Tại tỉnh Sóc Trăng, khi thu thập các bài thuốc theo kinh nghiệm dân gian được người dân sử dụng, chúng tôi có được hàng trăm bài thuốc, trong đó có bài thuốc độc vị lá Mật gấu dùng để hạ đường huyết. Lá Mật gấu còn được gọi là cây lá đắng, được người dân sử dụng như một loại thực phẩm hàng ngày. Chính vì thói quen sử dụng lá Mật gấu như nguồn thực phẩm, việc dùng lá Mật gấu điều trị cho những người bệnh không bị tăng đường huyết, hay những người khoẻ mạnh với mục đích phòng ngừa bệnh có gây ra tác dụng không mong muốn cho người sử dụng như: tăng cân, hạ đường huyết hay các độc tính khác. Để trả lời cho câu hỏi đó chúng tôi tiến hành nghiên cứu này như bước khởi đầu nhằm đánh giá độc tính cấp của bài thuốc lá Mật gấu trên chuột, đánh giá tác động của bài thuốc lên trọng lượng và đường huyết của chuột khỏe mạnh qua đó có thể thực hiện thêm các nghiên cứu tiếp theo.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học ĐỘC TÍNH CẤP VÀ TÁC ĐỘNG LÊN TRỌNG LƯỢNG, ĐƯỜNG HUYẾT CỦA CHUỘT KHỎE MẠNH CỦA CAO NƯỚC LÁ MẬT GẤU THU THẬP TẠI TỈNH SÓC TRĂNG Nguyễn Văn Đàn*, Kiều Xuân Thy*, Bùi Phạm Minh Mẫn*, Bùi Chí Bảo*, Trịnh Thị Diệu Thường* TÓM TẮT Đặt vấn đề: Tại tỉnh Sóc Trăng, thu thập thuốc theo kinh nghiệm dân gian người dân sử dụng, chúng tơi có hàng trăm thuốc, có thuốc độc vị Mật gấu dùng để hạ đường huyết Lá Mật gấu gọi đắng, người dân sử dụng loại thực phẩm hàng ngày Chính thói quen sử dụng Mật gấu nguồn thực phẩm, việc dùng Mật gấu điều trị cho người bệnh không bị tăng đường huyết, hay người khoẻ mạnh với mục đích phòng ngừa bệnh có gây tác dụng khơng mong muốn cho người sử dụng như: tăng cân, hạ đường huyết hay độc tính khác Để trả lời cho câu hỏi chúng tơi tiến hành nghiên cứu bước khởi đầu nhằm đánh giá độc tính cấp thuốc Mật gấu chuột, đánh giá tác động thuốc lên trọng lượng đường huyết chuột khỏe mạnh qua thực thêm nghiên cứu Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Chế phẩm nghiên cứu Cao nước Mật gấu Thử nghiệm độc tính cấp qua việc xác định liều Dmax, LD100, LD50, LD0 Khảo sát tác động lên trọng lượng đường huyết chuột khỏe mạnh cách chọn 18 chuột khỏe mạnh chia làm lô ngẫu nhiên (mỗi lô con), lô sinh lý cho chuột uống nước cất, lô BT100 cho chuột uống Cao nước Mật gấu liều 100 mg/kg, lô BT200 cho chuột uống Cao nước Mật gấu liều 200 mg/kg Cho chuột uống nước cất cao thử lần/ngày 14 ngày Trọng lượng chuột theo dõi ngày, đường huyết chuột đo ngày cách lấy máu tĩnh mạch đuôi chuột vào buổi sáng sau cho chuột nhịn đói 12 Kết trình bày dạng trung bình ± sai số chuẩn giá trị trung bình (Mean ± SEM), phân tích thống kê phép kiểm Kruskal-Wallis Mann-Whitney với phần mềm SPSS 22.0 Kết quả: Cao nước Mật gấu không xác định giá trị LD50, độc tính cấp với liều tối đa (Dmax) 20,06 g/kg trọng lượng chuột Đối với tác động lên trọng lượng, nhóm khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê với p>0,05 trọng lượng tất ngày khảo sát Đối với tác động lên đường huyết, thay đổi đường huyết lô khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê với p>0,05 Kết luận: Cao nước Mật gấu khơng thể độc tính cấp chuột, khơng có tác động lên trọng lượng đường huyết chuột khỏe mạnh Từ khóa: Mật gấu, Lá đắng, đường huyết, trọng lượng, độc tính ABSTRACT ACUTE TOXICITY AND EFFECT OF VERNONIA AMYGDALINA LEAF EXTRACT COLLECTED IN SOC TRANG PROVINCE ON WEIGHT AND BLOOD SUGAR OF NORMAL MICE Nguyen Van Dan, Kieu Xuan Thy, Bui Pham Minh Man, Bui Chi Bao, Trinh Thi Dieu Thuong * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol 23 – No - 2019: 179 - 184 Objectives: In Soc Trang province, we have collected hundreds of folk remedies, including the Vernonia amygdalina used to reduce blood glucose level Vernonia amygdalina is also known as bitter leaves, used as a daily Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: ThS.BS Kiều Xuân Thy ĐT: 0902485417 Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Email: kxthy@ump.edu.vn 179 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 food Because of the habit of using Vernonia amygdalina leaves as a food source, the use of Vernonia amygdalina to treat patients without hyperglycemia, or healthy people with the purpose of preventing the disease, can cause undesirable effects, such as weight gain, hypoglycemia or other toxicity To answer that question, we conducted this study as an initial step to assess the acute toxicity of Vernonia amygdalina in mice, the effect of the plant on weight, and blood glucose of healthy mice through so that further research can be done Materials and Methods: The material is aqueous extract of Vernonia amygdalina Acute toxicity was found by determining Dmax, LD100, LD50, LD0 doses Survey on healthy weight and glycemic rats by selecting 18 healthy mice divided into random groups (6 mice/group)), group used distilled water, group used extract of Vernonia amygdalina 100 mg/kg, group used extract of Vernonia amygdalina 200 mg/kg Give mice distilled water or extract time/day during 14 days The weight was monitored every day, the blood sugar was measured every days by taking the venous blood vein in the morning after starving for at least 12 hours The results were presented as mean ± standard error of Mean (SEM), analyzed statistically by Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests with SPSS 22.0 software Results: Aqueous extract of Vernonia amygdalina could not be determined LD50 value, not showing toxicity at maximum dose (Dmax) is 20.06 g/kg of mouse weight For effects on weight, there was no statistically significant difference between groups For effects on hyperglycemic, there was also no statistically significant difference between groups with p>0.05 Conclusions: Extract of Vernonia amygdalina did not show acute toxicity in mice as well as effect on weight and blood glucose of healthy mice Keywords: Vernonia amygdalina delile, Bitter leaves, glycemia, weight, toxicity Trung ương tiến hành, tỷ lệ mắc đái tháo ĐẶT VẤN ĐỀ đường toàn quốc người trưởng thành Sử dụng thuốc nguồn gốc thảo dược 5,42% Đái tháo đường nguyên nhân tử vong kinh nghiệm dân gian quý báu phòng đứng hàng thứ Việt Nam(4) Tác động ngừa điều trị bệnh dân tộc Việt Nam Ở đái tháo đường làm gia tăng tỷ lệ tử vong, địa phương có thuốc giảm chất lượng sống, tăng gánh nặng kinh sử dụng theo kinh nghiệm “cha truyền tế cho thân người bệnh, cho gia đình cho nối”, để điều trị phòng ngừa số bệnh lý xã hội(5) đặc biệt Trong cơng tác thu thập để gìn giữ Hiện có nhiều tiến điều trị đái kinh nghiệm điều trị bệnh Sóc Trăng, tháo đường, nhiên loại thuốc tân dược chúng tơi có thu thập hàng trăm thuốc nhiều có tác dụng khơng mong muốn, sử dụng để điều trị hầu hết loại bệnh lý chống định số bệnh nhân cụ thể Ưu thường gặp, có thuốc độc vị Mật điểm thuốc thảo dược tác dụng gấu dùng để điều trị đái tháo đường với tác khơng mong muốn có chỗ nên người bệnh dụng hạ đường huyết dễ tiếp cận Tuy nhiên, hiệu độc Năm 2017 theo ước tính Liên đồn đái tính tiềm ẩn truyền miệng, cần thực tháo