 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DĐVN V Dƣợc điển Việt Nam V ĐTĐ Đái tháo đƣờng HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography) IDF Liên đoàn Đái tháo đƣờng Thế giới (International Diabetes Federation) MeCN Acetonitril MeOH Methanol MS Khối phổ (Mass spectrometry) MLC Sắc ký lỏng sử dụng chất diện hoạt (Micellar liquid chromatography) NIDDM Đái tháo đƣờng không phụ thuộc insulin (Non-insulin dependent diabetes) RPTLC Sắc ký lớp mỏng pha đảo (Reversed phase thin layer chromatography) r Hệ số tƣơng quan RSD Độ lệch chuẩn tƣơng đối S Diện tích pic SD Độ lệch chuẩn STT Số thứ tự TEA Triethylamin TFA Acid trifluoroacetic tR Thời gian lƣu UV Tử ngoại (Ultraviolet) v/v Thể tích/thể tích DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Nội dung Trang Bảng 1.1 Các phƣơng pháp định lƣợng gliclazid huyết tƣơng Bảng 1.2 Các phƣơng pháp định lƣợng gliclazid dƣợc phẩm Bảng 2.1 Nguyên liệu chuẩn dùng nghiên cứu 16 Bảng 2.2 Các hoá chất dùng nghiên cứu 16 Bảng 2.3 Các thiết bị dùng nghiên cứu 16 Bảng 2.4 Các dụng cụ dùng nghiên cứu 17 Bảng 3.1 Kết khảo sát độ phù hợp hệ thống 24 Bảng 3.2 Kết khảo sát độ tuyến tính gliclazid 25 Bảng 3.3 Kết khảo sát độ lặp lại phƣơng pháp 26 Bảng 3.4 Kết khảo sát độ xác khác ngày phƣơng pháp 27 Bảng 3.5 So sánh độ lặp phƣơng pháp hai ngày khác 27 Bảng 3.6 Kết thẩm định độ phƣơng pháp 29 Bảng 3.7 Kết định lƣợng gliclazid số chế phẩm viên nén giải phóng kéo dài gliclazid 30 mg 30 DANH MỤC CÁC HÌNH Nội dung Hình Trang Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo gliclazid Hình 1.2 Ngun tắc q trính sắc ký 11 Hình 1.3 Cấu tạo hệ thống HPLC 11 Hình 3.1 Sắc ký đồ gliclazid chuẩn pha MeOH 21 Hình 3.2 Sắc ký đồ đánh giá độ đặc hiệu 22 Hình 3.3 Độ tinh khiết gliclazid dung dịch thử 23 Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn mối tƣơng quan tuyến tính diện tích 25 pic nồng độ gliclazid Hình 3.5 Biểu đồ kết định lƣợng chế phẩm viên nén 32 gliclazid giải phóng kéo dài 30 mg Hình 3.6 Sắc ký đồ số chế phẩm định lƣợng 33 ĐẶT VẤN ĐỀ Đái tháo đƣờng bệnh chuyển hóa, đặc trƣng tình trạng tăng đƣờng huyết mạn tính, có biểu rối loạn chuyển hoá carbohydrat, lipid chuyển hóa protein Nguyên nhân khiếm khuyết tiết insulin (typ 1), hoạt động insulin (typ 2) hai [24] Theo Liên đoàn Đái tháo đƣờng Thế giới (IDF), năm 2015 tồn giới có 415 triệu ngƣời (trong độ tuổi 20-79) bị bệnh đái tháo đƣờng (ĐTĐ), tƣơng đƣơng 11 ngƣời có ngƣời bị ĐTĐ, đến năm 2040 số 642 triệu, tƣơng đƣơng 10 ngƣời có ngƣời bị ĐTĐ Bên cạnh đó, với việc tăng sử dụng thực phẩm khơng thích hợp, khơng hoạt động thể lực trẻ em, bệnh ĐTĐ typ có xu hƣớng tăng trẻ em, trở thành vấn đề sức khỏe cộng đồng nghiêm trọng [4] Năm 2017, số ngƣời mắc bệnh đái tháo đƣờng độ tuổi từ 20 đến 79 giới 425 triệu năm 2045, số dự kiến 629 triệu ngƣời Ở châu Âu, số ngƣời mắc bệnh đái tháo đƣờng độ tuổi 58 triệu số ngƣời dự kiến tăng lên 67 triệu ngƣời [19] Ở Việt Nam, theo kết điều tra STEPwise yếu tố nguy bệnh không lây nhiễm Bộ Y tế thực năm 2015, nhóm tuổi từ 18-69, cho thấy tỷ lệ ĐTĐ toàn quốc 4,1%, tiền ĐTĐ 3,6% [4] Năm 2017, ƣớc tính số ngƣời mắc đái tháo đƣờng độ tuổi từ 20 - 79 334 nghìn ngƣời (đã đƣợc chẩn đốn), tỷ lệ mắc đái tháo đƣờng typ chủ yếu đự đoán đến năm 2045, số tăng lên đến 583 nghìn ngƣời [22] Để điều trị đái tháo đƣờng typ sau thể không đáp ứng với biện pháp không dùng thuốc nhƣ điều chỉnh chế độ ăn, vận động thể lực, cần thiết phải sử dụng thuốc có tác dụng hạ đƣờng huyết Trong số thuốc điều trị, dẫn chất sulfonylure đƣợc quan tâm sử dụng phổ biến Gliclazid thuốc hạ đƣờng huyết uống sulfonylure hệ thứ hai đƣợc sử dụng điều trị đái tháo đƣờng không phụ thuộc insulin (NIDDM) đƣợc chọn vào danh sách thuốc thiết yếu để điều trị ĐTĐ Tổ Chức Y tế Thế giới Gliclazid làm giảm đƣờng huyết cách điều chỉnh tiết insulin tình trạng kháng insulin ngoại biên Hiện gliclazid dƣợc sử dụng phổ biến chế phẩm với xuất nhiều thị trƣờng dƣợc phẩm, nƣớc Vấn đề có mục đích điều trị nhƣng chất lƣợng chế phẩm cần phải đƣợc đánh giá, để từ chứng minh hiệu an tồn q trình sử dụng Trong tiêu chí quan trọng góp phần đánh giá chất lƣợng thuốc phải xác định đƣợc hàm lƣợng thực hoạt chất có chế phẩm, chứng minh đƣợc nằm giới hạn cho phép điều trị, đồng thời bƣớc đánh giá góp phần phục vụ công tác kiểm tra chất lƣợng chế phẩm, từ hỗ trợ phát triển cơng thức bào chế Chế phẩm viên nén giải phóng kéo dài chứa gliclazid đƣợc sử dụng ngày phổ biến hiệu lợi ích lớn mà mang lại nhƣ: tăng hiệu điều trị, cải thiện tuân thủ sử dụng, giảm nguy sức khoẻ điều trị lâu dài Tuy vậy, nghiên cứu phân tích chế phẩm cịn hạn chế, chƣa đáp ứng đƣợc tính sẵn có để phục vụ cho lĩnh vực khác nhƣ bào chế, thử tƣơng đƣơng sinh học, đánh giá PK/PD…cụ thể chƣa đƣợc xây dựng thành chuyên luận riêng Dƣợc điển Việt Nam số dƣợc điển khác nhƣ USP, BP… Từ lý trên, đề tài: ―Xây dựng phƣơng pháp định lƣợng gliclazid viên nén gliclazid 30 mg giải phóng kéo dài‖ đƣợc thực với mục tiêu sau: - Xây dựng thẩm định phương pháp định lượng gliclazid viên nén gliclazid 30 mg giải phóng kéo dài kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) - Ứng dụng phương pháp định lượng xây dựng để xác định hàm lượng gliclazid chế phẩm bào chế phục vụ đánh giá chất lượng viên nén gliclazid 30 mg giải phóng kéo dài độ cao; khoảng tuyến tính rộng: 101,51 – 303,11 µg/ml với hệ số tƣơng quan r = 0,9998 (thích hợp cho việc định lƣợng gliclazid hàm lƣợng 30 mg chế phẩm) Từ kết thẩm định phƣơng pháp thu đƣợc, tiến hành định lƣợng gliclazid chế phẩm bào chế viên nén GPKD gliclazid 30 mg Yêu cầu hàm lƣợng gliclazid viên nằm giới hạn 95,0 - 105,0% hàm lƣợng so với nhãn Trong số công thức đƣợc định lƣợng, có cơng thức đạt u cầu G2 (97,40%), G9 (102,69%), G10 (103,93%), G11 (103,27%) Những công thức đạt yêu cầu hàm lƣợng nêu tiếp tục đƣợc đánh giá tiêu khác: đồng hàm lƣợng, độ hoà tan, tƣơng đƣơng sinh học… để hoàn thiện hồ sơ đăng ký thuốc đƣợc lƣu hành thị trƣờng Nhƣ vậy, từ đề tài này, xây dựng đƣợc phƣơng pháp định lƣợng gliclazid viên nén gliclzid giải phóng kéo dài 30 mg, nghiên cứu thêm để áp dụng mở rộng với chế phẩm