Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae) Nghiên cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử (fructus gardeniae)
Trang 1BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI Nguyên Thị Ngọc Thày NGHIÊN CỨU CHIẾT XUẤT IRIDOID VÀ TÁC DỤNG HẠ DƯỜNG HUYẾT CỦA VỊ THUỐC CHI TỬ (Fructus Gardeniae)
KHOA LUAN TOT NGHIEP DUOC SI KHOA 2003 - 2008 Giáo viên hướng clắn : PGS.TS Phùng Hoà Bình
ThŠ Nguyễn Văn Hân
Nơi thực hiện : Trường đại học Dược Hà Nội
Viện dược liệu - Bộ Y tế
Trang 2Lot eaten on
Fit wine bay tél tug biel vn sid sie tld Haig gia PGS GF Phang
Ha Bink od thiy gide Fad Hguytn Cin Fin dit tin tink (tưởng cớ, ohtd bdo Ping wtéu, khiiche te tad, tao ned dtu kién Hann let che téd troug sudb gud trink đạn tiêm cụt dụ lu cất,
(hươu triết trong cant dn ede lhdg of trong bd nidu Pave đe ad tragéut,
đi ước Cong ngheép dive, Phong GHP di tac Tea keétce tdé cha toe trong
seed queda trénle taree betere BE tiie
Fed eetug wite chet thant cater ove hhoa Pipe lf Stash how - Cin Puve lieu dé gédp bébé troceg gerd teiule thee wglheten tite dung dive li plece ege ade dt t0 cư
Cede carey weve (cute cất giới (Ất cuc đụướt Fé db ladu Tdug oténe hebetobe “ gtip de tide tin fink trewg sudé gad trink fine tig pie heorss theanle bebedas firsine
fel naphetépe reaiy
Mat Hee, ragiy 25 Hetug OF seative 2008
Trang 3MUC LUC
ĐẠT VẤN ĐỀ 1
PHAN 1: TONG QUAN 2
I.I Vị thuốc thỉ tử 4x43E00656568403i0113935i0gk.0i4044 isha eaiienivnvenixae poate 2
SU ae Na TR DNE uekeiieaeei¿»rasoarruasatosssdagesiadix 2
1.123 Đặc điều vị thiết GhÍ ca eaaieeenieoasoeoiriearreenbegraeil 3 1.1.3 Phân bế, trồng trọt, tát đổi cscs snces nei nica nerscecnscsnaneceventnneinnctonaness 3
1,128 CHẾ HIẾN ke iaiaiabassuau Sisco ite 6 hice ed seeae ease ana peer Ora -
Ì,1,5 Thằnh piển hoi NI cciiiiiiiiielaesaasarxeomsol
1.2 Các phương pháp trang phản tích IridoidÏ, -«e cóc Š
1.2.1 Phản ứng định tính Iridoid + 2 iezieirrerrrrrerte 5
8 SNe FN HN osteo ners ere nets ema mene neti aes be a 6
Pa SG NE a ocemnnhit con stan nies nea aaa ea ean cores omaha RC ROR 6 4 8 8 8 8 8 8 9 9
1.3 Phuong phap chiét xuất [ridoid - -.- Lf Phương pháp xác định cấu trúc hóa học c««ecxeeeeeereee
Lá 1H NO NGHI xo c6 c6 c0 si mato
1.4.2 Phố cộng hưởng từ hạt nhân ĂẰ Sex
La TH CHỈ HS a haa lee
DS Dee die sm NGC scarce iii cee oleae 1.5.1 Tác dụng trên hệ tiêu hóa ;G0020251406146)00246184356360L00 3G cac si
1.5.2 Tác dụng trên hệ thần kinh trung ương -
L;5.3., Tác dụng trên hệ tt THACH: ii 0y 60 bct dau bac atacGiassec j
1.5.4 Tác dụng kháng khuẩn, chống viêm LŨ L535, TÁC dunP Hộ THẾ Qaukaideudongrdagbidar da gieciclocDGày2y4233.66 10 1.5.5: TG cae THO Ti HỘI HE sieu dtcoeeiocecctubicicbcooioacdivdtssecotl 10 123.7 Tác tụng KHẨ.:occcsccccccgSebidddc086ã0ai 0304x083 40ã0sgdke 10 Lay TERS HỆ gầy KẾ duacadagtaaddaddadaocdiadiGbiisdkbkiiodsbiosx4tsi34siesiec 10 DF Oe MRE, CHIE sicaiccinsissvscnssnneciineaiinatssianennsesnar caviar ninneisieieiniaiatte 10 bê BỆNNĐNIHGNÔNDGO deiecoeiccecrroeaeoooicceeococooc.T1
LINH De ghe oioidaatkccidioiaseesaesgeosaursE 1
TU HE NỮ N caeeeeseeeaeeaeeeaeeeeoreaseeeeoaceeensacli
BR Coe CI TO 1Ý neearrrrseeseseessee=nsa 12
1.8.4, Ti8u chusin chan oct .csssseesccssececesescesssesssescsssevstessessreeeeesersnees 13
TH TK] TK maddie SERRE S mn
1.8.6 Bénh Dai thao đường trong Y hoe cổ truyền ‘cheek oe aun ire l4
PHẦN 2: ĐỐI TƯƠNG, PHƯƠNG TIÊN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN
CƯU PRA RAS AR STA TETRA HEE HEHE R THREE REET E RARE SHAE EES REET EE HAE RHEE REET SEER EES EERE REE RES E RHEE REE EEE ES ETE SE 16
Trang 4OF ae FR TIED eerie races sta eror oie oe SN nae cn meRT Ree ee ee 16
S0 0 TIẾP Wil skins iia ainacaonanliaiea Mitel mei eiasaaasec 16
An L0 CÁO VÃÍ scat ss essa ss bass cea aes ation ee am aa aca crac aaa 17 li: Ð NN UP DĐ các tung ca ttu005G420156ã0100246ã4040g664x64i8606ix64 42x46 17 E1, (,IẾ HiỂT XIỂỂT TH s.oc2á6 i0 cd66ng tuï gia cGi0va40401u404444402046 17 eh cae NMRA COMMER tac sais cscs sn ik Wi a Raa lnc 17 lo coi Ý THAI: LA TH DNI cụ xccnv2o sgg 22202 642)5626y006l2261466235504665G.140010051664: 06g58 18 1.1.5 THỦ to dynp bạ đường hHUƯẾT.ccccccccciioaaicesaaogosaaaaase 18
