Truyền máu ngày càng phát triển, số lượng và số lần truyền máu ngày càng nhiều, dẫn đến hậu quả tạo kháng thể miễn dịch ở người nhận máu ngày càng tăng. Để phát hiện và xác định các kháng thể bất thường tư đó lựa chọn những đơn vị máu phù hợp về mặt miễn dịch, cần có dàn Hồng cầu mẫu với sự hiện diện tương đối đầy đủ các kháng nguyên của các hệ ngoài ABO.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 Nghiên cứu Y học 101 THIẾT LẬP DÀN HỒNG CẦU MẪU DÙNG ĐỂ PHÁT HIỆN VÀ XÁC ĐỊNH CÁC KHÁNG THỂ BẤT THƯỜNG TẠI BỆNH VIỆN CHỢ RẪY TĨM TẮT Mở đầu: Truyền máu ngày phát triển, số lượng số lần truyền máu ngày nhiều, dẫn ñến hậu quảtạo kháng thể miễn dịch người nhận máu ngày tăng Để phát vàxác ñịnh kháng thể bất thường tư lựa chọn đơn vị máu phù hợp mặt miễn dịch, cần có dàn Hồng cầu mẫu với diện tương ñối ñầy ñủ kháng nguyên hệ ABO Phương pháp: Phân loại kháng ngun ngồi ABO kháng thể đặc hiệu Từ đó, xếp dàn panel cho có đầy ñủ kháng nguyên Kết quả: Tháng năm 2006, Thái lan, với giúp ñỡ Tiến sĩ Oytip nathalang, chúng tơi tiến hành xác định kháng nguyên hồng cầu hệ ABO 42 mẫu máu nhân viên Bệnh viện Chợ Rẫy.Từ đó, chúng tơi thiết lập hai dàn Hồng cầu mẫu giúp cho việc phát ñịnh danh khán thể bất thường Kết luận: Dàn panel ñã giúp phát ñịnh danh kháng thể bất thường, làm cho truyền máu an toàn mặt miễn dịch Từ khóa: panel hồng cầu, dàn hồng cầu, định danh kháng thể ABSTRACT ESTABLISHMENT OF THE PANEL CELLS SYSTEM FOR ANTIBODY SCREENING AND ANTIBODY IDENTIFICATION TO ENSURE THE SAFETY OF BLOOD TRANSFUSION IN CHỢ RẪY HOSPITAL Tran Van Bao, Tu Ana, Tran Nguyen Truong Son, Tran Thi My Duyen, Phan Thi Thanh Loc, Pham Thị Hong Ngoc*, Oytip Nathalang * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 14 - Supplement of No - 2010: Background: Blood transfusion is daily going on with a mass of quantities The times of blood transfusion seem to be rising To detect and confirm the irregular antibodies to choose the units of blood matched with the patients on immunology, we have to establish the panel cells system with the presence of the antigens different from of ABO blood group system Methods: We identified the antigens different from ABO blood group system Results: In March 2006, from 42 blood samples collected from medical officers at Cho Ray Hospital by the great assistant of Dr Oytip Nathalang Since then, we had established the panel cells system for antibody screening and antibody identification Conclusion: These issues will lead to the unexpected result that there will have the presence of immunological antibodies in the blood recipients Keyword: red cell panel, antibody screening qua kháng thể bất thường xuất ngày ĐẶT VẤN ĐỀ nhiều có vai trò quan trọng an toàn Truyền máu phương thức trị liệu ñặc biệt, truyền máu Tỷ lệ Kháng thể bất thường ngồi hiệu to lớn ñược khẳng ñịnh, máu ñem lại cho người nhận tác dụng người truyền máu nhiều lần cao: 13,04% (miền khơng