Nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết của chế phẩm Vinabetes trên thực nghiệm. Mục tiêu: Đánh giá tác dụng hạ glucose huyết của Viabetes trên chuột đái tháo đường typ 2. Phương pháp nghiên cứu: Chuột cống đái tháo đường typ 2 được uống Vinabetes để nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết thực nghiệm.
Nguyễn Xn Hòa Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 89(01/2): 273 – 277 NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG HẠ GLUCOSE HUYẾT CỦA VINABETES TRÊN CHUỘT CỐNG ĐÁI THÁO ĐƯỜNG TYP THỰC NGHIỆM Bùi Thị Quỳnh Nhung1, Nguyễn Trọng Thông2, Phạm Thị Vân Anh2, Phạm Hữu Điển3 (1) Trường Đại học Y Dược – Đại học Thái Nguyên (2) Bộ môn Dược lý – Trường Đại học Y Hà Nội (3) Trường Đại học Sư phạm Hà Nội TÓM TẮT Nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết chế phẩm Vinabetes thực nghiệm Mục tiêu: Đánh giá tác dụng hạ glucose huyết Viabetes chuột đái tháo đường typ Phương pháp nghiên cứu: Chuột cống đái tháo đường typ uống Vinabetes để nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết thực nghiệm Kết cho thấy: Vinabetes có tác dụng hạ glucose huyết chuột đái tháo đường typ thực nghiệm Từ khóa: Vinabetes, đái tháo đường typ thực nghiệm, hạ glucose huyết, động vật thực nghiệm ĐẶT VẤN ĐỀ* Đái tháo đường bệnh rối loạn chuyển hóa nguy hiểm, nguyên nhân gây tử vong hàng đầu giới [0] Bên cạnh nhóm thuốc điều trị đái tháo đường sử dụng rộng rãi giới insulin, sulfonylure, biguanid , nhiều tác giả sâu tìm hiểu tác dụng hạ glucose máu cây, làm thuốc có sẵn dân gian Tại Việt Nam, nghiên cứu về tác dụng hạ glucose huyết riêng rẽ ba loại thảo dược giảo cổ lam (GCL), tri mẫu (TM) lăng nước (BLN), chuột bình thường chuột đái tháo đường typ cho kết tốt, nhiên chưa có nghiên cứu đánh giá tác dụng hạ glucose huyết động vật bị đái tháo đường typ thực nghiệm phối hợp ba loại thảo dược Qua nghiên cứu sàng lọc tác dụng hạ glucose huyết, nghiên cứu tiến hành phối hợp ba dược liệu GCL, TM, BLN thành chế phẩm Vinabetes nhằm tạo chế phẩm có tác dụng chuột cống bị gây đái tháo đường typ thực nghiệm Nghiên cứu tiến hành với mục tiêu: Đánh giá tác dụng hạ glucose huyết Vinabetes chuột cống gây đái tháo đường typ thực nghiệm * CHẤT LIỆU, ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Chất liệu nghiên cứu: Thuốc nghiên cứu Chế phẩm Vinabetes dạng cao mềm Viện hóa học thuộc viện khoa học hợp chất thiên nhiên sản xuất, gồm thành phần: + Cao thân, lá, rễ GCL (Gynostemma pentaphyllum): 1gram cao tương đương 15g dược liệu khô + Cao thân củ TM (Anemarhena asphodeloides): 1gram cao tương đương 15g dược liệu khô + Cao BLN (Lagerstroemia speciosa (L.) Pers): gram tương đương 10 g dược liệu khô Ba thành phần trộn theo tỷ lệ 1,5:1,5:1 để tạo thành chế phẩm Vinabetes 1g cao chứa 3,24g dược liệu khô Hóa chất dụng cụ nghiên cứu - Streptozotocin (Zanosar) bột pha tiêm 1g