PHẦN 3 THỰC NGHIỆM KẾT QUÁ VÀ BÀN LUẬN 2Ú 3.1 Giám đỉnh tên khoa học cáy dành thầnÌ: o ào 5< se 5x5 20
3.2 Nghiên cứu về lúa học .-.òsSsxeceeererresrrrerrsrrre 2I
TL TH R11 d6 xi gjaze 21
tp 6c CIINH CN 2602 6cc6 6i icsdosaicugsxa ee 22 372-3; Prins [io Biri SAG GCMs cassis reece areas 22 RAs Tey reeks Vik MES thai vissicscceiccsscinccnmuananrancunimennamuisis 25 3.2.5 Xác định cấu trúc hóa học tšxl4tdöjgdšuitdedk 28
1.3 Nghiên cứu tác dụng hạ đường ÏLt(YÉT -o< << 30 3.4 Bàn luận tobias (0n 1Á 215181205011 60 1 4664406 010004410160 10540008406 34
KẾT LUẬN YÀ ĐỀ XUẤT 36
Trang 6ĐẶT VẤN ĐỀ
Từ xa xưa, nhân đân ta đã biết sử dụng cảy có để làm thuốc theo kinh nghiệm dân gian Cúc vị thuốc cùng với những bài thuốc được lưu truyền góp phần lớn vào cóng tắc chăm sóc và bảo vệ sức khỏe cho nhân dân Ngày nay, đồng thời với nên kinh tế phát triển, khoa học cũng phát triển và có nhiều thành
tựu đáng kẻ Trước kia cây cỏ dùng làm thuốc chỉ theo kinh nghiệm được truyền lại thì ngày nay đã được dùng dựa trên những kết quả nghiên cứu khoa học
Chỉ tử là vị thuốc được thu hái từ cây đành dành Nó là cây hoang dã đã
được trồng trọt ở một số địa phương, có sức sống mãnh liệt Ở Việt Nam, có một số công trình nghiên cứu chỉ tử theo hướng điều trị chứng ứ mật, vàng da, cẩm máu dưới dạng sắc nước Cần đây, có tác giả cho thấy một thành phần quan trọng là Iridoid với hàm lượng 6 — 7%, hàm lượng lớn nhưng chưa được nghiên
cứu tác dụng trên đường huyết Trên cơ sở đó chúng tôi tiễn hành thực hiện để
tài "“Wghién cứu chiết xuất iridoid và tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc
chi tr (Fructus Gardeniae)” với mục Liêu:
- Chiết xuất lridoid từ vị thuốc chỉ tử
Trang 7Phin 1 TONG QUAN
1.1 Vị thuốc chỉ Lử
Chi tử là quả chín phơi hoặc sảy khö của cây Dành dành (Gardenia jasminoides Ellis) (5) Nếu bóc vỏ trước khi say sẽ được chi tử nhãn [6], [22],
[4, 2001
Cây dành dành tên khoa hoc: Gardenia jasminoides Ellis 1761 Tên khoa học đồng nghĩa: — Œarderra fiorrda L, 1762
Gardenia angustifolia Load 1825
Gardenia augusta (L) Merr 1993 Varneria augusta L 1759 [22]
Quả đành đành © rucns (ardeniae
Cây dành dành còn có tên gọi khác là: Thủy hoàng chí, Mác làng cương
(Tay), Son chi tur [7]
Ho Ca phé ( Rubiaceae) [4, 200], [ 15] [21]
1.1.1 Đặc điểm thực vật
Dành đành là một loại cây nhỏ, thân thẳng nhẫn, cao chừng 1- 2m, phân nhánh nhiễu, thường xanh tốt quanh năm Cành màu nâu nhẫn có khía rãnh dọc [13], [19, 596] Lá mọc đổi hay mọc vòng 3 chiếc 1 [4, 200], thuôn hình trái xoan, đôi khi bầu dục, đài, tù và có mùi nhọn ở đỉnh, hình nêu ở gốc, đài 5- I4cm, rộng 2-7cm, mặt nâu hoặc lục sâm đến hơi đen ở mặt trên Lá kèm to,
mem dau 6m lay ca cành như bẹ
Hoa to mọc đơn độc ở đầu cành, màu tring hodc tring nga, rat thom, cuéng
hoa có 6 cạnh, tròn ở đâu, ông tràng nhẫn, nhị 6 chỉ nhị ngắn, bao phan ta, bau 2 ô, noãn rất nhiều [11], [22, 596]
Trang 8chiều dọc qủa, giữa 2 đường gờ có những mạch chạy dọc khá rõ, phân nhánh
Đỉnh quả lõm có 2- 8 lá dai ton tại, thường bị gẫy cụt Gốc quả hẹp, còn có vết cuống quả, vỏ quả mỏng, giòn, hơi bóng Vỏ quả giữa mầu vàng đục, dày hơn
Vỏ quả trong mau vàng ngà, bóng, rất mỏng, có 2-3 vách ngăn gia [4, 344} Qua nhiéu hat hinh tron, det, XÉP XÍt vào nhau Hạt nhỏ màu vàng cam, nâu đỏ hoặc nâu đen nhạt, màu vỏ hạt có nhiều hạt mịn Bóc vỏ hạt thấy nội nhũ dài như sừng, cây mắm rất nhỏ, có hai lá mằm hình tròn đẹt, rễ mầm thằng đứng
[17,3], [22, 5971
Hình 1.1 Ảnh cáy và hoa cây Dành dành
1.1.2 Đặc điểm vị thuắc chỉ tứ
Chi tứ là quả khô được tách riêng thành hạt( bỏ vỏ) của cây dành dành Hạt
chỉ tử có hình đáng đẹt và nhỏ như hạt ca có màu vàng đẻ, mùi thơm vị đăng [6
150 ]
1.1.3 Phan bd, trong trot, thu hai
- Phản bố:
Chỉ Gardenia Ellis có Khoảng 270 loài, phản bố ở các vùng nhiệt đới và á
Trang 9bồ tập trung ở khu vực Châu Á [21], (22, 597]
Ở Việt Nam hoa đành dành mọc hoang rải rắc ở khắp nơi Những tỉnh có
nhiều dành dành là Hà Nam, Nam Định, Ninh Bình, Hải Hưng, Thanh Hóa, Hà
Bắc, Bình Định, Long An [22, 597], [7, 354] [ L7, 6) - Trồng trọt, thư hái:
Đặc điểm thích nghỉ với rộng rãi nhiều vùng khí hậu và đất đai khác nhau
Vì vậy có thể trồng ở cả miền núi, trung du và đồng bằng
Có thể nhân giêng băng gieo hạt hoặc giâm cành Tuy nhiên phương pháp
gieo hạt ít được phỏ biển vì cây chậm ra hoa [22, 597]
Quả thu hái vào tháng 8- 10 khi quả chín cung cấp màu vàng đõ, hái về ngắt
bỏ cudng, dem phoi hoac say nhe [15, 226], [26] 1.1.4 Chế biến
Tùy theo mục đích chế biển mà Dược điển Việt Nam qui định 3 cách chế biến [5]:
+ Sinh chỉ tử: loại bỏ tạp chất, khi dùng đập vụn
+ Chỉ tử sao vàng: lay dược liệu sạch, sao lửa nhỏ đến màu nâu và lay ra để
nguội
+ Chỉ tử sao xém ( tiêu chỉ tử): lấy dược liệu sạch sao lửa vừa đến khi mặt
ngoài dược liệu vàng xém, mặt bẻ màu thẳm, lay ra đẻ nguội Khi sao xém được liệu dé cháy, có thẻ phun một ít nước, lẫy ra phơi hoặc sấy khô.[4]
Ngoài ra có thẻ sao ton tính (sao cháy đen nhưng chưa thành tro) [L5] 1.1.5 Thanh phan hoa hoe
Cúc công trình nghiên cửu hóa học cho thấy quả dành đành chứa cúc nhóm:
[- glucosyloxy ở vị tri C, vã một nối đôi ứ C¡, C, làm cho chúng có tính chất của
mot enol- ether,
- Cac Iridoid glycosid: gardenesid, gardosid, geniposid, acety| geniposid,
Trang 10Gardenosid là thành phân có tỉ lệ cao và coi là hợn chất chính Dược điển
Trung Quác quy định hàm lượng gardenosid không dưới 1,8 % [30),
- Cúc acid hữu cơ: acid picrocrocinic, acid decafeoyl- Š- 3- hydroxyl- 3-
methyl glutaroyl quinic, acid 3- cafeoyl - 4- sinaposyÌ quinic
- Các sắc tố: ứ- crocin, - crocetin [ 19.598| [4, 226]
- Tinh dau: trong đồ có benzyl acetat, hyđroxylcitronelal và eugenol
Tinh đâu chiết xuất bảng dụng môi chira benzyl acetal, styren acetal, terpineol [22, 598] - Ngoài ra quả đành đành còn có monocosan, f- sitoterol, D- manitol [4, 2001 COOR COOCH, H Rạ—CH; OR, Acid geniposidic: R= Ry = elec R; = OH Geniposice R=CH, Ry = gle R, = OH O Cieninn genubieœxl: 7 R=CH¡ bụ Ry @ gentibiose ee ee R= OH Acid pierocinic
1.2 Cac phuong phap trong phan tích Lridoid
1.2 Phén itng dink tinh Iridoid
Phan img dae trưng của iridoid la phan dng Trim Hill (Trim va Hill 1951) Thuốc thứ Trim Hill gom 10m! CH,COOH + Iml dung dich CuSO, 0.2% va 0.5
Trang 11có Iridoid sẽ xuất hiện màu xanh [4, 195]
Ngoài ra Iridoid còn cho phản ứng màu với một số thuốc thử Terpenoid như: Liebermann Burchat, SbCl, trong CHCI; và với dung dich anisaldehyd trong H;SO, |8, 324]
1.2.2 Sắc ký lắp mảng
- Chuẩn bị mẫu thử và mẫu đổi chiều: bột dược liệu được chiết nóng bảng
MeOH [4, 195], EIOH [§] hoặc EIOH 75% Lac, dich lac duge sir dung lam
dung dịch thử Cũng có thẻ loại tạp dung dịch thứ bằng dung dịch chì acctat trước khi chấm sắc ký Mẫu đổi chiều có thẻ là dung địch gardenosid trong
EtOH , dung dịch jasminoidin trong EtOH hoặc dịch chiết của mẫu chỉ tứ đối chiều [ I7 6]
- Điều kiện sắc ký:
+ Ban mong Silicagel G
+ Dung môi triên khai: có thẻ đùng một tong các hồn hợp dung môi sau [ l5,
6]
e Hé 1: EtOAc - aceton - acid formic — nurée (5:5:1:1) [29]
e Hé 2: CHCI,- MeOH (3:1)
+ Thuốc thứ hiện mẫu: có thê dùng cúc TT sau:
Dung địch acid suÌ furie 5-L0% trong EtOH, ho néng Dung dich p-anisaldehyde trong acid sulfuric, ho nong Dung dich thude thir Trim Hill
Soi UV dưới bước song 254nm
1.2.3, Sac ky cat:
Cột: Chiều dài 30 — 70 cm, đường kính trong là | — 5 cm
Pha tinh thutme li: silicagel, oxyd nhom, polyamit, CaCO,, MgO than hoat
Trang 12Dung cụ hứng phản đoạn: là các ống nghiệm đã được đánh dấu sắn vạch và
đánh số từ l trở đi Hoặc có thể là máy tập hợp tự động là dụng cụ chuyên dùng
để hứng các phân đoạn rửa cột tự động hứng từng phân đoạn riêng theo thể tích hoặc thởi gian chảy đã ấn định |8, 58]
1.3 Phương pháp chiết xuất iridoid
Chiết xuất là đùng đụng mới thích hợp, hòa tan các hoạt chất trong được liệu và tách ra khỏi phần không tan của được liệu
Các yếu tế ảnh hưởng đến quả trình chiết xuất:
-_- Độ mịn của được liệu: Chia nhỏ được liệu làm tăng hiệu suất nhưng đồng
thời cũng làm tăng tỷ lệ tạp chất trong dịch chiết vì vậy tùy thuộc vào bản chất dược liệu, bản chất dung môi và phương pháp chiết mà chia độ mịn dược liệu thích hợp
