Khảo sát tác động hạ lipid huyết của đậu bắp abelmoschus esculentus (L.) malvaceae trên chuột thực nghiệm

Mục tiêu nghiên cứu đưa ra tác động hạ lipid huyết của các cao chiết toàn phần trái đậu bắp từ dung môi nước cất, cồn 96%, cồn 50% và cao phân đoạn của cao toàn phần cồn 50% từ dung môi dichloromethan và n-buthanol và có so sánh với một loại tân dược là simvastatin (zocor).

Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG HẠ LIPID HUYẾT CỦA ĐẬU BẮP ABELMOSCHUS ESCULENTUS (L.) MALVACEAE TRÊN CHUỘT THỰC NGHIỆM Trương Thị Thu Trang**,Nguyễn Thị Hạnh*, Lê Phú Nguyên Thảo*, Mai Phương Mai**, Võ Phùng Nguyên** TÓM TẮT Mở đầu: Bệnh tăng lipid huyết ngày trở nên phổ biến xem yếu tố nguy bệnh tim mạch, bệnh xơ vữa động mạch Đậu bắp loại rau chứa nhiều chất dinh dưỡng sử dụng từ lâu khắp nơi giới Cao chiết từ đậu bắp chứng minh có tác dụng cải thiện tình trạng tăng đường huyết lipid huyết chuột gây bệnh tiểu đường alloxan streptozocin Tuy nhiên, tác động hạ lipid huyết đậu bắp chưa nghiên cứu rõ ràng Mục tiêu: Tác động hạ lipid huyết cao chiết toàn phần trái đậu bắp từ dung môi nước cất, cồn 96%, cồn 50% cao phân đoạn cao toàn phần cồn 50% từ dung mơi dichloromethan n-buthanol có so sánh với loại tân dược Simvastatin (Zocor®) Phương pháp nghiên cứu: Tyloxapol liều 400mg/kg thể trọng, tiêm phúc mơ liều để gây tình trạng tăng lipid huyết cấp Các cao chiết từ trái đậu bắp sử dụng đường uống với liều 30g bột dược liệu/kg thể trọng 60g bột dược liệu/kg thể trọng sau chuột tiêm tyloxapol Kết quả: Cao cồn 50% toàn phần cao phân đoạn n-butanol với liều 60g bột dược liệu/ kg thể trọng cho tác động hạ lipid huyết tốt Kết luận: Đậu bắp có tác dụng làm giảm cholesterol triglycerid chuột gây tình trạng tăng lipid huyết cấp tyloxapol Từ khóa: đậu bắp, tăng lipid huyết, simvastatin, tyloxapol ABSTRACT HYPOLIPEMIC ACTIVITY OF EXTRACTS FROM ABELMOSCHUS ESCULENTUS L MALVACEAE IN MICE Truong Thi Thu Trang, Nguyen Thị Hanh, Le Phu Nguyen Thao, Mai Phuong Mai, Vo Phung Nguyen * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 17 - Supplement of No - 2013: 412 - 417 Background: Hyperlipideamia has become more popular and is considered as one of the risk factor of cardiac disease, especially atherosclerosis Abelmoschus esculentus (L.) Malvaceae, synonym of okra, which is a nutritious vegetable has been used around the world for a long time Extract from okra has been studied to ameliorate hyperglycemia and hyperlipideamia in diabetic mice induced by alloxan and streptozocin However, its hypolipideamia effect has not been studied clearly yet Objectives: Hypolipideamia effect of the extracts from fruit by distilled water, ethanol 96%, ethanol 50% and the extracts from the ethanol 50% fruit extract by dichloromethan, n-buthanol was studied and was compared with Simvastatin (Zocor®) Methods: Hyperlipideamia in mice was induced by single intra-peritoneal injection of 400mg/kg of * Khoa Dược, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh ** Đại học Y Dược Cần Thơ Tác giả liên lạc: ThS Trương Thị Thu Trang ĐT: 0909511658 Email: thutrang.pharm@gmail.com 412 Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 Nghiên cứu Y học Tyloxapol Studied extracts were orally administered at doses equivalent to 30g and 60g of dry extract/kg immediately after Tyloxapol injection Results: Extracts of ethanol 50% and n-buthanol of ethanol 50% extract at dose equivalent to 60g of dry extract/kg has the most hypolipideamia effect Conclusions: Okra is useful in diminishing cholesterol and triglycerid levels in hyperlipidemic mice induced by tyloxapol Keywords: okra, hyperlipideamia, simvastatin, tyloxapol cung cấp viện Vắc-xin sinh phẩm y MỞ ĐẦU tế Nha Trang Chuột nuôi ổn định tuần Chứng tăng lipid huyết có liên quan nhiều trước thử nghiệm thực phẩm viên đến bệnh xơ vữa động mạch, bệnh động cung cấp từ Viện Vắc-xin sinh phẩm y tế Nha mạch vành, cao huyết áp, tai biến mạch máu Trang não, tiểu đường,…Tại Việt Nam, tỷ lệ người mắc Dược liệu: Trái đậu bắp, Abelmoschus bệnh có xu hướng gia tăng nhanh chóng esculentus L Malvaceae thu hái Cần với nhịp độ phát triển xã hội đại Thơ Trái đậu bắp cắt lát mỏng, phơi khơ, Có nhiều loại thuốc chứng minh làm xay thành bột giảm nồng độ lipid huyết bệnh nhân, Bột trái đậu bắp tiến hành chiết nhiên hầu hết thuốc điều trị độc đối phương pháp đun hồi lưu với dung mơi với thể có giá thành cao Hiện nay, xu nước, cồn 50%, cồn 96% thu cao hướng tìm kiếm nguồn nguyên liệu làm thuốc nước, cao cồn 50% cao cồn 96% Từ kg bột độc tính, giá thành thấp có nguồn gốc từ thiên dược liệu (độ ẩm 10,21%) thu 82,07g cao nhiên nâng cao không Việt H2O toàn phần (độ ẩm 28,98 %, hiệu suất chiết Nam mà nước phát triển 8,2%) 241,80g cao cồn 50% toàn phần (độ Đậu bắp với tên khoa học Abelmoschus ẩm 17,84%, hiệu suất chiết 24,18%) 115,59g esculentus (L.) Malvaceae loại rau chứa cao cồn 96% toàn phần (độ ẩm 13,56%, hiệu suất nhiều chất dinh dưỡng sử dụng phổ biến chiết 11,56%) nhiều nơi giới Theo dân gian, dịch nhầy Trích 200g cao cồn 50% tồn phần phân tách đậu bắp có tác dụng kháng viêm tốt, dùng 1,632g cao phân đoạn (độ ẩm 9,8%), trường hợp viêm đường tiểu, tiểu khó, ngồi 26,46g cao phân đoạn (độ ẩm 12,92%) hạt có tính chống co thắt, kích thích ăn ngon, 122,02g cao phân đoạn (độ ẩm 24,58%) bồi bổ thần kinh Mặt khác, số nghiên cứu gần cho thấy, đậu bắp có tác dụng hạ đường huyết, chống oxy hóa(1,2,5,10) Mục tiêu Trong phạm vi đề tài này, tiến hành khảo sát tác động hạ lipid huyết cao chiết từ trái đậu bắp thơng qua mơ hình gây tăng lipid huyết cấp tyloxapol ĐỐI TƯỢNG-PHƯƠNGPHÁP NGHIÊNCỨU Động vật thí nghiệm Chuột nhắt trắng Swiss albino đực, 5-6 tuần tuổi, khỏe mạnh, trọng lượng trung bình 22 ± 2g Chuyên Đề Dược Học Trích 200g cao cồn 50% hòa tan với nước đem lắc phân đoạn với dichloromethan, n-butanol bão hòa nước thu 1,632g cao phân đoạn (độ ẩm 9,8%), 26,46g cao phân đoạn (độ ẩm 12,92%) 122,02g cao phân đoạn (độ ẩm 24,58%) Quy trình chiết