Bài viết trình bày khảo sát tác động tăng lực của viên nang mềm Saphraton nhằm phát triển chế phẩm có tác dụng tăng lực – chống nhược sức.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học TÁC DỤNG TĂNG LỰC CỦA VIÊN NANG MỀM SAPHRATON TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG (MUS MUSCULUS VAR ALBINO) Nguyễn Lĩnh Nhân*, Trịnh Minh Thiên*, Trần Mỹ Tiên*, Nguyễn Thị Ngọc Đan*, Dương Thị Mộng Ngọc*, Trương Thị Phương Lan** TÓM TẮT Mục tiêu nghiên cứu: Khảo sát tác động tăng lực viên nang mềm Saphraton nhằm phát triển chế phẩm có tác dụng tăng lực – chống nhược sức Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Phương pháp bơi kiệt sức Brekhman có cải tiến chuột nhắt trắng áp dụng để khảo sát tác dụng tăng lực viên nang mềm Saphraton Liều thử nghiệm dựa theo liều tính toán dự kiến sử dụng người viên/ngày, quy đổi sang liều thử nghiệm chuột 143 mg/kg thể trọng chuột Thuốc đối chiếu sử dụng viên nang mềm Pharmaton liều 242 mg/kg viên nang mềm Koligin- S liều 174 mg/kg Kết quả: Ở thời điểm sau 60 phút dùng thuốc, viên nang mềm Saphraton liều 143 mg/kg thể tác dụng phục hồi sức tức thời (T60/T0 = 115,44%), nhiên tác dụng yếu hai loại thuốc đối chiếu Ở thời điểm sau ngày 14 ngày cho uống, tỷ lệ thời gian bơi so với thời gian bơi lần đầu lô thử uống viên nang mềm Saphratonliều 143 mg/kg (lần lượt 690,69% 613,33%) tương đương với thuốc đối chiếu Pharmaton liều 242 mg/kg tăng khác biệt đạt ý nghĩa thống kê so với lô đối chiếu Koligin - S liều 174 mg/kg Kết luận: Viên nang mềm Saphraton liều 143 mg/kg thể tác dụng phục hồi sức tức thời sau 60 phút tác dụng tăng lực sau ngày 14 ngày dùng thuốc Bên cạnh đó, viên nang mềm Saphraton có tác dụng tăng lực tốt Koligin- S tương đương với Pharmaton thời điểm ngày 14 ngày thử nghiệm Từ khóa: Viên nang mềm Saphraton, tác dụng tăng lực ABSTRACT STUDY ON ANTI-FATIGUE EFFECT OF SAPHRATON CAPSULE ON MOUSE (MUS MUSCULUS VAR ALBINO) Nguyen Linh Nhan, Trinh Minh Thien, Tran My Tien, Nguyen Thi Ngoc Đan, Duong Thi Mong Ngoc, Trương Thị Phương Lan * Ho Chi Minh City Journal Of Medicine * Vol 22 - No 5- 2018: 45 – 50 Objectives: This work studied on anti-fatigue effects in mice of Saphraton capsule for development of a product used in treatment of fatigue Materials and Methods: The Brekhman’s mouse forced swimming test was used to study on anti-fatigue effect of Saphraton capsule The test dose was based on human dose of capsule/day corresponding to dose of 143 mg/kg body weight in mice The reference groups were Pharmaton and Koligin capsules at the doses of 242 mg/kg and 174 mg/kg, respectively Results: After 60 minutes treatment, mice treated with Saphraton capsules at 143 mg/kg dose (T60/T0 = 115.44%) showed an immediate ant-fatigue effect less than that of two positive controls On the day and 14, the mice treated with Saphraton capsules at 143 mg/kg had similar swimming time/first swimming time ratio (sequence 