hững thông tin chung:Họ và tên sinh viên được giao đề tài (Số lượng sinh viên: 1)NGUYỄN THỊ NGUYÊN MSSV: 2022150233 LỚP: 06DHDB3Tên đề tài: Tinh sạch Naringin và nghiên cứu khả năng kháng khuẩn của Naringin táchchiết từ vỏ quả cam.Nhận xét của giảng viên hướng dẫnVề tinh thần, thái độ làm việc của sinh viên: .................................................................................................................................................................................................................................................................................................hững thông tin chung:Họ và tên sinh viên được giao đề tài (Số lượng sinh viên: 1)NGUYỄN THỊ NGUYÊN MSSV: 2022150233 LỚP: 06DHDB3Tên đề tài: Tinh sạch Naringin và nghiên cứu khả năng kháng khuẩn của Naringin táchchiết từ vỏ quả cam.Nhận xét của giảng viên hướng dẫnVề tinh thần, thái độ làm việc của sinh viên: .................................................................................................................................................................................................................................................................................................hững thông tin chung:Họ và tên sinh viên được giao đề tài (Số lượng sinh viên: 1)NGUYỄN THỊ NGUYÊN MSSV: 2022150233 LỚP: 06DHDB3Tên đề tài: Tinh sạch Naringin và nghiên cứu khả năng kháng khuẩn của Naringin táchchiết từ vỏ quả cam.Nhận xét của giảng viên hướng dẫnVề tinh thần, thái độ làm việc của sinh viên: .................................................................................................................................................................................................................................................................................................
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP TINH SẠCH NARINGIN VÀ NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA NARINGIN TÁCH CHIẾT TỪ VỎ QUẢ CAM GVHD: PHAN THỊ HỒNG LIÊN SVTH: NGUYỄN THỊ NGUYÊN MSSV: 2022150233 LỚP: 06DHDB3 TP HỒ CHÍ MINH, 2019 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM KHỐ LUẬN TỐT NGHIỆP TINH SẠCH NARINGIN VÀ NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA NARINGIN TÁCH CHIẾT TỪ VỎ QUẢ CAM GVHD: PHAN THỊ HỒNG LIÊN SVTH: NGUYỄN THỊ NGUYÊN MSSV: 2022150233 LỚP: 06DHDB3 TP HỒ CHÍ MINH, 2019 BỘ CƠNG THƯƠNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM BẢN NHẬN XÉT Khóa luận tốt nghiệp Đồ án tốt nghiệp Những thông tin chung: Họ tên sinh viên giao đề tài (Số lượng sinh viên: 1) NGUYỄN THỊ NGUYÊN MSSV: 2022150233 LỚP: 06DHDB3 Tên đề tài: Tinh Naringin nghiên cứu khả kháng khuẩn Naringin tách chiết từ vỏ cam Nhận xét giảng viên hướng dẫn Về tinh thần, thái độ làm việc sinh viên: Về nội dung kết nghiên cứu: Ý kiến khác: Ý kiến giảng viên hướng dẫn việc sinh viên bảo vệ trước Hội đồng: Đồng ý Không đồng ý TP.Hồ Chí Minh, ngày tháng GVHD năm 2019 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan khố luận tốt nghiệp