đường quốc tế, Việt Nam có khoảng 3,53 nghiên cứu thực nghiệm để chứng minh Vì triệu người trưởng thành từ 20-79 tuổi mắc đái tiến hành nghiên cứu nhằm tháo đường, đến năm 2045 số tăng đánh giá độc tính cấp thuốc Mật gấu 78,5% lên 6,3 triệu người Khoảng 29.000 người chuột, đánh giá tác động thuốc lên chết có liên quan đến đái tháo đường năm trọng lượng đường huyết chuột khỏe 2017, tức khoảng 80 ca tử vong ngày(8) mạnh qua thực thêm nghiên Theo kết điều tra dịch tễ học bệnh đái tháo cứu chuột đái tháo đường để từ đường tồn quốc năm 2012 Bệnh viện Nội tiết 180 Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 ứng dụng vào lâm sàng điều trị bệnh ĐỐITƯỢNG- PHƯƠNG PHÁPNGHIÊNCỨU Đối tượng nghiên cứu Chế phẩm nghiên cứu Cao nước Mật gấu (còn gọi Lá đắng) tên khoa học Vernonia amygdalina Delile Động vật thử nghiệm Chuột nhắt trắng (Mus musculus var Albino), trưởng thành, khỏe mạnh, từ 10-12 tuần tuổi có nguồn gốc từ Viện Kiểm nghiệm thuốc Tp Hồ Chí Minh Chuột ni điều kiện phòng thí nghiệm, vệ sinh hàng ngày, điều kiện 12 sáng/tối, nhiệt độ 28oC, ẩm độ 0,05) Bảng Trọng lượng trung bình lơ chuột 15 ngày thử nghiệm (n=6) 36,95 ± 1,32 38,08 ± 1,20 36,88 ± 1,35 36,68 ± 1,29 N14 37,88 ± 1,18 37,64 ± 1,08 36,75 ± 1,27 N13 36,65 ± 1,46 33,49 ± 1,01 32,23 ± 1,15 36,40 ± 1,42 N12 36,44 ± 1,06 32,67 ± 1,19 N11 35,02 ± 1,45 N10 35,48 ± 1,34 35,66 ± 1,20 34,30 ± 1,35 34,60 ± 1,24 34,71 ± 1,04 33,90 ± 1,09 N9 33,58 ± 1,16 33,52 ± 1,01 N8 35,03 ± 1,26 29,02 ± 0,90 N7 33,23 ± 1,12 35,00 ± 1,14 33,70 ± 1,37 30,19 ± 0,96 34,95 ± 1,16 33,67 ± 1,39 N6 29,20 ± 1,13 34,50 ± 1,21 33,43 ± 1,48 33,02 ± 1,47 N5 33,97 ± 1,20 32,95 ± 1,41 N4 33,08 ± 1,55 32,53 ± 1,48 N3 30,70 ± 1,05 32,52 ± 1,53 N2 29,62 ± 1,63 26,73 ± 0,70 29,47 ± 1,34 N1 26,42 ± 0,95 N0 26,87 ± 1,29 Cao 200 mg/kg Cao 100 mg/kg Sinh lý Lô Bảng Đường huyết trung bình chuột lơ vào ngày 0, 5, 10, 15 thử nghiệm Lơ 182 Đường huyết trung bình ± SEM (ml/dL) Ngày Ngày Ngày 10 Ngày 15 Sinh lý 103,65 ± 6,75 78,58 ± 8,05 95,09 ± 5,04 96,39 ± 7,58 Cao 100mg/kg 107,41 ± 6,81 92,23 ± 0,63 115,72 ± 10,87 97,69 ± 3,39 Cao 200mg/kg 105,42 ± 4,53 70,21 ± 3,81 108,54 ± 6,05 94,83 ± 7,63 Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 BÀN LUẬN Độc tính cấp thuốc Như vậy, qua việc thử nghiệm độc tính cấp chuột, cao nước Mật gấu khơng xác định giá trị LD50, độc tính cấp đường uống với liều tối đa cho uống qua kim (Dmax) 20,06 g/kg trọng lượng chuột Điều thể tính an tồn sử dụng thuốc thời gian ngắn, nhiên tính an toàn thuốc sử dụng thời gian dài chưa chứng minh Điều phù hợp với tình hình sử dụng thực tế thuốc địa phương khơng ghi nhận biểu độc tính cấp Nghiên cứu Y học ngày lô, điều chứng tỏ Cao nước Mật gấu tác động lên trọng lượng đường huyết chuột khỏe mạnh liều 100 mg/kg liều 200 mg/kg Điều tương đồng với kết nghiên cứu tác giả Amole OO, nhóm tác giả kết luận khơng có thay đổi trọng lượng mức đường huyết chuột thử nghiệm với liều uống nghiên cứu 87,53g/kg – 92,57g/kg, uống liên tục tuần, khác biệt trọng lượng khơng có ý nghĩa thống kê (p >0,05)(1) Kết tương đồng với nghiên cứu nhóm tác giả Yusmazura Zakaria, Nurhazirah Zainul Azlan, Hussin Muhammad, nhóm tác giả tiến hành thu thập Mật gấu Malaysia, thuốc thử dịch chiết nước Mật gấu thử chuột nhắt trắng Trong nghiên cứu này, chuột thử nghiệm uống dịch chiết nước Mật gấu với liều 175, 550, 2000 5000 mg/kg, hòa tan 1ml nước cất quan sát hàng ngày 14 ngày Kết cho thấy khơng có chuột chết suốt 14 ngày khơng có thay đổi hình thái hay hành