Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu nhằm khảo sát độc tính bán trường diễn và tác dụng kháng viêm, giảm đau của cao phối hợp thiên niên kiện và bách bệnh trên thực nghiệm. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết của đề tài nghiên cứu này.
Trang 1KHẢO SÁT ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN
VÀ TÁC DỤNG KHÁNG VIÊM, GIẢM ĐAU CỦA CAO PHỐI HỢP THIÊN NIÊN KIỆN VÀ BÁCH BỆNH TRÊN THỰC NGHIỆM
Phan Phước Hiền*, Nguyễn Thị Thu Hương**, Lê Thị Mỹ Thảo**, Dương Thị Mộng Ngọc**
TÓM TẮT
Mục tiêu nghiên cứu: Thiên niên kiện (Homalomena occulta) thường được sử dụng riêng lẻ hoặc kết hợp
với các dược liệu khác để giảm các triệu chứng đau nhức và giúp tăng cường thể lực Cây Bách bệnh (Erycoma longifolia) được sử dụng với tác dụng chống oxy hóa, tăng cường thể lực và sức khỏe tình dục cho nam giới Với mục đích ứng dụng hai cây thuốc này trong việc bảo vệ sức khỏe và nâng cao chất lượng cuộc sống cho đối tượng người cao tuổi, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Khảo sát độc tính bán trường diễn và tác dụng kháng viêm, giảm đau của cao phối hợp Thiên niên kiện và Bách bệnh trên chuột nhắt trắng”
Phương pháp nghiên cứu: Khảo sát in vitro hoạt tính ức chế peroxid hóa lipid của cao phối hợp được thực
hiện bằng thực nghiệm malonyl dialdehyd trên não chuột Khảo sát in vivo gồm khảo sát độc tính cấp và độc tính bán trường diễn đường uống, khảo sát tác dụng kháng viêm cấp của cao phối hợp trên chuột nhắt trắng bằng thực nghiệm carragenin và khảo sát tác dụng giảm đau bằng thực nghiệm gây đau xoắn bụng bằng acid acetic
Kết quả: Cao phối hợp Thiên niên kiện-Bách bệnh thể hiện hoạt tính ức chế peroxid hóa lipid với IC 50 là 751,5
µg/ml Cao phối hợp có thể hiện độc tính cấp đường uống trên chuột nhắt trắng với liều LD 0 = 21,5g cao/kg thể trọng chuột Cao phối hợp ở liều 2,15 g/kg (liều tương đương 1/10 LD 0 ) sau 2 tháng uống không có biểu hiện bất thường về độc tính bán trường diễn trên chuột nhắt trắng Các thông số về huyết học, chỉ số sinh hóa thuộc về chức năng gan - thận đều nằm trong giới hạn bình thường Cao phối hợp ở hai liều uống 1,075 g/kg và 2,15 g/kg
có tác dụng giảm đau Tác dụng kháng viêm của cao phối hợp tăng theo thời gian sử dụng thuốc và đạt tối đa ở thời điểm 72 giờ kháng viêm
Kết luận: Cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh có thể định hướng nghiên cứu thành dạng chế phẩm
phù hợp (viên nang hoặc rượu thuốc) trong hỗ trợ điều trị các loại bệnh mạn tính ở người cao tuổi như đau nhức
xương khớp hoặc tăng cường thể trạng tổng quát
Từ khóa: Thiên niên kiện, Bách bệnh, hoạt tính ức chế peroxid hóa lipid, độc tính bán trường diễn, tác dụng
kháng viêm, tác dụng giảm đau
ABSTRACT
STUDY ON SUBCHRONIC TOXICITY, ANTI-INFLAMMATORY AND ANALGESIC EFFECTS
OF COMBINED EXTRACT OF HOMALOMENA OCCULTA AND EURYCOMA LONGIFOLIA
ON EXPERIMENTATION
Phan Phuoc Hien, Nguyen Thi Thu Huong, Le Thi My Thao, Duong Thi Mong Ngoc
* Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 18 - Supplement of No 1 – 2014: 156 - 163
