Đề tài này tiến hành khảo sát tác dụng hướng nội tiết tố sinh dục nam của công thức phối hợp hai dược liệu Thiên niên kiện và Bách bệnh trên chuột nhắt trắng với mục tiêu đánh giá tác dụng hướng sinh dục nam của công thức phối hợp của hai dược liệu trên hai cơ địa chuột bình thường và chuột giảm năng sinh dục.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 TÁC DỤNG TĂNG LỰC VÀ TÁC DỤNG HƯỚNG NỘI TIẾT TỐ SINH DỤC NAM CỦA CAO PHỐI HỢP THIÊN NIÊN KIỆN VÀ BÁCH BỆNH Trần Mỹ Tiên*, Huỳnh Thanh Hằng*, Nguyễn Thị Thu Hương*, Dương Thị Mộng Ngọc*, Phan Phước Hiền* TÓM TẮT Mục tiêu nghiên cứu: Trong năm gần đây, việc nghiên cứu thực nghiệm số thuốc có tác dụng bổ, tăng cường thể lực nội tiết tố sinh dục nam thực nhiều sở nghiên cứu Cây Thiên niên kiện (Homalomena occulta) Bách bệnh (Erycoma longifolia) sử dụng lâu đời với nhiều công dụng khác Việc phối hợp hai dược liệu nghiên cứu dược lý thực nghiệm theo hướng tăng cường thể lực nhằm mục đích ứng dụng hai thuốc việc bảo vệ sức khỏe nâng cao chất lượng sống cho đối tượng người cao tuổi Vì vậy, đề tài tiến hành khảo sát tác dụng hướng nội tiết tố sinh dục nam công thức phối hợp hai dược liệu Thiên niên kiện Bách bệnh chuột nhắt trắng với mục tiêu đánh giá tác dụng hướng sinh dục nam công thức phối hợp hai dược liệu hai địa chuột bình thường chuột giảm sinh dục Đối tượng nghiên cứu: Cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh cung cấp từ BM Hóa-Chế phẩm, Trung tâm Sâm Dược Liệu TP HCM Mẫu cao tiêu chuẩn hóa theo quy định Dược điển Việt Nam IV tiêu chuẩn sở Phương pháp nghiên cứu: Đánh giá tác dụng tăng lực so sánh tỉ lệ phần trăm thời gian bơi lô chứng lô thử sau dùng thuốc sau 60 phút, sau ngày sau 14 ngày Đánh giá tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam qua tiêu: định lượng hàm lượng testosteron huyết tương, thay đổi trọng lượng túi tinh - tuyến tiền liệt, tăng trọng lượng nâng hậu môn, khảo sát hàm lượng protein tồn phần huyết tương chuột bình thường chuột bị cắt hai tinh hoàn Ngoài đánh giá thêm thay đổi thể trọng trước sau dùng thuốc Kết quả: Kết nghiên cứu cho thấy tỉ lệ % thời gian bơi chuột sau 60 phút, ngày 14 ngày liều thấp 1,075 g/kg tăng so với lô chứng chưa đạt ý nghĩa thống kê liều cao 2,15 g/kg tỉ lệ % thời gian bơi chuột không khác so với lô chứng Về tác dụng androgen, cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh không làm tăng hàm lượng testosteron huyết, trọng lượng quan sinh dục đực làm tăng trọng lượng nâng hậu mơn hàm lượng protein tồn phần huyết tương sau 14 ngày dùng thuốc động vật bình thường động vật giảm sinh dục Kết luận: Cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh có chiều hướng tác dụng tăng lực thể rõ liều 1,075 g/kg Về tác dụng androgen, hai liều uống 1,075 g/kg 2,15 g/kg chưa thể điển hình hoạt tính androgen địa chuột bình thường chuột giảm sinh dục Còn tác dụng đồng hóa, cao phối hợp thể tác dụng tăng tiến dưỡng protein địa chuột bình thường chuột giảm sinh dục sau 14 ngày dùng thuốc Từ khóa: Giảm sinh dục, androgen, testosterone, protein ∗ Trung tâm Sâm Dược liệu TPHCM – Viện Dược liệu Tác giả liên lạc: ThS Trần Mỹ Tiên ĐT: 08-38298530 106 Email: tranmytien96@yahoo.com.vn Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học ABSTRACT STUDY ON THE TONIC AND ANDROGENIC EFFECT OF THE COMBINED EXTRACT OF HOMALOMENA OCCULTA AND ERYCOMA LONGIFOLIA Tran My Tien, Huynh Thanh Hang, Nguyen Thi Thu Huong, Duong Thi Mong Ngoc, Phan Phuoc Hien * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 18 - Supplement of No – 2014: 106 - 113 Objectives: In recent years, many studies of tonic, fitness-enhancing effects and androgenic effect of some medicinal herbs have been carried out in many research facilities Homolomena occulta and Erycoma longifolia have been used in a long time for their various health benefits Combining these two plants for fitness-enhancing is directed to use these two plants in preserving health and improving life quality especially in the elderly This present study aims to investigate androgenic effect of the combined extract of Homolomena occulta and Erycoma longifolia on normal and castrated mice Methods: The combined extract of Homalomena occulta and Erycoma longifolia purchased by Ginseng and Medicinal plants Research Center, met all Pharmacopea IV and local standards The normal mice and mice were castrated by remove the testicles and let stably for 15 days before treatment in the androgenic test The percentage of swimming time after 60 minutes, days, 14 days were recorded in the physical strength experiment An increase of the plasma testosterone levels, the weight of male sexual organs (testicle, seminal vesicle and prostate gland) was used as an index of androgenic effects On the orther hand, the quantitive of protein, the weight of levator ani was used as an index of protein anabolic The weight of body were also reported before and after intervention Results: The results revealed that the percentage of swimming time was insignificant increased after 60 minutes, days, 14 days at the dose of 1.075 g/kg At the dose of 2.150 g/kg, the percentage of swimming time was not difference in comparison with the control group In the androgenic effect, the combined extract did not changed testosterone levels, the weight of seminal vesicle but increased and levator ani, protein content in castrated mice after14 days administration in both normal mice and castrated mice Conclusion: The combined extract of Homalomena occulta and Erycoma longifolia had a tendency of the invirogation effect at a dose of 1.075 g/kg At the both of using doses, the combined extract had not androgenic effect in both normal mice and castrated mice but showed clearly the anabolic effect after 14 days administration Key wods: Castrated mice, androgen, testosterone, protein giới nước khả tăng ĐẶT VẤN ĐỀ cường sức khỏe tình dục cho nam giới, kích Trong năm gần đây, việc nghiên thích thể tiết hormon sinh dục nam cứu thực nghiệm số thuốc có tác cách tự nhiên (1) Việc phối hợp hai dược liệu dụng bổ, tăng cường thể lực nội tiết tố sinh Bách bệnh Thiên niên kiện nghiên dục nam thực nhiều sở cứu dược lý thực nghiệm theo hướng tăng nghiên cứu Cây Thiên niên kiện (Homalomena cường thể lực nhằm mục đích ứng dụng hai occulta) sử dụng lâu đời để chữa nhiều thuốc việc bảo vệ sức