ĐẶT VẤN ĐỂ ĐTĐ (ĐTĐ) là một bệnh gây ra bởi sự rối loạn chuyển hoá gluciđ. Bệnh rất phổ biến không chí ở các nước phát Iriển mà cả Ư các nước đang phát triển và chậm phát triển. Hiện nay, bệnh ĐTĐ đang ở giai đoạn hùng nổ dich tễ li ên phạm vi toàn thế giứi. Theo công bố của tổ chức y lế thế giới (WHO) năm 1985 có 30 triệu người bị mắc bệnh ĐTĐ, năm 1994 cổ 98,9 triệu người bị mắc bệnh ĐTĐ. Vói đà gia tăng bệnh như hiện nay, ước lính đốn năm 2010 số người mắc bệnh nừy khoáng 215,6 triệu người Ị2 Ị. ở Việt Nam, theo háo cáo của hộ y lê năm 1998 có lới 1 2% dân số mắc bệnh ĐTĐ (0,8 1,5 triệu người). Tỉ lệ mắc bệnh ở Hà Nội là 1,44% ; Huế là 0,96% và TP Hồ Chí Minh là 2,68% và đang có XII hướng tăng lên. TổrUhất kinh tế do bệnh ĐTĐ gây ra rất lớn. Theo Lynn Wilson ơ Mĩ chi phí cho bệnh ĐTĐ đã lên tới 50 lí USD|7|. Ớ Thái Lan, nhiều nhà khoa học và kinh tế đã cảnh háo bệnli ĐTĐ cỏ llic đe đoạ triệt liêu các tiến bộ kinh tế đạt được, nguy cơ lớn h(Jn nguy cơ do nhiễm HIVAIDS. Ở Việt nam , hầu hết các thuốc điều trị bệnh ĐTĐ đều phải nhập nội nên gây ra lổn thất kinh lế rấl lớn. Những hậu hiến chứng của bệnh ĐTĐ như mil mắt, các bệnh lim mạch (lai biến mạch máu não, nhồi máu cơ lim. suy thận....) thường nặng nề và thường phải điều Irị lâu dài gây tốn kém nhiều Liền của. Y học hiện đại trong nhiều trường hựp chưa tìm ra được thuốc diều Irị nguyên nhân mà mới chí có thuốc điều trị triệu chứng và thường phải dùng thuốc suôi đời, kèm theo nhiều phần ứng phụ nguy hiểm. Do đó nhiệm vụ tìm và phát triển các cây Ihuốc, bài Ihuốc chữa bệnh ĐTĐ vẫn là mội nhiệm vụ cấp bách và lâu dài của ngành dược. Trong kho tàng đông y và y học dân gian có rấl nhiều cây thuốc, vị Ihuốc được dùng để điều Irị bệnh ĐTĐ mà Đông y gọi là bệnh liêu khát. Song hầu hết các cãy thuốc, vị thuốc và bài Ihuốc đó đều mới được sử dụng llico kinh nghiệm hay llieo y lý của y học Phương Đông chua được nghiên cứu
B ộ Y TÊ TRƯỜNG ĐẠI HỌC D ợ c HÀ NỘI G3 o SO LƯU MẠNH HỪNG NGHIÊN CỨU Sơ BỘ TÁC DỤNG HẠ ĐƯỜNG • • • HUYẾT CỦA BÀI THUỐC ĐƠNG Dược (KHỐ LUẬN TỐT NGHIỆP DUỢC SỶ KHOÁ 1996 - 200 i ) Ngưồi hướng dần : PGS.PTS Mai Tất Tố BS Dirơng Thị Ly Hương Nơi thực : Bộ môn Dược lực Bộ mơn Hóa sinh Thời gian thực : /0 - /0 /2 0 ỵ ', ị.io-o*, ị HÀ NỘI - / 2001 ọ - A y -\ ' l 0,05 8,05 ± 1,23 III Tolbutamid (50 mg / kg) uốn IV Nước sắc thuốc (200 mg / kg) Tiêm màng bụne V Insulin (1 ƯI / kg) Tièm mang bụng Ghi : p > 0,05 8,83 ± 1,08 p > 0,05 9,10 ±0,33 [G] hạ tối đa sau dùng thuốc (mmol/1) 8.47 ± 0,47 (sau 2h) p, > 0,05 5,35 ± 0,59 (sau 4h) p, < 0,01 Pu/t > 0,05 P2 < 0,01 Pu/tol>0,05 6,23 ± 1,61 (sau 4h) Pj < 0,05 Pt/'in>0,05 ! P, < 0,01 5,58 ± 1,50 (sau 4h) p, < 0,01 p ! < 0,01 