- Ty lé due liệu và dung môi: Dùng ít dung môi thì không chiết kiết hoạt
chất, dùng nhiều quá dịch chiết chứa nhiều tạp
- pH: Tùy vào tính chất của thành phản trong được liệu mà chuyển sang
dang mudi dé tang độ hòa tan vào dung môi
- Chênh lệch nồng độ trong các lớp khuếch tán: tăng cường khuấy trộn và thay thế các lớp dịch chiết bảng các lớp dung môi mới
Nhiệt độ: làm tầng độ tan, tạo khuếch tấn đối lưu và giảm độ nhớt của
đụng mỗi nhưng đồng thời gây tăng độ tan tạp chất và có thể phản hủy hoạt chất
[2]
Có thể chiết xuất glycoside iridoid hãng EIOH hoặc nước nóng Dược liệu tươi xay với it nước và chiết núng bảng nước (hoặc EIOH) Dược liệu khô tán
Trang 131.4 Phương pháp xác định cầu trúc hóa học
1.4.1 Phú lững ngoai:
Các hợp chất hữu cơ hấp thụ bức xã hồng ngoại ở những tän số từ 10.000 —
100 cm” và biến thành năng lượng của dao động phân tử
Tản sẽ hay độ dài sóng hấp thụ của mỗi chất phụ thuộc vào khối lượng tương đối của các nguyên tử, vào hằng số lực các dày nổi và vào cấu trúc hình học của các nguyên tử [8, 131]
1.4.1 Phố cộng hưởng từ hạt nhân:
Trong những điều kiện thích hợp một chất có thẻ hấp thụ bức xạ điện từ trong vùng tản số vô tuyến điện, ở những tẳn số tùy thuộc vào đặc tính mỗi chất
* Nguyên lý: Tất cä nhân trong phân tử đều mang điện tích Trong một số nhân điện tích này "spin" quanh trục nhan và sự quay điện tích hạt nhân gây ra
hai cực từ dọc theo trục [8, 162-196] 1.4.2 Phổ khối lượng:
Máy khối phổ sử đụng một chùm electron bẵn vào một lượng rất bé chất thứ
( từ t## - mg), phá chúng thành nhiều mảnh ion mang điện dương Các mảnh ion
này nhờ một bộ phận phát hiện và ghi thanh pic với cường độ khác nhau tương ứng với một lượng khỗi của mỗi ion [8, 162 -196]
1.5 Tac dung sinh hoc
1.5.4 Tac dung trên hệ tiêu hóa:
- Tác dụng lợi mật: Dạng chiết bằng côn từ quả, các chất crocin, crocetin và genipin đều làm tăng sự phân tiết mật Thí nghiệm trên thỏ đã thất ông dẫn mật chủ, cho thấy cao côn, cao nước của quả đành dành, muối natri của croein
crocetin đêu có tác dụng ức chế sự gia tăng bilirubin trong máu, cao củn có tác dụng kém hơn so với cao nước.[f, 201 |
- Tác dụng ức chế sự phân tiết dịch vị và hoạt động da dày- ruột:
Trang 14pilocarpin gay nén [22, 599],
- Tác dụng gãy tiêu chảy: Cúc chat gardenosid, geniposid déu cé tac dung
gây tiêu chảy [22, 599], [17]
1.5.2 Tae dung trên hệ thần kinh Irung ương:
- Tac dung an than: gay tran tinh, làm giảm hoạt động tự nhiên của chuột, có
tác dụng hợp đồng với hexoharbital kéo dài thời gian ngủ, nhưng không có tác
dụng kháng co giật do corazol, strychnin và kích thích điện gây nên [4, 201], [22, 396]
- Tác dụng giảm đau: Các hoạt chất genipin, gardenosid và đạng chiết nước
của quá đành đành đẻu có tác dụng giảm đau, giảm một cách rõ rệt số lẫn quan đau của chuột [22, 599], [21]
I.5.3 Tác dung trén hé tim mach:
- Tác dụng hạ áp: Nước sắc quả đành dành và dạng chiết cồn, ding bằng đường uống hoặc tiêm tĩnh mạch đều có tác dụng hạ huyết ip Tac dung ha
huyết áp của dành dành không ảnh hưởng đến tác dụng tăng áp của adrenalin và
phan xa tang áp do kẹp động mạch canh, cũng không tăng cưởng tác dụng hạ ấp của acctylcholin Túc dụng hạ áp của dành đành không phải là do giải phóng
histamin, khong liên quan đến sự truyền dan xung động trong sợi than kinh Tác
dụng của dành đành là ở trung ương, chủ yếu là do tăng cường mức hưng phần của trung khu đổi giao cảm ở hành não [4, 201], (22, 596]
- Tác dụng đổi với tìm: Dịch chiết quả đành dành làm giảm sức co hónp cơ
tim Dịch chiết bằng methanol quả đành đành tiêm tĩnh mạch cho chuột công
trắng, theo dõi qua điện tâm đỏ thấy có dâu hiệu tồn thương cơ tim và dẫn truyền
nhị thất bị phong bẻ [23, 599], [27]
Trang 151.5.4 Tác dụng kháng khuẩn, chẳng viém:
Quả đành dành có tác dụng ức chế sự phát triển của tụ cầu khuẩn vang va
nao mo cau Nước ngắm quả dành đành có tác dụng ức chế một số nằm gây
bệnh ngoài đa Dạng chiết băng ELOH, MeOH từ quả đành dành và gardenosid
có tác dụng chống viêm [4, 201] [22 596] 1.35.3 Tac dung ha nhiet
Dang chiét cén gua dành đành tiêm xoang bụng cho chuột nhất trang sau | giờ xuất hiện tác dụng ha than nhiệt Tác dụng này kéo đài trong nhiều giờ