hình Hóa chất – thuốc thử Dung mơi chiết xuất: Ethanol (Trung Quốc); Tyloxapol (Sigma-Aldrich Chemie Gmbh; Simvastatin (Zocor 20 mg); thuốc thử cholesterol (Globe, Ý); thuốc thử triglycerid (Globe, Ý) 413 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 Nghiên cứu Y học Phương pháp nghiên cứu Liều 1: liều tương đương 30g bột dược liệu/kg thể trọng Cho chuột nhịn đói 12 trước tiến hành nghiên cứu gây tăng lipid huyết tyloxapol tiêm phúc mô mô tả nghiên cứu trước đây(4) Tyloxapol pha nước cất pha tiêm, tiêm phúc mơ để gây tình trạng tăng lipid huyết cấp, với liều 400mg/kg thể trọng Thuốc cao pha nước cất để tiêm hay cho uống theo liều thử nghiệm với điều kiện sử dụng 0,1mL/10g thể trọng Liều 2: liều tương đương 60g bột dược liệu/kg thể trọng Cho chuột uống nước cất thuốc đối chứng cao thử nghiệm pha nước cất liều khảo sát sau tiêm Tyloxapol gây tăng lipid huyết cấp, sau uống thuốc, cho chuột ăn lại bình thường Sau 24 uống thuốc, tiến hành lấy máu đo nồng độ cholesterol triglycerid huyết Bột trái đậu bắp Đun hồi lưu Nước Cồn 96% Cồn 50% Dịch nước Dịch cồn 50% Dịch cồn 96% Cô giảm áp Cô cách thủy Cao nước Cô giảm áp Cao cồn 50% Cao cồn 96% Lắc với dichloromethan Dịch dichloromethan didichloromethanedichloromet Cô giảm áp Dịch sau lắc dichloromethan Lắc với n-BuOH Cao Dịch lại Dịch n-BuOH Cô giảm áp Cô cách thủy Cao Cao Hình 1: Sơ đồ chiết đậu bắp lắc phân đoạn dùng nghiên cứu Thử nghiệm tác động hạ lipid huyết cao toàn phần Chia ngẫu nhiên chuột thành lô, lô 10 Ngoại trừ lô chứng, chuột tiêm dung dịch sinh lý cho uống nước cất, chuột lơ lại gây tăng lipid cấp tyloxapol tiêm phúc mô (IP) chia thành lô cho sử dụng cao tồn phần sau: 414 - Lơ chứng (lơ Sly): tiêm dung dịch sinh lý 0,9% (IP), uống nước cất - Lô Tyl: uống nước cất - Lô Sim: uống simvastatin liều 24mg/kg thể trọng - Lô C50-1: uống cao cồn 50% tồn phần, liều - Lơ C50-2: uống cao cồn 50% toàn phần, liều Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 - Lơ CH2O-1: uống cao H2O tồn phần, liều - Lơ C96-1: uống cao cồn 96% tồn phần, liều - Lơ C96-2: uống cao cồn 96% tồn phần, liều Thử nghiệm tác động hạ lipid huyết cao phân đoạn Tương tự trên, chuột chia thành lô cho sử dụng cao phân đoạn sau: 500 Nồng độ cholesterol (mg/dl) - Lơ CH2O-2: uống cao H2O tồn phần, liều - Lơ C1-2: uống cao phân đoạn 1, liều - Lô C2-1: uống cao phân đoạn 2, liều - Lô C2-2: uống cao phân đoạn 2, liều - Lô C3-1: uống cao phân đoạn 3, liều - Lô C3-2: uống cao phân đoạn 3, liều Xác định nồng độ cholesterol triglycerid huyết Cho chuột nhịn đói 12 Lấy khoảng 0,2mL máu tĩnh mạch đuôi chuột, cho vào ống eppendorf Ly tâm 3000 vòng/ phút 10 phút Hút lấy phần huyết để định lượng cholesterol triglycerid theo nguyên tắc enzym màu(4) KẾT QUẢ Kết khảo sát tác động hạ lipid huyết cao toàn phần Tác động hạ cholesterol huyết Tất cao toàn phần cồn 50%, cồn 96%, H2O liều khảo sát thể tác động hạ cholesterol huyết chuột bị gây tăng tyloxapol khác có ý nghĩa thống kê so với lơ uống nước cất (p