vi nhóm chuột thử nghiệm khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p >0,05)(10) Tuy nhiên, theo nghiên cứu nhóm tác giả Osinubi AA năm 2005, chuột bình thường uống dịch chiết Mật gấu với liều 500g/kg qua ống thông dày, xét nghiệm đường huyết với lần đo, lần đo cuối sau uống dịch chiết 12 giờ, ghi nhận thay đổi đường huyết có ý nghĩa thống kê (p 0,05) không xảy độc tính nhóm nghiên cứu(1) Nước sắc Mật gấu thuốc theo kinh nghiệm dân gian có tác dụng điều trị bệnh lý đái tháo đường Từ khảo sát tác động lên trọng lượng đường huyết chuột cho thấy Cao nước Mật gấu khơng có tác động lên chuột có đường huyết khỏe mạnh Có thể Cao nước Mật gấu có tác dụng lên chuột bị đái tháo đường, cần thực nghiên cứu chuột bị đái tháo đường Tác động lên trọng lượng đường huyết chuột khỏe mạnh KẾT LUẬN Qua việc khảo sát tác động lên trọng lượng đường huyết chuột khỏe mạnh, so sánh với nhóm chứng lô sinh lý cho uống nước cất theo dõi 15 ngày khơng có thay đổi khác biệt trọng lượng đường huyết Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Cao nước Mật gấu độc tính cấp chuột, khơng có tác động lên trọng lượng đường huyết chuột khỏe mạnh TÀI LIỆU THAM KHẢO Amole OO, Onakoya JAA, Izegbu MC, et al (2006) “Toxicity studies of the aqueous extract of Vernonia amygdalina” Biomedical Research, 17(1):39-40 183 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Bộ Y tế (2002) Dược điển Việt Nam IV Nhà xuất Y Học Hà Nội, https://xuatbanyhoc.vn/duoc-dien-viet-nam-lan-xuat-banthu-4 Bộ Y tế (2017) Hướng dẫn phương pháp chế biến vị thuốc cổ truyền ban hành ngày 11/7/2017 Thông tư 30/2017/TT-BYT Centers for Disease Control and Preventio (2019) Global Health – Vietnam CDC, www.cdc.gov/globalhealth/ Cục Y tế dự phòng (2015) “Điều tra quốc gia: Yếu tố nguy bệnh không lây nhiễm (STEPS)” Bộ Y tế, http://vncdc.gov.vn/vi/tin-tuc-trong-nuoc Đỗ Tất Lợi (2005) Những thuốc vị thuốc Việt Nam Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Hà Nội, https://www.google.com/search Fasola TR, Okeocha PC, Odetola A (2010) “Screening for the Hypoglycaemic Potentials of the Extract of Vernonia amyggalina” Ethnobotanical Leaflets, 1(7):59-65 184 International Diabetes Federation (2017) IDF Diabetes Atlas 8th edition URL: https://diabetesatlas.org/resources/2017-atlas.html Osinubi AA, Adejunwon SA, Noronha CC, et al (2005) “Acute Effect of Vernonia Amygdalina on Blood Glucose Levels in Normoglycaemic and Alloxan-Induced Diabetic Male SpragueDawley Rats” Ma West Africa Journal of Anatomy, 8:161-168 10 Zakaria Y, Azlan NZ, et al (2016) “Phytochemicals and acute oral toxicity studies of the aqueous extract of Vernonia amygdalina from state of Malaysia” Journal of Medicinal Plants Studies, 4(3):01-05 Ngày nhận báo: 28/07/2019 Ngày phản biện nhận xét báo: 20/08/2019 Ngày báo đăng: 14/09/2019 Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền ... nước Mật gấu khơng có tác động lên chuột có đường huyết khỏe mạnh Có thể Cao nước Mật gấu có tác dụng lên chuột bị đái tháo đường, cần thực nghiên cứu chuột bị đái tháo đường Tác động lên trọng. .. thay đổi khác biệt trọng lượng đường huyết Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Cao nước Mật gấu khơng thể độc tính cấp chuột, khơng có tác động lên trọng lượng đường huyết chuột khỏe mạnh TÀI LIỆU THAM... xảy độc tính nhóm nghiên cứu(1) Nước sắc Mật gấu thu c theo kinh nghiệm dân gian có tác dụng điều trị bệnh lý đái tháo đường Từ khảo sát tác động lên trọng lượng đường huyết chuột cho thấy Cao nước