690.69% 613.33%) to 242 mg/kg dose of Pharmaton group This ratio was statistically significant higher than 174 mg/kg dose of Koligin group * Trung tâm Sâm Dược liệu TP Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: DS Trương Thị Phương Lan ** Công ty TNHH Sâm Sâm ĐT: 0913949239 Email: lansgtqn@gmail.com 45 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 22 * Số * 2018 Conclusions: The product did exhibite ant-fatigue effects at 143 mg/kg dose in mice after 60 minutes treatment as well as days and 14 days treatment In addition, the anti-fatigue effect of Saphraton capsules was better than Koligin-S and as well as Pharmaton after days as well as 14 days treatment Keywords: Saphraton capsules, anti-fatigue effect ĐẶT VẤN ĐỀ PHƯƠNGTIỆN-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Trong thời đại cơng nghiệp hóa - đại hóa ngày nay, kinh tế ngày phát triển mạnh mẽ số vấn đề đáng báo động tình trạng suy nhược thể chất lẫn tinh thần người nhiều ngun nhân nhiễm mơi trường, thói quen sinh hoạt không hợp lý, sức ép từ công việc Vì thế, xu hướng chăm sóc sức khỏe cộng đồng ngày hướng đến việc sử dụng loại dược liệu chế phẩm nguồn gốc từ dược liệu có tác dụng bồi bổ thể, chống nhược sức an toàn sử dụng lâu dài Và sâm Việt Nam (sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha et Grushv.) số dược liệu đặc hữu Việt Nam với tác dụng dược lý quan tâm phát triển Theo nghiên cứu động vật, hoạt chất Sâm Ngọc Linh có tác dụng tốt lên hệ thần kinh trung ương, chống stress tâm lý vật lý, chống trầm cảm, tăng sinh lực, tăng khả thích ứng, kích thích khả miễn dịch, kháng u chống oxy hóa…(2,6,8) Bên cạnh đó, Đinh lăng nhỏ (Polyscias fruticosa (L.) Harms) dược liệu gần gũi với người dân Việt Nam thuộc họ Nhân sâm (Araliaceae) với nhiều tác dụng dược lý tăng lực - chống nhược sức, chống oxy hóa, bảo vệ tim mạch, chống trầm cảm,… quan tâm nghiên cứu, phát triển ứng dụng Đối tượng nghiên cứu Từ sở khoa học nêu trên, viên nang Saphraton bào chế với từ thành phần chiết xuất từ Sâm Ngọc Linh Đinh lăng nhỏ nhằm hướng đến mục tiêu chăm sóc sức khỏe cộng đồng nguồn dược thảo quốc gia để cạnh tranh, thay chế phẩm ngoại nhập với giá thành cao thị trường 46 Viên nang mềm Saphraton sản xuất vào ngày 23 tháng năm 2017 xây dựng tiêu chuẩn sở cho viên nang mềm Công ty TNHH Sâm Sâm với thành phần cơng thức cao chiết từ Sâm Ngọc Linh Đinh lăng nhỏ Liều thử nghiệm dựa liều dự kiến sử dụng cho người viên/ ngày, quy đổi sang liều chuột thử nghiệm 143 mg/kg thể trọng chuột Động vật nghiên cứu Các thử nghiệm thực chuột nhắt trắng đực chủng Swiss albino, trọng lượng trung bình 25 ± g, cung cấp Viện Vắc xin Sinh phẩm Y tế Nha Trang Chuột nuôi thực phẩm viên cung cấp Viện Vắc xin Sinh phẩm Y tế Nha Trang, với nước uống đầy đủ Thể tích cho uống 0,1 ml/10 g thể trọng chuột Phương pháp nghiên cứu Thiết kế thực nghiệm, đo lường độc lập Nghiệm pháp chuột bơi kiệt sức Brekhman (Swimming test, cải tiến để áp dụng chuột nhắt trắng) chọn để khảo sát tác dụng tăng lực chế phẩm từ dược liệu(1,5) Phương pháp chuột bơi thuận tiện, đơn giản giúp đánh giá tình trạng chống mệt mỏi, phục hồi sức lực động vật thử nghiệm sau liều uống mẫu thử hay đánh giá tác dụng tăng lực sau - 14 ngày uống liên tục mẫu thử Chuột mang vào đuôi gia trọng 5% thể trọng, cho chuột bơi thùng nước có dung tích 20 lít, đường kính 30 cm, chiều cao cột nước 25 cm, nhiệt độ 29 1oC Chuột cho bơi lần 1, thời gian bơi tính từ chuột thả vào thùng nước, bơi đến chìm khỏi mặt nước Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 22 * Số * 2018 20 giây không trồi lên nữa, lúc vớt chuột lau khô Ghi nhận thời gian bơi lần (T0) Chọn chuột có thời gian bơi 15 phút < x < 60 phút Cho chuột nghỉ phút, chia ngẫu nhiên lơ thí nghiệm sau: Lơ chứng: cho uống nước cất Lô thử: cho uống Saphraton liều 143 mg/kg Lô đối chiếu 1: cho uống Pharmaton liều 242 mg/kg (chọn liều quy đổi dựa liều dùng cho người theo định nhà sản xuất Swiss Caps AG, Husenstrasse 35, Kirchberg CH-9533, Thụy Sĩ) Lô đối chiếu 2: cho uống Koligin liều 174 mg/kg (chọn liều quy đổi dựa liều dùng cho người theo định nhà sản xuất Korea Ginseng Bio-Science Co., LTD.) Một sau cho chuột uống mẫu thử nghiệm, ghi nhận thời gian bơi lần (T60phút) Chuột tiếp tục cho uống nước cất, mẫu thử nghiệm liên tục (mỗi ngày lần vào định) đến ngày thứ 14 tiến hành cho chuột bơi lần (T7 ngày) lần (T14 ngày) Đánh giá kết Đánh giá tác dụng tăng lực so sánh thống kê lô thử lô chứng tiêu: Thời gian bơi (phút): Tỉ lệ phần trăm thời gian bơi sau uống cao thử nghiệm (T60phút, T7 ngày, T14 ngày) so với thời gian bơi lần (T0), tính theo cơng thức: X% = (Tt/T0) × 100 Nếu T60 phút / T0 (%) lô thử lớn T60 phút / T0 (%) lô chứng: mẫu thử nghiệm có tác dụng hồi phục sức Nếu T7 ngày / T0 (%) lô thử lớn T7 ngày / T0 (%) lơ chứng: mẫu thử nghiệm có tác động tăng lực sau ngày Nếu T14 ngày / T0 (%) lô thử lớn T14 ngày / T0 (%) lơ chứng: mẫu thử nghiệm có tác động tăng lực sau 14 ngày Các số liệu biểu thị trị số trung bình: M ± SEM (Standard Error of the Mean – sai số chuẩn giá trị trung bình) xử lý thống kê Nghiên cứu Y học dựa vào phép kiểm One –Way ANOVA hậu kiểm Student-Newman-Keuls test (phần mềm SigmaStat-3.5) Kết thử nghiệm đạt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% p < 0,05 KẾT QUẢ Thời gian bơi Ở thời điểm trước thử nghiệm, thời gian bơi T0 lô chứng, thử nghiệm đối chiếu khơng có khác biệt đạt ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Ở ba thời điểm thử nghiệm, lô đối chiếu cho uống Pharmaton liều 242 mg/kg Koligin liều 174 mg/kg có thời gian bơi tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng uống nước cất Như vậy, Pharmaton Koligin liều chọn đạt yêu cầu để sử dụng làm lô đối chiếu Saphraton liều 143 mg/kg có thời gian bơi T60 phút tăng khác biệt đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng Lô cho