Mục tiêu của nghiên cứu này là chuyển dạng bào chế trà thuốc khổ qua - đa búp đỏ thành dạng viên nang, so sánh tác động hạ glucose huyết của hai dạng trà thuốc khổ qua - đa búp đỏ và viên nang khổ qua - đa búp đỏ trên chuột nhắt trắng gây tăng glucose huyết bằng alloxan.
KHẢO SÁT TÁC DỤNG HẠ GLUCOSE HUYẾT CỦA HAI DẠNG BÀO CHẾ TRÀ THUỐC VÀ VIÊN NANG KHỔ QUA – ĐA BÚP ĐỎ TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG Hứa Hoàng Oanh∗, Nguyễn Quỳnh Hương* TÓM TẮT Mục tiêu: Trà thuốc Khổ qua – Đa búp ñỏ ñã ñược sử dụng rộng rãi dân gian ñể ñiều trị bệnh ñái tháo ñường týp Mục tiêu nghiên cứu chuyển dạng bào chế trà thuốc Khổ qua – Đa búp ñỏ thành dạng viên nang, so sánh tác ñộng hạ glucose huyết hai dạng trà thuốc Khổ qua – Đa búp ñỏ viên nang Khổ qua – Đa búp ñỏ chuột nhắt trắng gây tăng glucose huyết alloxan Phương pháp: Tác ñộng hạ glucose huyết dạng thuốc bào chế từ dược liệu ñược ñánh giá chuột nhắt trắng gây ñái tháo ñường alloxan với liều 70 mg/kg qua ñường tiêm tĩnh mạch Kết quả: Cả hai dạng thuốc có tác ñộng làm giảm glucose huyết chuột ñái tháo ñường ñã gây tăng glucose huyết alloxan sau sử dụng 14 ngày ñối với viên nang Khổ qua – Đa búp ñỏ; từ ngày ñiều trị thứ 21 ñối với trà thuốc Khổ qua – Đa búp ñỏ khơng ảnh hưởng đến glucose huyết chuột bình thường Tác ñộng làm giảm glucose huyết tương ñương với gliclazide Kết luận: Theo thống kê nghiên cứu chưa phát khác biệt lơ chuột nghiên cứu tác ñộng hạ glucose huyết viên nang Khổ qua – Đa búp ñỏ dạng trà thuốc Khổ qua – Đa búp đỏ mơ hình chuột nhắt trắng gây đái tháo đường alloxan Từ khóa: Đái tháo đường týp 2, Khổ qua, Đa búp ñỏ, trà thuốc, viên nang ABSTRACT THE HYPOGLYCEMIA EFFECT OF “KHO QUA- DA BUP DO” TEA AND “KHO QUA- DA BUP DO” CAPSULE ON ALLOXAN-INDUCED DIABETES IN MICE Hua Hoang Oanh, Nguyen Quynh Huong Objectives: “Kho qua – Da bup do” (“Bitter melon plants – Rubber tree leaves”) tea was commonly used in the treatment of diabetes mellitus in Vietnam These are Vietnamese traditional medicine formula comprising two medicinal plants such as Momordica charantia L and Ficus elastica prepared by traditional method In this study, comparison of the efficacy of “Kho qua – Da bup do” tea and “Kho qua – Da bup do” capsule in type diabetes mellitus is evaluated on alloxan-induced diabetes in mice by using “Kho qua – Da bup do” capsule Methods: the hypoglycemia effect of “Kho qua - Da bup do” tea and “Kho qua - Da bup do” capsule was evaluated in the alloxan-induced diabetic mice The body weight of mice were also evaluated Results: Both of two formula “Kho qua - Da bup do” tea and capsule reduced glycemia content of all mice after 14-day administration of “Kho qua - Da bup do” tea and 21-day administration of “Kho qua- Da bup do” capsule, respectively These effects are similar to the effect of gliclazide These traditional remedies also improved the loss of body weight