gliclazid giải phóng kéo dài khác nhƣ viên hàm lƣợng 60mg, 80 mg; hay chế phẩm gliclazid giải phóng kéo dài sử dụng tá dƣợc khác Phƣơng pháp ứng dụng để xác định nhanh hàm lƣợng chế phẩm, sở định cần có điều chỉnh công thức bào chế phƣơng pháp bào chế (đối với chế phẩm chƣa đạt) đƣa chế phẩm đến khâu kiểm nghiệm (đối với chế phẩm đạt), để từ hồn thiện hồ sơ đăng ký đƣa thị trƣờng 35 KẾT LUẬN Từ kết thực nghiệm thu đƣợc chúng tơi có kết luận sau: Đã xây dựng thẩm định phƣơng pháp định lƣợng gliclazid viên nén giải phóng kéo dài gliclazid 30 mg HPLC với detector DAD tham khảo dựa theo Dƣợc điển Việt Nam V – chuyên luận viên nén gliclazid Cụ thể là:  Điều kiện phân tích: - Cột C8 (150 mm x 4,6 mm, µm) - Pha động: TEA –TFA– MeCN – nƣớc (0,1 : 0,1 : 40 : 60, v/v/v/v) - Detector quang phổ tử ngoại đặt bƣớc sóng 235 nm - Dung mơi pha mẫu: q trình xử lý mẫu, viên chứa nhiều tá dƣợc trƣơng nở mạnh nên sử dụng dung môi pha mẫu ACN : nƣớc (40 : 60, v/v ) theo nhƣ dƣợc điển chƣa phù hợp, chúng tơi khảo sát lựa chọn MeOH dung môi pha mẫu - Tốc độ dịng: 1,0 ml/phút - Thể tích tiêm: 20 µl  Kết thẩm định: - Phƣơng pháp có độ đặc hiệu cao: pic gliclazid gọn, đẹp cân đối, thời gian phân tích phù hợp với tR khoảng - 10 phút - Phƣơng pháp có độ cao: 99,68% – 101,43% - Độ xác có RSD = 0,52% < 2,00%, độ xác trung gian có ttn = 0,076 < 1,812 = tlt (0,95; 10) Ftn = 1,69 < 4,28 = Flt (0,95; 6; 6) - Khảo sát khoảng nồng độ tuyến tính 101,51 – 303,11 μg/ml cho hệ số tƣơng quan sát gần (r = 0,9998) Đã ứng dụng phƣơng pháp định lƣợng xác định hàm lƣợng gliclazid chế phẩm bào chế viên nén giải phóng kéo dài gliclazid 30 mg - Kết cho thấy có công thức tổng số công thức đƣợc định lƣợng đạt yêu cầu hàm lƣợng gliclazid nằm giới hạn 95,0 – 105,0% hàm lƣợng ghi nhãn công thức G2 (97,40%), G9 (102,69%), G10 (103,93%), G11 (103,27%) 36 KIẾN NGHỊ Từ kết đạt đƣợc, xin đƣa vài đề xuất sau: Áp dụng phương pháp xây dựng để kiểm tra chất lượng viên nén giải phóng kéo dài gliclazid tiêu hàm lượng Hoàn thiện nộp hồ sơ đăng ký thuốc chế phẩm, xin đăng ký lưu hành để đưa thuốc tới tay người tiêu dùng 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Trần Tử An (2012), "Hố phân tích tập 2", NXB Y học, tr 84-110 Bộ Y tế (2017), "Dược điển Việt Nam V tập 1", NXB Y học, tr 444-445 Bộ Y tế (2019), Dược Thư Quốc Gia Việt Nam, NXB Y học, tr 729-730 Bộ Y tế (2017), Hướng dẫn chẩn đoán điều trị đái tháo đường typ Bộ Y tế (2009), Hướng dẫn Asean thẩm định quy trình phân tích, Hà Nội Bộ Y tế (2011), "Kiểm nghiệm dược phẩm", NXB Y học, tr 84-88, 104-105 Nguyễn Ngọc Chiến (2011), "Nghiên cứu bào chế viên nén gliclazid giải phóng kéo dài", Tạp chí Dược học, tr 26-28 Viện kiểm nghiệm an toàn thực phẩm quốc gia Thẩm định phương pháp phân tích hố học vi sinh vật, chương II, NXB Khoa học kỹ thuật, tr 5-35 Nguyễn Hạnh Thủy Nguyễn Ngọc Chiến (2013), "Nghiên cứu bào chế pellet gliclazid giải phóng kéo dài", Tạp chí Dược học, tr 16-20 10 Võ Thụy Cẩm Vy (2009), "Nghiên cứu tƣơng đƣơng sinh học viên Gliclazid 30 mg phóng thích kéo dài", Tạp