Mục tiêu nghiên cứu nhằm khảo sát tác động của cao chiết từ vỏ thân vừng quả xoan trên bệnh đái tháo đường type 2 được đánh giá trên chuột nhắt được gây bệnh đái tháo đường. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết.
Trang 1KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG HẠ ĐƯỜNG HUYẾT CỦA VỎ THÂN VỪNG QUẢ
XOAN (CAREYA ARBOREAE ROXB LECYTHIDACEAE)
Nguyễn Trần Châu Đỗ Mai Anh, Đỗ Mộng Quỳnh**
TÓM TẮT
Đặt vấn đề: Trong số các thảo dược được dùng để trị bệnh đái tháo đường, mặc dù Vừng quả xoan (Careya
arboreae) chưa được đưa vào nghiên cứu và sử dụng rộng rãi nhưng trên thế giới đã có một số công trình nghiên cứu cho thấy Vừng quả xoan có các tác dụng như: kháng khuẩn, chống oxy hóa, ức chế enzyme α-glucosidase
Mục tiêu nghiên cứu: Khảo sát tác động của cao chiết từ vỏ thân Vừng quả xoan trên bệnh đái tháo đường
type 2 được đánh giá trên chuột nhắt được gây bệnh đái tháo đường
Phương tiện và phương pháp: Nghiên cứu thực nghiệm có nhóm chứng ngẫu nhiên thực hiện tại Phòng
thí nghiệm Y Dược Cổ Truyền - Khoa Y Học Cổ Truyền - ĐHY Dược TP HCM Tác động hạ đường huyết của cao chiết từ vỏ thân Vừng quả xoan được đánh giá trên chuột được gây đái tháo đường bằng alloxan
Kết quả: Cao Vừng quả xoan làm giảm nồng độ đường huyết của chuột sau 15 ngày dùng đường uống liều
2g/kg/ngày
Kết luận: Tác động hạ đường huyết của cao Vừng được xác định trên mô hình chuột nhắt được gây đái tháo
đường
Từ khóa: Cây Vừng quả xoan, tác động hạ đường huyết
ABSTRACT
STUDY ON THE EXPERIMENTAL HYPOGLYCEMIC EFFECT OF CAREYA ARBOREAE ROXB
LECYTHIDACEAE
Nguyen Tran Chau Do Mai Anh, Do Mong Quynh
* Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 16 - Supplement of No 1 – 2012: 175 - 179
Background: Although Careya Arboreae have not been widely used and studied but it has showed some
effects such as: antimicrobial, anti-oxidant, and anti α-glucosidase
Objectives: In this study, the efficacy of Careya Arboreae extract in type 2 diabetes mellitus was evaluated
on diabetic mice induced by alloxan
Materials and Methods: This experimental case study (randomized, controlled) was conducted in
Pharmacological Laboratory of Traditional Medicine Faculty - University of Medicine and Pharmacy in HCM city The hypoglycemic effect of Careya Arboreae was evaluated in diabetic mice induced by alloxan
Results: The Careya Arboreae extracts reduced plasma glucose levels of all mice after 15 days of oral dose of
2g/kg per day.