mong muốn, chí gây tai biến dẫn Bắc); 16,40% (miền Nam)(3,4) (3) đến tử vong Đại ña số kháng thể phát thuộc hệ Truyền máu ngày phát triển , số lượng số nhóm máu ngồi ABO, ñều kháng thể bất thường lần truyền máu nhiều, số người nhận máu khơng miễn dịch Vì truyền máu nhiều lần cho người khả xảy tai biến “không vài lầnmànhiều lần ngày tăng lên Hậu hoà hợp “ dẫn đến việc truyền máu khơng hiệu *BV Chợ Rẫy, **Đại học Dược Hà Nội, ***PhramongKutKlao College of Medicine, Bangkok, Thailand Tác giả liên hệ: ThS Trần Văn Bảo, ĐT: 0903978845; Email: tranvanbao178@yahoo.com Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy Năm 2010 553 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 quả, chí gây tán huyết ảnh hưởng nghiêm trọng đến tình trạng sức khoẻ bệnh nhân(6) Để khắc phục hậu phải tiến hành phát xác ñịnh ñược kháng thể bất thường ñể từ ñó lựa chọn đơn vị máu hồ hợp miễn dịch, mang lại hiệu an toàn cho người bệnh(7) Các trang thiết bị sinh phẩm chuyên dùng góp phần lớn vào việc thực an tồn truyền máu.Gần ñây việc chế tạo sinh phẩm dùng kiểm nghiệm thay sản phẩm ngoại nhập Chính việc chế tạo dàn Hồng cầu mẫu để phát xác định kháng thể bất thường ngồi hệ ABO, từ chọn đơn vị máu phù hợp phenotype ñể truyền cho bệnh nhân cần thiết Do chúng tơi thực đề tài nhằm mục tiêu: Xây dựng thiết lập ñược dàn hồng cầu mẫu ñể dùng việc phát định danh kháng thể bất thường ngồi hệ ABO góp phần vào việc thực chương trình an tồn truyền máu quốc gia ñược cao Mỗi dàn hồng cầu gồm từ – 11 mẫu hồng cầu có đầy ñủ kháng nguyên hệ Phương pháp thống kê Dùng phương pháp thống kê mơ tả, tính tỷ lệ % kháng nguyên diện mẫu thử ñể phân loại chọn lựa kháng nguyên thiết lập dàn hồng cầu KẾT QUẢ Xác ñịnh kháng nguyên Thực việc xác ñịnh kháng nguyên 34 mẫu thử nhóm “O”, có kết âm tính với HIV, HBV, Anti-HCV Dùng Gel-card (Dia- Med) có 22 kháng thể đơn ñặc hiệu hệ, thực phản ứng ngưng kết với hồng cầu mẫu thử VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁPNGHIÊN CỨU Ngun vật liệu - Mẫu máu đơng chống đơng nhân viên BV CHỢ RẪY có nhóm máu “O”, khơng có tác nhân gây bênh HIV,HBV, anti-HCV, giang mai… - Các gel-card dùng việc xác ñịnh kháng Kết sau: Bảng Tỷ lệ kháng nguyên hồng cầu ngòai hệ ABO Kháng huyết đơn đặc hiệu hệ ngồi ABO Hệ Rh Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu ñược tiến hành theo phương pháp mơ tả cắt ngang, tiền cứu Xác định kháng nguyên Dùng Gel-card (Dia-Med) có chứa 22 kháng thể ñặc hiệu hệ gồm: Rhesus, Kell, Kidd, Duffy, MNSs, P,cho phản ứng hồng cầu mẫu thử, với kỹ thuật Antiglobulin gián tiếp, ñể xác ñịnh kháng nguyên hệ ABO Ghi nhận kết theo mức ñộ ngưng kết từ 1+ - 4+ Các mẫu thử cho kết ngưng kết 1+ , 2+ ñược kiểm tra lại lần ñể khẳng ñịnh Phân loại kháng nguyên theo hệ Thiết lập dàn Hồng cầu mẫu Chọn lựa xếp kháng nguyên tất hệ nhóm hồng cầu ñã ñược xác ñịnh vào dàn hồng Số mẫu(+) (N =36) % D 31 86,1 C 33 91,6 E 13 36,1 c 22 61,1 Kháng nguyên