công ty MP Biomedicals (France) sản xuất - Diamicron (Gliclazid) viên nén 80mg hãng Servier (France) sản xuất - Bộ kit đo triglycerid, cholesterol huyết Teco Dianostics gồm thuốc thử cholesterol chuẩn - Kit định lượng glucose hãng HUMAN 279 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Bùi Thị Quỳnh Nhung Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ Đối tượng nghiên cứu: Chuột cống trắng chủng Wistar hai giống, cân nặng trung bình 160 - 170g Học viện quân y cung cấp Phương pháp nghiên cứu: Mơ hình gây ĐTĐ typ Dựa mơ hình gây đái tháo đường typ 2: chế độ ăn giàu chất béo kết hợp với STZ liều thấp Srinivasan K [0] có chỉnh lý cho phù hợp với điều kiện Việt Nam Chuột cống chia thành 03 lô Các lô chuột ăn với chế độ khác (tính theo Bảng thành phần thực phẩm Việt Nam Viện dinh dưỡng [0]) liên tục 10 tuần: Lô 1: Chuột ăn chế độ ăn 12% tổng số calo phần ăn chất béo (NFD: Normal fat diet) Lô 2: Chuột ăn chế độ ăn có 40% tổng số calo phần ăn chất béo (HFD: Hight – fat diet) Lô 3: Chuột ăn chế độ ăn có 40% tổng số calo phần ăn chất béo (HFD: Hight – fat diet) Sau 10 tuần ăn chế độ ăn giàu lipid, chuột lô 1, tiêm nước cất, chuột lô tiêm màng bụng STZ 50mg/kg 89(01/2): 279 – 283 Sau 72 tiêm STZ nước cất, tiến hành lấy máu từ đuôi chuột để định lượng số glucose, cholesterol toàn phần triglycerid máu Nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết chuột thực nghiệm Chuột cống trắng bình thường, chuột béo chuột gây mơ hình đái tháo đường typ 2, chia thành lô, lô 10 con: Lô 1: Lô chứng: NFD + nước cất Lô 2: Chuột đái tháo đường typ + nước cất Lô 3: Chuột đái tháo đường typ + Gliclazid liều 20mg/kg Lô 4: Chuột đái tháo đường typ + Vinabetes liều 3g/kg (Liều tương đương liều dự kiến dùng người) Chuột uống nước cất thuốc thử liên tục tuần Chuột nhịn ăn qua đêm, lấy máu toàn phần từ chuột định lượng glucose máu, cholesterol tồn phần triglycerid thời điểm to (chưa uống thuốc), tc (sau uống thuốc thử ngày cuối giờ) KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Mơ hình ĐTĐ typ Bảng 1: Sự biến đổi trọng lượng chuột thời điểm nghiên cứu Thời gian Bắt đầu NC Sau tuần % tăng Sau tuần % tăng Sau tuần % tăng Sau 10 tuần % tăng Sau tiêm STZ 72h % tăng Lô 165,00 ± 9,81 189,86 ± 15,09* 15,26 199,29 ± 19,58* 20,88 212,57 ± 27,29* 28,95 200,00 ± 10,50* 21,44 199,29 ± 30,34* 20,96 Trọng lượng (g) Lô 165,30 ± 27,27 247,22 ± 19,85* 54,16 260,20 ± 36,67* 60,73 265,60 ± 47,52* 64,37 278,50 ± 53,26* 72,60 278,40 ± 64,51* 73,39 Lô 171,10 ± 22,35 249,70 ± 40,11* 47,32 259,70 ± 43,22* 53,17 270,90 ± 44,22* 60,04 284,40 ± 48,66* 67,73 278,30 ± 47,01* 64,27 p so với lô > 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 p < 0,05: So sánh với thời điểm bắt đầu nghiên cứu Kết bảng 1cho thấy sau tuần cân nặng chuột tất lô tăng so với trc nghiờn cu S tng cân nng ca chut lô 2, 3(có chế độ ăn 40% lượng lipid ) cao rõ rệt so với lô chứng, khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) 280 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Bùi Thị Quỳnh Nhung Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CƠNG NGHỆ 89(01/2): 279 – 283 Bảng Sự biến đổi nồng độ glucose huyết lô chuột thời điểm nghiên cứu Thời gian Sau tuần Sau tuần % tăng Sau tuần % tăng Sau 10 tuần % tăng Sau tiêm STZ 72h % tăng Glucose huyết (mmol/l) n = 10 Lô Lô Lô 5,68 ± 0,96 6,67 ± 0,81 6,70 ± 1,14 5,82 ± 1,54 6,44 ± 0,95 6,33 ± 0,72 - 0,66 - 0,56 - 0,75 6,30 ± 0,93 7,36 ± 0,72 7,74 ± 1,09* 11,57 11,33 20,51 5,94 ± 0,58 7,12 ± 0,10 7,53 ± 0,22* 7,29 8,69 21,78 10,23 ± 2,13* 6,03 ± 1,89 7,14 ± 0,97 (*) 8,76 9,29 56,96 P so với lô > 0,05 > 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,01 Kết bảng cho thấy nồng độ glucose huyết tất thời điểm nghiên cứu chuột lô thay đổi khác biệt Sau ăn chất béo tuần nồng độ glucose huyết chuột lô tăng cao so với chuột nhóm chứng, sai khác khơng có ý nghĩa thống kê Trong nồng độ glucose huyết sau 72 tiêm STZ kèm theo ăn chất béo 40% tăng cao rõ rệt so với chứng so với nhóm ăn chất béo không tiêm STZ ( lô 2) với p < 0,05 Bảng Sự biến đổi nồng độ cholesterol máu toàn phần lô chuột thời điểm nghiên cứu Thời gian Sau tuần Sau tuần % tăng Sau tuần % tăng Sau 10 tuần % tăng Sau tiêm STZ 72h % tăng Cholesterol máu toàn phần (mmol/l) n = 10 Lô Lô Lô 1,81 ± 0,83 2,67 ± 0,54 2,70 ± 0,40 2,16 ± 0,21 3,32 ± 0,95 3,28 ± 0,77 8,00 28,15 13,93 1,80 ± 0,18 3,20 ± 0,56 3,06 ± 0,53 - 12,60 25,00 15,97 2,21 ± 0,47 3,33 ± 0,38* 3,70 ± 0,60* 6,80 40,93 39,43 2,29 ± 0,64 3,25 ± 0,67* 3,39 ± 1,0* 12,40 25,91 25,87 p so với lô > 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 < 0,05 p < 0,05: So sánh với thời điểm sau tuần Kết bảng cho thấy nồng độ cholesterol máu tồn phần lơ chuột có chế độ ăn giàu lipid tăng cao rõ rệt so với lô chứng bắt đầu thời điểm sau tuần Tuy nhiên, tăng cholesterol rõ rệt sau 10 tuần * Sự biến đổi nồng độ triglycerid máu lô chuột thời điểm nghiên cứu Kết bảng cho thấy nồng độ triglycerid máu lô ăn chế độ ăn giàu lipid từ tuần thứ trở tăng lên rõ rệt so với lơ chứng, khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 281 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Bùi Thị Quỳnh Nhung Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ 89(01/2): 279 – 283 Bảng Sự biến đổi nồng độ triglycerid máu lô chuột thời điểm nghiên cứu Triglycerid máu (mmol/l) n = 10 p so với lô Lô Lô Sau tuần 2,11 ± 0,21 2,16 ± 0,33 > 0,05 Sau tuần 2,54 ± 0,07* 2,66 ± 0,10* > 0,05 % tăng 21,34 24,78 Sau tuần 2,50 ± 0,40* 2,36 ± 0,41 > 0,05 % tăng 19,18 11,29 Sau 10 tuần 3,06 ± 0,78* 2,88 ± 0,27* < 0,05 % tăng 45,49 35,71 Sau tiêm STZ 72h 2,76 ± 0,38* 2,83 ± 0,28* < 0,05 % tăng 31,86 33,02 p < 0,05: So sánh với thời điểm sau tuần Bảng Ảnh hưởng Vinabetes lên nồng độ Tác dụng hạ glucose