5,67 ± 0,92 (sau 2h) [G] sau tiêm Adrenalin (mmol/1) 16,37 ±4,41 P < 0,05 Tỷ lệ % [G] thay đổi so vói mức [G] tối đa (%) ’ 93,27% - 9,23 ± 0,92 p, > 0,05 ĩ < 0,01 13,72 ±2,51 p, < 0,05 pỊ > 0,05 8,8 ± 1,12 p, > 0,05 < 0,01 16,9215,46 72,52% 120,22% 57,70% 198,41% p, < 0,01 p, < 0,01 pỊ < o’oi pỊ > 0,05 - p, so sánh nồns độ glucore/máu cùns mội lô cấc thời điểm sau uống thuốc với trước uống thuốc - P, so sánh nồne độ glucose/máu siữa lô thứ với lô trắng thời điểm - /(ỉ/ Nồng độ glucose/máu - Ưu/Ĩ so sẩnh lô uổns tiêm nước S iỉc thuốc Pu/loỉ so sánh iiiữa lô uốnu bằnu bời thuốc tolbutamid Pt/in sosánh p > 0,05 ỊỊÌừa lị liêm thuốc với lô liêm insulin Del NaCl 0,9% Insulin HÌNH Bài thuốc (Uốim ) Tolbutamid Bài thuốc (Tiêm ) HỈNH 3' Hình & Hình 3': So sánli tác dụng thuốc vói Tolbutaniiđ, insulin chuột nhắt trắng gíìy tăng đường huyết Adrenalin * Nhân xét: - Adrenalin 0,6 mg/kg ihể trọng làm tăng đường huyếl rõ tất lô chuột - Mức lăng đường huyết Adrenalin lô tiêm nước sắc thuốc thấp (57,70%) đến lô uống nước sắc thuốc (72,52%) lố uống Tolbutamid (120,22%) lồ liêm insulin (198,41%) 21 Bảng 4: Ảnh hưởng nước sắc vị thuốc nồng độ đường huyết chuột nhắt tráng gáy tàng đường huvèt Adrenalin (Tính trung bình cho lơ) Thuốc Lơ I Dd NaCl 0,9% (0,5 ml / chuột) Đường uống [G] bình thường (mmol/1) 8,92 ± 0,98 uống 8,22 ± 0,48 II Nước sắc Thổ phục linh (200 mg / kg) uống p > 0,05 7,88 ± 0,92 > ị Nước sắc Mướp đắn 2, (200 mg / kg) Nước sắc vi X IV (200 mg / kg) Ghỉ : uống p > 0,05 9,85 ± 0,55 uống p > 0.05 [G] sau giò dùng thuốc (mmol/ì) 8,47 ± 0,47 (sau 2h) p, > 0,05 5,72 ± 0.40 (sau 4h) p, 0.05 Ỹ > 0,05 [G] sau tiêm Adrenalin (mmol/1) 16,37 ±4,41 Tỷ lệ % [G] thay đổi so với múc [G] sau dùng thuốc (%) 93,27% p, < 0.G5 10,55 ±1,19 Pi < 0,05 P, < 0.01 13.77 ±2.69 ị 1 o nM?! < 0,05 ? > 0,05 18,75 ±1.65 Pj < 0,01 P > 0,05 i Ị i 84.44% 100.14% 103,24% - [G] nons độ đườníi huyết - Pj so sánh nồng độ slucose/mấu cùns lô thời điểm sau uốrm thuốc với thời điểm trước uống thuốc - P2 so sánh nồns độ iiỉucose/máu siữa cấc lô cùne thời điểm 18 16 D 14 ầ 12 w c 10 zi 8 ổ Q I 'O O' * zu giờ Hình 4: Ảnh hưởng vị thuốc chuột nhắt trắng íluức gà) tăng đường huyết Adrenalin * Nhận xét: - Adrenalin 0,6 mg/kg thề trọng làm lăng đường huì rõ tất cá lô chuộl - Mức lăng đường huyết Adrenalin lô uổng nước sắc Thố phục linh thấp (84,44 %) khác với lơ trắng có ý nghĩa thống kê (p < 0,01) 3.3 NGHIÊN c ú u ĐỘC TÍNH CÂP CỦA BÀI THUỐC VÀ XÁC’ ĐỊN1I LD50 t h e o p h n g p h p BERHEN - KABER Siíc vật (hí nghiệm l;ì chuột nliííl trắng, chủnụ Swiss, liai giống trọng lưựng 18 đến 20 gam Trước tiến hành thí nghiệm, chuột dược ni ổn định phịng ihí nghiệm ngày + Tiến hành thí