khỏe bệnh khác chữa thấp khớp, đau nâng cao chất lượng sống cho đối nhức khớp, đau dày, làm thuốc kích thích tượng người cao tuổi Vì vậy, đề tài nhằm tiêu hố, dùng trị đau bụng kinh, ăn uống khảo sát tác dụng tăng lực tác dụng hướng không tiêu, nôn mửa, đầy bụng, tiêu chảy, sốt nội tiết tố sinh dục nam (androgen) công rét, giải độc uống nhiều rượu (1) Và thức phối hợp hai dược liệu Thiên niên kiện Bách bệnh (Erycoma longifolia) công bố Bách bệnh chuột nhắt trắng hai Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền 107 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 địa chuột bình thường chuột giảm sinh dục với thời gian bơi lần (T0) theo cơng thức: X% = (Tt/T0) × 100 ĐỐI TƯỢNG-PHƯƠNGPHÁP NGHIÊNCỨU - T60 phút / T0 (%) lô uống cao thuốc lớn T60 phút / T0 (%) lơ chứng: cao thử nghiệm có tác động tăng lực tức thời (Tác dụng hồi phục sức) Nguyên liệu nghiên cứu Cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh cung cấp từ Bộ Mơn Hóa-Chế phẩm, Trung tâm Sâm Dược Liệu TP HCM Mẫu cao tiêu chuẩn hóa theo quy định Dược điển Việt Nam IV tiêu chuẩn sở Cao phối hợp thể độc tính cấp đường uống chuột nhắt trắng với liều LD0 = 21,5 g cao/kg thể trọng chuột Động vật nghiên cứu Chuột nhắt trắng đực (chủng Swiss albino, 5-6 tuần tuổi, trọng lượng trung bình 22 ±2 g) cung cấp Viện vắc xin Sinh phẩm Y tế Nha Trang để tuần trước thử nghiệm Chuột nuôi đầy đủ thực phẩm viên, giá, đậu, rau xà lách, nước uống Thể tích cho uống thuốc thử nghiệm 10 ml/kg thể trọng chuột Liều thử nghiệm 1/20 LD0 1/10 LD0 tương đương 1,075 2,150 g/kg thể trọng chuột Phương pháp nghiên cứu Tác dụng tăng lực (6) Chuột mang vào đuôi gia trọng 5% thể trọng, cho chuột bơi thùng nước có dung tích 20 lít, đường kính 30 cm, chiều cao cột nước 25 cm, nhiệt độ 29 ± 10 C Chuột cho bơi lần 1, thời gian bơi tính từ chuột thả vào thùng nước, bơi đến chìm khỏi mặt nước 20 giây khơng trồi lên nữa, lúc vớt chuột lau khô (T0) Cho chuột nghỉ phút, chia lơ thí nghiệm Một sau cho chuột uống thuốc thử nghiệm, ghi nhận thời gian bơi lần (T60 phút) Sau đó, cho chuột uống nước cất cao thử nghiệm liên tục (mỗi ngày vào định) đến ngày thứ ngày thứ 14 tiến hành cho chuột bơi lần (T7 ngày) lần (T14 ngày) Tính thời gian bơi chuột sau dùng thuốc (T60 phút, T7 ngày, T14 ngày) gọi chung Tt so 108 - T7 ngày / T0 (%) lô uống cao thuốc lớn T7 ngày / T0 (%) lô chứng: cao thử nghiệm có tác động tăng lực sau ngày - T14 ngày / T0 (%) lô uống cao thuốc lớn T14 ngày / T0 (%) lô chứng: cao thử nghiệm có tác động tăng lực sau 14 ngày Khảo sát tác dụng nội tiết tố sinh dục nam (tác dụng androgen) (5, 6) Những thuốc có tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam (tác dụng androgen) xem liệu pháp thay điều kiện sản sinh androgen nội sinh mức sinh lý bình thường Trong liệu pháp này, cần có hoạt tính androgen hoạt tính đồng hóa Hoạt tính androgen gây tác dụng kích thích sinh trưởng, phát triển trì quan sinh dục phụ giống đực; Hoạt tính đồng hóa có đặc tính khả làm tăng sinh trưởng, làm tăng trọng lượng thể cách gây cân nitơ dương Như vậy, tiêu để xác định hoạt tính androgen định lượng hàm lượng testosteron huyết tương, thay đổi trọng lượng túi tinh - tuyến tiền liệt, tiêu để xác định hoạt tính đồng hóa khảo sát tăng trọng lượng nâng hậu môn, khảo sát hàm lượng protein toàn phần huyết tương Ngoài đánh giá thêm thay đổi thể trọng trước sau dùng thuốc Việc nghiên cứu hoạt tính androgen xác định địa: động vật bình thường động vật bị giảm sinh dục Gây mơ hình động vật bị giảm sinh dục Chuột nhắt đực gây mê ether, dụng cụ giải phẫu sát trùng cồn Cắt đường dài khoảng 0,5 cm bìu kéo tinh hoàn ngoài, dùng cột phần Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 tinh hoàn cắt bỏ tinh hoàn Khâu vết mổ chỉ, sát trùng vết mổ dung dịch cồn iod (Povidine) Chuột cắt tinh hoàn để nghỉ tuần trước làm thử nghiệm Khảo sát tác dụng mẫu cao chiết Mẫu cao chiết thực liều (1,075 mg/kg 2,15 mg/kg), đối tượng chuột nhắt trắng đực bình thường chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Lô đối chiếu dùng Testocaps liều 0,002 g/kg Mỗi lô từ 10 – 12 cho uống với thể tích 10 ml/kg thể trọng chuột Thời gian cho uống 15 ngày vào buổi sáng trước cho ăn Xác định tiêu: - Nồng độ testosteron huyết tương Nghiên cứu Y học - mg% = (trọng lượng thực quan/trọng lượng thể) x 100 (Trọng lượng thực quan khác biệt nhiều cá thể trọng tăng giảm lơ lô thử nghiệm Để tránh sai số so sánh thống kê, đơn vị mg% chọn để tính trọng lượng tương đối quan 100g trọng lượng thể) - Nồng độ protein toàn phần huyết tương xác định phương pháp Biuret (theo quy trình kit cung cấp hãng Human, Đức) - Sự thay đổi trọng lượng thể trước sau xác định phương pháp ELISA (theo dùng thuốc thử nghiệm quy trình kit cung cấp hãng Đánh giá kết Human, Đức ) Các số liệu biểu thị số trung - Trọng lượng tinh hoàn, túi tinh - tuyến tiền bình M ± SEM (Standard Error of the Mean – sai số chuẩn giá trị trung bình) xử lý thống kê liệt (mg%: mg/100g thể trọng chuột) - Trọng lượng nâng hậu môn (mg%: dựa vào phép kiểm t-Student với độ tin cậy 95% (P < 0,05) so với lô chứng mg/100g thể trọng chuột) KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Khảo sát tác dụng tăng lực Bảng 1: Thời gian bơi chuột thời điểm lô thử nghiệm Lô (n = 15) Chứng Cao phối hợp TNK -BB Liều (g/kg) T0 T 60 phút T ngày T 14 ngày 1,075 2,15 34,07 ± 6,75 37,40 ± 5,41 54,69 ± 8,55 6,21 ± 0,75 8,93 ± 1,07 9,23 ± 1,95 34,57 ± 9,55 63,40 ± 13,82 41,77 ± 11,33 32,14 ± 10,95 73,47 ± 20,26 55,23 ± 25,86 Bảng 2: Tỉ lệ % thời gian bơi thời điểm T60 phút, T7 ngày, T14 ngày so với T0 lô thử nghiệm Lô (n = 15) Chứng Cao phối hợp TNK -BB Liều (g/kg) 1,075 2,15 T 60 phút/ T0 T ngày/ T0 T 14 ngày/ T0 25,37 ± 4,57 111,57 ± 24,93 105,53 ± 25,96 28,11 ± 4,28 189,85 ± 38,81 272,32 ± 104,36 21,79 ± 4,20 92,40 ± 29,24 118,08 ± 48,54 Cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh so với liều thấp 1,075 g/kg không khác liều 1,075 g/kg làm tăng tỷ lệ % thời gian bơi biệt so với lô chứng Như vậy, cao phối hợp so với lô chứng thời điểm 60 phút, sau Thiên niên kiện - Bách bệnh có khuynh hướng ngày dùng thuốc sau 14 ngày dùng thuốc thể tác dụng tăng lực liều thấp Ở liều cao 2,15 g/kg, tỷ lệ % thời gian bơi giảm Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền 109 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học Khảo sát tác dụng nội tiết