máu Vinabetes cholesterol toàn phần chuột cống trắng Bảng Ảnh hưởng Vinabetes lên nồng độ Nồng độ cholesterol glucose huyết chuột cống trắng Lơ chuột tồn phần (mmol/l) Nồng độ glucose huyết To Tc Lô chuột mmol/l (X ± SE) Lơ 1: Chuột bình 2,29 ± 2,03 ± 0,22 thường + Nước cất 0,64 To Tc Lô 2: Chuột ĐTĐ 3,39 ± 2,78 ± 0,66 Lô 1: Chuột bình 6,03 ± 6,07 ± 1,32 Nước cất 1,0 p > 0,05 thường + Nước cất 1,89 Lô 3: Chuột ĐTĐ 3,51 ± 2,89 ± 0,84 Gliclazid 20mg/kg 0,46 p > 0,05 Lô 2: Chuột ĐTĐ 10,23 ± 7,78 ± 0,65 Lô 4: Chuột ĐTĐ 4,22 ± 2,99 ± 0,39 Nước cất 2,13 Vinabetes g/kg 1,98 p > 0,05 Lô 3: Chuột ĐTĐ 10,21 ± 5,72 ± 0,67 Bảng Ảnh hưởng Vinabetes lên nồng độ Gliclazid 20mg/kg 0,83 p < 0,05 triglycerid máu chuột cống trắng Lô 4: Chuột ĐTĐ 10,16 ± 5,72 ± 0,82 Nồng độ triglycerid Vinabetes 3g/kg 0,94 p < 0,05 máu mmol/l (X ± SE) Lô chuột To Tc Kết bảng cho thấy: nồng độ glucose Lơ 1: Chuột bình 2,34 ± 0,39 2,10 ± huyết lô chuột tiêm STZ (lô 2, thường 0,37 3, 4) tăng lên rõ rệt so với lô chứng (p < Nước cất 0,05) Vinabetes liều 3g/kg thể trọng chuột, Lô 2: Chuột ĐTĐ + 2,83 ± 0,28 2,75 ± Nước cất 0,37 uống liên tục tuần có tác dụng làm hạ p > 0,05 glucose huyết rõ rệt (p < 0,05), tác dụng Lô 3: Chuột ĐTĐ 3,05 ± 0,51 2,51 ± Vinabetes tương đương với gliclazid liều Gliclazid 20mg/kg 0,34 p < 0,05 20mg/kg thể trọng chuột (p > 0,05) Lô 4: Chuột ĐTĐ 3,37 ± 0,45 2,96 ± Bảng 3.6, 3.7 cho thấy: Nồng độ triglycerid Vinabetes g/kg 0,16 p < 0,05 hai lô uống gliclazid Vinabetes giảm nhiều Thời gian Lô 1,85 ± 0,84 2,50 ± 0,07 18,78 2,04 ± 0,17 - 4,81 2,37 ± 0,15 12,03 2,34 ± 0,39 10,85 so với thời điểm trước uống thuốc với khác biệt có ý nghĩa (p < 0,05), nồng độ cholesterol ba lơ giảm khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê KẾT LUẬN Vinabetes liều g/kg/ngày liên tục tuần làm giảm nồng độ glucose máu (44%) chuột cống trắng gây mơ hình đái tháo đường typ chế độ ăn giàu chất béo kết hợp với STZ liều thấp 282 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Bùi Thị Quỳnh Nhung Đtg Tạp chí KHOA HỌC & CƠNG NGHỆ TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Tạ Văn Bình (2007), “Những nguyên lý tảng bệnh đái tháo đường - tăng glucose máu”, Nhà xuất Y học [2] Nguyễn Thị Hương Giang (2004), Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết Mangiferin chiết xuất từ Tri mẫu (Anemarrhena asphodeloides bunge) chuột nhắt trắng, Luận văn thạc sỹ y học [3] Phùng Thanh Hương (2010), Nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết ảnh hưởng chuyển hóa glucose dịch chiết lăng nước (Lagertroemia speciosa (L.) Pers) Việt Nam, Luận án tiến sĩ dược học [4] Vũ Ngọc Lộ (2006), “Những dược liệu có tác dụng hạ đường huyết trị tiểu đường”, Tạp chí dược học, (1), tr 5,6,34 [5] Đào Văn Phan, Nguyễn Khánh Hòa, Nguyễn Duy Thuần (2003), “Nghiên cứu sàng lọc tác dụng hạ đường huyết Sinh địa, Móng trâu, Giảo cổ lam Tri