Aim of study: Homalomena occulta rhizome has been used in traditional medicine as single or combined
form of herb with tonic and analgesic purposes Erycoma longifolia root was used as antioxidants, tonic and androgenic drug The present study was conducted in the aim of evaluating the acute and subchronic toxicity, the anti-inflammatory and analgesic effects of the combined extract of Homalomena occulta and Erycoma longifolia
∗ Đại học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh
∗∗ Trung Tâm Sâm và Dược liệu Tp Hồ Chí Minh-Viện Dược liệu
Trang 2Materials and Methods: Anti-lipid peroxidation activity of the combined extract was determined by
malonyl dialdehyde test using mouse brain as substrate Oral acute toxicity test and subchronic toxicity test were carried out to evaluate the safety of the combined extract Carrageenan-induced acute inflammatory model and acetic acid-induced abdominal pain in mice were performed to determine anti-inflammatory and analgesic effects
of the combined extract
Results: The combined extract showed anti-lipid peroxidation activity with IC 50 of 751.5 µg/ml The combined extract had oral acute toxicity at the infralethal dose of 21.5 g/kg mouse body weight After 2-month treatment of the combined extract at the dose of 2.15 g/kg (equal to 1/10 of infralethal dose), there were no abnormal changes in hematological and biochemical parameters, indicating that the combined extract did not show subchronic toxicity The combined extract at doses of 1.075 g/kg and 2.15 g/kg mouse body weight had anti-inflammatory and analgesic effects The anti-anti-inflammatory effect of the combined extract was time-dependent and reached the highest effect after 72 hrs of treatment
Conclusion: The results of this study (combined extract of Homalomena occulta and Erycoma longifolia)
might be useful for further study on natural drugs used in supporting the treatment of chronic conditions of elderly people as osteoarthritis and enhancing physical strength
Keywords: Homalomena occulta, Erycoma longifolia, anti-lipid peroxidation activity, subchronic toxicity,
anti-inflammatory effect, analgesic effect
ĐẶT VẤN ĐỀ
Đau nhức xương khớp đã dần trẻ hóa thấy
rõ nhất ở những người làm việc văn phòng và
lao động khuân vác nặng nhọc, gây khó chịu,
mệt mỏi đau đớn kéo dài Người bệnh có thể
phải ngồi một chỗ, không thể tự thực hiện được
các sinh hoạt hàng ngày và phát sinh các bệnh
khác Bệnh đau nhức xương khớp ít nhiều ảnh
hưởng nhiều đến chất lượng sống, hiệu quả của
công việc và gây tổn thất kinh tế cho người bệnh
và xã hội Việc lạm dụng các thuốc giảm đau, đặc
biệt là các chế phẩm có corticoid, khiến cho bệnh
nhân có thể có rất nhiều tai biến (tổn thương dạ
dày, tá tràng, tăng huyết áp, đái tháo đường,
loãng xương, nhiễm khuẩn, suy thượng thận )
Theo xu hướng hiện nay thì con người đã hạn
chế sử dụng các thuốc nhóm này và thay thế
bằng các loại thảo dược có nguồn gốc từ thiên
nhiên Trong dân gian người dân thường sử
dụng Thiên niên kiện (Homalomena occulta) riêng
lẻ hoặc kết hợp Thiên niên kiện với các loại thuốc