chí Dược học số (389), tr 13-15+34 Tài liệu tiếng anh 11 British Pharmacopeia (2005), pp 146-148, pp 912-913 12 Martindale - the complete drug reference (2005), 34th edition, pp 324-328, pp 346-348 13 The Merk Index (2005), pp 789-790 14 Agrawal YK, Gogoi PJ, et al (2010), "A supercritical fluid chromatography/tandem mass spectrometry method for the simultaneous quantification of metformin and gliclazide in human plasma", Indian journal of pharmaceutical sciences, 72(1), pp 50-57 15 Asean (2009), Guidelines for validation of analytical procedures 16 Averineni Ranjith Kumar, Shavi Gopal Venkatesh, et al (2012), "Formulation of gliclazide encapsulated chitosan nanoparticles: in vitro and in vivo evaluation", NanoFormulation, pp 77-85 17 Delrat P, Paraire M, et al (2002), "Complete bioavailability and lack of food‐ effect on pharmacokinetics of gliclazide 30 mg modified release in healthy volunteers", Biopharmaceutics & drug disposition, 23(4), pp 151-157 18 El-Wasseef Dalia Rashad (2012), "Simultaneous determination of metformin, nateglinide and gliclazide in pharmaceutical preparations using micellar liquid chromatography", International journal of biomedical science: IJBS, 8(2), pp 144-151 19 Federation International Diabetes IDF Diabetes Atlas (8th Edn.), Brussels, International Diabetes Federation 2017; 20 Foroutan SM, Zarghi A, et al (2006), "Application of monolithic column in quantification of gliclazide in human plasma by liquid chromatography", Journal of pharmaceutical and biomedical analysis, 42(4), pp 513-516 21 Fu Zu Zhi, Yan Tang, et al (1992), "Thromboxane/prostacyclin balance in type II diabetes: gliclazide effects", Metabolism, 41(5), pp 33-35 22 Gumieniczek Anna, and Anna Berecka, (2010), "Quantitative analysis of gliclazide and glipizide in tablets by a new validated and stability-indicating RPTLC method", JPC-Journal of Planar Chromatography-Modern TLC, pp 129-133 23 Holmes B, Heel RC, et al (1984), "Gliclazide", Drugs, 27(4), pp 301-327 24 K.G.M.M Alberti (1998), "Definition, Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus and its complications Part 1: Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus Provisional Report of a WHO Consultation", Diabet Med 15, pp 539– 553 25 Kimura Masako, et al, (1980), "Determination of gliclazide in human serum by high-performance liquid chromatography using an anion-exchange resin", Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications 183.4 pp 467-473 26 Konya Hiroyuki, Hasegawa Yoshikazu, et al (2010), "Effects of gliclazide on platelet aggregation and the plasminogen activator inhibitor type level in patients with type diabetes mellitus", Metabolism, 59(9), pp 1294-1299 27 Ling Guixia, Sun Jin, et al (2006), "Liquid Chromatography‐ Electrospray Ionization Mass Spectrometric Method for Determination of Gliclazide in Human Plasma", Analytical letters, 39(7), pp 1381-1391 28 Loubatières Auguste (1957), "The hypoglycemic sulfonamides: history and development of the problem from 1942 to 1955", Annals of