Nghiên cứu được thiết kế nhằm mô tả và so sánh các thông số sinh hóa, huyết thanh và virút để phân biệt chẩn đoán viêm gan B cấp và viêm gan B mạn đợt bùng phát ở bệnh nhân viêm gan siêu vi B điều trị nội trú hay ngoại trú.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 Nghiên cứu Y học SO SÁNH GIÁ TRỊ CÁC THƠNG SỐ SINH HĨA, HUYẾT THANH VÀ VIRÚT Ở BỆNH NHÂN VIÊM GAN SIÊU VI B CẤP VÀ ĐỢT BÙNG PHÁT VIÊM GAN SIÊU VI B MẠN Bùi Trọng Hợp*, Phạm Thị Lệ Hoa**, Phạm Trần Diệu Hiền***, Nguyễn Thế Hùng** TÓM TẮT Mở đầu: Tại quốc gia vùng lưu hành cao, nhiễm HBV mạn tính có tỷ lệ cao, diễn tiến âm thầm Đợt bùng phát viêm gan B mạn có triệu chứng thường xảy thường khó phân biệt với viêm gan B cấp Nhiều kiện lâm sàng, sinh hóa, huyết virút sử dụng để phân biệt hai bệnh cảnh lâm sàng Mục tiêu nghiên cứu: Mô tả so sánh thơng số sinh hóa, huyết virút để phân biệt chẩn đoán viêm gan B cấp viêm gan B mạn đợt bùng phát bệnh nhân viêm gan siêu vi B điều trị nội trú hay ngoại trú Phương pháp: Thiết kế mơ tả tiền cứu Chẩn đốn xác định VG B cấp hay VG B mạn dựa tính chất HBsAg sau tháng Xét nghiệm IgM-antiHBc HBeAg kỹ thuật MEIA máy ASyM với thuốc thử Abbott; HBV-DNA định lượng kỹ thuật RealTime PCR ngưỡng dương tính 100 copy/ml xét nghiệm tìm đột biến PC PCP kỹ thuật giải trình tự gen trực tiếp cơng ty Kỹ thuật sinh học Nam khoa TP HCM Kết quả: Trong 88 bệnh nhân (43 viêm gan B cấp, 45 viêm gan B mạn) có 58% có HBeAg dương 61% IgManti HBc dương ALT Bilirubine không khác ý nghĩa hai nhóm Các kết sinh hóa phản ánh suy gan mạn gặp nhóm viêm gan B cấp Ngược lại IgMantiHBc dương HBeAg dương thường gặp HBV-DNA có mật độ thấp Đột biến Precore (G1896A) Basal core (A1762T/G1764A) gặp nhiều nhóm viêm gan B mạn Kết luận: Các thơng số sinh hóa có giá trị phân biệt viêm gan B cấp đợt cấp viêm gan B mạn Xét nghiệm HBeAg IgMantiHBc nên sử dụng với thơng số phản ánh tình trạng suy gan để nhận diện sớm bệnh nhân viêm gan B mạn đợt bùng phát Đột biến G1896A đột biến A1762T/G1764A chiếm tỷ lệ cao đợt bùng phát viêm gan B mạn nên khảo sát bệnh nhân viêm gan B với ALT tăng >10 ULN kèm theo HBeAg âm HBV-DNA >4 log copy/ml Từ khóa: viêm gan B cấp, IgM-antiHBc, Đợt bùng phát viêm gan B mạn, G1896A, A1762T/G1764A, Precore, Core promoter ABSTRACT COMPARISON OF THE BIOCHEMICAL, SEROLOGICAL AND VIROLOGICAL ASPECTS IN PATIENTS WITH ACUTE HEPATITIS B AND EXAXERBATION OF CHRONIC HEPATITIS B Bui Trong Hop, Pham Thi Le Hoa, Pham Tran Dieu Hien, Nguyen The Hung * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 16 - Supplement of No - 2012: 99 - 106 Background: In countries with high endemicity for chronic hepatitis B virus (HBV) infection, exacerbations of chronic hepatitis B (ECHB) are common The first episode of symptomatic exacerbation of CHB was usually * BV Trưng Vương, ** BM nhiễm ĐHYD TP HCM *** Khoa Nhiễm A, BV Nhiệt Đới TP HCM Tác giả liên lạc: BSCK I Bùi Trọng Hợp ĐT: 0908 164 221 Email: tronghopbvtv@hotmail.com Chuyên Đề Nội Khoa II 99 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 mimic by