tố sinh dục nam (tác dụng androgen) làm tăng nồng độ testosteron huyết tương Khảo sát nồng độ testosteron huyết tương Bảng 3: Nồng độ testosteron lơ thử nghiệm Đối với chuột đực bình thường Lơ uống Testocaps có nồng độ testosteron tăng, đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng Lô uống cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh liều 2,15 g/kg có nồng độ testosterone tăng chưa có khác biệt đạt ý nghĩa thống kê so với lơ chứng bình thường Như vậy, cao phối hợp khơng có tác dụng làm tăng nồng độ testosteron huyết tương chuột bình thường Hàm lượng Hàm lượng Liều testosteron testosteron chuột giảm chuột bình (g/kg) thường (ng/ml) sinh dục (ng/ml) Lô chứng 0,519 ± 0,055 0,383 ± 0,005 # Cao phối hợp 2,15 0,525 ± 0,053 0,380 ± 0,006 Testocaps 0,002 1,575 ± 0,145* 1,008 ± 0,042* Lô thử nghiệm n = 10 (# P < 0,05 so với chứng bình thường) (*P < 0,05 so với chứng cắt hai tinh hoàn) Đối với chuột bị giảm sinh dục Lô chứng cắt tinh hồn có nồng độ testosteron giảm đạt ý nghĩa thống kê so với lơ chứng bình thường chứng tỏ mơ hình gây giảm sinh dục đạt Lơ uống Testocaps có nồng chuột giảm sinh dục Khảo sát trọng lượng quan sinh dục đực (tinh hoàn, túi tinh-tuyến tiền liệt) Trên chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Bảng 5: Trọng lượng túi tinh-tuyến tiền liệt lô chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Lô thử nghiệm Liều thử Trọng lượng túi tinh nghiệm (g/kg) tuyến tiền liệt (mg%) độ testosteron tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô n = 10 chứng cắt tinh hồn Lơ uống cao phối hợp Chứng bình thường - 271,56 ± 55,78 Thiên niên kiện Bách bệnh liều 2,15 g/kg có Chứng cắt tinh hoàn - 42,96 ± 6,64# 1,075 50,46 ± 3,81 2,15 47,57 ± 6,03 0,002 150,40 ± 20,55* nồng độ testosteron không khác biệt so với lô Cao phối hợp chứng cắt tinh hoàn Như vậy, cao phối hợp Testocaps Thiên niên kiện Bách bệnh tác dụng (*P < 0,05 so với chứng cắt hai tinh hoàn) (# P < 0,05 so với chứng bình thường) Trên chuột nhắt trắng đực bình thường Bảng 6: Trọng lượng túi tinh – tuyến tiền liệt lơ chuột nhắt trắng đực bình thường Lơ thử nghiệm n = 10 Liều thử nghiệm g/kg Chứng Cao phối hợp 2,15 Trọng lượng túi tinh - tuyến tiền liệt (mg%) Sau 14 ngày Sau 30 ngày Sau 60 ngày 271,56 ± 55,78 482,00 ± 28,4 611,44 ± 35,21 277,43 ± 43,37 480,70 ± 54,82 620,76 ± 47,70 Testocaps 0,002 370,05 ± 27,17* - - * P < 0,05 so với chứng Bảng 7: Trọng lượng tinh hoàn lơ chuột nhắt trắng đực bình thường Lơ thử nghiệm n = 10 Liều thử nghiệm g/kg Chứng Cao phối hợp 2,15 Sau 14 ngày 337,30 ± 26,71 447,57 ± 24,89* Testocaps 0,002 486,37 ± 24,65* Trọng lượng tinh hoàn (mg%) Sau 30 ngày 331,17 ± 28,84 463,74 ±34,19* - Sau 60 ngày 564,89 ± 25,80 555,28 ± 28,80 - * P < 0,05 so với chứng 110 Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Trên địa động vật giảm sinh dục Trọng lượng túi tinh – tuyến tiền liệt lơ chứng cắt tinh hồn giảm đạt ý nghĩa thống kê so với lơ chứng bình thường Trọng lượng túi tinh – tuyến tiền liệt lô uống Testocaps tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng cắt tinh hoàn Trọng lượng túi tinh – tuyến tiền liệt lô uống cao phối hợp liều 1,075 g/kg liều 