Đang tải... (xem toàn văn)
Nội dung bài viết giới thiệu về ba kích là một loại thảo mộc được trồng đại trà ở một số tỉnh, thành phố ở miền Bắc Việt Nam. Gần đây, thảo mộc này được sử dụng trong dân gian với tác dụng bổ dương, tăng cường sinh lực cho nam giới. Nhưng chưa có nhiều nghiên cứu cụ thể về hợp chất và nhóm hợp chất có tác dụng kiểu androgen của ba kích. Đề tài nghiên cứu tác dụng kiểu androgen của cao kích trên chuột nhắt trắng giảm năng sinh dục và chuột nhắt trắng bình thường.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG HƯỚNG SINH DỤC NAM CỦA BA KÍCH (MORINDA OFFICINALIS HOW.) Trần Mỹ Tiên*, Nguyễn Mai Thanh Tâm*, Trần Cơng Luận*, Nguyễn Thị Thu Hương* TĨM TẮT Mục tiêu nghiên cứu: Ba kích loại thảo mộc trồng đại trà số tỉnh, thành phố miền Bắc Việt Nam Gần đây, thảo mộc sử dụng dân gian với tác dụng bổ dương, tăng cường sinh lực cho nam giới Nhưng chưa có nhiều nghiên cứu cụ thể hợp chất nhóm hợp chất có tác dụng kiểu androgen Ba kích Đề tài nghiên cứu tác dụng kiểu androgen cao kích chuột nhắt trắng giảm sinh dục chuột nhắt trắng bình thường Đối tượng-Phương pháp nghiên cứu: Cao chiết cồn 45% rễ Ba kích (Morinda officinalis How.) Thực nghiệm tiến hành chuột nhắt trắng bình thường bị giảm sinh dục Thời gian dùng thuốc 15 ngày.Chỉ tiêu theo dõi: nồng độ testosteron huyết tương, thay đổi trọng lượng tuyến tinh - tuyến tiền liệt, trọng lượng nâng hậu mơn, nồng độ protein tồn phần huyết tương, thể trọng trước sau dùng thuốc Kết quả: Trên địa động vật giảm sinh dục cao Ba kích (Morinda officinalis How.) thể tác dụng làm tăng nồng độ testosteron huyết, tăng trọng lượng quan sinh dục đực nâng hậu mơn, tăng nồng độ protein tồn phần huyết tương không làm tăng thể trọng thể Tác dụng thể rõ động vật bình thường liều cao (100mg/kg) Kết luận: Ba kích (Morinda officinalis How.) thể tác dụng kiểu androgen chuột đực bình thường chuột đực giảm sinh dục liều thử nghiệm 50mg/kg 100mg/kg Ở liều trọng lượng tinh hồn khơng thay đổi chuột đực bình thường thể trọng khơng thay đổi sau thời gian thử nghiệm Từ khóa: Giảm sinh dục, androgen, testosterone, protein ABSTRACT STUDY ON THE ANDROGENIC EFFECT OF MORINDA OFFICINALIS HOW Tran My Tien, Nguyen Mai Thanh Tam, Tran Cong Luan, Nguyen Thi Thu Huong * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 16 - Supplement of No – 2012 : 192– 198 Objectives: Morinda officinalis How is the herbal medicine which have been used with the nutrition value and enhancing vital force for men This herb has been grown in the North provinces of Viet Nam and people used their alcohol extract to drink However, the studies in male sexual effects of this herb has not yet realized in both of Viet Nam and the other countries In this study, the androgenic effects of Morinda officinalis How in Viet Nam will be investigated in this study in the normal mice and castrated mice Methods: The ethanol extract of Morinda officinalis’s roots was used The normal mice and mice were castrated by remove the testicles and let stably for 15 days before treatment.An increase of the plasma testosterone levels, the weight of male sexual organs (testicle, seminal vesicle and prostate gland) was used as an index of androgenic effects On the orther hand, the quantitive of protein, the weight of levator ani was used