Nghiên cứu tác dụng bảo vệ phóng xạ của một số chế phẩm từ nấm linh chi

Trang 1

BỘ GIÁO ĐỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC QUỐC GIÁ HA NOL

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN

DOAN SUY NGHĨ

NGHIEN CUU TAC DUNG BAO VE PHONG XA CUA MOT SỐ CHẾ PHẨM TU NAM LINH CHI GANODERMA LUCIDUM TREN

CHUOT NHAT TRANG DONG SWISS

Chuyên ngùnh: Tế bào hục

Ma sé: 1.05.22

TOM TAT LUAN AN THEN ST SINH HOC

HANOE - 2000

Trang 2

Luận án được hoàn thành tại Bộ mòn Tế bào và Sinh học phát triển, Bo mon Li sinh Khoa Sinh học - Trường Đại học KHTN - Đại học Quốc gia Hà Nội

Người hướng dân khoa học: 1 PGS.TS Nguyễn Thị Kim Ngân 2 TS Trinh Xuan Hau

Phan bién 1: PGS.TSKH Nguyén Kim Độ Viện Công nghệ sinh học

Phản biện 2: PGS.TS Trịnh Bình Trường Đại học Y Ha Nội

Phản biện 3: PGS TS Nguyễn Kim Giao Viện Vệ sinh dịch fé trung ương

Luận án sẽ được bảo vệ tại Hội đồng chấm luận án cấp nhà nước,

họp tại: Trường Đại học KHTN, Đại học Quốc gia Hà Nội

vào hỏi ngày tháng năm 2000

Trang 3

NHUNG CHU VIET TAT TRONG TOM TAT LUAN AN BVPX CFU CTBC ĐCSH DCUT DSS ĐCCX TBC TGSTB : TLOT IN DVTN : HVĐT ; HVQH : HSBV TTPX YTGL Bao ve phony xa

Quan thể tế bào huyệt nội sinh

Công thức bách càu Doi chimg sinh hoe Đi chứng uỏng Thuốc

Po song sot

Poi chimg chiéu va Teé hao chat

Thoi gian sone trung bình Trung lượng cơ the

Thí nghiêm

Dong vat thi nghiem Hiến vỉ điện tư Hiện vỉ quang học He so bao ve

Tủn thương phóng xà

Trang 4

MƠ ĐẤU

Hiện nay ở trên thể giới các nhà nghiền cứu đã phát hiện duo

; hàng ngàn chất BVPX song các chất có nguồn gốc từ đọng vật thực vat lai được

quan tâm nghiên cứu vì vừa có hiệu lực BVPX cao lại khỏng gây hiệu ứng

phụ Ở Việt Nam trong kho tàng y học cổ truyền dân tộc có nhiều vị thuốc hay song công dụng đây đủ của nó cịn ít được biết tới, Đỏ Eì nấm Linh Chi Ganoderma Jucidum được danh v Lí Thời Trân (Trung Quốc - Thẻ kì lô) mệnh danh là *

lên thảo” (có thân) được danh y Hải Thượng Lân Ơng và Lẻ Qui Đón (Thế Kí 18) đánh giá "là một san vật quí hiểm của đất rừng bai Nam” song kha nang BVPX cua no con ít cơng trình đề cập tới Bởi vậy chung tỏi chọn dé tai:

” Nghiên cửu tác dụng bán vệ phóng xạ cua mới sở chế phẩm từ nam Linh Chi Ganoderma lucidum trén chuot nhat wang dong Swiss"

Nhiệm vụ chính của đề tài

1 Chung lôi cân xác định liều tôi ưu và thời gian tác dụng Lõi tu cưa các

ché phẩm Linh Chỉ,

to - Chúng tôi nghiền cứu hiệu lực BVPX của chẻ phảm Linh Chỉ ở mức

cơ thẻ

trở - Chúng tói nghiên cứu hiệu lực BVPX của chế pham Linh Chi ở mức

tế bào và dưới tế bảo

4 Chúng tôi nghiên cứu tác dụng của chế nhầm Linh Chỉ qua một số chỉ tiêu huyết học và sinh hoá

Trang 5

NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN

1 Nấm Linh Chi nâng cao độ sống sót và kéo dài thời gian sống trung bình

cho chuột nhất trắng Swiss nếu được uống liều tối ưu (5g/kg trọng lượng) và

thời gian tác dụng tối ưu khi cho uống liên tục 7 ngày trước chiếu xạ

2 Nam Linh Chi hạn chế tổn thương cấu trúc và siêu cấu trúc của tế bào trước tác dụng của bức xạ ion hoá

- Nấm Linh Chỉ có tác dụng bổ huyết thể hiện tăng số CEU ở lách, hạn chế

La

giam sé lugng héng cau, bach cau, hemoglobin, tigu edu duy trì CTBC của mau ngoai vi, hạn chế giảm trọng lượng của cơ quan và cơ thể chuột nhất

trắng Swiss khi bị chiếu xạ

+ Nấm Linh Chỉ kìm hãm quá trình peroxit hố lipiL thơng qua tác động tới hoạt tính enzym chống oxi hoá (peroxidaza, catalaza, ascobatoxidaza) nén hạn chế tích luỹ độc tố phóng xạ malonic dialdehyt (MDA) và tầng phơng nội sinh cản phóng xạ do tăng nơng độ nhóm SH ở một số mô của chuột nhất trắng Swiss khi bị chiếu xạ