Conclusions: The hypoglycemic effect of Careya Arboreae was determined in diabetic mice models
Keywords: Careya Arboreae, hypoglycemic effect
Khoa Y học cổ truyền - Đại học Y Dược Tp HCM ** Khoa Dược –Đại học Y dược Tp HCM
Tác giả liên lạc: ThS Nguyễn Trần Châu Đỗ Mai Anh ĐT: 0977979257 email:maianhyhct@ump.edu.vn
Trang 2ĐẶT VẤN ĐỀ
Đái tháo đường là một bệnh mạn tính, có tác
động của yếu tố di truyền, do hậu quả của sự
thiếu hụt insulin Do sự gia tăng quá độ của tỷ
lệ bệnh nhân đái tháo đường nên việc điều trị
bệnh và những biến chứng phức tạp của căn
bệnh này đòi hỏi chi phí khá cao Trong số các
thảo dược được dùng để trị bệnh đái tháo
đường, mặc dù Vừng quả xoan chưa được đưa
vào nghiên cứu và sử dụng rộng rãi nhưng trên
thế giới đã có một số công trình nghiên cứu cho
thấy Vừng quả xoan có tác dụng điều trị các
bệnh: tiêu chảy, kháng khuẩn, kháng khối u,
chống oxy hoá, tác động ức chế enzyme
α-glucosidase (4,2) Vì vậy, đề tài này thực hiện với
mục tiêu thử tác dụng điều trị bệnh đái tháo
đường từ dịch chiết nước vỏ thân Vừng quả
xoan
PHƯƠNG TIỆN - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN
CỨU
Nguyên liệu
Vỏ thân Vừng quả xoan (Careya arborea Roxb
Lecythidaceae) được thu hái tại Iagrai Gia Lai,
xay thành bột thô Độ ẩm trung bình của dược
liệu: 10,81% Dịch chiết nước được cô cách thuỷ
thành dạng cao đặc Độ ẩm của cao: 24,05%
Động vật thí nghiệm
Chuột được mua ở viện Pasteur, giống
Swiss abino, phái đực, khoẻ mạnh, cân nặng từ
22-27g (khoảng 4-6 tuần tuổi) Do viện Pasteur
Tp HCM cung cấp, được nuôi ổn định từ 2- 4
ngày trước khi làm thí nghiệm
Hoá chất thử nghiệm
Alloxan monohydrat (Sigma Aldrich)
NaCl 0,9%
Acarbose (Glucobay®)
Thiết bị
Que thử nước tiểu: 10 thông số HT-10A
Máy ly tâm: Sigma
Máy đo UV/Vis: HITACHI U-1900
Phương pháp nghiên cứu
Chuột sau khi đã nuôi ổn định, trọng lượng 22-27g Chọn những chuột khoẻ mạnh để gây bệnh Chuột được bỏ đói qua đêm Sau đó tiến hành cân để xác định trọng lượng, lấy máu xác định glucose huyết lúc đói, tiêm tĩnh mạch đuôi ngay sau đó dung dịch alloxan pha trong nước muối sinh lý 2% liều 60mg/kg thể trọng (tính theo alloxan monohydrat)
Thức ăn và nước uống được cho trở lại 30 phút sau khi tiêm Sau 72 giờ ghi nhận lại đường huyết lúc đói, đường niệu, để xác định tình trạng đái tháo đường ở chuột
Phần huyết tương sau khi ly tâm với tốc độ
3000 vòng/ 5 phút ở nhiệt độ 200C sẽ được sử dụng để xác định glucose huyết bằng phương pháp enzyme màu (phương pháp glucose oxidase)
Phương pháp xác định đường niệu
Sử dụng phương pháp dùng que thử để phát hiện nhanh và chính xác glucose, có trong nước tiểu
Phương pháp điều trị
Sau 72 giờ tiêm alloxan, chọn những con chuột đủ điều kiện để đưa vào điều trị:
Đường huyết đói (sau 12 giờ nhịn đói) 250mg/dl và 400mg/dl
Đường niệu dương tính
Cho chuột uống cao Lộc vừng với liều 2g/kg
và liều 2g cao/kg kết hợp acarbose 30mg/kg theo dõi trong 15 ngày, cứ mỗi 5 ngày lấy máu thử glucose huyết lúc đói (sau 8 giờ nhịn đói)