nguyên hệ ABO - Nghiên cứu Y học e Số Kháng nguyên mẫu(+) (N =36) Hệ P Hệ Kell % p1 15 41,6 K 00 k 36 100 Kpa 00 b 36 100 Kp 36 100 Hệ Fya Duffy Fyb 32 88,8 M 33 91,6 13,8 N 13 36,1 Jka 22 61,1 S 16,6 Jkb 23 63,8 s 35 97,2 Hệ Lea Lewis Leb 19,4 Lu a 00 26 72,2 Lu b 32 88,8 Hệ Kidd Hệ MNSs Hệ Luth Nhận xét: Tỷ lệ kháng nguyên khác hệ hệ Các kháng ngun K, Lua khơng có mẫu thử Một số kháng nguyên có tất mẫu thử: D,C, e,k, s, Lub… cầu cho hiệu suất xác ñịnh kháng thể bất thường Bảng Kết phân loại phenotype ABO mẫu thử Kiểu hình Số mẫu có kiểu hình (N =36) % Kiểu hình Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy Năm 2010 Số mẫu có kiểu hình (N =36) % 554 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 DCEce DCce DEce DCe dCce dEce dce Fya+Fyb+ Fya+FybFya-Fyb+ Fya-FybJka+Jkb+ Jka+JkbJka-Jkb+ Jka-JkbLea+Leb+ Lea+LebLea-Leb+ Lea-Leb- Hệ Rh Hệ Duffy Hệ Kidd Hệ Lewis 11 16 2 26 12 10 11 21 30,5 8,3 2,7 44,4 5,5 2,7 5,5 11,1 72,2 2,7 13,8 33,3 27,7 30,5 8,3 13,8 5,5 58,3 22,2 Hệ P Nghiên cứu Y học p1 K k Kpa+Kb+ Kpa+KbKpa-Kb+ Kpa-KbM+N+ M+NM-N+ M-NS+s+ S+sS-s+ S-sLua+Lub+ Lua+LubLua-Lub+ Lua-Lub- Hệ Kell Hệ MNSs Hệ Luth 13 00 36 0 36 18 15 30 0 32 36,1 100 0 100 50,0 41,6 8,3 13,8 2,7 83,3 0 88,8 11,1 tương tự kết quảnghiên cứu tác giả khác nước Nhận xét: Các kiểu hình hệ diện tương ñối ñầy ñủ mẫu thử Tỷ lệ kiểu hình Thiết lập dàn hồng cầu mẫu Dùng việc sàng lọc kháng thể Bảng Dàn hồng cầu mẫu dùng sàng lọc kháng thể bất thường Rh Donor CDe Rh D C Kell E c e Cw K Duffy a b k Kp K a Kidd b a Lewis b Fy Fy Jk Jk a Le P b Le P1 MNSs Lutheran M N S s Lua Lub 16-0807 + + 0 + 0 + + + + + 0 + + + + cDEe 03-0807 + + + + 0 + + + + + + + 0 + + CcDe 11-0807 + + + + 0 + + + + + + + + + CcDEe 14-0807 + + + + + 0 + + + 0 + + + + + + + Dùng việc ñịnh danh kháng thể Bảng Dàn hồng cầu mẫu dùng sàng lọc kháng thể bất thường Mã số: P-CR 01 Hệ Rh M N S s P Kell Số tt Tế bào Mã số HC mẫu PHENOTYPE C c D E e Cw M N S s p K k (3) DEce + + + + o + o + o o + (5) CcDEe + + + + + o + + + + o + (6) CDe + + + + + + + 0 + (11) CDce + + + o + o + + o + o + (14) CcDEe + + + + + o + + + + o + (16) CDe + + o + o + o + + o + Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy Năm 2010 (23) CcDEe + + + + + o + 0 + o + (28) CDe + + + o + + o + + + (29) CDe + + o + o + o o + o + 10 (34) CcDEe + + + + + o + + + o + 555 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 Duffy Kidd Luthe Lewis Kpa Kpb Fya Fyb Jka Jkb Lua Lub Lea Leb o + + o + o + + + o + + o + + o + + o + + 0 + + + o + + + o + + o + + o + o + o + o + + + + o + 0 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy Năm 2010 Nghiên cứu Y học o + + o + o + + + + + + + + + o + + + + o + o + o + + o + + o + o + 556 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 Nghiên cứu Y học Nhận xét: Dàn hồng cầu dùng sàng lọc kháng thể có mẫu hồng cầu so với dàn hồng cầu dùng ñịnh danh kháng thể Tuy nhiên hai dàn có diện tối