[4,201], [22, 599]
1.5.6 Tác dụng trên hệ nội tiết
- Tác dụng hạ đường huyết [27]
1.5.7 Tac dung khae:
- Tac dung chong oxy héa [4, 201 ]
- Tic dụng chúng khôi u
- a—crotin đùng để nhuộm thực phẩm, lụa to 1am
1.6 Tính vị, quy kinh
Dành đành có vị đẳng, tính han, vào các kinh: tâm, phé, tam tiêu
1.7 Cong nang, chu trị
“* Củng nững:
Trang 16- Bệnh can đớm thấp nhiệt (viêm gan, viêm túi mật), vàng đa, tiểu tiện ra
mau
- Huyết nhiệt gây ra nôn ra máu, chảy máu cam, đai tiểu tiện ra huyết Chỉ tử chữa sốt bồn chồn khó ngủ, vàng da huyết nhiệt, tiểu tiện khó khăn,
mắt đỏ đau, miệng khát
Chi tir sao den có tác dụng chỉ huyết lương huyết dùng chữa chảy máu cam
non ra mau, dai ra mau, bang lau
Liễu dùng: ngày dùng 6 — I2g dưới dạng nước sắc hoặc hoàn tán Dùng ngoài, dành đành giã nát đp lên chỗ sưng đau, chữa bong gân, vết thương
1.8 Bệnh Đái tháo đường
1.84 Dinh aghia
Đái tháo đường là một bệnh mạn tinh gây ra bởi sự thiểu hụt tương đổi hoặc tuyết đối insulin, dân đến các rối loạn chuyển hóa hydratcarbon Bệnh được đặc trưng bởi tình trang tăng đường huyết mạn tính và các rối loạn chuyển hóa [3]
1.8.2 Dich te benh
Theo thông báo của Hiệp hội ‡YFÐ quốc tế (IDF) |I |:
Số người mắc ĐT trên thế giới các năm được thống kẽ ở hình I l tr người
1884 1885 zuon 2010
Hinh 1.2 Biéu dé biéu thi sO người mắc bệnh FXED qua cậc nảm
Trang 17Ở Việt Nam theo thống kẻ năm 2002 — 2003 số người mắc bệnh [L] thể hiện
ởhình 1.2 Lý lệ %
db ven bién đồ thị và khu
CN
núi cao trurw đu
Hình 1.3 Biểu đổ biểu thị tỷ lệ người mắc bệnh ĐI nước ta năm 2002 -2003 Tỷ lệ mắc cả nước năm 2002 — 2003 được thống kẻ là 2.7%, chủ yếu là là lứa tuổi 30 - 64 chiếm 10.5% 1.8.3 Cơ chế bệnh sinh > ĐLĐ tvn l:
- — Một bệnh tự miền: do sự thiếu hụt insulin do té bao của tuyến tụy bị tấn thương lìm ngừng tiết Insulin
- Hé gen nhay cam: do co khang nguyén HLA DR3 va HLA DR4
- YẾU LỔ mỗi Irường
> ĐT typ 2 [3]:
Do su khiém khuyét trong su tiét insulin gây rối loạn dụng nạp Insulin - Tăng tính kháng insulin do giảm số lượng thụ thể insulin hoặc giảm khả
nang két dinh insulin vao thu thé - — Yếu tð di truyền
- Corthé héo phi
Trang 181.84 Tiéu chuan chan doan{18]
Trang 19* Nhan xét:
Bệnh ĐT trên thế giới cũng như ở Việt Nam đang có chiều hướng gia tăng, Trong YHCT đã có rất nhiều vị thuốc được dùng để điều trị bệnh này như là: thể
phục linh, mướp đăng, cát cánh, hoàng kỳ, huyền sâm sinh địa, mạch nha, sẵn dây, sơn thù [L4]
Trang 20PHAN 2, NGUYEN LIEU, PHUONG TIEN
VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CUU 2.1 Nguyên liệu
Vị thuốc chỉ tử là hạt của quả cây dành dành được thu hái ở huyện Hải Hậu, tinh Nam Dinh vào tháng 10 năm 2005, phơi khô, tách bỏ vẻ thu lấy hạt, phơi khô
1.2 Phương tiền 2.2.1 Héa chat
— Huá chất tiêu chuẩn phản tích: acid acetic, acid formic, déng sulfat, aceton, acid chloroform đặc
— Dung môi: aceton, cthanol 90%, methanol n-huthanol ethyl acetat, chloroform, dichloro methan, ether đầu hỏa loại tĩnh khiết phân tích
2.2.2 Thiét bi
May
1 Can phân tích 2_ Thiết hị chiết Shoxlet
3 Kit định lượng glucose do hãng Human cung cấp, máy định lượng
glucose ban tu déng Scout_Italia
4 May cat quay Bachi Water bathn B 480 5 May do phố cộng hưởng từ Broker 5300MHz 6 May do phố khối lượng 1 100 Series LC/ MSD Trap 7 May do dé néng chay Mettler Toledo
8 May do nang suat quay cuc A.Kruss
Dung cu
| Nói đun cách thuy
3 Tủ säy Memmert, Shellab có chương trình điều chính nhiệt độ
Trang 21tao Bình sắc ký
4 — Cội chạy sắc ký
5 Mao quản, bình nón nút mãi, giấy lọc
6 Silicagel, Hản móng silicagel GEF›;, (Merck - Đức)
2.2.3 Súc vật
- Chuột nhất trắng, có trọng lượng từ 25g — 304, cả chuột đực và cái, đạt tiêu
chuẩn thí nghiệm, do Viên Vệ sinh địch tẻ trung ương cung cấp
- Thức ãn tổng hợp nuôi chuột đo Viện Vệ sinh dịch tế trung ương cung cấp 2.3 Phương pháp 2.3.1 Chiết xuất Iridoid % Nguyên tắc: > Dưa trên khả năng hòa tan Iridoid trong ELOH, dùng ELOH làm dung môi chiết xuất
> Loai chat béo trong hat bang ether dau hoa
» Loai cdc tap chat khac bang hén hep dung méi EtOAc: aceton
2.1.3 Dinh tính