nghiệm: Cho chuột lơ uống liều nliâì thuốc thử nghiệm vào sáng (clniộl cho uống nước sắc bình ihirịng khơng cho ăn từ 61ì chiều hỏin trước) Sau cho cluiộl uống với liều lăng dần từ 100-150 g/kg Ihể trọng (vứi thể lích lối da 0,8 ưil/ chuột) Ọuan sát chuột tính số chuột chết sau 72 giở Kết cho thấy không clniột chết, chuộl sau uốiig thuốc giảm hoạt động sau 30 - 40 phíil trt'y lại bình thường 22 3.4 THỬ TÁC DỤNG KHÁNG KHưẨN, k h n g nấm THUỐC VÀ TÙNG VỊ THUỐC Tác dụng kháng khuẩn vị thuốc xác định phương pháp khuyếch lán thạch Khả đường kháng khuẩn đưực thổ hằnu kínhvịng vơ khuẩn Kíchthước đường kính vịngvơ khuẩn lỷ lệ thuận với logarit nồng độ tưưng ứng - Các phép thủ' Ihực liên môi lrường canh thang, mỏi Irường Mallet - Hinton, môi trường Sabpuraund - Các chủng vi sinh vật thử gồm có: - Vi khuẩn gram (+): Bacillus cercus ATCC 9946 Sarcila lulea ATCC9341 Staphylococcus aureus ATCC 12228 - Vi khuẩn gram (-): Escherichia coli ATCC 25922 Proteus mirabilis BV 108 Shigella ilexreri DT112 Salmonella typhi DT 220 Pseudomonas aemginosa VM 201 - Vi nấm Candida albicans ATCC 10231 Các chủng vi sinh vậl trước thử cấy truyền vào mơi trường dinh dưỡng thích hợp đưực làm thànlĩ nhũ dịch cỏ khoảng 106 đến 107 tê bào/ml - Chuẩn bị mẫu thử Dùng nước sác 1:1 hài thuốc, cam ihảo, thổ phục linh, mướp đáng, vị X để Ihử lác dụng kháng khuẩn kháng nấm - Phương pháp liến hành 23 Bảng 5: Kết kháng khuẩn kháng nấm thuốc vị thuốc Đường kính vịng vơ khuẩn (mm) ^ ^ V i^ sm h ^ v ậ t S.auseus B.Cereus E Coli s.flexneri s.typhi ATCC ATCC ATCC DT112 DT220 12228 9946 25922 17,7 11,7 2,0 10,0 - - 9,2 - 17,2 ,1 18,2 ,0 - - - ,2 - 20,1 - - - - 18 - - - - 16,1 ,2 ,2 - - 12,5 - - - — 12 B.Pumilus s.lutea NTCC ATCC \ 8241 9341 Bài th u ố c 11,5 C am th ả o Mầu thử M óp đ ắng Thố phục linh p.mirabilis p.aerugi C.albicans BV108 nosa VM ATCC 10231 201 I 14,0 V ị X 16,5 17,3 17,2 14,3 - - - 12,2 - 18,- Ghi chú: (-) Khơĩìíỉ có tác duns kháng khuẩn Nhân x é t - Tất vị thuốc, thuốc cho tác dụng kháng nấm rõ ràng (C albicans ATCC 10231) - Nước sắc thuốc có tác dụng kháng khuẩn với tất chủng vi khuẩn 2;r(+) kháng hai chủng vi khuẩn gr(-) - Cam thảo vị X có tác dụng khánư khuẩn tốt với tấl vi khuẩn gr (+) kháng chủns, vi khuẩn gr(-) (P.mirabilis BV 108) - Mưóp đắnt: chi có tác dụnu kháng khuẩn với loại vi khuẩn 2Ĩ (-) (E.Coli ATCC 25922) - Thổ phục ì inh có tác dụn 0,05) Sau dùng thuốc 4giờ30' đường huyếl ehuộl lăng lên, chứng tỏ thời gian lác dụng thuốc vào khoảng 4,5 - Trơn mơ hình chuột nhắl gây tăng đường huyếl Adrenalin chúng lòi nhận Ihấy với liều 111 ực nghiệm tác dụng hạ đường huyết hài thuốc mạnh so với tolbutamid hưn so với Insulin khác khơng có ý nghĩa thống