tơi thực với hỗ trợ giúp đỡ tận tình giảng viên hướng dẫn – cô Phan Thị Hồng Liên Các nội dung nghiên cứu, số liệu kết đề tài trung thực Bên cạnh đó, đề tài sử dụng số nhận xét, đánh vài số liệu tác giả, báo trích dẫn mục tài liệu tham khảo Nếu phát gian lận nào, tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước hội đồng Sinh viên thực (Ký ghi rõ họ tên) i TĨM TẮT KHỐ LUẬN Nghiên cứu chất có hoạt tính sinh học hợp chất có tính ứng dụng cao vào đời sống thực tiễn vấn đề quan tâm hướng cho giới khoa học Những hợp chất từ flavonoid đặc biệt Naringin có tính ứng dụng cao, từ mở sâu cho bước phát triển phân tích cụ thể cho đối tượng mà áp dụng thực chất Với việc tận dụng nguồn nguyên liệu phế thải từ sống ngày, cam nhận định nguồn có Naringin hợp chất có hoạt tính sinh học cao việc nghiên cứu phần nhóm lớn giúp tăng khả ứng dụng Naringin vào thực tiễn nhiều Trong luận này, tiến hành đề tài: “Tinh Naringin nghiên cứu khả kháng khuẩn Naringin tách chiết từ vỏ cam” Đề tài thực với nội dung sau: Thí nghiệm tinh Naringin phương pháp chiết lỏng – lỏng Xác định độ tinh khiết Naringin phương pháp HPLC Xác định độ thu hồi Naringin sau xác định độ tinh khiết Xác định tính chất vật lý, hố học Naringin Xác định nồng độ ức chế tối thiểu đường kính kháng khuẩn Naringin hai loại khuẩn E.coli Staphylococcus aureus Qua trình nghiên cứu, thu số kết sau: Trong phương pháp xác định khả tinh Naringin dung mơi n-hexan tơi tìm tỷ lệ dung mơi:dịch trích phù hợp cho q trình tinh 0.5:1, trình xác định tỷ lệ dựa vào khối lượng Naringin thô thu nhận 0.3601g sau trình chiết lỏng – lỏng để kết tinh 24 thực 100g bột vỏ cam Tiến hành tách chiết Naringin điều kiện tối ưu, lọc, quay xuống 1/10 so với thể tích ban đầu, loại tạp Ca(OH)2 chỉnh pH = 9, lọc loại tủa, chiết lỏng – lỏng với n-hexan theo tỷ lệ 0.5:1, chỉnh pH = HCl đậm đặc, lọc nóng, cho dung dịch thu kết tinh điều kiện lạnh tối vòng 24 giờ, lọc thu tinh thể sấy khô, cho kết tinh lại với hệ dung môi Ethanol:Nước (2:8) xác định độ tinh khiết HPLC Qua kết thực nghiệm độ tinh khiết cao Naringin mà tinh 57.93% kết trình tinh 100g bột vỏ cam sau thu 0.166g Naringin từ trình kết tinh lại độ thu hồi xác định 7.983% Naringin flavanones thuộc nhóm flavanoid nên có số tính chất đặc trưng nhóm có khả tạo màu với NaOH cho màu vàng đặc trưng ii phản ứng Cyanidin với bột Mg có bổ sung HCl đậm đặc đun lửa đèn cồn cho màu hồng Về hoạt tính kháng khuẩn Naringin E.coli với nồng độ 100ppm, 150pm, 200ppm, 250ppm, 300ppm, 350ppm cho đường kính kháng khuẩn 1.92mm, 3.17mm, 4.5mm, 3.75mm, 2.25mm, 5.583mm Và hoạt tính kháng khuẩn Naringin S.aureus với nồng độ 100ppm, 150pm, 200ppm, 250ppm, 300ppm, 350ppm cho đường kính kháng khuẩn 6.17mm, 8.83mm, 7.75mm, 7.25mm, 9.417mm, 7.17mm Với kết kháng khuẩn Naringin E.coli Staphylococcus aureus tìm nồng độ ức chế tối thiểu MIC hai khuẩn 100ppm, khả kháng khuẩn Naringin thể rõ khuẩn S.aureus cho đường kính kháng khuẩn cao đạt nồng độ 300ppm 9.417mm, hiệu kháng khuẩn Naringin E.coli yếu nồng độ 