acute hepatitis B (AHB) Differentiating between AHB and exacerbation of ECHB based on clinical, serological and virological features has been investigated Objectives: To compare the biochemical, serological and virological aspects in patients with AHB and ECHB and to define validated test that should reasonably applied in differentiating of these two features Methods: Prospective and cross-sectional study Diagnostic confirmed based on HBsAg loss after months HBeAg and IgMantiHBc were done by MEIA in ASyM operator (Abbott) HBV-DNA were done by Realtime PCR (detection limit of 100 copies/ml) Precore (PC) and basal core promoter (BCP) mutation were done by direct sequencing at Nam Khoa Biotech Company Results: There was 88 patients were included (43 with AHB and 45 ECHB) 58% of them with HBeAg positive and 61% IgM-antiHBc positive The biological test that exposed chronic liver failure (protid, albumin, prothrombine time and platelet count) had lower rates in the AHB group The value of test related to acute liver injuries (ALT and bilirubine) were not significant different HBeAg and IgM-antiHBc had higher rates of positive results in AHB and higher rates of negative results in ECHB HBV-DNA had lower levels in AHB PC and BCP mutation had significant higher rates in ECHB Conclusion: The biological results had modest value in differentiated AHB from ECHB HBeAg and IgMantiHBc should be included in concurrently with the test of chronic liver failure to predict patient with ECHB PC and BCP should be investigated in patients with acute flare with ALT >1ULN and with HBV markers to recognize ECHB patients that need to treat with antiviral Keywords: AHB, CHB, IgM-antiHBc, ECHB, G1896A, A1762T/G1764A, Precore, Core promoter mutation MỞ ĐẦU Ở vùng lưu hành cao HBV, nhiễm HBV thường xảy từ sớm sau sanh diễn biến tiềm tàng Vì vậy, đợt bùng phát viêm gan (VG B) mạn biểu nhiễm HBV dễ bị chẩn đoán nhầm thành VG B cấp Việc phân biệt VG B cấp với đợt cấp VG B mạn có ý nghĩa quan trọng nhằm nhận diện người cần điều trị đặc hiệu để chấm dứt tình trạng viêm hoạt tính kéo dài, ngăn ngừa xơ gan ung thư gan Việc chẩn đoán VG B cấp thường dựa xét nghiệm IgM-anti HBc với xét nghiệm có tình trạng hoại tử gan rầm rộ phản ánh hoạt động thải trừ mạnh mẽ tế bào gan nhiễm HBV Tuy nhiên đợt bùng phát viêm gan siêu B mạn có xuất trở lại IgMantiHBc Vì nhận diện thêm dấu hiệu lâm sàng hay cận lâm sàng khác nhằm gia tăng giá trị chẩn đoán cho bệnh cảnh cần thiết thực tế lâm sàng, tránh bỏ sót chẩn đốn điều trị muộn đợt bùng phát VG B mạn 100 Các xét nghiệm nhắc đến khơng có giá trị phân biệt cao Gần đây, có thêm nhiều xét nghiệm đề nghị tham khảo phân biệt hai bệnh cảnh mức dương tính HBeAg, anti-HBe, mật độ HBV-DNA diện đột biến Precore hay Basal core promoter Các giá trị test có độ nhậy độ đặc hiệu riêng rẽ khác tùy theo giá trị ngưỡng sử dụng để phân biệt tùy theo tình trạng HBeAg bệnh nhân Nghiên cứu nhằm mô tả giá trị hai nhóm bệnh nhân so sánh giá trị chẩn đoán giá trị ngưỡng đề nghị xét nghiệm