3 Nấm Linh Chỉ Ganoderma lucidum không chỉ là được thảo có tác dụng "Kiện não” (tráng kiện), "kiện vị" (giúp tiêu hoá tốt) "bảo can” (bd gan), “cường tâm” (mạnh tim), "cường phé ” (bổ phổi) "trường sinh", (tăng tuổi thọ) mà cịn có tác dụng phịng bệnh phóng xạ

CẤU TRÚC VÀ KHỐI LƯỢNG CỦA LUẬN ÁN

Luận án gồm 138 trang Ngoài phản mở đầu và Kết luận luận án có 3

chương 20 bảng số liệu 15 đồ thị và biểu đỏ 42 ảnh HVOH và HVĐT, tài

Trang 6

CHUONG 1

TONG QUAN TAI LIEU

1.1 Tinh hình nghiên cứu chất BVPX hoá học

Khởi đầu năm 1942,W.M Dale phát hiện một số chất có chứa lưu huỳnh thioure có khả năng hạn chế sự khử hoạt tính enzym khi bị chiếu xa tia X Nam 1949 M Path & cs cong bé kha nang BVPX của cystein, Nam 1951 M.Z Bacq & cs tim ra hai chat BVPX mdi 1a cysteamin va cvstamm Năm 1955 G.Doherty & es lại công bỏ chất BVPX mới là S-2- amimmoethylisothiouronium (AET) Danh sách các chất BVPX hoá học được phát hiện ngày càng nhiều đã được cóng bố trong các cóng trình của các tac gia V.G Yusinski (1974) T.R Sweeney (1979) B.G Viadimirov (1989) Ding chi y cé hai chất BVPX tối là S-J-aminoethylthiophosphat (WR-638) và (WR-272l) S-2-3-aminopropylamin ethylthiophosphat do Viện nghiên cứu quản y MĨ tìm ra (1970) Nam ]980 Liên xỏ cũng sản xuất được hai chất nay dit tén 1a cystaphos va gammaphos

1.2 Tình hình nghiên cứu chất BVPX sinh hục

Quá trình nghiên cứu chất BVPX sinh học diễn ra có muộn hơn W.Smith & cs (1960; công bê trên tạp trí Mĩ vẻ kha năng chống phóng xa

của nội độc tô thương hàn Sau đó & Lien Xo N.D.Rogozkin (1960), V.LXocolov (1964) G.A.Vaxiliev (1969) L.V.Alecxeeva (1977) déu

Trang 7

A.X Axmadieva & es (1993) Céc chất BVPX sinh học có ưu điểm là ít gay ra hiệu ứng phụ

1.3 Thuyết giải thích cơ chế tác dụng của các chất BVPX

Về cơ chế tác dụng của các chất BVPX đã có I1 giả thuyết được đưa ra Tưu trung lại có hai loại giá thuyết: thuyết giải thích cơ chế tác dụng bảo vệ gián tiếp và thuyết giải thích cơ chẻ tác dụng bảo vệ trực tiếp Đáng chú ý là thuyết ” Phòng nội sinh chống phóng xạ ˆ do E.H, Goncharenco và TU, B Kudriasov dua ra nam 1980 va thuyết ' Dược lí toàn diện BVPX ở mức cơ thể ” do B, G, Vladimirov va I 1 Krasilnikov dua ra nam 1994

1.4 Tỉnh hình nghiên cứu nam Linh Chi Ganoderma lucidum

Hơn 400 nam trước dây tác dụng được lí của năm Lĩnh Chỉ đã dược ghí chép trong các thư tịch cố, còn lưu lại ở Trung Quốc đến ngày nay (J.D Zuo 1989) Năm ] 595 trong sách " Thân nòng bản thảo” Lý Thời fran xep nam Lạnh Chỉ vào lạng ˆ thượng dược” và phân thành lục bảo Linh Chỉ (Thanh Chỉ Hồng Chí, Hồng Chị Bách Chỉ Hắc Chị Tử Chịi Ở Việt Nam Linh Chỉ cũng được xếp vào một vị thuốc quí trong cơng trình nghiên cứu của Đỗ Tất Lợi (1991, 1994), Trịnh Tam Kiệt và Lê Xuân Thám ¡ 1995),

Các công trình nghiên cứu năm Linh Chỉ vẻ mật phân loại học, hóa dược, cong dung trị bệnh và cả thòng báo ngắn về khả nâng kìm hãm sự phát triển cla virus HIV đã dược trình bày tại các hội nghị nấm học quốc tế ở Bác Kinh (Trung Quốc 1994), ở Vancouver (Canada, 1994), ở Đài Bắc (Đài Loan 1996) ở Chí Ba ( Nhật Bản 1996) Nghiên cứu vẻ nấm Linh Chỉ có một tắm quan trọng đặc biệt, chính vì vậy Viên nghiên cứu quốc tế Ganoderma (Ganoderma International Research Iosititute) đã được thành lập vào năm

Trang 8

CHUONG 2

ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIEN CUU

2.1 Đôi tượng,

2.1.1 Chế phẩm Linh Chi

-Vién nang Linh Chi do Ni nghiép dược phạm trumg wong 24 (Mecophar) sản xuất từ nấm Linh Chỉ Ganodemna lucidum

-Bot Linh Chi dich chiét Linh Chỉ bảng côn etylie và địch chiết Lính

Chị đã loại côn là sản nhâm của để tài: Nghiên cứu công nghệ sản xuất sinh khôi và một số hoại tính sinh học của nấm Linh Chi Ganoderma tucidum do Bư món Vị sinh vật (Trường ĐHEHTN - Đại học quốc gia Hà Nội san