để giảm các triệu chứng đau nhức và giúp tăng
cường thể lực (7) Cây Bách bệnh (Erycoma
longifolia) được sử dụng với tác dụng tăng cường
sức khỏe tình dục cho nam giới (1,7) Với mục đích
ứng dụng hai cây thuốc này trong việc bảo vệ
sức khỏe và nâng cao chất lượng cuộc sống cho đối tượng người cao tuổi, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Khảo sát độc tính bán trường diễn và tác dụng kháng viêm, giảm đau của công thức phối hợp dược liệu Thiên niên kiện và Bách trên chuột nhắt trắng”
ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu
Cao phối hợp được phối chế từ cao chiết Thiên niên kiện (65,45%) và cao chiết Bách bệnh (34,55%) Cao được tiêu chuẩn hóa theo các quy định của Dược điển Việt Nam IV và tiêu chuẩn
cơ sở Độ ẩm của cao Thiên niên kiện là 17,8%, hàm lượng flavonoid toàn phần trong cao Thiên niên kiện là: 1,49%, hàm lượng coumarin toàn phần trong cao Thiên niên kiện là: 6,71% Độ ẩm của cao Bách bệnh là 16,42%, hàm lượng alkaloid toàn phần trong cao Bách bệnh là: 0,75%, hàm lượng coumarin toàn phần trong cao Bách bệnh là: 22,85%
Động vật thử nghiệm
Chuột nhắt trắng đực (chủng Swiss albino, 5-6
tuần tuổi, trọng lượng trung bình 25 g ± 2 g) được cung cấp bởi Viện Vắc xin và Sinh phẩm Y
tế Nha Trang, nuôi trong điều kiện ổn định về
Trang 3chế độ dinh dưỡng
Hóa chất-Thuốc đối chiếu
Carragenin (Sigma-Aldrich, USA), Trolox
(Calbiochem Ltd Co.), Aspirin pH8 (viên bao
phim, chứa acid acetylsalicylic 500 mg,
Mekophar), Celebrex® (viên nang chứa
celexcocib 200 mg, Pfizer) Các bộ kit định
lượng protein toàn phần, triglyceride, urea,
creatinin, GOT, GPT được cung cấp bởi hãng
Human, Đức
Phương pháp nghiên cứu
Phương pháp xác định sản phẩm của quá trình
peroxy hoá lipid (2)
0,1 ml mẫu thử ở các nồng độ thử nghiệm
được cho phản ứng với 0,5 ml dịch đồng thể não
và thêm đệm phosphat 50 mM vừa đủ 2 ml Ủ
hỗn hợp phản ứng ở 37oC trong 15 phút và dừng
phản ứng bằng 1 ml acid tricloacetic 10% Sau
khi ly tâm lấy dịch trong cho phản ứng với 1ml
acid thiobarbituric 0,8% trong 15 phút ở nhiệt độ
100oC Làm lạnh và tiến hành đo quang ở bước
sóng λ = 532 nm Trolox, đồng phân của vitamin
E được sử dụng làm chất đối chiếu
Công thức tính % hoạt tính chống oxy hóa
(HTCO):HTCO% = [(ODC – ODT) / ODC] x 100
Trong đó, ODC: Mật độ quang của chứng
dung môi và ODT: Mật độ quang của mẫu thử
Thử nghiệm độc tính cấp (3, 6)
Chuột nhắt chia thành các lô tương tự,
những chuột ở cùng một lô sẽ nhận cùng một
liều chất khảo sát Sự đánh giá dựa vào phản
ứng toàn ứng hay bất ứng (sống hay chết) nhận
thấy ở mỗi chuột trong nhóm sau 72 giờ Chuột
được tiếp tục theo dõi sau 14 ngày uống để ghi
nhận những triệu chứng bất thường (nếu có)
Khảo sát độc tính bán trường diễn (6)
Thời gian thử nghiệm độc tính bán trường diễn được thực hiện trên chuột nhắt trắng là hai tháng Chuột được chia thành các lô chứng (uống nước cất) và lô thử (uống cao phối hợp), mỗi lô 12 con Các chỉ tiêu quan sát sau 1 tháng
và 2 tháng:
- Huyết học: Số lượng hồng cầu, số lượng bạch cầu, tiểu cầu, tỷ lệ thể tích huyết cầu trong máu (hematocrit), hemoglobin
