Cao chiết nước bài thuốc gồm Cỏ xước, Lá lốt, Cây trinh nữ, Rễ nhàu, Tang ký sinh. Thử nghiệm độc tính cấp qua việc xác định liều Dmax, LD100, LD50, LD0. Khảo sát tác động giảm đau trên mô hình gây đau quặn bụng bằng acid acetic trên 32 chuột chia ngẫu nhiên làm 4 lô, lô chứng bệnh cho chuột uống nước cất, lô đối chứng cho chuột uống diclofenac liều 7,5 mg/kg, lô thử 1 cho chuột uống cao thử liều 60 mg/kg, lô thử 2 cho liều 120 mg/kg; theo dõi số lần đau quặn bụng các lô từng khoảng thời gian khác nhau. Khảo sát tác dụng kháng viêm cấp trên mô hình gây viêm bàn chân chuột bằng carrageenan trên 24 chuột chia ngẫu nhiên vào 3 lô, lô chứng bệnh cho uống nước cất, lô đối chứng cho uống diclofenac liều 10 mg/kg, lô thử cho uống cao thử liều 60 mg/kg; theo dõi thể tích bàn chân chuột ở các thời điểm khác nhau.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học ĐỘC TÍNH CẤP VÀ TÁC ĐỘNG GIẢM ĐAU NGOẠI BIÊN, KHÁNG VIÊM CẤP CỦA BÀI THUỐC THU THẬP TẠI TỈNH SÓC TRĂNG Bùi Phạm Minh Mẫn*, Nguyễn Văn Đàn*, Bùi Chí Bảo*, Trịnh Thị Diệu Thường* TĨM TẮT Đặt vấn đề: Tại Việt Nam, theo nghiên cứu Hồ Phạm Thục Lan TP.HCM bệnh lý thối hóa khớp có tần suất chung 66% người 40 tuổi, chủ yếu thối hóa cột sống thắt lưng thái hóa khớp gối Việc điều trị thuốc đặc biệt thuốc kháng viêm bệnh lý thối hóa khớp có hiệu cải thiện triệu chứng nhanh nhiên có tác dụng phụ tim mạch, thận đường tiêu hóa, gây khó khăn việc sử dụng lâu dài Trong nước ta, với tinh thần “Nam dược trị nam nhân”, có nhiều thuốc dân gian lưu giữ bảo tồn ngày Cụ thể, Sóc Trăng qua sưu tầm thuốc dân gian chúng tơi có thu thập thuốc gồm Cỏ xước, Lá lốt, Cây trinh nữ, Rễ nhàu Tang ký sinh sử dụng để điều trị số bệnh xương khớp, đặc biệt thái hóa khớp gối Hầu hết người dân sử dụng thuốc truyền miệng, chưa có nghiên cứu chứng minh hiệu tính an tồn thuốc Vì đề tài muốn nghiên cứu độc tính cấp tác động giảm đau ngoại biên, kháng viêm cấp thuốc Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Cao chiết nước thuốc gồm Cỏ xước, Lá lốt, Cây trinh nữ, Rễ nhàu, Tang ký sinh Thử nghiệm độc tính cấp qua việc xác định liều Dmax, LD100, LD50, LD0 Khảo sát tác động giảm đau mơ hình gây đau quặn bụng acid acetic 32 chuột chia ngẫu nhiên làm lô, lô chứng bệnh cho chuột uống nước cất, lô đối chứng cho chuột uống diclofenac liều 7,5 mg/kg, lô thử cho chuột uống cao thử liều 60 mg/kg, lô thử cho liều 120 mg/kg; theo dõi số lần đau quặn bụng lô khoảng thời gian khác Khảo sát tác dụng kháng viêm cấp mơ hình gây viêm bàn chân chuột carrageenan 24 chuột chia ngẫu nhiên vào lô, lô chứng bệnh cho uống nước cất, lô đối chứng cho uống diclofenac liều 10 mg/kg, lô thử cho uống cao thử liều 60 mg/kg; theo dõi thể tích bàn chân chuột thời điểm khác Kết quả: Cao chiết nước thuốc gồm Cỏ xước, Lá lốt, Cây trinh nữ, Rễ nhàu, Tang ký sinh không xác định giá trị LD50, khơng thể độc tính cấp đường uống với liều tối đa bơm qua đầu kim (Dmax) 20,06 g/kg trọng lượng chuột Qua thử nghiệm tác dụng giảm đau ngoại biên, chuột uống cao thử liều 60 120 mg/kg có số lần đau quặn thấp lơ chứng bệnh có ý nghĩa thống kê khoảng thời gian 20 phút đầu từ phút 36 đến phút 40 So với diclofenac liều 10mg/kg, số lần đau quặn lô cao thử liều 60 120 mg/kg khác khơng có ý nghĩa thống kê; so sánh số lần đau quặn liều 60 120 mg/kg khơng khác biệt có ý nghĩa thống kê Qua thử nghiệm tác dụng kháng viêm cấp, lô chuột uống cao thử liều 60 mg/kg có tác động giảm độ phù bàn chân so với lô chứng bệnh thời điểm sau gây viêm (30,63% 51,73%); so sánh lô cao thử liều uống 60 mg/kg lô đối chứng diclofenac 10 mg/kg, tất thời điểm khảo sát, tác động giảm độ phù bàn chân chuột lô cao liều 60 mg/kg thấp sơ với lô đối chứng diclofenac 10mg/kg, khác biệt có ý nghĩa thống kê Kết luận: Cao chiết từ thuốc khơng có độc tính cấp