kê ( p>(),05) lô dùng nước sắc hài thuốc, mức tăng đường huyết sau liêm Adrenalin thấp nhài Chứng tỏ thuốc có tác dụng ức chế tác dụng chuyển hố glycogen thành glucose, giảm phân bố glucose vào tổ chức ức chẽ Irìnli tổng hợp glycogen Adrenalin Kếl Ihu phù hợp với kốl 24 Nguyễn Ngọc Xuân nghiên cứu tác dụng hạ đường huyếí lliổ phục linh mơ hình gây tănu đường huyết Streptozocin |6| - Đối với lừng vị thuốc nghiên cứu nhận Ihây liều 2()()mg/kg thể trọng tác dụng hạ đường huyết vị thuốc nhiều so với lác dụng tluiốc Điều cho thấy sử dụng thuốc để điều trị ĐTĐ cổ hợp đồng lăng cường vị Ihuốc giảm hớl nhiều nguyên liệu Về độc tính cấp Ihuốc chúng tơi nhận íhấy liều 15()g/kg thể trọng thuốc khơng biểu độc tính cấp Irên chuột Vì việc sử dụng thuốc điều trị cho bệnh nhân ĐTĐ yên tâm Thật vị thuốc Irong thuốc vị thông thường đưực nhân dân sử dụng từ lâu đòi Nước sắc 1:1 ihuốc cho lác dụng kháng nâin (C albicans) rõ kháng tấl chủng vi khuẩn gram (+) thử nghiệm, kháng 2/5 ch Únụ vi khuẩn gram (-) Điều cho thấy Ihuốc khơng chí có tác dung hạ đường huyết mà cịn có lác dụng giảm số biến chứng bệnh ĐTĐ gây Đây ưu điểm bật so với việc sử dụng Ihuốc tân dược điều trị đái Iháo đường 25 PHẦN KẾT LUẬN VÀ ĐỂ NGHỊ 4.1 KẾT LUẬN Sau tháng thực đề tài "Nghiên cứu sơ hộ tác dụng hạ đườni; huyết hài thuốc Đông Dưực" rút số kết luận sau: - Bài thuốc cổ tác dụng hạ đường huyết chuột cống Irắng bình thường - Bài thuốc có tác dụng hạ đường huyết chuột nhắl Irắng đưực gây lăng đường huyếl Adrenalin với liều 0,6mg/kg Ihể Uọng - liều I50g/kg lliể trọng, hài thuốc khơng gây độc cho chuột thí nghiệm - Nước sắc (1:1) lliuốc cỏ tác dụng kháng nấm rõ (C albicans), lác dụng kháng khuẩn với lất cá chủng vi khuẩn gr (+) thử nghiệm mội sỏ chủng vi khuẩn gr (-) 4.2 ĐÊ NGHỊ Qua sơ nghiên cứu chúng lôi thấy hài Ihuốc có lác dụng chỏng ĐTĐ ill ực nghiệm Đổ sớm đua vào sử dụng Irong lâm sàng chúng lôi đồ nghị nên liếp lục nghiên cứu số vấn đề sau : - Tiến hành nghiên cứu thuốc Irên mơ hình gây tăngđườnghuí Slreptozocin - Nghiên cứu độc lính bán trường diễn hài Ihuốc Trên sớ kết nghiên cứu Irên có Ihể nghiên cứu dạng bào sàng để sớm đưa thuốc vào ứng dụng rộng rãi 26 chế vàthửnghiệm lâm TÀI LIỆU THAM KHẢO Đỗ Tất Lợi Những thuốc vị thuốc Việt Nam -1999, NXB KH KT (Trang 392 - 354; 837 - 841; 783 - 786; 734 - 735) Đồ Trung QuAn Bệnh đái tháo đường - NXB Y học 1999 Lô Đức Trình, Nguyễn Thị Hà Chẩn đốn sinh học mội số bệnh nội khoa NXB Y học 1995 (Irang 84-108) Nguyễn Xuân Thắng Receptor màng tế bào lác dụng thuốc - NXB Y học 1999 (Trang 284 - 295) Nguyễn Thị Hạnh, Mai Phương Mai, Võ Phùng Nguyên Thăm dò lác dụng hạ đường huyết số thuốc dân gian mỏ hình tiểu đường Streplozocin