> Định tính bằng thuốc thử: Thuốc thử Trim HiIL gồm l0ml CH;COOH +
Iml dung dich CuSO, 0.2% va 0.5 ml HCI dic Mét ml dung dich thử + I- 2 giọt
thudée thu Trim Hill, đun nhẹ nếu có Iridoid sẽ xuất hiện màu xanh
z Định tính bảng SKLM:
-Mẫu nghiên cứu: + Phân đoạn thu từ sắc ký cột
+ Căn thu được sau chiết xuấ hòa tan trong MeOH - Dung môi là một trong các hệ sau:
Hé 1: Ethylacetat—Aceton—Acid fonnic- Nước (5:5: :Ì )
Hé 2: Cloroform-Methanol (3:1)
- Hiện mau: quan sat cac vet dudi anh sang thudng, dnh sang UV o bude sdag A
Trang 223.3.1 Phan lap Iridoid: > Phan lap iridoid bang sac ky cot:
Pha tinh 1a silicagel 70 — 200 mesh
Pha động là 1 trong 2 hỗn hợp dung mỗi
Dung cụ hứng phân đoạn là các ống nghiệm 20ml với có vạch đong thể tích Šml và bát đầu đánh số từ l > Tay mau va két tinh > Xúc định cấu trúc hóa học: - — Xúc định điểm nóng chảy - — Xác định năng suất quay cực riêng - — Phố hỏng ngoại - — Phổ cộng hưởng từ H'- NMR, C”-NMR - Phổ khối 2.3.4 — Thử tác dụng hạ đường huyết
* Nguyên tắc của phương phần: Gây tang glucose huyết bảng phương pháp nội sinh: tiêm dung dich Alloxan monohydrate theo đường tĩnh mạch đuôi chuột
Alloxan có tác dụng phá hủy tế bào beta của tuyến tuy, tế bào beta cua tuyển tuy
là cơ quan sản sinh insulin để cản bằng nồng độ glucose trong máu Khi nông
độ insulin trong máu không đủ sẽ gây trạng thái tăng #lucose trong máu [23] # Lấy máu chuột định lượng GH1 trước khi gây tăng GH va ngay thi 8 sau khi gây ting glucose huyét
s+ Xử lý kết qua thực nghiệm:
> Chỉ tiêu quan sắt:
Nóng độ ølucose huyết thanh chuột của lô chứng vá lô thứ thuộc trước và sau khi gãy tăng đường huyết
z Chỉ tiêu đánh giá:
Trang 23- Thude khéng có tác dụng khi P > 0.05 > Phương pháp xử lý số liệu:
Kết quả thực nghiệm được xử lý thống kẻ theo phương pháp thống kẻ sinh
học Test - T - Student với sự hỗ trợ của chương trình Microsoft Excel [9], [12]
Trang 24PHAN 3 THUC NGHIEM, KET QUA VA BAN LUAN 3.1 Giám định tên khoa học cây đành đành
Trên cơ sở phân tích đặc điểm hình thái mắu cây đành dành thu hái ở xã Hải Phong huyện Hải Hậu, tỉnh Nam Định, giám định viên Ngô Văn Trại (Viện Dược liệu - Bộ Y tế ) đã xác định mẫu cây dành đảnh có tên khoa học là:
Gardenia augusta (L.) Merr., thuộc ho Ca phé — Rubiaceae Tên khoa học đồng nghĩa là:
- G., jasminoides J Ellis 1761
Hình 3.1 Anh canh cây dành dành (ardenia Jasminoldes Ellis
( Trích nguồn tài liệu [I7] )
Trang 25Đặc điểm vị thuấc chỉ tử:
Hạt chỉ tử mỏng nhỏ đẹt như hạt ớt, mặt ngoài màu vàng cam, nâu đỏ hoặc nâu đen, mặt vỏ hạt có rất nhiều hạt mịn Nhiều hạt xếp xít nhau thành một khối hình cầu hay hình trứng Vị hơi chua và đẳng
Hình 3.2 Ảnh vị thuốc chỉ tử (Fructus Gardeta) 3.2 Nghiên cứu về hóa học
3.3.1 Chiết xuáit Ïridoid:
- Cân 200z vị thuốc chỉ tử Chiết bàng dung cu Shoxlet, dung môi là ethanol
96% trong 8 giờ Thu hồi EIOH, thu được 30mldịch chiết
- Lac véi ether đầu hỏa ( mỗi lần 30ml ether đầu hỏa) để loại chất béo Thu được sản phim là cao lỗng, chứa iridoid và một số tạp chất khác
- Loại chất màu: cao lỏng chiết bằng EtOAc - aceton (50: 50) 3 lần mỗi lần 20ml
- Cất loại dung môi dưới ấp suất giảm thu được 7.41 38g cắn (TR])
Trang 261.2.2 Đỉnh tính
+ Định tính bằng thuốc thử;
Lay 2g dược liệu, thém 5ml nước, đun cách thủy 3 phút, lọc, được 2ml dịch Them 3 giot TT Trim Hill, dun néng, xudt hién mau xanh tim
+ Dinh tinh bang SKLM:
- Mau nghién ettu: Hoda tan 0.1g IRI trong MeOH - Chat hap phu: silicagel GF,.,
- Dung modi: EtOAc : aceton: acid formic: nước(5: 5: 1: 1)
- Hién mau: soi UV( 4 = 254nm), phun TT Trim Hill (say bản mỏng trong
sấy 11C 3phúU)
Kết quả: trình bày @ bang 3.3 va hinh 3.1
3.3.1 Phán lâp bằng sắc ký cúi
% Miẫu nghiến cứu:
Hòa tan cắn 6.5g LRI trong 5ml MeOH
# Triển khai sắc ký:
s Cội sắc ký thủy tỉnh đài 25cm, đường kính 3cm
øœ Chat hap phu : 80g hat silicagel 70 — 200 mesh (75 — 210 tím) được hoạt héa & 110°C trong 1 gid
® Dung môi: hệ CHC]:: MeOH (5:1)
> Nhỏi cột: Vào cột bằng dung mỗi:
Cột được chuẩn bị và lắp trên giá Lắc và trộn đều bột silicagel với dung môi thành một hỗn dịch Mở vời rốt vào cột, cho dung môi chảy và để chất hấp phụ lắng tự nhiên xuống đáy cột Khi dung môi chảy gần hết trong cội, tiếp tục rồi hôn dịch chất hấp phụ vào cặt Dùng dung môi hứng được rót lên cột và cho chảy liên tục I giờ cho đến khi cột hoàn toàn ổn định, đặt miếng giấy lọc lên trên mặt lớp silicagel
> Đưa dich IRI lén cot
Trang 27dưới sử dụng các ống nghiệm 20ml đã kẻ sắn vạch 5ml để hứng lấy các phan đoạn Cứ cách 3 ống lấy địch, chấm sac ky
Kiểm tra các phản đoạn:
Äfáu nghiên cứa: - Dich trong methanol của IRT - Các phân đoạn sắc ký cột Phương pháp: Sắc ký lớp mỏng
- Chất hấp phụ: Silicagel GF;
- Dung moi: hé ethylacetat: aceton: acid formic: nue (5: 5: 1: 1)
Soi dưới ánh đèn tử ngoại UV 254nm và hiện màu bằng thudéec thir Trim- Hill
(sấy nồng trong tủ sấy 110°C trong 3phtit)
- Két qua:
Kết quả được trình bay & bang 3.2., 3.3 va hinh 3.1
Bang 3.1 Ket gud sde ky ecte plidn doan tach bằng cột silicagel 2 Hệ số 100.R, I 4 82 7 82 10 82 13 lỗ 19
Ống thứ 4 đến ống thứ 10: trên sắc ký đồ xuất hiện một vết có 100.R, = 82 Gop tat ca cdc dich thu duoc ti ống 3 đến ống | 1 vào cốc có mỏ được 90ml dịch dịch thu được đem cất quay thu hồi dung môi được cắn,có khối lượng 4.7523g
Trang 29® Dịch Gar l: xuất hiện ] vết màu xanh > Soi dudi dtn UV :
® Dịch ITP: xuấi hiện 4 vết trong đó có vết trên cùng màu nau sắm e Dịch Gar_l: xuất hiện | vét mau nau sam
3.2.4 Tẩy màu và kết tỉnh
Can thé duce hoa tan trong methanol, dun nóng đến 60C, thêm 0.5g than hoạt và duy trì ở nhiệt độ 60°C trong 25phút Lọc, rửa than 2 lần bằng methanol ( mdi lin 30ml methanol đã dun nóng đến 60C)
Gộn dịch lọc và dịch rửa, cất thu hồi methanel dưới áp suất giảm đến khi còn 5ml, để kết tỉnh ở nhiệt độ lạnh trong một tuần thu được 2.6471g tình thể
(CGar 2)
> Xác định nhiệt độ nóng chảy của Gar_ 2:
- Lầm khan mẫu bằng bình hút ẩm
- Cho mau vào mao quan - — Đo bằng máy do độ nóng chảy Kết quả thể hiện ở bảng 3.3.: Bảng 3.3 Nhiệt độ nóng chảy của Gar 2 Nhiệt độ nông chảy Lan | 117.5 - 120 %C Lần 2 18-07% Lần 3 117,9 - 119.7°C Trung bình | 117.8—120.1%C
> Xúc định nãng suất quay cực của Ciar_2
- Mẫu đo: Pha lần lượt 10ml các dung dịch Gar_2 trong methanolcó nồng độ
2%, 4%, 6% vào bình định mức
Trang 31Hat - 200g hat - chiết shoxlet, dung mỗi MeOH Dịch chiết 30ml - lac voi ether dầu hỏa Dịch chiết đã loại chất béo - cất dưới ấp suất giảm Gar_2 | 2.54712 hết EtOH - chiết bằng hồn hợp EtOAc : aceton Han fet IRI 741382 - sắc ký cột Gar_| 4.75232
- tẩy màu bằng than hoạt
- kết tinh lại bang MeOH
Trang 323.2.7, Xác dịnh cấu trúc hóa hục
s* Phố hồng ngoai IR: Có các đải hấp thụ ở: Hấp thụ 3387.0 cmr! là đao động của nhóm — OH
Dải hấp thụ ở 1712.0 và 1638.1 em Í là đao động của nhóm >C=O
Cac dai hap thy 1381.3, 1289.2, 1159.2, 1075.5 cm’ 1A dao dong cla nhém —C-OH Thé hién & phu luc | * Pho céng hưởng từ: Do phd H'- NMR, C'’? —- NMR (500 MHz,D,0) thu được kết quả được trình bay bang 3.5, 3.6 Bang 3.5, Phd fH! — NMR Gar_2 so véti phd chudn Gardenosid
VỊ trí Số lượng Phổ của Gar_2 Phổ
Trang 33Bảng 3.6 Phổ C” - NMR Gar 2 xo với phổ chuẩn (ardenosid
Viti , Số lượng Phổ Gar_2 Phổ
Carbon | Carbon Gardenosid C, | 97.5 97.2 Cụ l 09.2 98.9 C ] 73.1 72.8 Cc, ] 76.6 76.3 Cc, 1 152,9 152.7 C, I 112.1 111.6 Cy ] 69.9 69.5 Cy 1 34.5 34.3 Cy 1 76.0 75.7 C, 1 61.0 00.6 C l 38.4 38.1 CG I 129.5 129.1 C, I 141.7 141.4 Cy I 46.2 45.7 Cw l 60.1 59.8 Cụ 1 170.6 170.2 Cy 1 52.2 51.9
Nhân xét: Phố công hưởng từ của Gar 2 tương đương với phổ cộng hưởng từ
của chất chuẩn Gardenosid
** Phổ khái lượng:
Phổ Natri [M + Na]* có nguyên từ khối là 427, vậy Gar_2 có nguyên tử khối
là: 404
Trong khi đó Gardenosid có công thức phân tử là C,;H,„O,¡ với M=404.37
Trang 343.3 Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết
** Chuẩn bị mẫu thử :
Mẫu nghiên cứu:
>M, là cao nước của vị thuốc chỉ tử: cân khoảng 300g chỉ tử, đếm sao vàng
Sắc với nước 3 lần( mỗi lần LI nước) Dịch thu được đem cô đến khi thu được cao
với tỷ lệ 2: 1 ( khoảng 150 ml ) Liều uống trên người : 7,5 mÌ dung dich 2:1/
người/ngày Liễu thử ngoại suy trên chuột nhất trắng là: 0,03 ml dung dịch 2:L/ 20g chuột (pha thuốc loãng 10 lắn dung dịch 2:1 và cho uống 0.3 mi/ 20g chuột
