Đề tài được thực hiện với mục tiêu nhằm khảo sát mức độ nhiễm nấm mốc trong không khí ở phòng làm việc không dùng máy lạnh của trường học tại quận Bình Thạnh Thành phố Hồ Chí Minh. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết của đề tài nghiên cứu này.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 BÀN LUẬN - KẾT LUẬN Chúng chọn quercetin chất đối chiếu theo số tài liệu, hợp chất có mặt nhiều nhóm flavonoid loài Crinum Mẫu thử triển khai với kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu cao chứng minh diện hợp chất dịch chiết TNHC Mẫu trắng sử dụng qui trình khác biệt: mẫu trắng có thuốc thử AlCl3 mẫu trắng khơng có tác nhân giúp qui trình có tính chọn lọc Qui trình khảo sát tỉ lệ thuốc thử để chọn tỉ lệ phù hợp nhất: phức tạo thành suốt, đạt yêu cầu định lượng quang phổ Uv-Vis Qui trình đạt yêu cầu thẩm định, kết nằm giới hạn cho phép Hàm lượng flavonoid tồn phần TNHC thu hái Bình Định cao số tỉnh/thành phố đem so sánh Lá thu hái vào tháng có hàm lượng flavonoid toàn phần cao thu hái tháng tháng 94 Đề tài xây dựng thẩm định qui trình định lượng flavonoid tồn phần TNHC tính theo quercetin quang phổ UV – Vis góp phần vào cơng tác kiểm tra nhanh chất lượng nguồn nguyên liệu đầu vào, triển khai vào thực tế sản xuất xí nghiệp dược phẩm nước TÀI LIỆU THAM KHẢO Chang C.C., Yang M.H., Wen H.M., Chern J.C., “Estimation of Total Flavonoid Content in Propolis by Two Complementary Colorimetric Methods” (2002), Jounal of Food and Drug Analysis, Vol.10, No.3, pp 178 – 182 Mai Đình Trị, Nguyễn Công Hào (2005), “Phenylpropanoid flavonol glycosides cô lập từ tươi Trinh nữ hoàng cung (Crinum latifolium L.”, Tạp chí hóa học, (34), tr 8–10 Nguyễn Hải Nam, Nguyễn Tiến Vững (2006), “Phân lập xác định cấu trúc hai flavonoid từ Crinum latifolium L.”, Tạp chí dược học, (1), trang 7–8 Nguyen Thanh Sy, Nguyen Huu Lac Thuy, Vo Thi Bach Hue (2009) “Determination of total phenolic compounds from Crinum latifolium L leaves by folin-ciocaltue method” Proceding of the 6th, Indochina conference on pharmaceutical sciences, pp 198 - 202 Renata J.G., Jadranka V., Dario K., Sanda V.K (2007), “Flavonoid Content Assay: Prevalidation and Application on Plantago L Species”, Acta Chim Slov., 54, pp 397 – 406 Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học KHẢO SÁT MỨC ĐỘ NHIỄM NẤM MỐC TRONG KHƠNG KHÍ Ở PHỊNG LÀM VIỆC KHÔNG DÙNG MÁY LẠNH CỦA TRƯỜNG HỌC TẠI QUẬN BÌNH THẠNH-THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Đỗ Thị Phương Xuân*, Trần Thị Hạnh Tiên**, Lê Thị Ngọc Huệ* TÓM TẮT Mở đầu: Nấm mốc nguyên nhân gây nhiễm khơng khí Với tác hại lớn nấm mốc, nước có quy định giới hạn mức độ nhiễm nấm khơng khí bên nhà, nhiên nước ta chưa có quy định Trong đó, khí hậu Việt Nam nóng ẩm điều kiện thích hợp cho nấm mốc phát triển Thật vậy, bệnh nấm ngày gia tăng, bệnh đường hô hấp, mắt, tai mũi họng…Bệnh nấm đặc biệt xảy người suy giảm miễn dịch Con người môi trường làm việc học tập nhiều giờ, thời gian tiếp xúc mơi trường nhiễm dài, có nguy nấm mốc chắn xảy Mục tiêu: Khảo sát mức độ nhiễm nấm mốc phòng làm việc không dùng máy lạnh trường học định danh nấm nhằm phát loại nấm mốc