XHấT

2.1.2 Dong vat thi nghiem

Chuột nhất trăng dòng SWiss 5-Š tuân tuổi, nàng trung bình 20-22 cùng Thức an tong hop mua 6 Vien dịch tế lọc trung ương, Chuối được phản thành + lô: I-Lõ ĐCSH (khong uong Linh Chi Khong chigu xan 2- Le DCUT ico uéng Linh Chi không chiếu xar: 3- Lô ĐCCX (khơng nóng Linh Chị có chiếu xạ): +- Lô TN thong Lính Chỉ Hước khi bị chiều xai Ló ĐCCX và lê TN chuột được phân thành nhóm theo liều chiều xa

2.1.3 Nguồn chiếu xạ

Sử dung ua ytir nguồn Coban - 6Ö của máy CHISOBALT ở Bệnh viên K (Hà Nói Máy có cơng suất [09.33R/phúi, Chuột được chiêu xã toàn thân một lần trong hộp gỗ hình trịn xoay đường kính 20em cao 5cm được chia thành 15 ö Khoảng cách từ nguồn chiều xạ tới hộp dựng mẫu vật là §0 em Liễu chiếu từ 550R - 900R với khoảng cách liêu là SUR

Trang 9

2.3 Phương pháp nghiên cứu

2.2.1 Phương pháp nghiên cứu hiệu lực HVPX ở mức cơ thể

-Xác định ĐSS theo công thúc của C.P lamonenko còn thời gian sống trung bình theo cơng thức của P.A Besiadosski

-Xác định hệ số bảo vệ: ơ B, y theo công thức của B.G.Viladimirov

lo 8

-Xác định YTGL theo công thức của B.G.Vladimirov & cs còn CD59 xác định theo phương pháp của Behrens

Phương pháp nghiên cứu tế bào

-Xác định CPU ở lách chuột theo phương pháp của 1.E, TÍ & es -Tiéu ban HVQH làm theo phương pháp của C.I Roskin &t cs ~Tiêu bản HVĐT làm theo phương pháp của B.l Biniuzova & cs

- Phương pháp nghiên cứu các chỉ tiều huyết học và sinh hố

-Sư lượng hòng cấu bạch cấu tiểu cảu CTBC và hàm lượng hermmoglobin mẩu ngoại vị chuột nhất trắng Swiss được đò trên máy Hemacell-V420

- Xác định hoạt tính peroxidaza theo phương pháp của Simakov - Xác định hoạt tính catalaza theo phương pháp vủa Bach và Zubkova - Xác định hoạt tính ascobatoxidaza theo phương pháp cua C.B Acatiana

-Xác định nông độ MDA theo phương phấp của E À Stroev -Xác định nóng độ nhóm SH theo phương pháp của G.L Ellman 2.3 Xử lí sở liệu nghiên cứu

Trang 10

CHƯƠNG 3

KẾT QUÁ NGHIÊN CỨU VÀ BẢN LUẬN

3.1 Xác định liêu và thời gian tác dụng tối ưu của các chế phẩm Linh Chi Liễu tối ưu và thời gian tác dụng tối ưu của các chế phẩm Linh Chi thể hiện

qua độ sống sót (ĐSS) cao nhất và thời gian sống trung bình (TGSTP) lâu nhất

khi che chuột nhất trắng uống hay tiêm phúc mạc (TPM) trước khi bị chiếu xạ

liều 750R

KQNC được trình bày ở bảng 3.1

Bang 3.1 Hiệu lực BVPX của các chế phẩm Linh Chị

| Chế phẩm | Liéu tối ưu TGTD tối ưu DSS (%) | Tingay)

Tl Linh Chi : |

1 | Vién nang 12.5g/kg | Uống 7 ngày| 47s 2.5 | 17.5 £1,0 | Linh Chỉ trọng lượng | trước khi chiếu xạ i

: |

la ị Bột Linh Chi 5ghke Uống 7 ngày| 47+ 25 | 205+1.5 trọng lượng ưước khi chiếu xa

3 Dich chiết Pha loing |Uéng 10 ngay| 2754 2.5 13.0 41.5

i Linh Chi bang 2lần trước chiếu xạ j

cồn etylic loml/kg

4 Dịch chiết | Dịch nguyên |Uống 10 ngay| 37.54 2.5 | 17.0+1.0 Linh Chi da 10ml/kg trước chiếu xa

loại cồn

3 Dịch chiết ¡ Dịch nguyên | TPM 7 ngày trước | 425+ 2š 18,5 + lŠ Linh Chi da I0ml/kg chiêu xạ

loại cồn ị i : |

|É Đối chứng | Nước Uống hàng ngày 0 | 8510

Trang 11

Từ Kết quả ở háng 3.1 chúng tỏi chọn bột Linh Chỉ có liều tơi ưu là Šg/kg trọng lượng cơ thể, thời gian tác dụng tôi ưu Khí cho chuột uỏng liên tỤc 7 ngày trước khi chiếu xa vì có ĐSS cao nhật và TGSTB lâu nhất Liên tôi ưu của bột Lĩnh Chỉ chúng tới xác định được khơng năm ngồi phạm vì liều nghiên cứu của Ravmond Chang đôi với ĐVTN từ l - 30g/kg trong lượng và phù hợp với công bộ của MLI Kim xác đính liêu tơi ưu dịch vhiết ii Ganoderma lucidum là {| - Se/kg trọng lượng cơ thê

22 Fac duay cua bot Linh Chi ở mức cơ thể

3.2.1 Tác dung của bọt Linh Chi qua DSS TGSTB va (LTB cua chuot

bị chiều xạ

Kết quả nghiền cứu tinh bay trong bane 3.2

Bang 3.2 Troug Juong ting Sink (Go thot wian song trang bmbh i Ty ya do song sor (DSS) cua chuột trong 30 ngày theo dõi sau chiều xà