chuột, có tác động giảm đau ngoại biên liều 60 mg/kg 120 mg/kg tương tự diclofenac liều 10 mg/kg khơng có khác biệt liều Cao chiết uống liều 60 mg/kg có tác dụng kháng viêm cấp thời điểm sau gây viêm giờ, tác động chậm thấp so với thuốc đối chứng diclofenac 10 mg/kg mô hình gây phù chân chuột Từ khóa: Cỏ xước, Lá lốt, Cây trinh nữ, Rễ nhàu, Tang ký sinh, thoái hoá khớp gối * Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: ThS BS Bùi Phạm Minh Mẫn Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền ĐT: 0916080803 Email: bpmman@ump.edu.vn 75 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 ABSTRACT ACUTE TOXICITY AND PERIPHERAL PAIN RELIEVING, ACUTE ANTI-INFLAMMATORY EFFECT OF FOLK REMEDY IN SOC TRANG PROVINCE Bui Pham Minh Man, Nguyen Van Dan, Bui Chi Bao, Trinh Thi Dieu Thuong * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol 23 – No - 2019: 75 – 81 Objectives: In Vietnam, according to Ho Pham Thuc Lan's study in Ho Chi Minh City, osteoarthritis disease has a common frequency of 66% in people over 40 years old, mainly degenerative lumbar spine and knee joint The treatment with drugs, especially anti-inflammatory drugs in degenerative joint diseases, effectively improves symptoms quickly but there will be side effects on the heart, kidney and gastrointestinal tract, making it difficult for long-period use Meanwhile in our country, with the spirit of "Southern medicine is for southern people", many folk remedies are still preserved until today Specifically, in Soc Trang, we have collected remedies including Achyranthes aspera L., Piper lolot L., Mimosa pudica L., Morinda citrifolia L., Loranthus parasiticus Merr, which are used to treat osteoarthritis, especially, degenerative knee joint Most people use the remedy because of word-of- mouth There has not been any research to prove the effectiveness and safety of the prescription Therefore, the study wants to study acute toxicity and peripheral pain relieving and acute antiinflammatory effects of the above-mentioned remedy Materials and Methods highly-extracted including Achyranthes aspera L., Piper lolot L., Mimosa pudica L., Morinda citrifolia L., Loranthus parasiticus Acute toxicity test was used to determine Dmax, LD100, LD50, LD0 values Investigating analgesic effect on acetic acid-induced abdominal cramps model in 32 mice which were randomly divided into groups In control groups: mice were taken distilled water In treatment group: mice were taken diclofenac dose of 7.5 mg/kg In trial group: group mice were taken a high dose of extract, 60 mg/kg and group with 120 mg/kg; monitor the number of abdominal cramps in each group in different periods Investigating acute anti-inflammatory effect of carrageenan-induced inflammation of mouse foot model in 24 mice which were randomly divided into group, control group: taken distilled water, treatment group: taken diclofenac dose of 10 mg/kg, trial group taken dose of 60 mg/kg of extract; track mice feet volume at different times Results The LD50 value of aqueous extract including Combretum Achyranthes aspera L., Piper lolot L., Mimosa pudica L., Morinda citrifolia L., Loranthus parasiticus Merr could not be determined The extract did not show orally acute toxicity with maximum dose to be taken (Dmax) (20.06 g/kg of mouse weight) Through the testing of peripheral analgesic effects, mice taken high doses of 60 and 120 mg/kg had a lower number of cramps than the control group with statistical significance during the first 20 minutes and from 36 to 40 Compared with diclofenac dose of 10mg/kg, the number of pain episodes were different from that in the high dose of 60 and 120 mg/kg doses with no statistically significance; Comparing the numbers of cramps between doses of 60 and 120 mg/kg, they