as an index of protein anabolic The weight of body were also reported after experiment Results: The results revealed that testosterone content in castrated mice was lower than that in normal mice, * Trung tâm Sâm Dược liệu Tp HCM – Viện Dược liệu Tác giả liên lạc: DS Trần Mỹ Tiên ĐT: 0903611626 E.mail: tranmytien96@yahoo.com.vn 192 Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 Nghiên cứu Y học suggesting for experimental sexual dysfunction Morinda officinalis’s root extract increased testosterone levels, the weight of seminal vesicle and levator ani, protein content in castrated mice but did not changed the weight of prostate gland These effects significantly increased in normal groups at a high dose (100mg/kg).However, the weight of body did not change as compared with control after 15 days administrating extracts Conclusion: Morinda officinalis roots showed the androgen effects in normal and castrated groups at doses: 50mg/kg and 100mg/kg The weigh of prostase in normal mice and the weigh of body have not changed after experiments Keywods: Castrated mice, androgen, testosterone, protein ĐẶT VẤN ĐỀ Testosteron liệu pháp áp dụng nhiều năm qua để điều trị thiểu sinhdục thiếu hụt testosteron Các hóa dược thường có nhiều tác dụng phụ sử dụng lâu dài Do đó, thảo dược thuốc y học cổ truyền ý khắc phục bất lợi Bạch tật lê, Dâm dương hoắc, Bá bệnh, có mặt chế phẩm lưu hành thị trường Ba kích một loại thảo mộc phát sử dụng gần có tác dụng bổ dương, tăng cường sinh lực cho nam giới Trong dân gian, Ba kích sử dụng cách ngâm rượu uống, nấu với thịt trai, hầm với Ngưu tiên để làm ăn bổ dưỡng cho nam giới (6) Hiện nay, Ba kích trồng số tỉnh, thành phố Việt Nam Nhưng, chưa có nhiều nghiên cứu cụ thể hợp chất nhóm hợp chất có tác dụng kiểu androgen Ba kích kể nước lẫn ngồi nước Đề tài tiến hành để nghiên cứu tác dụng kiểu androgen Ba kích chuột nhắt trắng giảm sinh dục chuột nhắt trắng bình thường ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nguyên liệu nghiên cứu Ba kích (Morinda officinalis How.) thu hái Đại Từ, Thái Nguyên, khoa Tài nguyên Dược liệu - Trung tâm Sâm Dược liệu TP HCM cung cấp Dược liệu sử dụng để nghiên cứu rễ bỏ lõi phơi khô, xay thành bột Dược liệu chiết ngấm kiệt với cồn 45% theo tỷ lệ dược liệu: dung môi : 15, sau tiến hành giảm áp dịch chiết để thu Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền cao cồn 45% (Cao Ba kích) Viên Andriol Testoscaps chứa 40 mg testosteron undecanoat (Organon Co.) dùng làm thuốc đối chiếu Động vật nghiên cứu Chuột nhắt trắng đực (chủng Swiss albino, 56 tuần tuổi, trọng lượng trung bình 22 ± g) cung cấp Viện Vắc xin Sinh phẩm Y tế Nha Trang để tuần trước thử nghiệm Chuột nuôi đầy đủ thực phẩm viên, giá, đậu, rau xà lách, nước uống Thể tích cho uống 10 ml/kg thể trọng chuột Thời gian dùng thuốc 15 ngày Phương pháp nghiên cứu(7) Gây mơ hình động vật bị giảm sinh dục Chuột nhắt đực gây mê ether, dụng cụ giải phẫu sát trùng cồn Cắt đường dài khoảng 0,5 cm bìu kéo tinh hoàn ngoài, dùng cột phần tinh hoàn cắt bỏ tinh hoàn Khâu vết mổ chỉ, sát trùng vết mổ dung dịch cồn iod (Povidine) Chuột cắt tinh hoàn để nghỉ tuần trước làm thử nghiệm Khảo sát tác dụng mẫu cao chiết Mỗi mẫu cao chiết thực liều, đối tượng chuột nhắt trắng đực bình thường chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục theo mơ hình bố trí thí nghiệm sau: Chuột chia thành lô sau: lô từ 10 – 15 Lô chứng: Uống nước cất Lô thử 1: Uống cao liều 50 mg/kg 193 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 Nghiên cứu Y học Độ hấp thu 3,042 2,698 2,448 2,094 1,623 0,893 0,435 Lô thử 2: Uống cao liều 100 mg/kg Lô chứng đối chiếu: Uống dầu olive 3.5 3.0 Lô đối chiếu: Uống Testocaps liều mg/kg Nồng độ testosteron huyết tương xác định phương pháp ELISA (theo quy trình kit cung cấp hãng Human, Đức) Trọng lượng tinh hoàn, túi tinh - tuyến tiền liệt (mg%: mg/100g thể trọng chuột) Trọng lượng nâng hậu môn (mg%: mg/100g thể trọng chuột) mg% = (trọng lượng thực quan / trọng lượng thể) x 100 (Trọng lượng thực quan khác biệt nhiều cá thể trọng tăng giảm lô lô thử nghiệm Để tránh sai số so sánh thống kê, đơn vị mg% chọn để tính trọng lượng tương đối quan 100g trọng lượng thể) Nồng độ protein toàn phần huyết tương xác định phương pháp Biuret (theo quy trình kit cung cấp hãng Human, Đức).Sự thay đổi trọng lượng thể trước sau dùng thuốc thử nghiệm Đánh giá kết Các số liệu biểu thị số trung bình M ± SEM (Standard Error of the Mean – sai số chuẩn giá trị trung bình) xử lý thống kê dựa vào phép kiểm t-Student với độ tin cậy 95% (P < 0,05) so với lô chứng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Khảo sát nồng độ testosteron huyết tương Xây dựng đường chuẩn testosteron nồng độ khác Bảng 1: Độ hấp thu theo nồng độ chuẩn testosteron Nồng độ (ng/ml) 194 0,2 0,5 1,0 2,0 6,0 16,0 2.5 Độ hấp thu Các lơ cho uống với thể tích cho uống 10 ml/kg thể trọng chuột Thời gian cho uống 15 ngày vào buổi sáng trước cho ăn Xác định tiêu sau: 2.0 1.5 1.0 0.5 0.0 0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 12.0 14.0 16.0 18.0 Nồng độ testoste rone (ng/ml) Đồ thị 1: Đồ thị biểu diễn độ hấp thu theo nồng độ Nhận xét: Nồng độ testosteron tăng độ hấp thu giảm, dựa vào đường chuẩn ta xác định nồng độ testosteron mẫu thử nghiên cứu Gây mơ hình chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục khảo sát thời điểm nghiên cứu Bảng 2: Nồng độ testosteron chuột bình thường chuột bị cắt hai tinh hoàn sau 1, 2, tuần Lô chuột thử Nồng độ nghiệm N = 10 testosteron (ng/ml) Bình thường Cắt tinh hoàn sau tuần Cắt tinh hoàn sau tuần Cắt tinh hoàn sau tuần Cắt tinh hoàn sau tuần 0,482 ± 0,035 0,367 ± 0,036* 0,246 ± 0,013* 0,133 ± 0,014* 0,102 ± 0,009* Tỉ lệ (%) so với chứng bình thường 23,86 48,96 72,41 78,84 (*P < 0,05 so với chứng bình thường) (: giảm so với chứng bình thường) Nồng dộ testosteron lơ chuột bị cắt hai tinh hoàn sau 1,2,3 tuần thấp động vật bình thường đạt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% thời điểm chọn thích hợp để khảo sát tác dụng tuần sau chuột bị cắt tinh hoàn Khi đó, nồng độ testosteron đo giảm gần phân nửa so với giới hạn bình thường (48,96 %), chưa giảm tới tối thiểu Khảo sát tác dụng cao Ba kích nồng độ testosteron huyết tương Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 Nghiên cứu Y học chuột đực bị giảm sinh dục chuột đực bình thường, Khảo sát trọng lượng quan sinh dục đực (tinh hoàn, túi tinh-tuyến tiền liệt) Trên chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Bảng 3: Nồng độ testosteron chuột đực giảm sinh dục Trên chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Bảng 