in alloxan-induced diabetic mice ∗ Khoa Y Học Cổ truyền – Đại học Y Dược Tp HCM Địa liên hệ: DS Hứa Hoàng Oanh ĐT: 0838442756 Email: oanhhuahoang@yahoo.com 174 Conclusions: The hypoglycemia effect of “Kho qua - Da bup do” capsule is equivalent to the hypoglycemia effect of “Kho qua- Da bup do” tea in the alloxan-induced diabetic mice Keywords: Type-2 diabetes, Bitter melon plant, Rubber tree leaves, tea, capsule ĐẶT VẤN ĐỀ Việc ñiều trị bệnh đái tháo đường týp q trình trị liệu lâu dài đòi hỏi có tn thủ dùng thuốc đủ liều để trì glucose huyết ổn định Vì vậy, ngồi việc quan tâm đến hiệu điều trị thuốc, người thầy thuốc mong muốn có thuốc hay sử dụng dễ dàng ñể bệnh nhân dùng thuốc ñúng ñủ liều Theo kinh nghiệm sử dụng thuốc dân gian nghiên cứu khoa học tác ñộng hạ ñường huyết thuốc ñó, ñề tài ñược tiến hành theo ñịnh hướng nghiên cứu chuyển dạng bào chế trà thuốc Khổ qua – Đa búp đỏ có tác dụng điều trị tiểu đường týp ñang ñược sử dụng rộng rãi dân gian thành dạng viên nang ñể thuận tiện cho bệnh nhân tuân trị dễ dàng Nghiên cứu tiến hành khảo sát tác dụng hạ glucose huyết hai dạng thuốc ñược tiến hành chuột nhắt trắng gây ñái tháo ñường alloxan [1], [2], [4] NGUYÊN LIỆU, ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nguyên liệu nghiên cứu Dây Khổ qua ñược thu hái nhà vườn huyện Hóc Mơn, Tp HCM vào tháng 08/2009 Lá Đa búp ñỏ ñược hái vào tháng 08/2009 từ Đa búp đỏ nhiều năm tuổi khn viên khu du lịch Hồ Kỳ Hòa (cũ), Quận 10, Tp HCM Nguyên liệu Khổ qua Đa búp ñỏ, sau thu hái, ñược rửa sấy khô 50ºC tán thành bột thô dược liệu A ñể tiến hành bào chế thành dạng trà thuốc dạng viên nang, dùng ñể thử nghiệm tác dụng dược lý Hóa chất thử nghiệm: - Thuốc đối chứng: Gliclazide (Diamicron®- Servier); số lơ: 104350; ngày sản xuất: 10/2006; hạn sử dụng: 10/2010 - Hóa chất gây mơ hình tăng đường huyết thực nghiệm: Alloxan tetrahydrat (Sigmaaldrich®), hạn sử dụng: 01/2011 Dược liệu Khổ qua Lá Đa búp ñỏ Sơ chế, tán thô Bột thô dược liệu A Nấu cao Thành phẩm Cao dược liệu & Bã dược liệu Sấy 60ºC Cô cao 175 Cao 1:1 Bột dược liệu khơ Tẩm cao Hình Qui trình bào chế trà thuốc Khổ qua – Đa búp ñỏ 176 Bột thô dược liệu A Chiết ngấm kiệt với cồn 70º Cao dược liệu A Bốc dung mơi Cơ cao Cao mềm Trộn tá dược độn Khối bột ẩm Sấy 60ºC Bột thuốc Nang thuốc Hình Qui trình bào chế viên nang Khổ qua – Đa búp ñỏ Thuốc T1: trà thuốc sau bào chế hãm nước sơi 10 phút, lấy dịch chiết trà thuốc thành cao 2:1 để dùng cho thử nghiệm tác ñộng dược lý Thuốc T2: bột thuốc viên nang ñã bào chế ñược dùng cho thử nghiệm tác ñộng dược lý Đối tượng nghiên cứu Chuột nhắt giống ñực cái, khỏe mạnh, trọng lượng 23 – 25g, Viện Pasteur TP HCM cung cấp Chuột ñược cho uống nước ăn ñầy ñủ thực phẩm viên điều kiện phòng thí nghiệm – Khoa Y học cổ truyền – Đại học Y Dược TP HCM - ngày trước thử nghiệm nhiệt độ phòng chu kỳ tối sáng 12/12 Phương pháp nghiên cứu Tác ñộng thuốc