2,15 g/kg khơng có khác biệt đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng cắt tinh hồn Trên địa động vật bình thường: Trọng lượng túi tinh - tuyến tiền liệt lô chuột uống cao phối hợp so với chuột lô chứng thời điểm sau 14 ngày, sau 30 ngày sau 60 ngày khơng có khác biệt đạt ý nghĩa thống kê Trọng lượng túi tinh - tuyến tiền liệt tinh hồn lơ uống Testocaps tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng sau 14 ngày dùng thuốc Nghiên cứu Y học Trọng lượng tinh hồn lơ uống cao phối hợp liều 2,15 g/kg sau 14 ngày sau 30 ngày tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng sau 60 ngày dùng thuốc trọng lượng tinh hồn khơng khác biệt so với lô chứng Khảo sát trọng lượng nâng hậu môn Trên chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Bảng 8: Trọng lượng nâng hậu môn lô chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Lô thử nghiệm Liều thử Trọng lượng nâng nghiệm (g/kg) hậu môn (mg%) n = 10 Chứng bình thường 203,38 ± 19,85 Chứng cắt tinh hoàn 89,18 ± 4,89# 1,075 125,16 ± 9,97* Cao phối hợp 2,15 121,11 ± 6,97* Testocaps 0,002 574,10 ± 55,41* (# P < 0,05 so với chứng bình thường)(*P < 0,05 so với chứng cắt tinh hoàn) Trên chuột nhắt trắng đực bình thường Bảng 9: Trọng lượng nâng hậu môn lô chuột nhắt đực bình thường Trọng lượng nâng hậu mơn (mg%) Lơ thử nghiệm (n = 10) Liều thử nghiệm g/kg Chứng Cao phối hợp 2,15 Sau 14 ngày 203,38 ± 19,85 258,92 ± 15,91* Sau 30 ngày 347,92 ± 43,11 431,47 ± 35,97 Sau 60 ngày 399,93 ± 14,53 392,12 ± 15,68 Testocaps 0,002 488,54 ± 28,28* - - (*P < 0,05 so với chứng bình thường) Trên địa động vật giảm sinh dục: Trọng lượng nâng hậu mơn lơ chứng cắt tinh hồn giảm đạt ý nghĩa thống kê so với lơ chứng bình thường Trọng lượng nâng hậu mơn nhóm uống cao phối hợp liều 1,075 g/kg, liều 2,15 g/kg thuốc đối chiếu Testocaps tăng so với lô chứng cắt tinh hoàn, đạt ý nghĩa thống kê, độ tin cậy 95% Trên địa động vật bình thường: Trọng lượng nâng hậu môn lô chuột uống cao phối hợp lô uống Testocaps sau 14 ngày tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng Trọng lượng nâng hậu môn lô chuột uống cao phối hợp sau 30 ngày tăng so với lô chứng nhiên không đạt ý nghĩa thống kê Trọng lượng nâng hậu môn lô chuột uống cao phối Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền hợp sau sau 60 ngày không khác biệt với so với lô chứng Khảo sát nồng độ protein toàn phần huyết tương Trên chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Bảng 10: Nồng độ protein toàn phần huyết tương chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Lơ thử nghiệm n = 10 Chứng bình thường Chứng cắt tinh hoàn Cao phối hợp Testocaps Liều thử nghiệm (g/kg) Hàm lượng protein (g/dl) 1,075 2,15 0,002 5,21 ± 0,20 # 4,17 ± 0,15 5,05 ± 0,14* 5,09 ± 0,16* 5,42 ± 0,164* # ( P < 0,05 so với chứng bình thường) (*P < 0,05 so với chứng cắt tinh hoàn) 111 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Trên chuột nhắt trắng đực bình thường Bảng 11: Nồng độ protein tồn phần huyết tương lơ chuột nhắt trắng đực bình thường Lơ thử nghiệm n = 10 Chứng Cao phối hợp Testocaps Liều thử nghiệm (g/kg) 2,15 0,002 Trước thử nghiệm 4,94 ± 0,14 4,55 ± 0,14 5,30 ± 