mẫu”, Tạp chí Nghiên cứu y học 21, tr - [6] Viện dinh dưỡng (2007), Bảng thành phần thực phẩm Việt Nam, Bộ Y tế [7] Huyen VT, Phan DV, Thang P, Hoa NK, Ostenson CG (2010), “Antidiabetic effect of Gynostemma pentaphyllum tea in randomly 89(01/2): 279 – 283 assigned type diabetic patients”, Horm Metab Res 42(5), pp 353 - 357 [8] Barun Kanti Saha, Md Nurul Huda Bhuiyan, Kishor Mazumder and K.M Formuzul Haque (2009), “Hypoglycemic activity of Lagerstroemia speciosa L extract on streptozotocin-induced diabetic rat: Underlying mechanism of action”, Bangladesh J Pharmacol (4), pp 79 - 83 [9] Judy WV (2003), “Antidiabetic activity of a from standardized extract (GlucosolTM) Lagertroemia speciosa leaves in type II diabetics: a dose-dependence study”, Journal of ethnopharmacology 87, pp 115 - 117 [10] K Srinivasan, B Viswanad, Lydia Asrat, C L Kaul, P Ramarao (2005), “Combination of hight-fat diet-fet and low-dose streptozocin-treated rat: A model for type diabetes and pharmacological screening”, Pharmacological Research 52, pp 313 - 320 [11] Norberg A, Nguyen Khanh Hoa, Dao Van Phan, Nguyen Duy Thuan (2004), “A Novel Insulin-releasing Substance, Phanoside, from the plant Gynostemma pentaphyllum”, Journal of Biologycal Chemistry 279, pp 41361 – 41367 [12] Shi L., Zhang W., Zhou YY (2008), “Corosolic acid stimulatetes glucose uptake via anhancing insulin receptor phosphorylation”, European Journal of Pharmacology 584, pp 21 - 29 SUMMARY STUDY ON HYPOGLYCEMIC ACTION OF VINABETES IN EXPERIMENTAL SEWER-RATS WITH TYPE DIABETES Bui Thi Quynh Nhung*1, Nguyen Trong Thong2, Pham Thi Van Anh2, Pham Huu Đien3 Ha Noi Medical University, Thai Nguyen University of Medicine and Pharmacy Ha Noi NationalUuniversity of Education Study on hypoglycemic action of Vinabetes in experiments Objective: To evaluate hypoglycemic actions of Vinabetes in sewer rats with type diabetes Method: sewer rats with type diabetes were taken Vinabetes for weeks to study its hypoglycemic action Results: Vinabetes had hypoglycemic actions in experimental sewer rats with type diabetes Key word: Vinabetes, type diabetes , hypoglycemia in, experimental animals * 283 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ... 15,09* 15 ,26 199 ,29 ± 19,58* 20 ,88 21 2,57 ± 27 ,29 * 28 ,95 20 0,00 ± 10,50* 21 ,44 199 ,29 ± 30,34* 20 ,96 Trọng lượng (g) Lô 165,30 ± 27 ,27 24 7 ,22 ± 19,85* 54,16 26 0 ,20 ± 36,67* 60,73 26 5,60 ± 47, 52* 64,37... cholesterol toàn phần triglycerid máu Nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết chuột thực nghiệm Chuột cống trắng bình thường, chuột béo chuột gây mơ hình đái tháo đường typ 2, chia thành lô, lô 10 con: Lô... 1: Lô chứng: NFD + nước cất Lô 2: Chuột đái tháo đường typ + nước cất Lô 3: Chuột đái tháo đường typ + Gliclazid liều 20 mg/kg Lô 4: Chuột đái tháo đường typ + Vinabetes liều 3g/kg (Liều tương