Trang 12

Từ bảng cho thấy chuột ở lò ĐCSH và ĐCUT trọng lượng đều tầng theo thời gian biểu hiện sự tầng trưởng bình thường Khi bị chiếu xạ (ĐCCN› ca rong lượng thời gian sơng đó song sỏi của chuột đêu giam và mức độ giảm càng nhiều khi liễu chiếu căng cao Chứng tỏ tà phống xạ đã phú hủy cấu trúc và các chức năng sinh học dẫn tới giảm DSS TGSTB va TL©I, Nếu chuột được uống Linh Chị trước khi chiếu xa (TN) thi DSS T⁄:5TB và TUCT của chuột đều giam ít hơn so với chuột không được uỏng Linh Chi trước khí chiếu xạ

Hé sé bao ve va yeu to gidm lieu cua hot Linh Chi

Hiệu lực BVPX của một chát thẻ hiện qua HSBV tơ B y) và YTGL Từ kết quả ở bang 3.2 xác định dược HSBV tợ ñ ÿ) và yêu tỏ giam

liệu của bội Linh Chị, trình bày ở bang ¢

Bang 3.3 Hệ số bao vẻ tơ [.y¡ và YTGL cua bọt Linh Chỉ

Trang 13

Hệ số bao vệ tạ, |3 ý) của bột Linh Chỉ cao hơn HSBV của cystamin naphtdi limphoKinin timowen và tương đương với của chè phẩm PG-2

YTGL cua bot Linh Chi cao hon YTGL cua csưogen (Í,1-1.2), gacavit

(1.16) SP (1.17) cepharantin (1.1), catechin «1.21) tương đương với

limogen (1.26), ché phdm HI (1.27), ché phim AP (1.25-1.33) che phém

MIKI-K (1.25-1.3) con thap hon YTGL của vao xương động vật PX (1.41), phan cat CM-S từ lách rùa Trung Á (1.361 chế phẩm PG-2 từ củ tam thất (1.38), chế phẩm antoxian rừ cánh hoa hỏng Bungari (1.7) là những chát đã được đưa vào trong danh sách các chat BVPX

3.3 Tác dụng của bọt Linh Chỉ ở mức tế bào và dưới tế bào

3.3.1 Tác dụng của bột Linh Chỉ đổi với sự thay đối trọng lượng lách

chuột bị chiều xạ

RONC su thay déi trong luong lách chuột ð lỗ ĐCSH & DCCK the

tiến quá hình 3.1 cịn ở lơ DCUT & TN gua bình 3.2,

RQONC cho thay ber Linh Chi dd han che su giam trọng lượng lách

chuột vào những ngày đầu sau chiều xạ nén lách chuot sớm hỏi phục trong lượng trở vẻ gắn giá trị của cơ thẻ Khoẻ mạnh

te OSH

ae sR

Trang 14

~x — —— BUOR ee HSK TOO Oe 750K 20 2X âu Nãy

Hình 3.2 Sự thay đói trọng lượng kích chuột nhất trang 6 lo BCUT & TN 3.3.2.Tác dụng của bột Linh Chỉ tới sự tạo số CEU ở lách chuột bị chiều Xã

KÓNC được vinh bay o bang 3.4

Nl: S@ CFU o lach chuột lò ĐCSH: N3: Sö CPU ở lách chuét Jé DCUT

N32: S6 CFU & [deh chuột lò ĐCCN:N3; Số CFU' ở lch chuột lò TN: K=N4/N3 Bảng 34, Số CPU ở lách chuột và hệ số K Liêu chiếu | 0 550R 600R 650R Ì 700R | 750R Ni , 0 M0 Nã : 8540.7 5.3404 3.984040 3.1#03 1,640.3 N4 Ị 273+1.1 20.1+0.5 23/7209 270206 10,.920.4 K Ị 3.2 38 6.0 89 68

Kết qua ở bảng cho thấy khi chuột được uống Lĩnh Chỉ trước khi chiếu xa số CEU ở lách chuột đã tầng từ 3.2 đèn 8.9 lần so với ĐCCX Điều này thê hiện Linh Chi đã kích thích quả tình tạo máu ở lách bởi vi theo E A Me Culloch & cs thi CFU thoại đâu là dịng thuận: đồng hơng cảu, tiên câu và đại thực bào mà khơnu có dịng limpho bào Do vậy Lĩnh Chỉ đã góp phần vào khói phục các chỉ sơ huyết học sẽ được chủng tôi nghiền cứu tiếp ở phản sau

Trang 15

- Tác dụng của bột Linh Chỉ đổi với cầu trúc rmó lạch chuột bị chiếu xạ

Tiểu bạn HVQH mó lách chuột nhất trang 6 16 DCSH DCCN va TN được chúng tôi làm vào ngày trước chiếu xạ và các ngày Ã, 1Ú 15 20 30 sau khi chiếu xạ liều 750R Chúng tôi quan sát và chụp anh dưới kinh hiển vi Olympus Kết quả cho thay mô lách chuợt bị chiều xạ bị xung huyết từng đám và có nhiều té bào lách đã chết teo đen đặc lại, Linh Chị đã hạn chế những tổn thương cấu trúc ở mó lách nền q trình tái sinh ø mẻ lích diễn ra sơm hơn và nhanh hơn đã hồi phục được cả cáu trúc lần chức nang góp phân nâng cao ĐSS và TGSTB cho chuối Bột Lính Chỉ có những tác dụng đối với mỏ lách chuột nhất trắng giỏng như các chất BVPX: CVvSfteamin cvstamin mexecamim xiữiphos AET CNÍ-Š5, KM-X củo xương (PÑ) tam thất (PG-3¡