5: Trọng lượng túi tinh-tuyến tiền liệt lô chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Lô thử nghiệm N Liều = 10 (mg/kg) Trọng lượng Tỉ lệ % so với Lô thử nghiệm Liều túi tinh-tuyến chứng bình N = 10 (mg/kg) tiền liệt (g%) thường Chứng bình 0,185 ± 0,017 thường Chứng cắt tinh # 0,042 ± 0,002 77,30 hồn Chứng bình thường Chứng cắt tinh hồn Cao Ba Kích Chứng dầu olive Testocaps 50 100 Nồng độ testosteron (ng/ml) Tỉ lệ % so với chứng bình thường - 0,485 ± 0,036 0,219 ± 0,042 # 54, 85 0,443 ± 0,016 * 0,515 ± 0,026 * # 0,226 ± 0,019 1,008 ± 0,042* 8,66 6,19 53,11 119,13 50 0,057 ± 0,005* 69,19 100 0,086 ± 0,006* 63,24 0,042 ± 0,003* 0,150 ± 0,021* 77,30 18,92 Cao Ba Kích Chứng dầu olive Testocaps (*P < 0,05 so với chứng cắt hai tinh hoàn), (: giảm so với chứng bình thường), (# P < 0,05 so với chứng bình thường); (: tăng so với chứng bình thường) (*P < 0,05 so với chứng cắt hai tinh hồn); (: giảm so với chứng bình thường); (# P < 0,05 so với chứng bình thường) Trên chuột nhắt trắng đực bình thường: Bảng 4: Nồng độ testosteron chuột nhắt trắng đực bình thường Trên chuột nhắt trắng đực bình thường: Bảng 6: Trọng lượng túi tinh – tuyến tiền liệt lô chuột nhắt trắng đực bình thường Lơ thử nghiệm Liều N = 10 (mg/kg ) Lơ chứng bình thường 50 Cao Ba Kích 100 Chứng dầu olive Testocaps Nồng độ testosteron (ng/ml) Tỉ lệ % so với chứng bình thường 0,485 ± 0,036 0,510 ± 0,020 0,595 ± 0,030* 0,565 ± 0,027 1,575 ± 0,145* 5,16 22,68 16,50 224,74 (*P < 0,05 so với chứng bình thường) (: giảm so với chứng bình thường)(: tăng so với chứng bình thường) Đối với chuột bị giảm sinh dục: Cao Ba kích liều 50 mg/kg 100 mg/kg thể tác dụng làm tăng nồng độ testosterone huyết tương đạt ý nghĩa thống kê Đối với chuột đực bình thường: Cao Ba kích liều 100 mg/kg tăng nồng độ testosteron huyết tương so với lô chứng đạt ý nghĩa thống kê liều 50 mg/kg nồng độ testosteron không khác biệt so với lô chứng Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Trọng lượng túi Tỉ lệ % so với Lô thử nghiệm Liều tinh-tuyến tiền chứng bình N = 10 (mg/kg) liệt (g%) thường Chứng bình 0,185 ± 0,017 thường Chứng dầu olive Testocaps 37,29 50 0,254 ± 0,030* 100 0,328 ± 0,039* 77,29 0,251 ± 0,024* 0,370 ± 0,027* 35,67 100,00 Cao Ba Kích (*P < 0,05 so với chứng bình thường), (: tăng so với chứng bình thường) Bảng 7: Trọng lượng tinh hồn lơ chuột nhắt trắng đực bình thường Tỉ lệ % so Lô thử nghiệm Liều Trọng lượng với chứng (mg/kg) tinh hồn (g%) N = 10 bình thường Chứng bình 0,499± 0,026 thường 50 0,499 ± 0,023 100 0,542 ± 0,024 8,62 0,487 ± 0,026 0,486 ± 0,025 2,41 2,53 Cao Ba Kích Chứng dầu olive Testocaps 195 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 (*P < 0,05 so với chứng bình thường), (: giảm so với chứng bình thường) Trên địa động vật giảm sinh dục: Cao Ba kích thể tác dụng làm tăng trọng lượng túi tinh-tuyến tiền liệt liều thử nghiệm 50mg/kg 100mg/kg Trên địa động vật bình thường: Ở liều thử nghiệm cao Ba kích làm tăng trọng lượng túi tinh-tuyến tiền liệt đạt ý nghĩa thống kê, khơng làm thay đổi trọng lượng tinh hồn Khảo sát trọng lượng nâng hậu môn Trên chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Bảng 8: Trọng lượng nâng hậu môn lô chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Lô thử Trọng lượng Tỉ lệ % so với Liều nghiệm