ña kháng nguyên hệ BÀNLUẬN Ngồi hệ ABO có 30 hệ nhóm máu khác với 40 kháng nguyên hồng cầu khác nhau, có hệ có tầm quan trọng truyền máu: Rhesus, Kell, Kidd, Duffy, MNSs, Levis, P, Lutheran Mỗi hệ lại có kháng nguyên khác Bằng kĩ thuật Gel-Card kĩ thuật ñại xác ñịnh kháng nguyên, làm sở cho việc thiết lập panel hồng cầu(1,5) Xác ñịnh kháng nguyên việc định nhóm thuộc hệ kháng ngun hồng cầu Càng có nhiề loại kháng huyết việc ñịnh nhóm phong phú, thực nhiều mẫu hồng cầu việc thiết lập panel thuận lợi(2) Chúng tơi chọn mẫu hồng cầu nhóm O mà khơng phải nhóm khác nhằm hạn chế phản ứng miễn dịch không mong muốn xảy Mặt khác việc chọn mẫu hồng cầu nhân viên bệnh viện nhằm trì tính thường xun bền vững panel(2,3) Lựa chọn xếp kháng nguyên cho hiệu suất xác ñịnh kháng thể bất thường panel ñược cao Việc tập hợp nhiều mẫu hồng cầu thuộc nhiều hệ kháng nguyên panel vừa phức tập vừa khó thực Việc phân nhiều loại panel panel hệ Rh, Kidd, Duffy, MNSs, ñể sử dụng theo hệ, cần thiết kết hợp tỏ tiện lợi gọn nhẹ Một panel tối thiểu nên có năm hồng cầu paenel đầy đủ có khoảng 10-11 mẫu hồng cầu thích hợp(2) KẾT LUẬN Qua việc xác định kháng nguyên hồng cầu hệ ABO kháng nguyên có tầm quan trọng truyền máu sở ñể thiết lập panel hồng cầu từ thực tế Việt Nam Việc thiết lập panel hồng cầu cần thiết để từ sử dụng việc sàng lọc ñịnh danh kháng thể bất thường nhằm nâng cao chất lượng an toàn truyền máu ĐỀ NGHỊ Cần thiết lập sớm ñưa vào sử dụng thống dàn panel hồng cầu toàn quốc TÀI LIỆU THAM KHẢO AABB(1999), Technical Manual, 13th edition 1999 Bạch Quốc Tuyên, Nguyễn Đình Lượng, P.Cazal, M.Bizot (1984), Nhóm hồng cầu Việt Nam, Một số cơng trình nghiên cứu khoa học 1974-1984, Bộ Y tế-Chuyên khoa Huyết học Truyền máu Đỗ Trung Phấn 2000, An tòan truyền máu , NXB KH-XH, Hà Nội Nguyễn Thị Huỳnh, Derek S Ford, Tran Thi Duyen, Mai Thanh Huong (2003), Jk and Mi.III phenotype frequencies in North Vietnam, Immunohematology Trần văn Bé (1994), Hệ nhóm máu hồng cầu, Lược yếu cơng trình nghiên cứu khoa học 1975-1994 Xu Huixin (2001), Hemolytic Transfusion Reaction Caused by Antibodies of Rh blood group.,Chinese journal of blood transfusion,Vol14 Woodfield G, Novaretti M.,( 2001) Rare blood, an international survey.Transfusion today, ISSN Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy Năm 2010 557 ... nước Nhận xét: Các kiểu hình hệ diện tương ñối ñầy ñủ mẫu thử Tỷ lệ kiểu hình Thiết lập dàn hồng cầu mẫu Dùng việc sàng lọc kháng thể Bảng Dàn hồng cầu mẫu dùng sàng lọc kháng thể bất thường Rh Donor... truyền cho bệnh nhân cần thiết Do chúng tơi thực đề tài nhằm mục tiêu: Xây dựng thiết lập ñược dàn hồng cầu mẫu ñể dùng việc phát định danh kháng thể bất thường ngồi hệ ABO góp phần vào việc thực... 2010 Nghiên cứu Y học Nhận xét: Dàn hồng cầu dùng sàng lọc kháng thể có mẫu hồng cầu so với dàn hồng cầu dùng ñịnh danh kháng thể Tuy nhiên hai dàn có diện tối ña kháng nguyên hệ BÀNLUẬN Ngồi hệ