Phương pháp phân tích kết quả
Số liệu được xử lý thống kê bằng phần mềm minitab 15 Các đồ thị được vẽ bằng phần mềm sigma plot 10.0 Số liệu trước khi xử lý thống kê
sẽ được kiểm tra về phân phối đồng đều, phương sai tương đương Dùng T-test hay Mann-Whitney để so sánh giữa các số liệu
Trang 3Thời gian (phút)
Thời gian (Phút)
KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
Khảo sát invivo tác động ức chế α – glucosidase trên chuột bình thường của cao Lộc vừng
Khảo sát hiệu quả gây tăng đường huyết của saccharose
Hình 1: Sự thay đổi đường huyết giữa 2 nhóm chuột uống saccharose
Trên biểu đồ cho thấy: nhóm 1 đường huyết
tăng nhưng không cao bằng nhóm 2 Sử dụng
saccharose ở liều 4g/kg để làm nhóm chứng
trong quá trình khảo sát tác dụng ức chế
α-glucosidase của cao Lộc vừng Mặt khác cho
thấy đường huyết của các nhóm đạt đỉnh tại
thời điểm 60 phút sau khi uống saccharose, sau
đó giảm dần cho đến khi kết thúc thực nghiệm
Khảo sát hiệu quả ức chế α-glucosidase của acarbose
Chuột được uống acarbose với liều 50mg/kg, 30mg/kg và 10mg/kg ngay trước khi uống saccharose
Hình 2: Sự thay đổi đường huyết của các nhóm
Acarbose liều 30mg/kg làm giảm có ý nghĩa
đỉnh đường huyết tại thời điểm 60 phút (p<0,01)
so với nhóm bệnh lý nên chúng tôi chọn
acarbose ở liều này để làm nhóm đối chiếu
Khảo sát hiệu quả ức chế α-glucosidase của cao Lộc Vừng
Việc khảo sát hiệu quả ức chế α-glucosidase của cao Lộc vừng được tiến hành trên các nhóm chuột uống cao Lộc vừng ở những liều khác
Trang 4Hình 3: Sự tăng đường huyết ở thời điểm 60 phút sau khi uống saccharose của các nhóm chuột
(
): p< 0,01 so với nhóm chứng
Cho thấy cao Lộc vừng có tác dụng ức chế
α-glucosidase ở liều 2g/kg, và có hiệu quả tương
đương với acarbose 30mg/kg Do đó, chúng tôi
quyết định khảo sát tác dụng của cao Lộc vừng
trên chuột tiểu đường ở liều này
Kết quả thăm dò liều alloxan monohydrat
gây tình trạng ĐTĐ trên chuột
Thăm dò tác động gây ĐTĐ thực nghiệm
trên chuột nhắt của alloxan monohydrat ở liều
60mg/kg thể trọng với thời gian nhịn đói 24 giờ
và 12 giờ Sau 72 giờ lấy máu xác định tình trạng
bệnh của chuột và chọn chuột thỏa điều kiện
Kết quả: nhóm chuột nhịn đói 24 giờ có tình
trạng bệnh tăng cao, tỷ lệ chết nhiều, chỉ có 20%
chuột có tình trạng bệnh thỏa điều kiện Ở
nhóm chuột nhịn đói 12 giờ có 60% chuột có
tình trạng bệnh thỏa điều kiện, chuột ăn nhiều,
uống nhiều, tiểu nhiều và lông bết dính chúng tôi quyết định liều alloxan thích hợp là 60 mg/kg thể trọng với thời gian nhịn đói 12 giờ
Tác động của các thuốc thử trên chuột ĐTĐ theo dõi trong 15 ngày
Bảng 1: Glucose huyết trung bình các nhóm
chuột qua các thời điểm:
Trắng (Nước cất) 8
98,02
3,52
91,78
4,26
102,95
4,02
95,32
3,51 Chứng
(Bệnh lý) 9
345,41
15,9
352,45
23,3
336,65
30,1
318,46
14,14 Acarbose
30mg/kg 9
340,57
20,5
262,29
9,98
212,23
9,09
201,36
7,07 Cao 2g/kg 10 346,36
16,9
293,65
6,73
282,12
4,97
240,47
12,2 Acarbose +
342,11
13,4
253,50
13,4
184,92
10,2