glucose huyết chuột nhắt bình thường Chuột chia ngẫu nhiên thành lô, lô con, ñược cho sử dụng nước cất, thuốc nghiên cứu với liều lượng 0,1ml/10g chuột x lần/ngày 21 ngày Glucose huyết chuột ñược theo dõi vào ngày 1, 7, 14 21 thử nghiệm máy ño glucose huyết que thử Accu-chek® Active (Roche) Tác động thuốc glucose huyết chuột nhắt ñái tháo ñường gây alloxan 177 Phương pháp gây ñái tháo ñường thực nghiệm, ñiều trị ñánh giá tác ñộng hạ glucose huyết ñược tiến hành theo nghiên cứu trước ñây [3], [4] Phương pháp gây ñái tháo ñường thực nghiệm: chuột gây bệnh cách tiêm tĩnh mạch dung dịch alloxan pha nước muối sinh lý với liều 70 mg/kg Các chuột bệnh ñáp ứng ñiều kiện glucose huyết > 250 mg/dl Phương pháp ñánh giá tác ñộng hạ glucose huyết Đánh giá tác ñộng hạ glucose huyết thuốc cách ñịnh lượng glucose huyết chuột máy ño glucose huyết que thử Accu-chek® Active (Roche) Glucose huyết xác định vào buổi sáng trước ăn ngày Phương pháp ñiều trị Các chuột bệnh ñược chia ngẫu nhiên thành lơ, lơ chuột điều trị 21 ngày nước cất, gliclazide (Diamicron®, Servier) - thuốc ñối chứng thuốc trị đái tháo đường đường nghiên cứu Lơ 1: chứng, uống nước cất Lơ 2: điều trị gliclazide, liều 200mg/kg/ngày, lần ngày Lơ 3: điều trị thuốc T1, liều 3g/kg/ngày, lần ngày Lô 4: ñiều trị thuốc T2, liều 3g/kg/ngày, lần ngày Thống kê phân tích số liệu Kết xử lý thống kê phần mềm MS-Excel KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Kết độc tính Ở liều tối ña ñưa vào dày chuột nhắt, tương ñương 500g/kg thể trọng, bột thuốc viên nang Khổ qua – Đa búp đỏ khơng gây chết chuột vòng 48 sau cho uống Khơng có phản ứng bất thường xảy chuột khảo sát Do đó, khơng xác định LD50 theo đường uống chuột nhắt trắng Tác ñộng thuốc nghiên cứu glucose huyết chuột bình thường Sau 21 ngày dùng thuốc thử nghiệm, khác biệt ý nghĩa thống kê lơ thử nghiệm (uống thuốc) lô chứng (uống nước cất) Mặt khác, lơ thử nghiệm chưa thấy có khác biệt có ý nghĩa thống kê thời ñiểm ñịnh lượng glucose huyết Kết cho phép kết luận thuốc nghiên cứu khơng ảnh hưởng đến nồng độ glucose huyết chuột bình thường sau 21 ngày theo dõi Bảng Nồng ñộ glucose huyết trung bình chuột bình thường qua ngày uống thuốc thử nghiệm Ngày 21 Glucose n Ngày (mg/dl) Chứng 163,88 ± 152,74 ± 21,31 20,15 T1 179,52 ± 168,32 ± 35,42 24,33 T2 155,49 ± 140,24 ± 26,56 26,39 n: số chuột lô 178 Tác ñộng hạ glucose huyết thuốc nghiên cứu chuột gây ñái tháo ñường alloxan Sau gây bệnh, lơ chuột điều trị thuốc thử nghiệm, kết thực nghiệm ñược ñánh giá dựa thay ñổi nồng ñộ glucose huyết lơ suốt q trình điều trị Bảng Tỉ lệ glucose huyết trung bình tăng sau tiêm alloxan lô vào ngày Tỉ lệ Trước Sau Glucose tăng n tiêm tiêm (mg/dl) (%)(*) 172,80 415,40 ± 140,39 Chứng ± 23,13 40,05 173,84 425,80 ± 144,94 Gliclazide ± 20,83 67,90 191,25 486,75 ± 154,50 T1 ± 35,42 62.18 185,40 473,28 ± T2 155,28 ± 25,66 48, 42 n: số chuột mổi lô thử nghiệm; p