nâng hậu mơn chứng bình (mg/kg) thường N = 10 (g%) Chứng bình 0,358 ± 0,029 thường # Chứng cắt 0,168 ± 0,009 53,05 tinh hoàn 50 0,197 ± 0,012* 44,94 Cao Ba Kích 100 0,270 ± 0,015* 24,54 Chứng dầu 0,169 ± 0,013 52,77 olive Testocaps 0,574 ± 0,055* 60,43 (*P < 0,05 so với chứng cắt tinh hoàn), (: giảm so với chứng bình thường) (# P < 0,05 so với chứng bình thường), (: tăng so với chứng bình thường) Trên chuột nhắt trắng đực bình thường: Bảng 9: Trọng lượng nâng hậu môn lô chuột nhắt đực bình thường Lơ thử Liều nghiệm (mg/kg) N = 10 Chứng bình thường 50 Cao Ba Kích 100 Chứng dầu olive Testocaps Trọng lượng Tỉ lệ % so nâng hậu mơn với chứng bình thường (g%) Trên địa động vật giảm sinh dục: Cao Ba kích thể tác dụng làm tăng trọng lượng nâng hậu môn Trên địa động vật bình thường: Cao Ba kích làm tăng trọng lượng nâng hậu môn liều 100mg/kg đạt ý nghĩa thống kê Khảo sát nồng độ protein toàn phần huyết tương Trên chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Bảng 10: Nồng độ protein toàn phần huyết tương chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Lô thử Hàm lượng Tỉ lệ % so Liều nghiệm protein toàn phần với chứng (mg/kg) thường N = 10 (g/dl) Chứng bình 5,210 ± 0,199 thường Chứng cắt hai # 4,170 ± 0,154 19,96 tinh hoàn 50 5,690 ± 0,087* 9,21 Cao Ba Kích 100 5,960 ± 0,156* 14,40 Chứng dầu # 3,620 ± 0,085 30,52 olive Testocaps 5,417 ± 0,154* 4,03 (*P < 0,05 so với chứng cắt tinh hoàn), (: giảm so với chứng bình thường) (# P < 0,05 so với chứng bình thường), (: tăng so với chứng bình thường) Trên chuột nhắt trắng đực bình thường Bảng 11: Nồng độ protein toàn phần huyết tương lơ chuột nhắt trắng đực bình thường Nồng độ protein toàn phần (g/dl) Tỉ lệ % so với chứng thường _ 5,210 ± 0,199 _ 50 100 _ 4,890 ± 0,095* 5,506 ± 0,194* 5,350 ± 0,086 5,450 ± 0,102 6,14 19,96 1,73 4,61 Lơ thử nghiệm Liều N = 10 (mg/kg) Chứng bình thường 0,358 ± 0,029 - Cao Ba Kích 0,364 ± 0,014 0,424 ± 0,021* 3,63 .18,44 Chứng dầu olive Testocaps 0,365 ± 0,028 1,95 0,489 ± 0,028* 36,59 (*P < 0,05 so với chứng bình thường), (: giảm so với chứng bình thường) (*P < 0,05 so với chứng bình thường), (: giảm so với chứng bình thường) 196 (: tăng so với chứng bình thường) (: tăng so với chứng bình thường) Cao Ba kích thể tác dụng làm tăng nồng độ protein toàn phần huyết tương Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 chuột bị giảm sinh dục liều thử nghiệm chuột bình thường liều 100mg/kg Khảo sát thể trọng sau dùng thuốc Trên chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Bảng 12: Thể trọng chuột lô chuột nhắt trắng đực bị giảm sinh dục Thể trọng sau Lô thử nghiệm Liều 15 ngày uống N = 10 (mg/kg) thuốc (g) Chứng cắt tinh 27,50 ± 0,78 hoàn 50 29,10 ± 1,33 Cao Ba Kích 100 30,30 ± 0,72 Chứng dầu olive 26,00 ± 0,49 Testocaps 28,50 ± 0,83 Thể trọng sau 15 ngày uống thuốc (g) 32,10 ± 0,66 33,20 ± 0,70 34,10 ± 0,67 31,20 ± 0,79 34,90 ± 1,22 Trên chuột nhắt trắng đực bình thường Bảng 13: Thể trọng chuột lơ chuột nhắt trắng đực bình thường Thể trọng sau Lô thử nghiệm Liều 15 ngày uống N = 10 (mg/kg) thuốc (g) Chứng bình 26,60 ± 0,58 thường 50 28,70 ± 0,78 Cao Ba Kích 100 28,80 ± 0,63 Chứng dầu olive 23,30 ± 0,33 Testocaps 27,10 ± 1,12 Thể trọng sau 15 ngày uống thuốc (g) 33,80 ± 0,73 32,90 ± 0,86 33,40 ± 0,81 27,20 ± 0,42 31,60 ± 1,42* (*P