3.3.4 Tac dung cua bot Link Chi doi voi su thay đối trọng lượng tinh hoạn chuột bị chiều xạ

Sự thầy đổi trọng lượng tình hồn chuột nhất trang lị ĐH ác DCCX thời gian sau chiều xa thể hiện qua hình 3.3 con cua lo DCUT & TN qua hình 3,4

200 †

Trang 16

ee —#— St aR He SR a FIR ee 50K

Hinh3.4 Sự thay đổi trọng lượng nh hoàn chudr nhat trang lo DCUT &

TN

Ket qua cho thầy khi chuốt được uong Linh Chi trước Khi chiếu xa trọng lượng tình hồn chuột nhất trang bị miam ít hơn và sau 3Ô ngày chiều

xa thẻ hiện quả trình hỏi phục ruy cơn chậm số với mỏ lách,

4.3.5 Túc dụng cúa bọt kính Chí đơi với cau trúc mơ tỉnh hoàn chuột bi chieu xa

Tiêu bạn HVQH mò tinh hoan chuer nhac rang o 16 DCSH DCCX va TN duoe chung toi lam vào ngày trước chiều xa và các ngày 3.10 20 30

sau khi chiêu xạ liệu S5SOR Tigu ban diroe quan sat va chup ảnh dưới kính hiển vị Ơlympus Kết quả cho thấy Khi chuột được uòỏng Linh Chỉ rude khi chiêu xạ đã hạn vhẻ được số tỉnh nguyên bảo bị tồn thương góp phân khơi phục q trình sinh tính nên tính trùng xuất hiện sớm hơn với số lượng nhiều hơn so với chuốt khơng được tịng Linh Chỉ trúợc khi chiều xa Dong thời Linh Chị cũng hạn chế sự rỏi loạn quá trình phân chia cua té bao déng tình nên sơ lượng tình trùng dị dạng xuất hiện vũng ít hơn số với chuột khong được uống Lĩnh Chỉ trước khí chiếu xạ Tác dụng của bột Linh Chỉ

đói với mỏ tĩnh hoàn chuột nhất trắng thể hiện rõ hơn so với catechin

Trang 17

3.3.6 Tác dụng cua bot Linh Chi doi voi cau truc hiện ví và siêu hiển ví cua te bao gan chuột bị chiều xịt

Chúng tới đã tiền hành làm Hiệu ban HVQH mo gan chuối nhảt trang o16 DCSH DCCX & TN vào ngày trước chiều xạ và các ngày Š, 10,20, 30 sau khi chiêu xã hiếu 750R, Tiêu bán được quan sài và chụp anh dưới kì

hien vi Olympus Ket qua cho thax mo gan ehuot nha trang đườy tong

Linh Chị trước Khi chiếu xa có số tị bào gan bị thương it hon de Linn chi a hàn chế được những tồn thương cảu trúc ở màng tẻ bảo, màng nhân củng như hiện tượng khone bào hoá TBC, Linh Chỉ kích thích sự tát sinh cúa mẹ gan nên xuất hiện nhiều tê bảo gan có hai nhân và hạn chế sự giảm số lượng t¿ Bảo nội mô Đề nghiên cứu anh hưởng của Linh Chỉ tới siêu cầu Trủ¿ chúng tôi làm tiêu bạn HVĐT Tế bào gan chuột vào ngày TỔ sau chiếu xe liểu 75Ó0R Tiêu bạn được quan sai và chụp anh trên kính HVĐT JEM - TT Kết qua cho thấy 1ý báo sạn chuột nhất trang được nông Link Ch trước Khi chiếu Sự nhận tế bao rb co hon 1

rou cas bur NST hush nhĩ,

bam vào mạng nhan con thay nhing soi nhiém sav mann pin bo deu khar nhan con o té bao gan chudt lo DCCN nhiém sae the co cum timy dam ton hon bam vào phía trong máng nhàn iim ming nhan co ku day len O 1é bào gan chuet lo TN hinh dang u the va céu ic mao rang fuoe it bi thay doi, mạng lưới nội sinh chất có hạt ít bí đứt gầy và mào răng lược cua ti the it bi phá huy so với ở tế bào gan chuột Khơng được uống Lĩnh Chí Tác dung “bao can” (bao vé gany cla Linh Chi the hiệu rõ hơn so với gacaviL naữrhhiosulfA và hang là những chút đã được thứ nghiệm trị bệnh viêm gan cho chui thí nghiệm

Trang 18

Chúng tôi tiến hành làm tiêu bản HVQH ruột non chuột nhất trắng ở

lò ĐCSH ĐCCX và TN vào ngày trước chiếu xã và ay 5 10 20 30

sau khi chiều xạ liều 650R Tiêu bạn được quan sát và chụp ảnh dưới Kinh hiện ví Olympus Kết quả cho thấy Lĩnh Chỉ đã hạn vhẻ những tồn thương câu trúc xây ra ở màng nhày ruội nen và kích thích sự tái sinh té bào viên cua lớp biểu mỏ phủ những mao góp phần duy trí chức nang hap thu char định dưỡng của ruột non nẻn TTPX sơm được Khói phục Đề nghiên cứu tác

dung cua Linh Chi doi vol sigu cau true chun tar lam teu ban Vi te

bao vién nhung mao ruét non vào ngày LÔ sau chiến xã liệu 650R Tiêu bản được quan sát và chụp anh dưới kính HVĐT JEM - 1010 Kér qua cho thay