- Thông số thuộc chức năng gan: Men gan transaminase GOT và GPT
- Thông số thuộc chức năng thận: Creatinin, urea
- Các thông số khác: Triglycerid, protein
- Giải phẫu đại thể-vi thể các cơ quan: Tim, gan, thận: tiến hành sau khi kết thúc thí nghiệm
Thực nghiệm gây phù chân chuột bằng carragenin-Khảo sát tác dụng kháng viêm cấp (6, 8)
Chuột được chia thành các lô với số lượng 10 chuột và được cho uống nước cất (lô chứng) hoặc thuốc thử nghiệm (lô thử, lô thuốc đối chiếu celecoxib) 30 phút trước khi tiêm carragenin 1% (50 µl) vào gang bàn chân phải của chuột Do không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê thể tích chân chuột phải và trái nên đề tài chọn chân trái (không tiêm carrageenin) làm
lô đối chứng Mẫu thử nghiệm được tiếp tục cho uống mỗi ngày liên tục trong 3 ngày sau khi tiêm carragenin và 1 giờ trước khi đo thể tích chân chuột Để đánh giá mức độ viêm, đo thể tích chân chuột bằng thiết bị đo thể tích chân chuột (Plethysmometer của UgoBasile, Italy) vào các thời điểm sau khi tiêm carragenin 3 giờ, 24 giờ,
48 giờ và 72 giờ Tiến hành đo 2 lần và lấy trị số trung bình Độ sưng phù chân chuột biểu thị mức độ viêm và được tính theo công thức:
Mức độ giảm viêm chân chuột ở các lô thử nghiệm so với lô chứng được tính theo công thức:
Số đo thể tích chân trái
Số đo thể tích chân phải – số đo thể tích chân trái
Trang 4% ức chế = (X – Y)/X *100 X: mức độ viêm chân chuột ở lô chứng
Y: mức độ viêm chân chuột ở lô đối chiếu, hoặc lô thử nghiệm
Thực nghiệm gây đau xoắn bụng bằng acid
acetic để khảo sát tác dụng giảm đau (6)
Chuột được cho uống nước cất (lô chứng)
hoặc cao thử nghiệm (lô thử) hàng ngày trong 7
ngày và 60 phút trước khi tiêm phúc mô acid
acetic 0,6% vào ngày 7 Sau 10 phút, ghi nhận số
lần xoắn bụng do đau của súc vật thử trong từng
thời gian 10 phút gồm 3 giai đoạn: 1 - 10 phút, 11
- 20 phút, 21 - 30 phút và tổng số lần xoắn bụng
trong 30 phút Thuốc đối chiếu Aspirin pH8
được cho uống liều duy nhất 200 mg/kg, 60 phút
trước khi tiêm phúc mô acid acetic
Phương pháp xử lý thống kê số liệu thực
nghiệm
Số liệu thực nghiệm thể hiện bằng số trung
bình (M) ± sai số chuẩn của giá trị trung bình
(SEM) Xử lý số liệu bằng phần mềm MS Excel
2007, xử lý thống kê dựa vào phép kiểm One–
Way ANOVA và Student-Newman-Keuls test
(phần mềm Jandel Scientific SigmaStat-98) Kết
quả thử nghiệm đạt ý nghĩa thống kê với độ tin
cậy 95% khi P < 0,05 so với lô chứng tương ứng
KẾT QUẢ
Kết quả khảo sát hoạt tính chống oxy hóa in
vitro bằng thực nghiệm MDA
Bảng 1: Hoạt tính chống oxy hóa của cao phối hợp
Thiên niên kiện và Bách bệnh
Mẫu Nồng độ (µg/ml) OD 1 OD 2 OD tb HTCO(%)
Cao phối
hợp
2000 0,099 0,107 0,1030 78,94
1000 0,167 0,208 0,1875 61,66
500 0,312 0,303 0,3075 37,12
250 0,347 0,341 0,3440 29,65
125 0,412 0,399 0,4055 17,08
62,5 0,457 0,413 0,4350 11,04
Từ bảng kết quả 1, thiết lập phương trình hồi
quy tuyến tính y = 0,0513x + 11.448 và xác định
được IC50 của cao phối hợp Thiên niên kiện -
Bách bệnh là 751,5 µg/ml Tuy nhiên, khi so sánh