the New York Academy of Sciences, 71(1), pp 4-11 29 Maeda Tadao, Yamaguchi Toshikazu, et al (1981), "Gas chromatographic determination of the hypoglycaemic agent gliclazide in plasma", Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications, 223(2), pp 357-363 30 Maurer Hans H, Kratzsch Carsten, et al (2002), "Screening, library-assisted identification and validated quantification of oral antidiabetics of the sulfonylurea-type in plasma by atmospheric pressure chemical ionization liquid chromatography–mass spectrometry", Journal of Chromatography B, 773(1), pp 63-73 31 McGavin Jane K, Perry Caroline M, et al (2002), "Gliclazide modified release", Drugs, 62(9), pp 1357-1364 32 ệzkan Yalỗn, Atay Tamer, et al (2000), "Improvement of water solubility and in vitro dissolution rate of gliclazide by complexation with β-cyclodextrin", Pharmaceutica Acta Helvetiae, 74(4), pp 365-370 33 Palmer Katharine J., Brogden Rex N (1993), "Gliclazide", Drugs, 46(1), pp 92125 34 Park Ji-Young, Kim Kyoung-Ah, et al (2004), "Quantification of gliclazide by semi-micro high-performance liquid chromatography: application to a bioequivalence study of two formulations in healthy subjects", Journal of pharmaceutical and biomedical analysis, 35(4), pp 943-949 35 Patel Pravin, Pailla Sravanthi Reddy, et al (2019), "Quality by design approach for developing lipid-based nanoformulations of gliclazide to improve oral bioavailability and anti-diabetic activity", AAPS PharmSciTech, 20(2), pp 20-45 36 Venkatesh P., et al, (2006), "Simultaneous estimation of six anti‐ diabetic drugs— glibenclamide, gliclazide, glipizide, pioglitazone, repaglinide and rosiglitazone: development of a novel HPLC method for use in the analysis of pharmaceutical formulations and its application to human plasma assay", Biomedical Chromatography 20.10, pp 1043-1048 37 Zin Nik Mohamad Lukman Mat, Mubin Anis Syazwani Abd, et al (2018), ''Preliminary Study on the Formulation of Syariah Compliant Generic Sustained Release Gliclazide Tablet Using Xanthan Gum'', International Medical Journal Malaysia, Volume 17 Special Issue No PHỤ LỤC Phụ lục 1: Sắc ký đồ mẫu chuẩn xây dựng đường chuẩn Phụ lục 2: Sắc ký đồ mẫu thử độ lặp lại Phụ lục 3: Sắc ký đồ mẫu thử độ xác trung gian Phụ lục 4: Sắc ký đồ số mẫu thử định lượng Phụ lục 5: Sắc ký đồ mẫu thử đánh giá độ thích hợp hệ thống ... TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI PHẠM THỊ HỒNG NHUNG Mã sinh viên: 1401456 XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG GLICLAZID TRONG VIÊN NÉN GLICLAZID 30 MG GIẢI PHĨNG KÉO DÀI KHỐ LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng... Ứng dụng phƣơng pháp định lƣợng xây dựng xác định hàm lƣợng gliclazid viên nén gliclazid giải phóng kéo dài Xác định hàm lƣợng gliclazid chế phẩm thử phƣơng pháp định lƣợng gliclazid xây dựng Tiến... đƣợc phƣơng pháp định lƣợng gliclazid viên nén gliclzid giải phóng kéo dài 30 mg, nghiên cứu thêm để áp dụng mở rộng với chế phẩm gliclazid giải phóng kéo dài khác nhƣ viên hàm lƣợng 6 0mg, 80 mg;