did not differ significantly Through acute anti-inflammatory test, rats with high dose of 60 mg/kg had an effect on reducing foot edema compared to the control group at hours after inflammation (30.63% and 51.73) %); comparing between extract of 60 mg/kg and the control group of diclofenac 10 mg/kg, in all time, the effect of lowering rat foot edema in the high dose of 60 mg/kg was lower than that of the control group diclofenac 10mg/kg, the difference was statistically significant Conclusions: Aqueous extract of the remedy was not toxic in mice and had a peripheral analgesic effect at doses of 60 mg/kg and 120 mg/kg similar to diclofenac at a dose of 10 mg/kg There was no difference between doses The extract of 60 mg/kg had an acute anti-inflammatory effect at the time of hours after inflammation, this effect is slower and lower than that of diclofenac 10 mg/kg on the model of rat foot edema Keywords: Achyranthes aspera L., Piper lolot L., Mimosa pudica L., Morinda citrifolia L., Loranthus 76 Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học parasiticus Merr., degenerative knee joint ĐẶT VẤN ĐỀ Tại Việt Nam, theo nghiên cứu Hồ Phạm Thục Lan bệnh xương khớp thường gặp TP.HCM cho thấy người 40 tuổi tần suất chung thoái hóa khớp 66%, vị trí thường gặp cột sống thắt lưng khớp gối(5) Các số liệu cho thấy quy mô bệnh xương khớp Việt Nam tương đương với nước khác giới Các biện pháp dùng thuốc tân dược (thuốc giảm đau, chống viêm non-steroid steroid) có hiệu nhanh triệu chứng, song gây nhiều tác dụng phụ cho tim mạch, thận đường tiêu hóa Do đó, trường hợp đau mạn tính sử dụng thuốc giảm đau kháng viêm tân dược thường xun việc sử dụng thuốc có nguồn gốc thảo dược điều trị bệnh lý thoái hóa khớp với tác dụng khơng mong muốn nhà khoa học quan tâm nghiên cứu Ở nước ta, truyền thống sử dụng thuốc kinh nghiệm dân gian truyền từ nhiều đời lưu giữ bảo tồn ngày nay, câu nói Tuệ Tĩnh “Nam dược trị nam nhân”(8) Ở địa phương có thuốc kinh nghiệm dân gian truyền miệng, Sóc Trăng qua thu thập chúng tơi có nhiều thuốc điều trị bệnh lý khác có gồm cỏ xước, lốt, trinh nữ, rễ nhàu, tang ký sinh sử dụng để điều trị số bệnh xương khớp, đặc biệt thoái hóa khớp gối Hầu hết người dân sử dụng đánh giá hiệu thuốc dân gian nói chung thuốc nói riêng truyền miệng, chưa có nghiên cứu thực nghiệm chứng minh điều này, chưa có nghiên cứu khảo sát đánh giá độc tính tiềm ẩn Vì đề tài muốn thực đánh giá nhằm xác định độc tính tiềm ẩn thuốc gồm cỏ xước, lốt, trinh nữ, rễ nhàu, tang ký sinh Cụ thể, nghiên cứu độc tính cấp tác động giảm đau ngoại biên, kháng viêm cấp Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền chuột thuốc Qua tạo tiền đề để thực nghiên cứu khác ứng dụng lâm sàng điều trị bệnh lý thối hóa khớp đặc biệt thối hóa khớp gối ĐỐITƯỢNG- PHƯƠNG PHÁPNGHIÊNCỨU Đối tượng nghiên cứu Chế phẩm nghiên cứu Cao chiết nước thuốc điều trị thối hóa khớp gối thu thập tỉnh Sóc Trăng gồm: Cỏ xước (Combretum achyranthes aspera L.), Lá lốt (Piper lolot L.), Cây trinh nữ (Mimosa pudica L.), Rễ nhàu (Morinda citrifolia L.), Tang ký sinh (Loranthus parasiticus Merr) Động vật thử nghiệm Chuột nhắt trắng (Mus musculus var albino), trưởng thành, khỏe mạnh, từ 10-12 tuần tuổi, có nguồn gốc từ Viện Kiểm nghiệm thuốc Tp Hồ Chí Minh Chuột ni điều kiện phòng thí nghiệm, vệ sinh hàng ngày, điều kiện 12 sáng/tối, nhiệt độ 28oC, ẩm độ 0,05) Tác động kháng viêm cấp thuốc chuột Do cao thử thể tác động giảm đau ngoại biên không khác biệt có ý nghĩa thống kê liều 60 120 mg/kg nên khảo sát tác động kháng viêm cấp cao thử liều 60 mg/kg Kết Sự thay đổi độ phù chân chuột theo thời gian lơ chuột trình bày Bảng Chuột uống cao thử liều 60 120 mg/kg có số lần đau quặn thấp lơ chứng bệnh có ý nghĩa thống kê khoảng thời gian 0-20 phút phút 36-40 (p