>M, là dịch nước của LRI: Lãy Ig IRI hòa tan trong 2ml H;O Liều uống trên người là 2ml/người/ngày Liều thử trên chuột nhất trắng là : 0,4ml/ kg/ ngày ( pha loãng 40 lần và cho uống 0,32 ml/ 20g chudt)
s* Tiển hành:
+ Ngày thứ nhất: Lấy máu nh mạch đuôi chuột (chuột đã được nhịn đói trư- đc 12h thí nghiệm), định lượng glucose trong huyết thanh, loại bỏ những chuột cố glucose huyết ban đầu quá cao hoặc quả thấp
+ Ngày thứ hai: Chia chuột thành 2 lỏ, 1 lỗ chứng va 1 lô thử thuốc, chia sao cho 3 lô có trị số GH ban đầu tương đương nhau
z Gây tăng GH chú chuột ở cả 3 lõ bằng cách tiêm dung dich Alloxan
monohydrad theo đường tiêm tĩnh mạch đuôi chuột, với liều 60mng/ kg chuột
Các lỏ thử thuốc được uống liên tục trong 8 ngày và lô chứng uống nước với cùng thể tích và số ngày của lõ thử thuốc Mỗi ngày uống l lần vào buổi
sáng
+ Ngày thứ chín: Sau 1 giờ uống thuốc của ngày cuối cùng, lấy máu chuột định lượng glucose huyết ( chuột đã được nhịn đói L2 giờ trước khi thí nghiệm) Tính mức độ tăng GH của từng con sau khi gây tăng với trước khi gây tang
sh Keét qua:
>» Mau M, thé hién & bang 3.7., 3.8
Trang 38mg% Bi lô chứng, Ole thir
cao nude dich IRI
Hinh 3.5, Biéu dé biểu thị tỷ lệ tăng (%6) GH của lã chứng và là thử thuốc
cla cao nite va dich [RI
3.4 BAN LUAN
3.4.1 Tên khoa học cây dành dành
Mẫu nghiên cứu được Giám định viên Ngé vin Trại- Viện Dược liệu đã xác định , so với mẫu lưu ở Viện Dược liệu, Tên khoa học của cây 14 Gardenia augusta (L.) Merr, déng nghia voi Gardenia jasminoides J Ellis, họ Cà phê Rubiaceac
3.4.2 Chiét xudt Iridoid tr chi tit
Gar_2 có các đạc điểm trùng lặp với Gardenosid:
- —_ Điểm chảy là: tP„„„ Gar_2 = 117.8 — 120.1 °C Ứ¿¿„ pardenosid = IIR— 121°C [31]
Năng suất quay cực: [ơ]p Gar 2 = - 100.6
[a], gardenosid = - 100.8 [31]
Trang 39- _ Khối lượng phân tử của Giar 2 (404) tương đương với khối lượng phân tử
cla Gardenoid (404.31)
Vậy Gar_2 thu được chính là Gardenoid
3.4.1 Thủ tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chỉ tử
Về tác dụng hạ đường huyết đã có một số tài liệu để cập đến nhưng chưa có một nghiên cứu nào được tiến hành ở Việt Nam Khóa luận này đã tiến hãnh thử tác dụng hạ đường huyết trên chuột nhất trắng Kết quả cho thấy rang ca cao chi tử và IRI chiết xuất được đều có tắc dụng hạ đường huyết Kết quả thực nghiệm phù hợp với kết quả của mội số tác giả đã nghiên cứu
IRI chứa chủ yếu là Iridoid Tác dụng của IRI manh hon cao long chỉ tử đo tỷ lệ phần trăm tăng đường huyết củ [RI thấp hơn sơ với cao lỏng chỉ tử
Tác dụng hạ glucose huyết nằm trong phan đoạn IRI Nếu sử dụng điều trị và chiết xuất theo quy trình (mục 3.2.L.) sẽ giảm khối lượng sử dụng
Như vậy đảy là bước đầu của việc nghiên cứu tác dụng này và là cơ sở cho những nghiên cứu sâu hơn sau này về tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chi tử
Trang 40KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT
L Kết luận
Sau quá trình làm thực nghiệm, chúng tôi đã thu được những kết quả như sau: 1 Chiết xuất lridoid:
Phân lập được Gardenosid từ vị thuốc chỉ tử được chứng mình bằng:
- — Điểm chảy: 11T.8°C- 120.1°C
Năng suất quay cực: -I00.6
- — Phổ hồng ngoại, phố cộng hưởng từ, phố khối của Gar_2 tương ứng với phố chuẩn của Gardenosid đã dược công bố trong tài liệu [30], [31]
3 Thử tác dụng hạ đường huyết của vị thuốc chỉ tử trên mỏ hình sử đụng phương pháp nội sinh dùng AHoxan phá tế bào beta đảo tụy và sơ bộ kết luận:
- Cao nước chỉ tử (2: l) với liều 0.03 ml / 20g chuột ( 1.5 ml / kg chuột) có tác dụng làm giảm 37.3% nồng độ glucose / huyết thanh của chuột số với lô đối chứng
- Mẫu [RI khi cho chuột nhất uống với liều 0.4 ml/ kg thể trọng chuột có tác dụng làm giảm 46.93% nồng độ glucose/ huyết thanh của chuột so với lô chứng
2, Dé xuat
- Nghiên cứu tiếp để én định, lựa chọn phương pháp chiết xuất gardenosid
hiệu suat cao,
- Iridoid trang chỉ tử là một nguồn nguyên liệu nhong phú ngoài tác dung ha đường huyết còn có tác dụng hạ cholesterol mau Day là nguồn nguyên liệu quý
hiểm để điều trị một số chứng bệnh rối loạn chuyển hóa Vì vậy chúng tỏi để
nghị tiếp tục nghiên cứu các tác dụng sinh học Tiến tới ứng dụng trên lâm sàng