gây bệnh cho người Phương pháp: Lấy mẫu nấm máy Mas 100, định danh phương pháp cổ điển dựa theo màu sắc khúm nấm cấu trúc nấm kính hiển vi Kết quả: Mức độ nhiễm nấm 10 phòng khơng máy lạnh 1397 – 1777 CFU/m3 khơng khí Cả 10 phòng khảo sát nhiễm vi nấm thuộc chi Penicillium, Aspergillus, Cladosporium nấm sợi màu với tỉ lệ cao nấm khác với mức độ nhiễm loại nấm > 50 CFU/m3 khơng khí Đa số nấm mốc phát nấm gây bệnh cho người Kết luận: Tất phòng khảo sát nhiễm nấm mốc với mức độ cao, nguy ảnh hưởng đến sức khoẻ người Do cần phải có biện pháp loại trừ nấm mốc dọn vệ sinh thường xuyên, giảm độ ẩm phòng Từ khố: Mức độ nhiễm nấm mốc, phòng khơng dùng máy lạnh, bệnh nhân suy giảm miễn dịch ABSTRACT RESEARCH ON THE AIR POLLUTED MOULDS LEVEL IN NON AIR-CONDITIONED SCHOOL OFFICES IN BINH THANH DISTRICT, HCM CITY Do Thi Phuong Xuan, Tran Thi Hanh Tien, Le Thi Ngoc Hue * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 15 - Supplement of No - 2011: 95 - 100 Background: The mould is one of the reasons causing air pollution The moulds are very harmful to health, so many countries have proposed limiting the level of indoor air pollution, however there is no such regulation in our country The climate in Viet Nam is hot and humid, that is a good condition for development of the moulds Nowadays, diseases caused by the moulds increasing, these are respiratory, otorhinolaryngology diseases…, especially on the immune deficiency patients Man study and work there all day, they contact polluted environment for a long time, so moulds can cause great harm to their health Objectives: Research on the polluted mould level in 10 non air-conditioned school offices and identify the moulds to discover harmful moulds *Bộ môn Vi Ký Sinh - Khoa Dược - ĐHYD Tp Hồ Chí Minh **Khoa Công nghệ Sinh học - Trường Đại học Mở Tp.HCM Tác giả liên lạc: ThS Lê Thị Ngọc Huệ ĐT: 0906394895 Chuyên Đề Dược Khoa Email: ngochue_l@yahoo.com 95 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Method: Research on fungal contamination in offices by using Mas 100 for sampling and identifying the moulds by following the classical method which is based primarily on colony color and mould morphology Results: The polluted moulds levels of the 10 non air-conditioned offices were about 1397 – 1777 CFU in air cubic metre All of ten offices were infected by the genera such as Penicillium, Aspergillus, Cladosporium and the group of dematiaceous fungi whose proportion was higher than the other, and a single fungal species was more than 50 CFU/m3 air The majority of moulds discovered are harmful ones which can cause diseases Conclusion: All of studied offices have been polluted the moulds at the high level, that can be harmful to human health So, these places need the method to reduce the moulds such as regular clearing offices, reducing humidity Keywords: The polluted moulds level, non air-conditioned offices, immune deficiency patient có tình hình bệnh đường hơ hấp gia tăng ĐẶTVẤN ĐỀ Ngồi ra, cơng trình vừa qua nhóm Tình hình nhễm khơng khí ngày nghiên cứu khảo sát mức độ nhiễm trầm trọng bệnh nấm ngày gia tăng nấm phòng làm việc dùng