chẩn đoán phân biệt VG B cấp đợt bùng phát VG B mạn Mục tiêu nghiên cứu Mô tả so sánh giá trị thơng số sinh hóa, huyết virút để phân biệt chẩn đoán VG B cấp đợt bùng phát VG B mạn bệnh nhân VG siêu vi B điều trị nội trú hay ngoại trú Chuyên Đề Nội Khoa II Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thiết kế nghiên cứu Mô tả tiền cứu cắt ngang nhiều thời điểm Dân số nghiên cứu Bệnh nhân VG B cấp hay mạn đến khám phòng khám gan hay điều trị khoa lâm sàng BV bệnh Nhiệt Đới Cỡ mẫu Nhằm có đủ số ca để xác định tỷ lệ VG B cấp hay đợt cấp VG B mạn, giá trị p dự đoán 0,5 dựa tỷ lệ VG B cấp so với đợt bùng phát nặng VG B mạn với men gan cao lần Chu C.M 1/1(1); chọn giá trị d=0,12 Cần có tối thiểu 67 ca Địa điểm thời gian nghiên cứu Khoa Nhiễm A, Khoa CCNL phòng khám gan BV Bệnh Nhiệt đới từ tháng 10 năm 2010 đến tháng 10 năm 2011 Tiêu chuẩn chọn bệnh loại trừ Bệnh nhân chọn vào nghiên cứu có đầy đủ tiêu chuẩn sau: Biêu VG cấp lần đầu tiên, có hay khơng có vàng da Khơng có tiền sử nhiễm HBV trước Có ALT > 10 lần giá trị bình thường Có dấu ấn huyết thanh: HBsAg (+), AntiHCV (-), AntiHAVIgM (-) Tiêu chuẩn loại trừ Có chứng VG nguyên nhân khác bệnh gan nhiễm mỡ, VG rượu, VG thuốc, bệnh gan chuyển hóa, ung thư gan, bệnh gan thai kỳ… Biến số, định nghĩa biến số kỹ thuật đo lường Biến số hay biến số kiểm soát Gồm tuổi, giới, tiền sử uống rượu, địa tiểu đường, tiền gia đình, đường lây, genotype HBV Biến số độc lập Chuyên Đề Nội Khoa II Nghiên cứu Y học Gồm triệu chứng lâm sàng (kiểu vàng da, gan to, phù chân, báng bụng), giá trị cận lâm sàng (ALT, AST, Protid máu, Albumin, Bilirubine toàn phần, thời gian prothrombine) giá trị huyết học dấu ấn HBV như: HBsAg, HBeAg, IgMantiHBc, HBVDNA định lượng, đột biến precore, đột biến basal core promoter Một số xét nghiệm IgM antiHBc, HBeAg ghi nhận kết dương tính với giá trị S/CO Biến số phụ thuộc: chẩn đốn bệnh xếp theo tình trạng HBsAg sau điều trị gồm có VG B cấp (mất HBsAg) đợt bùng phát VG B mạn (vẫn HBsAg) Ngồi ra, số trường hợp diễn tiến nặng tử vong không theo dõi HBsAg, có IgMantiHBc dương xếp vào nhóm VG B cấp Kỹ thuật Xét nghiệm huyết học sinh hóa thực máy phân tích sinh hóa tự động Xét nghiệm phát dấu ấn huyết virút HBeAg, IgMantiHBc thực kỹ thuật MEIA (Micro particle Immuno-Assay) máy ASym (Abbott) (ngưỡng dương tính S/CO HBeAg >1 ngưỡng dương tính S/CO IgMantiHBc >1,2) khoa xét nghiệm BV Bệnh Nhiệt Đới Xét nghiệm HBV-DNA thực kỹ thuật in-house Real-time PCR Xét nghiệm tìm đột biến PC BCP kỹ thuật giải trình tự gen trực tiếp phòng xét nghiệm sinh học phân tử Công Ty Kỹ thuật Sinh học Nam Khoa TP HCM.Xử lý phân tích số liệu Số liệu nhập phân tích phần mềm SPSS 16.0 chạy Window So sánh tỷ lệ phép kiểm Chi bình phương Mức ý nghĩa tính p10 ULN, khơng có dấu ấn nhiễm virút khác, có HBsAg dương khơng có tiền sử nhiễm HBV trước) thu thập theo dõi 101 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 đáp ứng HBsAg đến tháng Đặc điểm dân số thể theo bảng sau: Bảng 1: Đặc điểm dân số nghiên cứu (n=88) Đặc tính nhập viện Nhóm tuổi