0,09* Hàm lượng protein (g/dl) Sau 14 ngày Sau 30 ngày 4,94 ± 0,15 5,16 ± 0,19 5,09 ± 0,14* 5,26 ± 0,12* 5,45 ± 0,10* - Sau 60 ngày 5,06 ± 0,19 5,28 ± 0,14* - (*P < 0,05 so với chứng bình thường) Trên địa động vật giảm sinh dục: Hàm lượng protein toàn phần lơ chứng cắt tinh hồn giảm đạt ý nghĩa thống kê so với lơ chứng bình thường Hàm lượng protein tồn phần lơ chuột uống cao phối hợp liều 1,075 g/kg 2,15 g/kg lô uống Testocaps tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lơ chứng cắt tinh hồn Trên địa động vật bình thường: Hàm lượng protein tồn phần lô uống cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh sau 14 ngày, sau 30 ngày sau 60 ngày tăng đạt ý nghĩa thống kê so với trước thử nghiệm BÀN LUẬN Về tác dụng tăng lực Thời gian bơi chuột phụ thuộc vào tính hưng phấn (stimulating behaviour), khả thích nghi (adaptation), khả ghi nhớ (memory) chuột nhiệt độ môi trường (nước, khơng khí) nên lần chuột bơi với thời gian dài cho bơi lần 2, lần chuột bơi nhiều (thời gian bơi chênh lệch nhiều chuột thời điểm khảo sát) Vì chúng tơi đánh giá thuốc có chiều hướng tác dụng tăng lực hay không Kết nghiên cứu cho thấy lô uống cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh liều thấp 1,075 g/kg có chiều hướng biểu tác dụng tăng lực rõ liều cao 2,15 g/kg Đối với số dược liệu liều thấp có tác dụng kích thích gây hưng phấn, liều cao lại có tác dụng ức chế cao phối hợp có lẻ theo chiều hướng nên có biểu tác dụng tăng lực rõ liều thấp 112 Về tác dụng androgen Về hoạt tính androgen Trên địa chuột bình thường Ở động vật bình thường tổng hợp testosteron diễn chủ yếu tinh hoàn phần nhỏ tuyến thượng thận Ở tế bào Leydig tinh hoàn, phân tử cholesterol màng tế bào vận chuyển vào bên trong, chuyển hóa thành pregnenolon, qua hàng loạt phản ứng xúc tác enzyme để tạo thành testosteron (4) Ở động vật trưởng thành bình thường hàm lượng testosteron máu đạt mức ổn định Chuột bình thường uống cao phối hợp liều 2,15 g/kg chưa thấy tác dụng làm tăng nồng độ testosteron, trọng lượng túi tinh - tuyến tiền liệt Tuy nhiên, cao phối hợp liều uống 2,15 g/kg lại có tác dụng làm tăng trọng lượng tinh hồn sau 14 ngày sau 30 ngày Các kết cho thấy cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh thể tác dụng androgen trọng lượng tinh hồn chuột bình thường Trên địa chuột giảm sinh dục Ở chuột giảm sinh dục, tổng hợp testosteron chủ yếu diễn theo đường thượng thận Androstenediol Androstenedion hai tiền chất quan trọng tạo thành testosteron tuyến thượng thận Hai tiền chất chuyển hóa phân tử cholesterol qua nhiều giai đoạn trung gian(1) Cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh liều 1,075 g/kg 2,15 g/kg chưa thấy thể tác dụng làm tăng hàm lượng testosteron huyết tương Như vậy, cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh chưa có tác dụng phục hồi suy Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 giảm hàm lượng hormon sinh dục đực địa động vật giảm sinh dục thông qua đường tuyến thượng thận Bên cạnh chưa thấy tác dụng làm tăng trọng lượng quan sinh dục tác dụng ghi nhận nghiên cứu trước Đại học Dược Hà nội nghiên cứu Bách bệnh(3) Các kết cho thấy cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh chưa thể rõ tác dụng androgen địa chuột giảm sinh dục Về hoạt tính đồng hóa Cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh hai liều uống 1,075 g/kg 2,15 g/kg lại có tác dụng làm tăng hàm lượng protein toàn phần huyết tương, làm tăng trọng lượng nâng hậu mơn dịa chuột bình thường chuột giảm sinh dục sau 14 ngày uống Các kết cho thấy cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh tác dụng tăng tiến dưỡng protein địa chuột bình thường chuột giảm sinh dục Ngoài ra, cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh ảnh hưởng lên yếu tố khác kích thích dinh dưỡng hay nâng cao thể trạng tổng quát chuột Để làm sáng tỏ giả thuyết này, cần phải có nghiên cứu KẾT LUẬN Cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh có chiều hướng tác dụng tăng lực thể rõ liều 1,075 g/kg Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Nghiên cứu Y học Về tác dụng androgen cho thấy cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh hai liều uống 1,075 g/kg 2,15 g/kg chưa thể điển hình hoạt tính androgen địa chuột bình thường chuột giảm sinh dục Còn tác dụng đồng hóa, cao phối hợp thể tác dụng tăng tiến dưỡng protein địa chuột bình thường chuột giảm sinh dục sau 14 ngày dùng thuốc TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y tế, Viện Dược liệu (2004) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam-Tập Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, tr 101-106 Constanti A, Bartke A, Khardori R (1998) Basic Endocrinology (for Student of Pharmacy and Allied Health Sciences), Harwood academic publishers, pp 85 - 89 Dương Thị Ly Hương, Trịnh Thị Kim Anh, Nguyễn Thị Hải Hà (2010) Đánh giá hoạt tính Androgen rễ Bách bệnh (Eurycoma longifoilia J) chuột thực nghiệm Đề tài nghiên cứu cấp Bộ Trường Đại học Dược Hà Nội Nieschlag E., Behre H M (2004) Testosterone-Action-DeficiencySubstitution.Cambrigdge University Press, pp 127 - 147 Trần Mỹ Tiên, Hồ Việt Anh, Lê Minh Triết, Nguyễn Thị Thu Hương, Trần Công Luận (2008) Ứng dụng kỹ thuật Elisa định lượng testosteron nghiên cứu tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam Gai chống (Tribulus terrestris l zygophylaceae) Tạp chí Y học Tp HCM, trang 148 - 151 Viện Dược liệu – Bộ Y Tế (2006) Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ Dược thảo Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Hà Nội, tr 220 - 222, 377 - 387 Ngày nhận báo: 28/09/2013 Ngày phản biện nhận xét báo: 10/10/2013, 21/10/2013 Ngày báo đăng: 02/01/2014 113 ... sát tác dụng nội tiết tố sinh dục nam (tác dụng androgen) (5, 6) Những thuốc có tác dụng kiểu nội tiết tố sinh dục nam (tác dụng androgen) xem liệu pháp thay điều kiện sản sinh androgen nội sinh. .. gian(1) Cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh liều 1,075 g/kg 2,15 g/kg chưa thấy thể tác dụng làm tăng hàm lượng testosteron huyết tương Như vậy, cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh chưa có tác. .. LUẬN Cao phối hợp Thiên niên kiện Bách bệnh có chiều hướng tác dụng tăng lực thể rõ liều 1,075 g/kg Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Nghiên cứu Y học Về tác dụng androgen cho thấy cao phối hợp Thiên niên