ở tẻ bào viên nhung mao ruội non chuột nhất trăng được nông Linh Chỉ

trước Khi chiều xạ hiến tượng khong bào họa TRỂ xày rà A hơn, màng lưới

nội chất có hạt và so lượng tí thẻ Dị tồn thương wae hon do mang iver nei chat it bi dit gay cr thé ft bi phi huy mão răng lược hay bị trương phòng

Đặc biệt Linh Chí kích thích lớp sicu nhung mao moe diay va lo hon so vor ea DCSH de Linh Chi va nte dues “sien vid riup ten hoa ron Biéu nay

rất cô ý nghĩa đôi với quá trink hap thu chat dith dudng, yop phan rang cương thể lực cho cơ thể, Khả năng hạn vhẻ những tồn thương câu trúc ở màng nhày ruột non và siêu cầu trúc tế bào viên cúa lớp bieu mo phu nhung mạo ruột nen của Linh Chỉ thể hiện rõ hơn số với hón hợp [Ö-carofen + NaSe +12- 10coferon, AET, 5-MOT PG-2 Chung to tric

lưng "Niện v1” tgiúp teu

hea tov của Lĩnh Chỉ là có cơ sở khoa học

3.1 Tác dụng của bọt Linh Chí qua các chỉ tiêu huyet học và sinh hoa 3.4.1 Tác dụng của bọt Linh Chỉ qua các chị tiệu huyết học

Trang 20

13 2

Bang 3.6 Số lượng bạch cầu ở máu ngoại vi chuột nhất trắng lô ĐCSH,

ĐCUT ĐCCX &TN Đơnvi: 10⁄1

ĐCSH: 7.17+0,12 ; ĐCUT : 7.20 + 0,10 4 Ngày |Jiêu| 550R | 600R | 650R 700R 750R Lô | DCCX 4.5040.14 | 4.2040.11 | 3,8420,12 | 3.37+0.10 | 3,0940.09 » | 3 TIN |576012 5.534009 | 5298014 4,920.11 | 4,7740,13 BCX ' 4.08+0.12 | 3.8940.10 | 3,5820,11 | 6.4040.09 | 4.714010 | | 7 VIN |600£0/13 (5.61#0.11 5.3620.15 15202010 Ì4.9030,14 Ì ¡ ĐCCX | š.74:0.15 [522x012 [4744014 | 7.258011 744120111 | Í-10 [TN — 686010 1642203 l602:010 5,6520.09 | 5.28+0.13 | r ĐCCX | 7.114012 | 6.9240.10 | 6.652011 | 7.464012 | 8012007; | JON 5 7.3440.13 '7,2920.12 |7.2340.10 | 6.1440.10 | 5.7020.09 | IDCCX | 7112014 | 5,560.13 [5,908.15 | 7.752015 | 8.5420.20 | 20 TTN (7.252013 ' 7.2020, 10 17.3620.12 6.584012 | 6.1440,12 | DCCX | 7,2440.15 | 7,3340,09 | 7.1140.11 7,6020,10 | chuột chết

| 30 TTN Ching ti đã tiến hành xác định CTBC, tiểu cầu, hemoglobin của 7054010 [7.1220,13 17,28%0,09 | 7,040.08 [6.8440.14 |

vi chuột nhất trắng ở lô ĐCSH, ĐCUT, ĐCCX & TN, KQNC cho thay Linh Chi có tác dụng bổ huyết thể hiện hạn chế sự giảm quá thấp số lượng hồng

mầu ngoại

cầu, bạch cầu tiểu cầu hàm lượng hemoglobin, duy trì CTBC vào những ngày đầu sau chiếu xạ Điều này có liên quan tới số CEU ở lách chuột có uống Linh Chí tăng lên, bù đắp sự thiếu hụt đo một số tế bào máu bị TTPX nên các chỉ số huyết học sớm hồi phục dân về gần giá trị của cơ thể khoẻ mạnh Tác dụng bổ huyết của Linh Chỉ mạnh hơn so với vitamin nhóm B, địch chiết lách rùa Trung Á (Y-I, Y-2, KM-X, CM-5), tổ hợp sinh học Co (In, gacavi

Trang 21

3.4.2 Tác dụng của bột Linh Chi tới hoạt tính peroxidaza catalaza ascobatoxidaza

KQNC duoc thé hién qua hinh 3.5, hinh 3.6 va hinh 3.7

—+— bcs E —e— CNSSUR = ề —a~ TN550R = —>~ CX650R š —>—TN650R = - ——-_— ¬“ »x ` ——TN”ã50R Q > = —— -—— -—— —— 0 3 7 10 l5 20 30 Ngài

Hình 3.5 Hoạt tính peroxidaza (thời gian H;O; bị phân huy: giây) máu ngoại vị chuột nhất trang 16 DCSH DCCX & TN

“—DCSH —&~ CX550R —- TNS50R —— CX650R —*— TN650R —#— CX750R —— TN750R Ụ 7 lu 1s 20 Bu Ngài

Hình 3.6 Hoạt tính catalaza (mg H;O; bị phản huỷi máu ngoại vi chuội nhất

Trang 22

mae TNSSOR nã oe _ —x~ CX650R 5 UI§ + —<— TNG50R Bourse - —&— CX750R 005: ————— ——~— xe= TN750R : a 3 7 10 i5 30 30 Ngày