máy lạnh với thời đại Nấm mốc thường gây kết cao từ 200 – 530 CFU/m3 khơng khí bệnh dị ứng, hen suyễn, viêm mắt, tai, Do đề tài thực với mục tiêu: mũi, họng, hô hấp, đau đầu, đau khớp, ảnh - Khảo sát mức độ nhiễm nấm mốc hưởng hoạt động thần kinh trung ương, giảm khơng khí 10 phòng làm việc không dùng sức đề kháng…Bệnh nấm thường xảy người suy giảm miễn dịch: đặc biệt máy lạnh trường học người bệnh AIDS hay người bệnh mãn tính - Định danh chi nấm nhằm phát nấm lao, tiểu đường, sốt rét, …hay người dùng mốc độc gây nguy hại cho sức khỏe người thuốc corticoid kéo dài…và bệnh nấm gặp ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU bệnh nhân tình trạng bệnh nặng Đối tượng nghiên cứu khoa phòng cấy ghép quan(10) 10 phòng làm việc không dùng máy lạnh Cộng đồng nhà khoa học quốc tế lo trường học quận Bình Thạnh, thành phố lắng vấn đề nhiễm khơng khí Hồ Chí Minh (thư viện, phòng y tế, văn phòng mơi trường khép kín Những nơi quan tâm nhiều khu vực mà đoàn, tài vụ, giáo vụ…) khơng phòng người thời gian dài nhà ở, trường học dạy có nhiều học viên nơi làm việc Nhiệt độ độ ẩm 10 phòng khảo sát Do tác hại trầm trọng nấm mốc, nước giới đa số có quy định mức độ nhiễm nấm mốc bên nhà Tuy nhiên Việt Nam có quy định vi khuẩn Trong nước ta có khí hậu nóng ẩm thích hợp cho nấm mốc phát triển, mơi trường khơng khí với mức độ ô nhiễm cao Theo Việtnamnet năm 2007, báo cáo tình hình khu Pháp Vân Hà Nội với mức độ nhiễm nấm mốc 449 CFU/m3 khơng khí vào mùa lạnh 532 CFU/m3 khơng khí vào mùa nóng Khu vực 96 tóm tắt bảng sau Bảng Nhiệt độ độ ẩm tương đối 10 phòng khảo sát khơng dùng máy lạnh Phòng P1 P2 P3 P4 P5 Độ ẩm Nhiệt Nhiệt độ tương đối Phòng độ 0 ( C) (%) ( C) 28 – 29 65,5 – 70 P6 30 28 – 29 65 – 70 P7 29 – 30 30 64 – 68 P8 29 – 30 29 – 30 65 – 67 P9 30 30 63,5 – 67 P10 29 – 30 Độ ẩm tương đối (%) 63,5 – 65,5 57 – 66 64,5 – 65,5 63,5 – 65 62,5 – 66,5 Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Phương pháp lấy mẫu(12) Nghiên cứu Y học Phương pháp định danh(5,6,7) Dùng máy Mas 100, đĩa thạch Sabouraud Lấy mẫu buổi sáng, ngày liên tiếp Vận hành máy với tốc độ 50 L/phút, vị trí: góc phòng phòng Đem đĩa thạch ủ nhiệt độ 25 C ngày Đếm tổng số khúm nấm đĩa thạch Cách tính kết CFU/m3 (CFU: Colony Forming Unit) B = A/15 A: tổng số khúm nấm góc phòng ngày B: trung bình số khúm nấm đĩa phòng D = C x 20 C: tổng số khúm nấm phòng tra từ B theo bảng quy định tài liệu máy Mas 100 Định danh theo phương pháp cổ điển dựa vào hình dạng, màu sắc khúm nấm đặc điểm hình thái cấu trúc nấm mốc xem kính hiển vi Định danh sơ để xác định chi nấm Nếu nấm chưa định danh hay nấm khơng có bào tử, tham khảo tài liệu để chọn mơi trường thích hợp cho nấm PDA (Potato Dextrose Agar), MEA (Malt Extract Agar), CYA (Czapek Yeast extract Agar), CZ (Czapek-Dox), ….hay làm thêm số phản ứng sinh hoá cấy vào mơi trường đặc biệt thạch máu theo tính đặc thù số nấm để xác định chi nấm Sau cấy điểm (màu sắc khúm nấm) cấy lam (đặc điểm hình thái cấu trúc nấm) để đo đạc kích thước so sánh với tài liệu KẾT QUẢ Kết khảo sát mức độ nhiễm nấm mốc tóm tắt bảng biểu đồ D: CFU/m3 khơng khí Tỷ lệ % Cu rv u Ch lari a ry so ni Fu lia sa