uống Pharmaton liều 242 mg/kg Koligin liều 174 mg/kg có thời gian bơi tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng thời điểm bơi lần (T0) Chứng tỏ Saphraton có tác dụng phục hồi sức sau dùng 60 phút Sau ngày, Saphraton liều 143 mg/kg, Pharmaton liều 242 mg/kg Koligin liều 174 mg/kg có thời gian bơi tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng so với thời điểm bơi lần (T0) Về thời gian bơi, lô Saphraton không khác biệt so với lơ Pharmaton (p < 0,05) cao có ý nghĩa thống kê so với lô Koligin (p < 0,05) Như vậy, Saphraton liều 143 mg/kg có tác dụng tăng lực tương đương Pharmaton liều 242 mg/kg tốt Koligin liều 174 mg/kg Sau 14 ngày, thời gian bơi lô Saphraton liều 143 mg/kg tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng so với thời điểm bơi lần (p < 0,05) Lô đối chiếu Pharmaton liều 242 mg/kg Koligin liều 174 mg/kg có thời gian bơi tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng so với thời điểm bơi lần (p < 0,05); lô có tác dụng tương đương (p > 0,05) Thời gian bơi lô Saphraton khác biệt không đáng kể so với lô Pharmaton Koligin (p > 0,05) Như vậy, 47 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 22 * Số * 2018 Nghiên cứu Y học Saphraton liều 143 mg/kg có tác dụng tăng lực tương đương Pharmaton liều 242 mg/kg Koligin liều 174 mg/kg (Bảng 1) phục sức tức thời không Pharmaton Koligin-S Sau 14 ngày, Saphraton liều 143 mg/kg, Pharmaton liều 242 mg/kg Koligin liều 174 mg/kg có tỉ lệ thời gian bơi tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng (p < 0,05); chứng tỏ mẫu có tác dụng tăng lực Tỉ lệ thời gian bơi lô Saphraton cao lô Koligin-S đạt ý nghĩa thống kê (p < 0,05) không khác biệt so với lô Pharmaton (p > 0,05) Như vậy, viên nang mềm Saphraton thể tác dụng tăng lực tốt viên Koligin-S tương đương với viên Pharmaton (Bảng 2) Tỉ lệ % thời gian bơi Sau dùng thuốc 60 phút, tỉ lệ thời gian bơi lô Saphraton liều 143 mg/kg, Pharmaton liều 242 mg/kg Koligin-S liều 174 mg/kg tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng; chứng tỏ mẫu thử có tác dụng hồi phục tức thời kết lơ Saphraton thấp có ý nghĩa thống kê so với lô Pharmaton Koligin (p < 0,05); chứng tỏ Saphraton có tác dụng hồi Bảng Thời gian bơi (phút) chuột thời điểm lô thử nghiệm Lô (n = 10) Liều (viên/kg) T0 T60 phút T7 ngày T14 ngày Chứng - 28,70 ± 3,00 19,80 ± 2,98 27,00 ± 2,26 29,90 ± 2,45 Saphraton 143 mg/kg 26,25 ± 2,56 28,50 ± 1,64 * 178,50 ± 1,24 Pharmaton 242 mg/kg 29,20 ± 2,62 48,60 ± 5,02 *$ 173,00 ± 7,00 Koligin-S 174 mg/kg 30,00 ± 1,02 *$ 59,20 ± 7,90 *$ 152,63 ± 12,19 *$ 180,00 ± 0,00 *$ 146,40 ± 11,45 *$ *$ *$ 124,00 ± 16,41 * : p < 0,05 so với lô chứng thời điểm : p < 0,05 so với lô đối chiếu Pharmaton thời điểm $ : p < 0,05 so với thời điểm bơi lần 1(T0) lô thử nghiệm # Bảng Tỉ lệ % thời gian bơi thời điểm thử nghiệm so với trước thử nghiệm Lô (n = 10) Liều (mg/kg) T60 phút/T0 T14 ngày/T0 Chứng - 69,24 ± 9,62 107,31 ± 16,95 