với chứng dương Trolox (IC là 562,7 µg/ml),
hoạt tính của cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh thấp hơn
Kết quả khảo sát độc tính cấp đường uống
Cao phối hợp Thiên niên kiện – Bách bệnh có thể hiện độc tính cấp đường uống trên chuột nhắt trắng Sau khi uống cao phối hợp ở liều 25 g/kg (liều cao nhất có thể bơm qua kim) chuột có biểu hiện đầu tiên là gãi mõm liên tục, hoạt động chậm, lông hơi xù, khó thở khoảng 2 – 3 giờ Sau
8 - 24 giờ thấy xuất hiện chuột chết (tỉ lệ chuột chết 60 %) Sau 72 giờ cho uống, số chuột sống sót vẫn ăn uống và sinh hoạt bình thường Chuột được tiếp tục theo dõi sau 14 ngày uống và không ghi nhận các triệu chứng bất thường Liều dưới liều chết LD0 của cao phối hợp được xác định là 21,5g cao/kg thể trọng chuột
Liều tương đối an toàn Ds trên chuột nhắt trắng có thể được lấy giá trị bằng 1/5-1/10 LD0 Liều tương đối an toàn trên người được ngoại suy từ liều trên chuột nhắt trắng như sau: Liều trên chuột nhắt trắng x 0,085 (= hệ số ngoại suy liều có hiệu quả tương đương giữa chuột nhắt trắng và người) x thể trọng trung bình ở người trưởng thành (# 50 kg) Do đó, liều thử nghiệm được chọn cho các thử nghiệm tiếp theo: 1/10
LD0 = 2,15 g/kg và 1/20 = 1,075 g/kg LD0
Kết quả khảo sát độc tính bán trường diễn
Chuột được thử nghiệm là chuột đực 6 tuần tuổi, đang trong giai đoạn tăng trưởng và phát triển để chuyển sang giai đoạn trưởng thành (5,4) nên các thông số hồng cầu, hemoglobin, hematocrit, protein, creatinin của lô chứng và lô
uống cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh
liều 2,15 g/kg sau 1 tháng, 2 tháng đều tăng so với trước thử nghiệm Các thông số trở nên ổn định hơn sau 1 tháng và sau 2 tháng (Bảng 2)
Lô uống cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách
bệnh liều 2,15 g/kg có tác dụng làm tăng hồng cầu so với lô chứng sau 1 tháng Có thể giải thích
Trang 5rằng cao thuốc có thể làm tăng khả năng hấp thu
chất dinh dưỡng của chuột thử nghiệm, gián tiếp
làm tăng tốc độ trưởng thành của hồng cầu dẫn
đến tăng số lượng hồng cầu hơn so với lô
chứng(4) Số lượng tiểu cầu, bạch cầu ở lô uống
cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh liều
2,15 g/kg ở mức bình thường
Hàm lượng GOT, GPT, protein, triglycerid
và creatinin ở lô uống cao phối hợp Thiên niên
kiện - Bách bệnh liều 2,15 g/kg không có sự khác
biệt đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng Hàm
lượng urea khi uống cao phối hợp Thiên niên
kiện - Bách bệnh liều 2,15 g/kg giảm so với lô
chứng sau 2 tháng Lượng urea thấp có thể là do
quá trình khử acid amin trong cơ thể ở chuột uống cao thuốc thấp hơn lô chứng
Kết quả giải phẫu đại thể-vi thể các cơ quan tim, gan, thận đều không có sự khác biệt giữa lô uống cao phối hợp và lô chứng uống nước cất Như vậy, cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh ở liều 2,15 g/kg (liều tương đương 1/10 LD0) sau 2 tháng uống không có biểu hiện bất thường về độc tính bán trường diễn trên chuột nhắt trắng Các thông số về huyết học, chỉ
số sinh hóa thuộc về chức năng gan - thận đều nằm trong giới hạn bình thường(5).