ehuộl nhắt Tạp chí Y học TPHCM - Phụ tập 2-2000 (Trang 39-44) Nguyễn Ngọc Xuân, Đào Văn Phan, Nguyễn Duy Thuận Bước đẩu nghiên cứu lác dụng hạ đường huyết thổ phục linh Tạp chí Dược học số 4/2000 (Trang 12 - 13) Nguyễn Phương Dung, Lô Vỡ Định Tường Kết bước đầu nghiên cứu số thuốc, thuốc chữa bệnh đái tháo đường Tạp chí Y học thực hành số 8/2000 (Trang 22 - 25) Nguyễn Trọng Thông Thuốc điều uị ĐTĐ Dược lý học Bộ môn Dược lý ĐHY -UN NXB Y học (468 - 475) Đào Kim Chi, Nguyễn Xuân Thắng, Nguyễn Duy Thiệp Giáo liình thực lập sinh hố - Trường Đại hục Dưực Hà Nội 10 Phan Văn Kác: 27 Mộl sô lưưng tác Ihuốc tiên bán vộn động vân hạch giao cảm điều kiện sinh lý bình thường trạng thái ĐTĐ thực nghiệm Luận án PTS Y Dược - 1993 (trang 34-35) 1 Trần Đức Thọ Bài Giảng bẹnh học nội khoa tập I - Chương (trang 274-286) 12 Vũ Đình Vinh, Đặng Hanh Phức, Đỗ Đình Hổ K ỹ t h uậl XÓ n g h i ệ m Y sinh hoá I 13 Abnli F.Y, Wambcbe c and Rai p.p, Sokomba EN Hypoglycaemic Activity oĩ Anthocleisla Vogelii Phytotherapy Research Vol 4, Nol, 1990 (Page 20-24) 14 Chakrahorly 1, Verolta.L Evalualion ol Azadirachta indica Leal Exlracl for Ị ỉyịioglycaeinic Activity in Rats Phytotherapy Research Vol Nol, 1989 (Page 30-32) 15 Daniel w , Forler Chapter 334 "Diabele Mellilus" - In: Harrison 14,h Edition - 1998 (Page 2060-2080) 16 Foreslieri A.M ElTects of Guar and Carob Gums On Gulcose Phytotherapy Research vol 3, Nol, 1989 17 Harold Riikin M.D, Daniel Forlc Diabele Klellitus - Tlieoiy and Practise fourth edition - 1990 (Pauc 299 - 339) 18 H OkamolO el al Lessons from animal diabetes London Publish house - 1988 (Page 43-52) 19 Huralikuppi J c et al Anli- diabetic Effect of Nelumbo nucifcra Phytotherapy Research Vol 5, No2, 1991 (Page 54-59) 20 Philip K Bondy, Leon E Rosenberg Metabolic Control and diseases (Page 307 - 329) 28 21 Stephen N Davis and Daryl K Granner Goodman and Gilman’s The pharmacological Basis of Therapeutics Chapter 60 (Page 1487 - 1519) 22 Yukata Suzuki and Hiroshi Hikino Pliylolherapy Research Vol 3, No I, l()X9 (Page 15-24) 29 ... tiến hành nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết thuốc Đông dược với mục tiêu cụ thể sau : - Chứng minh tác dụng hạ đường huyếl thuốc Đơng dược - Xác định độc lính cấp thuốc - Xác định lác dụng kháng... Xuân nghiên cứu tác dụng hạ đường huyếí lliổ phục linh mơ hình gây tănu đường huyết Streptozocin |6| - Đối với lừng vị thuốc nghiên cứu nhận Ihây liều 2()()mg/kg thể trọng tác dụng hạ đường huyết. .. phương pháp nghiên cứu 15 2.5.1 Nghiên cứu ánh hưởng bàithuốc vị thuốc 15 nồng độ đưịìig huyết chuột cống trắng bình thường 2.5.2 Nghiên cứu ánh hưởng bàithuốc vị thuốc 16 trôn đường huyết chuột