110,75 ± 10,08 Saphraton 143 115,44 ± 12,15* # 690,69± 71,86* 613,33 ± 75,68* Pharmaton 242 189,25 ± 35,11* 639,95 ± 70,47* 669,11 ± 68,11* 202,06 ± 29,32* # 408,21 ± 49,61* Koligin-S *: p < 0,05 so với lô chứng 174 491,85 ± 38,73* # #: p < 0,05 so với lô đối chiếu Pharmaton BÀNLUẬN Pharmaton xem dược phẩm có tác dụng khắc phục tình trạng kiệt sức, mệt mỏi; viên Pharmaton chứa 40 mg nhân sâm tiêu chuẩn hóa, 2Dimethylaminoethanol hydrogentartrat 26mg, vitamin A 4000 IU, vitamin D2 400 IU, vitamin E 10 mg, vitamin B1 mg, vitamin B2 mg, vit B6 mg, vit B12 mcg, Canxi pantothenate 10 mg, vitamin PP 15mg, vitamin C 60 mcg, rutoside trihydrate 20 mg, Fluorine 0,2 mg, Kali 8mg, Đồng mg, Mangan mg, Magie 10 mg, Sắt 10 mg, Kẽm 1mg, Canxi 90,3 mg, Phosphor 70 mg, 48 T7 ngày/T0 Lecithin 66 mg Trong nghiên cứu này, viên Pharmaton sử dụng làm thuốc đối chiếu để đánh giá tác dụng tăng lực chuột thí nghiệm mẫu thử Bên cạnh đó, viên nang mềm Koligin sử dụng làm thuốc đối chiếu đề tài không để so sánh, nhận định tác dụng mẫu thử mà nhằm mục đích so sánh tác dụng tăng lực chống nhược sức với viên Pharmaton Koligin thực phẩm chức Hàn Quốc với thành phần chủ yếu nhân sâm, nấm linh chi, nhung hươu, sữa ong Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 22 * Số * 2018 chúa, vitamin khống chất; có tác dụng bồi bổ sức khỏe, nâng cao thể trạng, chống nhược sức Ngồi ra, Koligin có tác dụng hỗ trợ điều trị số bệnh lý tim mạch, điều hòa cholesterol, chống oxy hóa, giảm stress Viên nang mềm Saphraton thể tác dụng tăng lực – chống nhược sức tương đương với thuốc đối chiếu Pharmaton tốt viên Koligin Điều giải thích dựa vào hai thành phần cơng thức bào chế viên nang mềm Saphraton Sâm Việt Nam Đinh lăng nhỏ Sâm Việt Nam (Sâm Ngọc Linh) ứng dụng lâm sàng nhiều bệnh lý khác nhau, có vấn đề suy nhược thể Đến nay, 52 hợp chất saponin phân lập từ Sâm Việt Nam (Sâm Ngọc Linh) xác định cấu trúc hóa học, 26 hợp chất có cấu trúc biết ginsenoside Rb1 (G-Rb1), Rb2 (G-Rb2), Rd (G-Rd), Re (G-Re), Rg1 (G-Rg1) thường thấy Sâm Triều Tiên, Sâm Mỹ, Sâm Nhật Bản 26 saponin mới, gọi vinaginsenoid-R1, vina-ginsenoid-R2, vinaginsenoid-R25, 20-O-methyl ginsenosid-Rh1 đặc biệt hợp chất majonosid-R2; hợp chất polyacetylen, sterol, acid amin, acid béo nguyên tố vi lượng(2,8) Theo nghiên cứu Võ Xuân Minh cộng (1991) khảo sát hàm lượng saponin toàn phần phận Đinh lăng: rễ (0,49%), vỏ rễ (1,00%), lõi rễ (0,11%) (0,38%)(7) Bên cạnh đó, Đinh lăng có alkaloid, glycosid, vitamin B1, B2, B6, vitamin C, phytosterol 20 loại acid amin(4) Những nghiên cứu khoa học trước Đinh lăng Trung tâm Sâm Dược liệu TP.HCM cho thấy cao Đinh lăng có tác dụng làm gia tăng vận động tự nhiên thể tác dụng tăng lực – chống nhược sức hai thực nghiệm chuột bơi kiệt sức Brekhman chuột leo dây Cabureb Cao phối hợp rễ Đinh lăng làm tăng thể trọng súc vật thử nghiệm, tác dụng phụ gây ảnh Nghiên cứu Y học hưởng đến chức sinh lý chuột cơng