riu m M u Rh c izo or mu co Sy R r n c h iz op ep u la s s Pa tr ec um il o m Pe yce s ni c Rh illiu od m ot or ul a As p er gi ll Bi us p Ch ola ae ris to mi um Các chi nấm Biểu đồ Tỉ lệ % mức độ nhiễm chi nấm 10 phòng khảo sát Bảng Kết khảo sát mức độ nhiễm nấm mốc 10 phòng khơng máy lạnh TT Tên nấm A flavus A fumigatus A nidulans Chuyên Đề Dược Khoa P1 23 P2 24 P3 13 1 P4 16 2 CFU/m khơng khí P5 P6 P7 13 12 16 0 P8 19 10 P9 13 P10 22 97 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học TT Tên nấm A niger Aspergillus sp Acremonium sp Bipolaris sp Chaetomium sp Chrysonilia sp Cladosporium nấm sợi màu Curvularia sp Fusarium sp Mucor sp Paecilomyces sp Penicillium sp Rhizomucor sp Rhizopus sp Rhodotorula sp Scopulariopsis sp Syncephalastrum sp Trichoderma sp Nấm men khác Nấm sợi khác Tổng cộng 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 CFU/m khơng khí P5 P6 P7 36 40 40 0 0 3 P1 23 0 P2 56 P3 47 0 0 P4 46 0 1211 1433 1237 1419 1175 1148 16 16 208 1 0 23 58 1596 16 1 183 0 0 10 27 1777 12 174 3 20 13 1538 10 3 201 0 1740 10 140 1 0 17 1417 16 120 1 26 1397 P8 34 0 P9 43 25 P10 32 1249 1239 1276 969 18 129 0 19 18 1523 178 1 10 28 1557 13 34 149 0 16 44 1637 10 177 0 13 144 1399 Chú thích: Aspergillus: A - Nấm sợi: nấm thấy sợi tơ nấm khơng có bào tử Qua q trình thực nghiệm xác định 17 chi Quy định giới hạn cho phép mức độ nhiễm nấm m3 khơng khí Trong 17 chi gồm 16 chi nấm sợi, chi nấm men (Rhodotorula) Có nhiều đề nghị giới hạn mức độ nhiễm nấm mốc khơng khí nhà nước sau: BÀN LUẬN Bảng Quy định độ nhiễm nấm bên nhà nước(1,2,8,9,13) TT Giới hạn nấm mốc < 100 CFU/m3 khơng khí < 200 CFU/m3 khơng khí < 300 CFU/m3 khơng khí < 500 CFU/m3 khơng khí < 50 CFU/m3 khơng khí cho chủng loại nấm (trừ Cladosporium spp.) - Mức độ nhiễm nấm nơi khảo sát từ 1397 – 1777 CFU/m3 khơng khí Theo tham khảo bảng 3, quy định mức đô nhiễm nấm nước khác nhau, dựa theo quy định mức độ nhiễm nấm cao < 500 CFU/m3 kết khảo sát cho thấy mức độ nhiễm nấm gấp lần quy định cho phép Ngoài ra, theo tài liệu cho biết nhân viên văn phòng thường bị bệnh đường hô hấp môi trường làm việc nhiễm nấm mức độ 344 CFU/m3 (3) 98 Nguồn gốc ACGIH 1989 US Public Health Service 1993 Robetson (Mỹ) 1997 Singapore WHO; Robertson (Mỹ) 1997; Canada 1993 Vậy 100% nơi khảo sát có nguy nấm mốc gây hại sức khoẻ người - Đa số phòng khảo sát có chi Aspergillus, Penicillium, Cladosporium có mức độ nhiễm cao chi nấm khác Kết phù hợp với cơng trình khảo sát nước (3,4) Qua bảng 3, quy định giới hạn tổng số nấm mốc có m3 khơng khí có quy định chủng loại nấm không vượt Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 50 CFU/m3, nấm mốc vượt mức giới hạn gây nguy hại đến sức khoẻ người Với quy định cho thấy đa số phòng khảo sát có nguy bị tác hại nấm mốc có mức độ nhiễm chi nấm Aspergillus, Penicillium, Cladosporium cao (> 50 CFU/m3 không khí) Mặc dù chi Cladosporium khơng có quy định mức độ nhiễm cho loại nấm chi nấm có tác hại gây dị ứng, theo báo cáo BV ĐHYD Huế năm 2008, ca bệnh não Cladosporium batiana bệnh nhân không nhiễm HIV(11) - Riêng chi Aspergillus, định danh nhóm lồi A flavus, A fumigatus, A nidulans, A niger Trong