Bảng 2: Kết quả khảo sát độc tính bán trường diễn của cao phối hợp Thiên niên kiện và Bách bệnh
a 6,23 ± 0,22 a
a 11,37 ± 0,71 a
a 29,65 ± 1,46
Bạch cầu
(tế bào/µl)
GOT
(IU/l)
GPT
(IU/l)
Creatinin
(mg/dl)
Urea
(mg/dl)
Thể trọng
(g)
a: P < 0,05 so với trước thử nghiệm; b: P < 0,05 so với lô chứng
Kết quả khảo sát tác dụng kháng viêm
sulfopolygalactocid, chiết xuất từ Chondrus
crispus, có tác dụng gây viêm cấp Mức độ
viêm tối đa ở trong khoảng thời gian 3-4 giờ (6)
Kết quả thực nghiệm cho thấy độ sưng phù
chân chuột tăng tối đa sau 3 giờ tiêm carragenin (đạt 119,9 %) và giảm dần sau 24 giờ, 48 giờ và 72 giờ sau khi tiêm
Mức độ viêm chân chuột sau 3 giờ tiêm
carragenin: Mức độ viêm chân chuột của các lô
uống cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh
Trang 6liều 1,075 g/kg, liều 2,15 g/kg, lô đối chiếu uống
Celebrex® (celexcocib liều 25 mg/kg) đều giảm
đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng (Bảng 3)
Như vậy cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách
bệnh ở liều 1,075 g/kg và liều 2,15 g/kg có tác
dụng kháng viêm cấp sau 3 giờ gây phù chân
chuột bằng carragenin Mức độ giảm viêm ở lô
uống cao thử nghiệm giảm từ 22 - 27% so với lô
chứng uống nước cất (Bảng 4)
Mức độ viêm chân chuột sau 24 giờ tiêm
carragenin: Mức độ viêm chân chuột ở lô uống
Celebrex® giảm đạt ý nghĩa thống kê so với lô
chứng Mức độ viêm chân chuột ở lô uống cao
phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh ở liều
1,075 g/kg và liều 2,15 g/kg không có sự khác biệt
đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng Như vậy
cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh ở liều
1,075 g/kg và liều 2,15 g/kg không có tác dụng
kháng viêm sau 24 giờ gây phù chân chuột bằng
carragenin
Mức độ viêm chân chuột sau 48 giờ tiêm
carragenin: Mức độ viêm chân chuột ở lô uống
Celebrex® giảm đạt ý nghĩa thống kê so với lô
chứng Mức độ viêm chân chuột ở lô uống cao
phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh liều 1,075 g/kg và liều 2,15 g/kg giảm so với lô chứng nhưng chưa đạt ý nghĩa thống kê Như vậy cao phối hợp Thiên niên kiện và Bách bệnh ở liều 1,075 g/kg và liều 2,15 g/kg không có tác dụng kháng viêm sau 48 giờ gây phù chân chuột bằng carragenin
Mức độ viêm chân chuột sau 72 giờ tiêm
carragenin: Mức độ viêm chân chuột của các lô
uống cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh liều 1,075 g/kg, liều 2,15 g/kg, lô đối chiếu uống Celebrex® đều giảm đạt ý nghĩa thống kê so với
lô chứng Như vậy cao phối hợp Thiên niên kiện
- Bách bệnh ở liều 1,075 g/kg và liều 2,15 g/kg có tác dụng kháng viêm sau 72 giờ gây phù chân chuột bằng carragenin Mức độ giảm viêm ở lô uống cao thử nghiệm giảm từ 39-40% so với lô chứng uống nước cất
Thuốc đối chiếu Celebrex® liều uống 25 mg/kg ở các thời điểm khảo sát thể hiện tác dụng kháng viêm đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng Tác dụng kháng viêm tăng theo thời gian
sử dụng thuốc và đạt tối đa ở thời điểm 72 giờ (giảm viêm 65,88%)
Bảng 3: Mức độ viêm chân chuột ở các lô thử nghiệm
* P < 0,05 so với lô chứng tại các thời điểm sau 3 giờ, sau 24 giờ, sau 72 giờ
Bảng 4: Mức độ giảm viêm chân chuột ở các lô thử
nghiệm so với lô chứng
Lô thử nghiệm
N = 12
Mức độ giảm viêm chân chuột (%) Sau 3
giờ
Sau 24 giờ
Sau 48 giờ
Sau 72 giờ
Cao phối
hợp
Celebrex 25 mg/kg 40,25 42,29 53,97 65,88
BÀN LUẬN
Bàn luận về tác dụng kháng viêm cấp
Ở thời điểm sau 3 giờ gây viêm thì độ sưng
phù chân chuột lô uống cao phối hợp Thiên niên
kiện - Bách bệnh giảm rõ rệt so với lô chứng (liều 1,075 g/kg giảm 32,72%, liều 2,15g/kg giảm 18,83
% so với lô chứng) Tuy nhiên ở thời điểm sau 24 giờ và sau 48 giờ gây viêm thì độ sưng phù ở lô uống cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh không khác biệt so với lô chứng, điều này có thể
do có sự giảm đột ngột mức độ viêm so với thời điểm sau khi tiêm carragenin 3 giờ nên cao phối hợp chưa thể hiện rõ hoạt tính kháng viêm Sau
72 giờ, lô chuột uống cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh lại có tác dụng kháng viêm, chứng tỏ cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách
Trang 7bệnh có thể có tác dụng kháng viêm mạn tính
Kết quả khảo sát tác dụng giảm đau
Thời điểm từ 0 đến phút thứ 10
Số lần xoắn bụng giữa lô uống cao phối hợp
Thiên niên kiện - Bách bệnh liều 1,075 g/kg giảm
đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng Số lần xoắn
bụng của lô uống cao phối hợp Thiên niên kiện -
Bách bệnh liều 2,15 g/kg giảm nhưng chưa đạt ý
nghĩa thống kê so với lô chứng Như vậy cao
phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh ở liều
1,075 g/kg có tác dụng giảm đau ở phút thứ 0 –
10 sau khi gây đau xoắn bụng bằng acid acetic
Tác dụng giảm đau ở liều 1,075 g/kg tương
đương với thuốc đối chiếu aspirin liều 200
mg/kg
Thời điểm từ phút thứ 11 đến phút 20
Số lần xoắn bụng của các lô uống cao phối
hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh liều 1,075g/kg
và liều 2,15 g/kg đều giảm đạt ý nghĩa thống
kê so với lô chứng Như vậy cao phối hợp
Thiên niên kiện - Bách bệnh ở liều 1,075 g/kg
và liều 2,15 g/kg có tác dụng giảm đau ở phút
thứ 11 – 20 sau khi gây đau xoắn bụng bằng
acid acetic Tác dụng giảm đau ở liều 1,075
g/kg tương đương với thuốc đối chiếu aspirin
liều 200 mg/kg
Thời điểm từ phút thứ 20 đến phút thứ 30
Số lần xoắn bụng của lô uống cao phối hợp
Thiên niên kiện - Bách bệnh liều 1,075 g/kg giảm đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng với Số lần xoắn bụng của lô uống cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh liều 2,15 g/kg giảm nhưng chưa đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng
So sánh tổng số lần xoắn bụng trong 30 phút sau khi tiêm
Số lần xoắn bụng của các lô uống cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh liều 1,075g/kg
và liều 2,15 g/kg đều giảm đạt ý nghĩa thống kê
so với lô chứng (Bảng 5)
Bàn luận khảo sát tác dụng giảm đau cấp
Cao thử nghiệm thể hiện tác dụng giảm đau đạt ý nghĩa thống kê ở hai liều uống 1,075 g/kg và liều 2,15 g/kg Mức độ giảm đau là 48,35% ở liều 1,075 g/kg và 22,03% ở liều 2,15 g/kg so với lô chứng uống nước cất Tác dụng giảm đau của cao thử nghiệm yếu hơn thuốc đối chiếu aspirin (mức độ giảm đau là 59,51%) Mức độ giảm đau xoắn bụng ở lô uống cao thử nghiệm liều 1,075g/kg điển hình hơn liều 2,15g/kg khi ghi nhận chi tiết ở từng giai đoạn 10 phút trong 30 phút Lô uống cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh có tác dụng giảm đau cấp trong 30 phút sau khi tiêm acid acetic chứng tỏ cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh có thể có tác dụng ức chế các chất trung gian hóa học gây đau
Bảng 5: Kết quả khảo sát tác dụng giảm đau của cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh
Lô thử nghiệm
N = 12
trong 30 phút
% giảm đau so với chứng 0-10 phút 11-20 phút 21-30 phút
Cao phối hợp
* P < 0,05 so với lô chứng
KẾT LUẬN
Cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh
có biểu hiện độc tính cấp đường uống với liều
LD0 là 2,15 g/kg Cao phối hợp Thiên niên
kiện-Bách bệnh liều 2,15 g/kg (liều = 1/10 LD0)
sau 2 tháng uống làm tăng số lượng hồng cầu
và không có biểu hiện bất thường về độc tính bán trường diễn trên chuột nhắt trắng Cao phối hợp Thiên niên kiện-Bách bệnh ở hai liều uống 1,075 g/kg và 2,15 g/kg có tác dụng giảm đau, kháng viêm Cao phối hợp Thiên niên kiện - Bách bệnh có hoạt tính ức chế quá trình peroxy hóa lipid tế bào
Trang 8Đề tài này được thực hiện với sự tài trợ kinh phí của Sở
Khoa học và Công nghệ Tỉnh Bà Rịa-Vũng Tàu
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1 Ang HH, Nga TH, Tan TH (2003) Effects of Eurycoma longifolia
Jack on sexual qualities in middle-aged male rats
Phytomedicine10 (6 - 7): pp 590 - 593
2 Cheseman K.H (1985) Studies on lipid peroxidation in normal
and tumor tissues, J Biol Chem., pp 235, 507 – 514
3 Đỗ Trung Đàm (1996) Phương pháp xác xác định độc tính cấp
của thuốc Nhà xuất bản Y học Hà Nội, tr 7 - 24
4 Nguyễn Đình Giậu, Nguyễn Chi Mai, Trần Thị Việt Hồng
(2000) Sinh lý học người và động vật Nhà xuất bản Đại Học
Quốc Gia Thành phố Hồ Chí Minh, tr 7 – 91, 187 – 188, 235 –
237
5 Suckow MA, Danneman P, Brayton C (2001) The laboratory
mouse, CRC Press, pp 18 – 21
6 Viện Dược Liệu (2006) Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược
lý của thuốc từ thảo dược, Nhà xuất bản Khoa học và Kỹ thuật,
tr 57 – 63, 140 – 141, 171 - 183, 279 – 284, 295, 311 - 313, 355 - 367,
377 - 387
7 Viện Dược liệu (2007) Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam, Nhà xuất bản Khoa học và Kỹ thuật, tập I, tập II, tr 116 –
118, 868
8 Winter CA, Risley EA, and Nuss GW (1962) Carrageenin-induced edema in hind paw of the rat as an assay for antiiflammatory drugs Proc Soc Exp Biol Med ,111:pp 544 - 547
Ngày nhận bài báo: 3/10/2013 Ngày phản biện nhận xét bài báo: 02/10/2013,
14/10/2013 Ngày bài báo được đăng: 02/01/2014