350ppm đường kính kháng khuẩn đạt 5.583mm iii LỜI CẢM ƠN Trong q trình hồn thành báo cáo khố luận em nhận nhiều giúp đỡ thầy bạn bè Do đó, lời cảm ơn em xin gửi đến quý thầy cô khoa Công nghệ thực phẩm đưa chương trình học nhiều đề tài khố luận cho chúng em lựa chọn hoàn thành với thời gian đề ra, đồng thời nhờ có thầy mà em biết kiến thức tảng để ứng dụng việc thực đề tài Sau lời cảm ơn người bạn đồng hành với em tham gia nghiên cứu Đặc biệt em xin gửi lời cảm ơn cô Phan Thị Hồng Liên người hướng dẫn, bảo sửa chữa lỗi sai mà em mắc phải trình thực nội dung khố luận giúp cho em hồn thành tốt báo cáo tảng kiến thức cá nhân Qua q trình làm khố luận giúp em có nhìn rộng nắm bắt nhiều kiến thức hơn, có nhìn khả quan ngành học Đặc biệt trình thực đề tài giúp em có vài kỹ mà ứng dụng tương lai cho ngành học kỹ phân tích, tìm hiểu vấn đề, kỹ làm việc độc lập, kỹ tin học, kỹ thuyết trình kế hoạch kiểm soát thời gian Hiện khoá luận mà em tiếp xúc thực hành nghiên cứu mang tính khoa học nên khơng thể tránh khỏi sai sót, đồng thời với thời gian làm việc không dài phòng thí nghiệm nên có nhiều vấn đề em chưa nắm bắt hiểu cách tường tận việc sai sót điều em khơng thể tránh khỏi Vì vậy, mong nhận thơng cảm góp ý chân thành từ thầy để em tiếp tục hồn thiện đề tài Em xin chân thành cảm ơn! TP Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2019 SVTH iv MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN I TĨM TẮT KHỐ LUẬN II LỜI CẢM ƠN IV MỤC LỤC V DANH MỤC HÌNH ẢNH, ĐỒ THỊ VIII DANH MỤC BẢNG BIỂU X DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT XI CHƯƠNG 1.1 1.2 1.3 1.4 MỞ ĐẦU .1 Tính cấp thiết đề tài Bố cục đề tài Mục tiêu đề tài .2 Nội dung đề tài .2 CHƯƠNG TỔNG QUAN .3 2.1 Cam .3 2.1.1 Thành phần hoá học cam .3 2.1.2 Ứng dụng cam 2.2 2.2.1 2.2.2 2.3 2.4 2.5 Naringin Đặc điểm tính chất Naringin Ứng dụng Naringin E.coli .9 Staphylococcus aureus 10 Phương pháp tinh .11 2.5.1 2.5.2 2.6 2.7 2.7.1 2.7.2 2.7.3 2.7.4 2.7.5 Tinh phương pháp tủa 11 Tinh dung môi 12 Phương pháp kết tinh lại .12 Sắc ký hiệu cao (HPLC) 13 Nguyên tắc hoạt động .13 Phân loại 13 Bình chứa dung môi 14 Hệ thống bơm 14 Bộ tiêm mẫu 14 2.7.6 Cột phân tích .15 v 2.7.7 Đầu dò .15 2.7.8 Thiết bị thu thập liệu 15 2.8 Tình hình nghiên cứu Naringin ngồi nước 15 2.8.1 Tình hình nước 15 2.8.2 Tình hình ngồi nước 17 2.9 Tình hình nghiên cứu khả kháng khuẩn Naringin .18 CHƯƠNG PHƯƠNG TIỆN, PHƯƠNG PHÁP VÀ NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 20 3.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 20 3.2 Vật liệu nghiên cứu 20 3.2.1 Nguyên liệu 20 3.2.2 Hoá chất 20 3.2.3 3.3 3.3.1 3.3.2 3.4 3.5 Thiết bị 21 Phương pháp nghiên cứu 22 Sơ đồ nghiên cứu thực nghiệm 22 Thuyết minh quy trình: 23 Nội dung nghiên cứu đề tài 28 Phương pháp bố trí thí nghiệm 29 3.5.1 Tinh Naringin phương pháp chiết lỏng – lỏng 29 3.5.2 Xác định độ tinh khiết Naringin HPLC .29 3.5.3 Phản ứng Naringin với số thuốc thử đặc trưng 30 3.5.4 Khảo sát nồng độ Naringin tối thiểu để ức chế E.Coli Staphylococcus