Hình 3.7 Hoại tính ascobatoxidaza (mg axit uscobic bi phan hủy) máu ngoại

vị chuột nhất tráng lô ĐCSH ĐCCX & TN

KQNC cho thấy Linh Chí có tác dụng kìm hãm hoạt tính enzvm nén enzvm peroxidaza va ascobatoxidaza hoạt tính Khơng giảm q thấp cịn enzym vatalaza hoạt tính không tảng quá cao vào thời gian dấu sau chiếu xạ Do vậy

cơ thể duy trì cản bảng hoạt tính enzvm giữ cho cân băng giữa hệ thông oxi hố - chóng oxi hố của cơ thể không bị phá vỡ góp phản hạn chế nóng độ góc tự do nen ngắn căn sự tích tụ độc tổ phóng vạ trong đó có malonic dialdehvt chúng tôi nghiên cứu tiếp ở phản sau Như vảy Lĩnh Chí đã hạn chế những TTPX gây ra bởi gốc tự do và các độc tố phóng xạ Khả náng tăng cường hè

thông chông oxi hoá của Linh Chỉ tượng đương với gacavit còn thẻ hiện rõ hơn

so với dịch chiết flavonoit toàn phần của dâu dây, mỏ qua lá móng, thổ phục

linh bồ công anh, kim ngắn

3.43 Tác dụng của bột Linh Chỉ tới nóng độ malonic dialdehyt

(MDA)

Trang 23

là nguy hiểm nhất Nóng độ MDA được xem lá chỉ số peroxit hoá liph dùng

đề đánh giá mức độ TEEN

Kết quá xác định nông độ MIDA ở mắu, gan lịch chuột nhất trang 16 ĐCSH ĐCCX & TÀ thời gian sau chiêu xạ thẻ hiện trên hình 3.8

eo XSL —#— NIanxCN a Mate TS Senate ae iN ee fash a Lac dN ` : 2 ‘ 1s Mh 2 Nwity

Hình 3.5 Nơng độ MDA (2 số với ĐCSH ) o mau gan lach chuot

nhất trăng lò ĐCSH ĐCCX & TN thời giản sau chiều xạ

Kết quá cho thấy ở chuột được uống Linh Chí nóng độ MA ứ máu gan lách đẻu thấp hơn so với ở chuột không được uỏng Linh Chr Sur thấp hơn này là có sự khác biệt với P $ 005 đến P š 0.01, Chứng tỏ Lĩnh Chi da kim ham quái tình poroxH nố Hơn thất là phospholip tham gia vào cấu trúc màng sinh học) dẫn tới nông độ MDA nam nen han chẻ được những TTPX Khả nang giam nóng độ MÙA của Linh Chí mạnh hơn so với adeturon, L- dopha hén hop f-caroten + NaSe + u- tocoferon MUKI-K va tương đương véi PG-2 dich chiết lách rùa Trung Á (CM-5), AET, cwstein, mexcdmim

3.4.4 Tac dung cua bot Linh Chi toi nong do nhom SH ¢ Cy)

Trang 24

trong cơ thể càng thấp thì độ nhạy cảm phòng xạ cửa cơ thẻ càng cao, Khí bị chiêu xa thì tồn thương do phòng xạ gây ra cảng nàng Ngược Jai khi nong độ nhóm SH trong cơ thể cảng cao thì độ nhạy cảm phóng xạ của cơ thể

we ,

càng thấp khi bị chiều xạ thì tồn thương do phóng xạ gây ra càng nhẹ Theo

B.M Grlevski khi chiều xạ nắng lượng tia chủ yêu tập trung vào cau noi disylfir (S-S) hình thành do phân rứ có chứa nhóm SH tương tác với phân từ sinh học làm cho phán tử sinh học không bị tôn thương

Kết quả xác định nòng độ nhóm SH ở máu gan lách chuột nhật trang 16 DCSH DCCN & TN thời gian sau chiếu xạ thể hiện qua hình 3.9

—+—t1SiL —#— VIän-CX a Mae DN ea N ee ue l'N Se Ect VN

Hình 3.9 Nơng độ nhóm SH ( !f so với ĐCSH 1 ở máu gan, lách vhuột nhất trắng lò ĐCSH ĐCCX &: TN thời gian sau chiếu xã

Trang 25

the Kha nang tang phong nội sinh chống phóng xạ của Linh Chi tương đương VỚI CVS(amin c3

samn, AET, mexcamin còn mạnh hơn so với serotonin adrenalin teophiiin catechin

3.5 Co ché tac dung BVPX cia nam Linh Chi Ganoderma lucidum

Năm Linh Chỉ có tác dụng bổ huyết: hạn chế sự giảm số lượng hỏng cấu bạch cẩu, tiểu cầu duy trì CTBC và hàm lượng hemoglobin kích thích quá

trình tao mau thong qua tăng số CPU ở lách góp phần tăng cường quá trình hồi

phục các chỉ số huyết học sớm trở về mức bình thường Năm Linh Chi tâng sức đeo đai sức ben chin dung dé cơ thể chống lại các yêu tố bất lợi từ bén ngoài như tầng nhiệt độ thiểu oxi, chiếu xa, Nam Linh Chi tang cường hệ thống miễn dich của cơ thể thong qua kích thích tiết cytokin trung hoà các độc tố phóng xa Nam Linh Chỉ tăng cường hệ thông chống oxi hoá của cơ thể thong qua tac động tới hoạt tính enzym peroxidaza, catalaza, ascobatoxidaza nén han ché sự ton har gay ra boi các góc tự do Nấm Linh Chi kìm hãm quá trình peroxI húa lipt nén hạn chế sự tích luý độc tổ phóng xã là peroxit (H,O0.) malonic dialdehit (MDA) va ngan chặn được sự tương tác có hại của H;O¿ MDA với Các đại phan tư sinh học với tế bào và mó Nấm Linh Chỉ hạn chế sự glam nguồn thiol nội sinh dong thời tăng cường sự tổng hợp các hop chat thiol noi

sinh ở máu, gan, lách nén đã tàng phông nội sinh chống phóng xa cho cơ thẻ Tác dụng của Linh Chỉ lên hệ huyết học hệ miễn địch hoạt tính enzym thuộc hệ thông chồng oxi hố tăng phơng nội sinh nén đã hạn chế được tồn thương

cấu trúc ở mỏ ruội non mỏ gan ở mức tế bào và đưới tế bào mô lách và mỏ tỉnh hoàn Kết quá nấm Lành Chỉ giữ thăng bang trọng lượng cơ quan và cơ thể

nang cao DSS và thời gian sống trung bình cho chuột bị chiếu xạ

Kết quả nghiên cứu cho thay tác dụng phòng bệnh phóng xạ của nấm Linh

Trang 26

1 3 2.1 33 2.3 24 2.6 37 2.8 KET LUAN

Liễu tôi ưu của bột Linh Chỉ là Sg/kg trong luong co thé va thời gian tác dụng tỏi ưu cho chuột nhất trắng Šwiss uống liên tục 7 ngày (1lần/ngày) trược khi chiếu xạ

Linh Chỉ có những tác dụng đổi với chuột nhất trắng Swiss bị chiếu xa phạm vị liêu từ SSOR đến 750R như sau:

Tang do song sét cho chuột nhất trắng ŠWwiss lên 60% và kéo dài thời gian »ịng trung bình được l2 ngày Yêu tổ giảm liễu của bột Lính Chí đạt

1.28

- trọng lượng lách tình hồn và trọng lượng chuột được uỏng Lĩnh Chi không bị giảm quá thấp vào tuần đấu sau chiều xạ nên cơ quan - cơ thể sớm khỏi phục trọng lượng trở vẻ mức đặc trưng cho cơ thể đã bình phục - Tưn thương cáu trúc của mỏ lách mỏ tỉnh hoàn mỏ gan mỏ ruột nơn và

TỒN THƯỜng Dã iu cau trúc tế bào san rẻ bão hình trụ của lớp biểu mỏ phủ những mạo ruột nón chuột nhất trắng Swiss được uống Linh Chỉ nhẹ hơn >0 với ở chuột đôi chứng chiếu xạ

„ Hạn chẻ giảm sỏ lượng hồng cảu, bạch cảu, tiểu cáu, hemoglobin và hạn

chẻ tăng tỉ lệ giữa bạch cầu trung tính (N) và bạch cầu limpho (L) của

máu ngoại vi chuột nhất trắng Swiss vào tuản đầu sau chiếu xạ

Š, Kích thích sự tạo huyết ở lách thông qua tăng số quản thể tế bào huyết nội sinh ở lách chuột nhất trang Swiss tr 3.2 đến 8,9 lần so với ở lách chuốt đối chứng chiếu xạ

Kìm hãm hoạt tính enzym peroxidaza, ascobatoxidaza không giảm quá tháp và hoạt tính catalaza khơng tăng q cao vào tuần dầu sau chiếu xa - Kìm hăm qua trình peroxit hóa lipit thẻ hiện giảm sự tích tụ độc tố phóng

xạ là malonic đialdehir ở máu, gan lách chuột nhất trắng Swiss nén hạn chế dược Tôn thương phóng xạ

Trang 27

Ww

uw

CAC CONG TRINH LIEN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN ĐÃ CƠNG BO

Đồn Suy Nghĩ, Tác dụng bảo vệ của nấm Linh Chỉ G lucidum đối với

lách và QTTBHNS ở lách chuột nhất mắng Su'iss dưới tắc dụng của tỉa

phóng xa, Di truyền & ứng dụng, 2, 1998, 6-10

Đoàn Suy Nghĩ, Xóc định hàm lượng manolic dialdehi! và nâng độ nhóm SH đmột số mơ của động vật chiếu xạ, Di truyền & ting dung 4 1998,

14- 19,

Đoàn Suy Nghĩ, Trịnh Xuân Hậu, Nguyên Thị Kim Ngân, Nghiền cứu tác dung của chế phẩm Linh Chi téi hoat tinh enzym peroxidaza, catalaza, ascobatoxidaza cua mdu ngogi ví chuột nhất trăng Swiss khi bị chiếu xạ,

Đi truyền & ứng dụng, 2 1999, 30- 34

Đoàn Suy Nghĩ, Lê Hùng Trịnh Xuân Hậu, Nguyễn Thị Kim Ngan Tham đò khả năng bảo vệ pháng xạ của bột nấm Limli Chi G lucidum trén chuot nhất trắng Swiss, Tạp chí Sinh học, 21(1b) 1999, 185-189

Doan Suy Nghĩ Trịnh Xuân Hậu Nguyễn Thị Kim Ngàn Thảm: dò tác dụng của bột nấm Linh Chi G lucidum lên tỉnh hoàn chuột nhất trắng bị chiếu xạ, Tạp chỉ Sinh học, 211B), 1999, 190- 193

Đoàn Suy Nghĩ, Trịnh Xuân Hậu Nguyễn Thị Kim Ngân, Tác dụng bảa vệ

của chế phẩm Linh Chỉ đối với máu ngoạt vì chuột nhất trắng Swiss khí

chiếu xạ tia gamma, Tap chi Sinh học, 21(1b), 1999, 194-197,