177,88
7,96
Hình 4: Glucose huyết trung bình các nhóm chuột qua các thời điểm
Ngày
Trang 5Kết quả sơ bộ cho thấy tại thời điểm ban
đầu, glucose huyết các nhóm chuột ĐTĐ khác
nhau không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) và
khác với lô trắng không gây bệnh
Bảng 2: Tỉ lệ glucose niệu âm tính (%) qua các thời
điểm:
Acarbose
Cao LV
Acarbose +
Sau 5 ngày theo dõi, glucose huyết các nhóm
chuột ở các lô bệnh có/không điều trị đi vào ổn
định và khác có ý nghĩa thống kê so với lô trắng
Hiệu quả điều trị của nhóm chuột uống cao vẫn
chưa thể hiện rõ và glucose huyết vẫn còn duy
trì ở mức cao Tuy nhiên ở nhóm chuột uống
acarbose và nhóm kết hợp acarbose/cao đã thể
hiện hiệu quả điều trị, glucose huyết giảm và khác có ý nghĩa thống kê so với lô chứng (p<0,01)
Sau 10 ngày theo dõi, tình trạng bệnh ở nhóm chứng và uống cao vẫn ổn định, nồng độ glucose huyết vẫn duy trì ở mức cao (>250mg/dl) Trong khi đó nồng độ glucose huyết ở nhóm chuột uống acarbose và kết hợp acarbose/cao tiếp tục giảm, khác có ý nghĩa với glucose huyết nhóm chứng Đặc biệt với nhóm chuột được điều trị kết hợp acarbose và cao, glucose huyết giảm xuống dưới mức tiêu chuẩn chọn bệnh (< 190mg/dl)
Sau 15 ngày theo dõi, ở nhóm chuột uống cao Lộc vừng hay cao Lộc vừng kết hợp acarbose đã thể hiện hiệu quả điều trị, glucose huyết giảm khác có ý nghĩa thống kê so với lô chứng (p<0,01), và hiệu quả điều trị tương đương với nhóm chuột được uống acarbose 30mg/kg (p<0,05)
Kết quả theo dõi cân nặng
Bảng 3: Trọng lượng (g) các nhóm chuột qua từng thời điểm:
Trong suốt quá trình thử nghiệm cân nặng
của các nhóm chuột được điều trị khác nhau
không có ý nghĩa thống kê Nhóm chuột ĐTĐ
uống nước cất, trọng lượng bắt đầu giảm từ khi
gây bệnh, và khác có ý nghĩa thống kê so với lô
trắng uống nước cất từ ngày thứ 10 (p< 0,05)
KẾT LUẬN
Dịch chiết nước từ vỏ thân Lộc vừng (Careya
arborea Roxb.) ở liều 2g/kg có tác dụng làm giảm
đường huyết trên chuột, và khi cao thuốc được
điều trị kết hợp cùng acarbose khác sẽ đạt hiệu
quả tốt hơn
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1 Hidy PH (1945), “Structural repuirements for diabetogenic
action in alloxan and related compounds”, Department of Biochemistry, College of Medicine, Baylor University, Houston, pp
307-311
2 Kumar RS, Sivakumar T, Sundaram RS, Sivakumar P, Nethaji R,
Gupta M, Mazumdar UK (2006),“Antimicrobial and
Antioxidant Activities of Careya arborea Roxb Stem Bark”,
Iranian Journal of Pharmacology & Therapeutics, 103, pp 12-23
3 Nguyễn Quang Nam, Nguyễn Thị Xuân Hương, Mai Phương Mai, Võ Phùng Nguyên (2009), “Tác động hạ đường huyết của
alloxan”, Tạp chí Y học Tp HCM, 13 (1), tr 302 – 306
4 Rahman M.T., Khan O.F., Saha S., Alimuzzaman M (2003),
“Antidiarrhoeal activity of the bark extract of Careya arboreae
Roxb”, Fitoterapia, 74, pp.116- 118
5 Srinivasan K & Ramarao P (2007), “Animal models in type 2
diabetes reseach: An overview”, Indian J Med Res 125, pp 451-
472