thức máu, số protein tồn phần khơng xuất thay đổi bất thường cấu trúc gan, tim thận(3,7) Thành phần hóa thực vật hai loại dược liệu nói chung saponin nói riêng xem yếu tố định tác dụng tăng lực – chống nhược sức viên nang mềm Saphraton Sự phối hợp hai dược liệu góp phần làm tăng tác dụng tăng lực chế phẩm tốt viên Koligin tương đương với viên nang Pharmaton Từ đó, cho thấy khả ứng dụng viên nang mềm Saphraton chăm sóc sức khỏe cộng đồng có khả thay số chế phẩm nhập ngoại thị trường KẾT LUẬN Viên nang mềm Saphraton liều 143 mg/kg tương đương với liều sử dụng người viên/ngày thể tác dụng phục hồi sức tức thời tác dụng tăng lực sau ngày, 14 ngày dùng thuốc Viên nang mềm Saphraton có tác dụng tăng lực tốt viên nang mềm Koligin-S tương đương với viên nang mềm Pharmaton thời điểm ngày 14 ngày thử nghiệm LỜI CẢM ƠN: Nhóm nghiên cứu xin chân thành cảm ơn tài trợ kinh phí Cơng ty TNHH Sâm Sâm TÀI LIỆU THAM KHẢO Brekhman II, Dardymov IV (1969) Pharmacological investigation of glycoside from Ginseng and Eleutherococcus Lioydi; 32(1):46 – 51 Becker K, Francis G, Kerem Z and Makkar HPS (2002) “The biological action of saponins in animal systems: a review” British Journal of Nutrition; 88(06): 587 Nguyen Thi Thu Huong (2002) “Adaptogenic Effect of Vietnamese Medicinal Plants” Proceeding of 2002 International Symposium of Traditional Korean Medicine, 116-130 Nguyễn Thị Thu Hương, Lương Kim Bích, Nguyễn Thới Nhâm (2001) “Tác dụng dược lý cao toàn phần chiết xuất từ rễ Đinh lăng (Polyscias fruticosa Harms Araliaceae)” Cơng trình nghiên cứu Khoa học 1987-2000 Chủ biên: Viện Dược liệu Nhà Xuất Khoa học Kỹ thuật, 241-244 Nguyễn Thượng Dong, Trần Công Luận Nguyễn Thị Thu Hương (2007) Sâm Việt Nam số thuốc họ nhân sâm Nhà Xuất Bản Khoa Học Kĩ Thuật, 148-262 49 Nghiên cứu Y học Viện Dược liệu (2006) Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ dược thảo NXB Khoa học Kỹ thuật, 295-296, Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 22 * Số * 2018 Yamasaki K (2000) “Bioactive saponins in Vietnamese ginseng, Panax vietnamensis” Pharmaceutical biology; 38(1): 16–24 385-386 Võ Xn Minh (1991), “Góp phần tìm hiểu thành phần hóa học Ngày nhận báo: 25/04/2017 dạng bào chế Đinh lăng” Tạp chí Dược học; 3: 19-21 Ngày phản biện nhận xét báo: 20/06/2018 Ngày báo đăng: 20/09/2018 50 ... viên/ ngày thể tác dụng phục hồi sức tức thời tác dụng tăng lực sau ngày, 14 ngày dùng thuốc Viên nang mềm Saphraton có tác dụng tăng lực tốt viên nang mềm Koligin-S tương đương với viên nang mềm Pharmaton... yếu tố định tác dụng tăng lực – chống nhược sức viên nang mềm Saphraton Sự phối hợp hai dược liệu góp phần làm tăng tác dụng tăng lực chế phẩm tốt viên Koligin tương đương với viên nang Pharmaton... Như vậy, viên nang mềm Saphraton thể tác dụng tăng lực tốt viên Koligin-S tương đương với viên Pharmaton (Bảng 2) Tỉ lệ % thời gian bơi Sau dùng thuốc 60 phút, tỉ lệ thời gian bơi lô Saphraton