aureus .30 3.6 Phương pháp phân tích .33 3.6.1 Phương pháp xác định độ tinh khiết Naringin 33 3.6.2 Phương pháp xác định độ thu hồi .33 3.6.3 Phương pháp kháng khuẩn .33 3.7 Phương pháp xử lý số liệu 34 CHƯƠNG 4.1 4.1.1 4.2 4.2.1 4.2.2 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 35 Kết tinh 35 Khảo sát tỷ lệ dung mơi n-Hexan dịch trích 35 Kết chạy HPLC xác định độ tinh khiết Naringin 37 Đường chuẩn Naringin chạy sắc ký HPLC 37 Thời gian lưu chất chuẩn qua hệ thống sắc ký HPLC 37 4.2.3 Kết phân tích mẫu gửi 38 4.3 Kết xác định độ thu hồi 40 vi 4.4 Kết tính chất Naringin 41 4.4.1 Tính chất vật lý 41 4.4.2 Phản ứng với NaOH 42 4.4.3 Phản ứng Cyanidin 42 4.5 Kết kháng khuẩn 43 4.5.1 Kháng khuẩn E.coli 43 4.5.2 Kháng khuẩn Staphylococcus aureus 44 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 45 5.1 Kết luận 45 5.2 Kiến nghị 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 vii B8 Kết chạy HPLC Naringin mẫu 13 B9 Kết chạy HPLC mẫu 14 15 B10 Đường chuẩn Naringin dựng theo phương pháp đo quang Đường chuẩn Naringin 2.5 y = 0.0383x - 0.0131 R² = 0.9999 OD 1.5 0.5 0 10 20 30 40 50 60 Nồng độ Naringin (ppm) B11 Khối lượng tinh thể Naringin thu sau trình kết tinh mẫu Mẫu Khối lượng Naringin sau kết tinh (g) Khối lượng Naringin sau kết tinh lại (g) M1 0.4284 0.0925 M2 0.4734 0.1706 M3 0.4625 0.166 M4 0.4046 0.0854 16 B12 Hình ảnh đường kính kháng khuẩn Naringin E.coli Nồng độ Naringin Kết đường kính kháng khuẩn (mm) (ppm) 45 60 75 17 100 150 200 18 250 300 350 19 B13 Kết đo đường kính kháng E.coli Naringin đĩa Đường kính kháng khuẩn (mm) Nồng độ Naringin (ppm) Đĩa Đĩa Đĩa 100 1–2 2–3 1.5 – 150 5–3 2–3 3–3 200 4–6 – 3.5 5.5 – 250 – 3.5 _ _ 300 3–2 _ 2–2 350 7–8 4–5 – 5.5 20 B14 Hình ảnh đường kính kháng khuẩn Naringin Staphylococcus aureus Nồng độ Naringin (ppm) Kết đường kính kháng khuẩn 45 60 75 21 100 150 200 22 250 300 350 B15 Kết đo đường kính kháng Staphylococcus aureus Naringin đo đĩa Nồng độ Naringin (ppm) Đường kính đo (mm) 23 Đĩa Đĩa Đĩa 100 – 5.5 6–6 – 6.5 150 9–9 7.5 – 10 8.5 – 200 9.5 – 9.5 7.5 – 6.5 – 7.5 250 7–8 9–7 – 5.5 300 8.5 – 8.5 12 – 12 – 7.5 350 6.5 – 7.5 8–8 5–8 24 PHỤ LỤC C HÌNH ẢNH THIẾT BỊ SỬ DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU Tủ sấy Cân số Bể ổn nhiệt Thiết bị quay chân khơng Cân số Lò vi sóng 25 Nồi hấp tiệt trùng đứng Tủ cấy Buồng đếm hồng cầu Kính hiển vi 26 Tủ ấm 27 ... TP.HCM KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP TINH SẠCH NARINGIN VÀ NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA NARINGIN TÁCH CHIẾT TỪ VỎ QUẢ CAM GVHD: PHAN THỊ HỒNG LIÊN SVTH: NGUYỄN THỊ NGUYÊN... tài: Tinh Naringin nghiên cứu khả kháng khuẩn Naringin tách chiết từ vỏ cam Đề tài thực với nội dung sau: Thí nghiệm tinh Naringin phương pháp chiết lỏng – lỏng Xác định độ tinh khiết Naringin. .. NGUYÊN MSSV: 2022150233 LỚP: 06DHDB3 Tên đề tài: Tinh Naringin nghiên cứu khả kháng khuẩn Naringin tách chiết từ vỏ cam Nhận xét giảng viên hướng dẫn Về tinh thần, thái độ làm việc sinh viên: