NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH CẤP VÀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM, GIẢM ĐAU CỦA CAO LỎNG TK1 TRÊN THỰC NGHIỆM

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ HỌC VIỆN Y DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN VIỆT NAM NGUYỄN NGỌC THƯỢC NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH CẤP VÀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM, GIẢM ĐAU CỦA CAO LỎNG TK1 TRÊN THỰC NGHIỆM LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC Hà Nội - Năm 2017 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ HỌC VIỆN Y DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN VIỆT NAM NGUYỄN NGỌC THƯỢC NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH CẤP VÀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM, GIẢM ĐAU CỦA CAO LỎNG TK1 TRÊN THỰC NGHIỆM Chuyên ngành: Y học cổ truyền Mã số : 60.72.02.01 LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC Hướng dẫn khoa học: TS.BS ĐẬU XUÂN CẢNH Hà Nội - Năm 2017 LỜI CẢM ƠN Hoàn thành luận văn này, với tất lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, tơi xin gửi lời cảm ơn đến Đảng ủy, Ban Giám đốc Học viện Y Dược học cổ truyền Việt Nam, Phòng đào tạo Sau đại học, Bộ mơn, Khoa phòng Học viện Y Dược học cổ truyền Việt Nam, nơi trực tiếp đào tạo tận tình giúp đỡ tơi q trình học tập, nghiên cứu Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn tới tồn thể thầy cơ, anh chị kỹ thuật viên, em sinh viên nghiên cứu khoa học môn Dược lý, Học viện Quân Y bên tơi, giúp đỡ tơi q trình tơi thực nghiên cứu Tơi xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới TS Đậu Xuân Cảnh người thầy hướng dẫn trực sát, thường xuyên giúp đỡ, cho nhiều ý kiến quý báu, sát thực trình học tập nghiên cứu để hồn thành luận văn Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành lòng biết ơn sâu sắc tới TS.BS Nguyễn Hồng Ngân, Phó chủ nhiệm môn Dược lý, Học viện Quân Y, người thầy trực tiếp hướng dẫn, giúp đỡ cho nhiều ý kiến quý báu trình nghiên cứu Cuối xin gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình, bạn bè ln đồng hành, động viên, chia sẻ với tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Luận văn hồn thành có nhiều tâm huyết người viết, song tránh khỏi sai sót Xin cảm ơn đóng góp chân thành quý thầy cô, anh chị em bạn bè đồng nghiệp Xin trân trọng cảm ơn! Tác giả Nguyễn Ngọc Thược LỜI CAM ĐOAN Tôi Nguyễn Ngọc Thược, học viên cao học khóa Học viện Y dược Học cổ truyền Việt Nam, chuyên ngành Y học cổ truyền, xin cam đoan: Đây luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn Tiến sĩ Đậu Xn Cảnh Cơng trình không trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu, thơng tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hà Nội, ngày tháng 10 năm 2017 Tác giả Nguyễn Ngọc Thược DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt Tiếng Việt Tiếng Anh AA Acid arachidonic ADN Acid desoxyribonucleic AMP Adenosin monophosphat ATP Adenosin triphosphat COX (1,2) Enzym cyclooxygenase (1, 2) DMSO Dimethyl sulfoxid DPPH 1,1-dimethyl-2-picryhydrazyl IL Interleukin INF Interferon iNOS NO sythase cảm ứng LCT Leucotrien LOX Lypoxygenase MeOH Methanol NADPH Nicotinamid adenin dinucleotid phosphat NOS NO synthase PARP Poly( ADP-ribose)polymerase PG Prostaglandin PGI Protacyclin PGHS-1,2 Prostaglandin synthase-1,2 PLA2 Phospholipase A2 POX Peroxidase Tx Thromboxan RNS Gốc nitơ hoạt động ROS Gốc oxi hoạt động IASP Hiệp hội quốc tế endoperoxid nghiên cứu đau NSAID Thuốc chống viêm không steroid NF-kB Yếu tố chép nhân TNF Yếu tố hoại tử u WHO Tổ chức Y tế giới YHCT Y học cổ truyền YHHĐ Y học đại World health Organization MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan viêm 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 Nguyên nhân phân loại viêm .3 1.1.3 Cơ chế bệnh sinh 1.1.4 Một số thuốc chống viêm .10 1.2 Tổng quan đau 12 1.2.1 Định nghĩa 12 1.2.2 Đường dẫn truyền cảm giác đau .12 1.2.3 Thuốc giảm đau 13 1.3 Tổng quan viêm đau theo y học cổ truyền 14 1.3.1 Sơ lược quan niệm viêm đau theo y học cổ truyền 14 1.3.2 Chứng tý theo quan niệm y học cổ truyền 15 1.3.3 Chứng thống phong theo quan niệm y học cổ truyền 17 1.4 Tình hình nghiên cứu thuốc y học cổ truyền có tác dụng chống viêm, giảm đau giới nước 19 1.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 19 1.4.2 Tình hình nghiên cứu nước 20 1.5 Tổng quan thuốc TK1 .22 1.5.1 Xuất xứ thuốc 22 1.5.2 Thành phần .22 1.5.3 Phân tích thuốc 31 1.5.4 Dạng bào chế 33 1.5.5 Chỉ định cách dùng 33 Chương CHẤT LIỆU - ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 Chất liệu nghiên cứu 34 2.1.1 Thuốc nghiên cứu TK1 34 2.1.2 Thuốc đối chứng hóa chất dùng nghiên cứu 35 2.2 Đối tượng nghiên cứu .35 2.3 Phương pháp nghiên cứu 36 2.3.1 Thiết kế nghiên cứu 36 2.3.2 Sơ đồ nghiên cứu 37 2.3.3 Công cụ trang thiết bị dùng nghiên cứu: 38 2.3.4 Nghiên cứu độc tính cấp 38 2.3.5 Nghiên cứu tác dụng chống viêm, giảm đau 41 2.4 Địa điểm thời gian nghiên cứu 46 2.4.1 Địa điểm nghiên cứu .46 2.4.2 Thời gian nghiên cứu 46 2.5 Phương pháp xử lý số liệu 46 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .47 3.1 Kết nghiên cứu độc tính cấp .47 3.2 Kết nghiên cứu tác dụng chống viêm cấp mơ hình gây phù chân chuột Carrageenin 49 3.3 Kết nghiên cứu tác dụng chống viêm cấp mô hình gây viêm màng bụng chuột cống trắng 53 3.4 Tác dụng chống viêm mạn tính cao lỏng TK1 56 3.5 Ảnh hưởng cao lỏng TK1 lên tuyến ức chuột cống non .56 3.6 Tác dụng giảm đau mơ hình gây đau phiến nóng 58 3.7 Tác dụng giảm đau tổ chức viêm cao lỏng TK1 59 3.8 Tác dụng giảm đau mơ hình gây đau quặn 60 Chương BÀN LUẬN 63 4.1 Độc tính cấp cao lỏng TK1 63 4.2 Tác dụng chống viêm, giảm đau cao lỏng TK1 65 4.2.1 Tác dụng chống viêm cao lỏng TK1 65 4.2.2 Tác dụng giảm đau cao lỏng TK1 70 KẾT LUẬN 76 Kết luận độc tính cấp cao lỏng TK1 76 Kết luận tác dụng chống viêm, giảm đau cao lỏng TK1 thực nghiệm 76 2.1 Kết luận tác dụng chống viêm cao lỏng TK1 thực nghiệm……………………………………………………………………76 2.2 Kết luận tác dụng giảm đau cao lỏng TK1 thực nghiệm .76 KIẾN NGHỊ …………………………………………………………… 77 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC 30.Đào Văn Phan (2003), Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết thổ phục linh (Smilax glabra Roxb-Smilacaceae) động vật thực nghiệm Luận văn Thạc sỹ Y học, Đại học Y Hà Nội 31.Nguyễn Thế Siển (2006), Nghiên cứu tác dụng chống viêm, giảm đau bảo vệ tế bào máu sau tai xạ nhàu thực nghiệm, Luận văn tốt nghiệp Bác sỹ Y khoa, Trường Đại học Y Hà Nội 32.Sở Y tế Bắc kinh (1999), “Nghiên cứu đánh giá thuốc gồm: Hy thiêm thảo, Đan sâm, Xuyên sơn giáp bệnh nhân viêm khớp”, Hội nghị khoa học điều trị bệnh lý khớp, trang 86-90 33.Đậu Thị Giang (2016) Nghiên cứu tác dụng chống viêm giảm đau rễ gối hạc thực nghiệm Luận văn Thạc sỹ Dược học Đại học Dược Hà nội 34.Hải thượng Lãn Ông (2008) Y trung quan kiện, Nhà xuất Y học, trang 2, 13 35.Hồ Văn Lộc, Đào thị Vân Khánh (2007), “Thối khớp”, Giáo trình sau đại học Bệnh xương khớp, trang 48-54 36.Hoàng Thị Quế (2011) Nghiên cứu tác dụng thuốc tam tý thang gia giảm điều trị VKDT, Luận án tiến sĩ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội 37.Học viện Qn Y (2009) Bài giảng chun đề thối hóa khớp, Học viện Quân y, trang -10 38.Nguyễn Thị Thanh Hoa (2014) Nghiên cứu tác dụng hỗ trợ điều trị viên nang cứng Regimune 30 bệnh nhân VKDT giai đoạn I- II (Thể phong thấp nhiệt tý), Luận văn tốt nghiệp cao học, Trường Đại học Y Hà Nội 39.Đặng Thị Như Hoa (2010), “ Nghiên cứu tính an tồn tác dụng điều trị bệnh gút Cao vương tôn” Luận văn Thạc sỹ y học, Đại học Y Hà Nội 40.Nguyễn Trần Thị Giáng Hương (2003) Nghiên cứu tác dụng chống viêm giảm đau Cẩu tích thực nghiệm Tạp chí Y học thực hành, trang 1, 42 - 44 41 Nguyễn Văn Tâm (2002) Đánh giá tác dụng điều trị viên nang Phong tê thấp điều trị VKDT, Luận văn tốt nghiệp BS CKII, Trường ĐH Y Hà Nội 42.Nguyễn Viết Thân (2013) Những thuốc Việt Nam thuốc thường dùng, Nhà xuất giới, Tập I 43 Y Tạ Thiêm, Dương Đức Tài (2011) Bổ thận tráng cốt điều trị VKDT Tạp chí đại học Trung y dược Hồ Bắc, Quyển 13, Kỳ 2, trang 18-19 44.Nguyễn Thị Bích Thu (2002), Nghiên cứu cà gai leo làm thuốc chống viêm gan ức chế xơ gan Luận án Tiến sỹ Dược học, Đại học Dược Hà Nội 45.Trần Thuý, Vũ Nam Viêm khớp dạng thấp, thối hóa khớp đau nhức khớp Chun đề nội khoa Y học cổ truyền, trang 478-485 46 Trần Thuý cộng (1978) Kết điều trị 64 bệnh nhân thấp khớp rượu thấp khớp Thông tin YHCT, trang 18, 10 – 14 47.Nguyễn Thị Lan Trang (2004), Đánh giá tác dụng điều trị viên nang thấp khớp bệnh viêm khớp dạng thấp, Luận văn thạc sỹ Y khoa, Trường Đại học Y hà Nội 48 Nguyễn Thị Lan Trang (2004) Đánh giá tác dụng điều trị viên nang Thấp khớp điều trị VKDT, Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ, Trường Đại học Y Hà Nội 49 Phạm Văn Trịnh, Nguyễn Thị Hằng (1997), “Nghiên cứu tác dụng nhóm thuốc phát tán phong thấp ứng dụng lâm sàng”, Thông tin YHCT số 80/1997, trang 65 50.Trường Đại học Y Hà Nội, Khoa Y học cổ truyền (2006) Chứng Tý Chuyên đề nội khoa Y học cổ truyền, Nhà xuất Y học, trang 478 – 486 51.Nguyễn Thị Thanh Tú (2015), Nghiên cứu tính an tồn tác dụng viên nang Hoàng Kinh bệnh nhân VKDT, Luận án Tiến sĩ, Đại học Y Hà Nội 52.Băng Tuyết (1976), “Solamin - thuốc chữa thấp khớp” Thông tin YHCT số 1/1976, trang 35 53.Viện Dược liệu (1993), Tài nguyên thuốc, Nhà xuất Y học, trang 336,524,540,574,615 54 Viện nghiên cứu Đông y (1977) Chứng Tý Trung y học khái luận, Bệnh viện đơng y Thanh Hóa, Tập hạ, trang 20 55.Viện Dược liệu (2006) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, Tập I, Tập II 56.Nguyễn Quang Vinh, Đỗ Trung Đàm, Nguyễn Thị Dung (1999), Nghiên cứu tác dụng giảm đau Cao thấp khớp II mơ Hình gây đau thực nghiệm acid acetic, Luận văn thạc sỹ Y học, Trường Đại học Y Hà Nội Tiếng Anh 57.Anthony S Fauci, MD (2010) Rheumatoid Arthritis Harrison,s Rheumatology, Mc Graw Hill Medical, trang 82-99 58 Arend, WP (1991) Interleukin-1 recepter antagonist, A new member of the interleukin family Jclin invest, trang 88 59.Bendtzen, K, Hansen, MB, Ross, C, et al (1995) Cytokines and autoantibodies to cytokines Stem Cells, trang 13, 206 60.Ducrot, R; Julon, L et al (1965) Tumor screening methods in pharmacology Academic press, trang 114 - 115 61 Edwards, JC, Szczepanski, L, Szechinski, J, et al (2004) Efficacy of B-cell-targeted therapy with rituximab in patients with rheumatoid arthritis, N Engl J Med, trang 350, 2572 62.Epstein, WV (1996) Expectation bias in rheumatoid arthritis clinical trials The anti CD4 monoclonal antibody experience Arhtritis Rheum, trang 39, 1773 63.Feldmann, M, Brennan, FM, Maini, R (1998) Cytokines in autoimmune disorders Int Rev Immunol, trang 17, 217 64.Litchfield J T& Wilcoxon F A (1949) A simplified method of evaluating dose - effect experiments J Pharmacol Exp Ther, 96, 99 113 Ankier, S, J (1974) New hot plate test to quantity anti nociceptive and narcotic antagonist activities Eur, J Pharmacol, trang 27, - 65.Koster, R; Anderson, M and Debeer, FJ (1959) Acetic acid for analgetic screening Fed Proc, trang 18, 412 66.Hunskaar S, Hole K (1987), The formalin test in mice: dissociation between inflammatory and noninflammatory pain Pain, trang 30, 103 104 67.Geissner U., Wurtele U (1990), "Themen und Trends einer Psychologie des Schmerzes", Man Med, 28, pp trang 42-47 68.Maxine A Papadakis and Stephen J McPhee (2013) Rheumatoid arthritis Current medical Diagnosis and treatment, Mc Graw Hill, trang 826 - 831 69 Norris S H (1990) Surgegy for the rheumatoid wrist and hand, Annals of the Rheumatic Dieaws, trang 49, 863 - 870 70.Paul P Tak1 and Joachim R Kalden2 (2011) Advances in rheumatology: new targeted therapeutics Arthritis Res Ther, trang 13 71.Winter C.A., Risley E.A and Nuss G.W (1962) Carrageenin induced edema in hind paw of the rat as an assay for anti inflammatory drug Proc, exp Biol NJ, 111, trang 544 - 574 72.Wolfgang H.Vogel, Bernward A S., Jurgen S., Gunter M., Wolfgang F Vogel (2002), "Drug Discovery and Evaluation", Springer, pp 716-717, pp.751-769 73.World Health Organization (1993) Working group on the safety and efficacy of herbal medicine Report of regional office for the western pacific of the World Health Organization, trang 33 - 51 Tiếng Trung 74.姜姜, 姜姜 (2007 年年) 475 年年年年年年年年年年年年年年年年年 年年年年 48 年年 年, 253 254 年 75.姜姜姜姜姜(2011) 年年年年年年年年年年年年年年年年年年年年年年年 年年年年年年年285 年年 76.姜姜 (1963 年) 年年年年年年, 年年 年年年年年, 240 年 77.姜姜 姜, 年年年, 年 年 年 (2009) 年 年 年 年年年年年, 年年年年年年年, 299 - 407 年 78.姜姜姜姜姜 (2008 年) 年年年年年年年, 年年年年年年年, 368 - 373 79.姜姜姜(2010年3年).年年年年年年年年年年年120年年年年年年, 年年年年, 23年年3年, 136-137年 80.姜姜姜, 姜姜姜 (2011) 年年年年年年年年年年年年年年年年 年年年年年年年年年, 年13年年2年, 18 19年 81.姜姜(2008年年).年年年年年年年年年年年年年年年年年年 年年年年年 年年年年年年年,19年年7 年,1758-1759年 82.姜姜姜姜姜 (1993年 年年年年年年年年年年年年年年年年年年年年年, 年年年年年年年, 1652-56 年 83.姜姜.年年年年年年年年年年年年年年年年年年年年年年年年2006 351-388 84.姜姜姜 年年年年年年年年年年年, 年年年年年年年年年年年年, 2005(21年2: 79-8 PHỤ LỤC SƠ ĐỒ CHIẾT XUẤT CAO LỎNG TK1 Dược liệu khô (Chế biến) Cân theo tỷ lệ thuốc ( Đổ ngập nước đun sôi 1h) Dược liệu ( Đổ ngập nước đun sôi tiếp 1h) Dược liệu ( Đổ ngập nước đun sôi tiếp 1h) Dịch chiết Dịch chiết Tổng số dịch chiết Cao lỏng 100g/100ml Dịch chiết PHỤ LỤC ẢNH NGHIÊN CỨU THỰC NGHIỆM Chuột nhắt trắng sử dụng nghiên cứu Chuột cống trắng sử dụng nghiên cứu Tuyến ức Tuyến ức chuột nhắt trắng nghiên cứu tác dụng chống viêm TK1 Hình ảnh gây u hạt chuột nghiên cứu tác dụng chống viêm TK1 Hình ảnh khối u hạt bóc tách khỏi tổ chức xung quanh để cân trọng lượng nghiên cứu tác dụng chống viêm TK1 Thời gian từ lúc cho chuột lên nóng đến chuột đưa chân sau lên liếm dùng đánh giá tác dụng giảm đau chế phẩm nghiên cứu (TK1) thử nghiệm đo đau nóng Cơn đau quặn bụng chuột thử nghiệm đau quặn nghiên cứu ché phẩm TK1 Chuột oằn người, duỗi dài thân người, ép bụng xuống Đo đau bàn chân chuột bị phù viêm nghiên cứu tác dụng giảm đau tổ chức viêm chế phẩm TK1 Hình ảnh cho chuột uống thuốc Hình ảnh ni chuột Đo thể tích phù bàn chân chuột nghiên cứu tác dụng chống viêm cấp chế phẩm TK1 PHỤ LỤC CÁC VỊ THUỐC TRONG CAO LỎNG TK1 Cà gai leo Thổ phục linh 3.Cốt khí 4.Cẩu tích 5.Dây gắm 6.Dây chiều 7.Hà thủ ô 8.Ngưu tất nam 9.Kê huyết đằng 10.Quế chi