A niger có tỉ lệ nhiễm cao nhóm lồi khác Theo tài liệu tóm tắt bảng quy định chủng loại nấm mốc nhiễm phải < 50 CFU/m3 vượt mức cho phép gây nguy hại đến sức khoẻ người theo tài liệu 12 nhiễm Aspergillus > 50 CFU/m3 khơng khí gây kích ứng mắt, da, ho Vậy với kết trên, 100% phòng khảo sát bị nhiễm nấm mốc mức độ nguy hiểm - Theo tài liệu 2, 6, ca lâm sàng báo cáo, nấm định danh 10 phòng khảo sát hầu hết nấm gây hại đến sức khoẻ người - Mức độ nhiễm phòng khơng có chênh lệch nhiều Riêng phòng có mức độ nhiễm nấm cao P1, P2, P4, P9 có đặc điểm góc trường, mơi trường khơng thơng thống địa điểm khác gần cầu thang có nhiều người qua lại - Mức độ nhiễm nấm 10 phòng khảo sát khơng dùng máy lạnh cao nhiều so với phòng dùng máy lạnh (200 – 530 CFU/m3 khơng khí) cơng trình chúng tơi khảo sát trước Thật khu vực khảo sát khác nhau: phòng dùng máy lạnh Q1, phòng khơng dùng máy lạnh quận Bình Thạnh (BT) Ngồi ra, đặc điểm kiến trúc khác Chuyên Đề Dược Khoa Nghiên cứu Y học nhau, trường học Q1 sân rộng, thông thống hơn, có nhiều xanh ngược lại với trường Q BT Cách sinh hoạt khác nhau, trường Q BT với đặc điểm số lượng học viên vào trường theo (giờ chơi, về) ngược lại trường Q1 Với đặc điểm phần giải thích mơi trường khơng khí khu vực 10 phòng khảo sát khơng dùng máy lạnh nhiễm gây làm gia tăng mức độ nhiễm bên phòng KẾT LUẬN Theo tham khảo quy định mức độ nhiễm nấm nước cho thấy 100% phòng khảo sát với mức độ nhiễm nấm cao Đa số nấm mốc nhiễm nấm mốc độc hại Nếu thời gian người phơi nhiễm môi trường nhiều hay người có địa dị ứng, suy giảm miễn dịch nấm mốc có nguy gây hại sức khoẻ Qua khảo sát cho thấy phòng có mức độ nhiễm nấm cao phòng khác có đặc điểm chung phòng có nhiều người vào Ngồi 100% phòng khảo sát có độ ẩm tương đối > 60%, điều kiện hình thành phát triển nấm mốc Vì thế, nơi cần có biện pháp khắc phục mức độ nhiễm nấm vệ sinh môi trường thường xuyên giảm độ ẩm phòng TÀI LIỆU THAM KHẢO Air-Care Engineering (S) Pte Ltd (1998-2005) Bakhda S (2007) Indoor air quality audit based on Singapore national environment agency (NEA) guidelines PRlog.Org-Global Press Release Distribution Buczyńska A., Cyprowski M (2007) Indoor moulds: results of the environmental study in office rooms Med Pr 58(6): p 521-525 Cetinkaya Z., Fidan F (2005) Assessment of indoor air fungi in Western-Anatolia, Turkey Asian Pacific Journal of Allergy and Immunology 23(2-3): p 87-92 Đặng Vũ Hồng Miên (1976) Bảng phân loại loài nấm mốc thường gặp NXB Minh Sang, Hà Nội, tr 371 – 375 Dettoog G.S (2000) Atlas of clinical fungi, 2nd ed Centraalbureau Voor Schimmel cultures, Spain p: 128, 156, 164, 444 – 445, 596, 523, 857, 899, 928 Germain S.G (1996) Identifying filamentous fungi A clinical laboratory handbook p 54, 64, 63-77, 82, 84-85, 9093,104, 106, 160, …178, 200, 263-265 99 Nghiên cứu Y học 10 11 100 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Giardino J.N (2004) Summary of currently available guidelines for fungal levels in indoor, Pure air control services Kowalski W.J.(2000) Indoor mold growth- Health hazards and remediation, HPAC Engineering (Heating/Piping/Air Conditioning Engineering) Nguyễn Đinh Nga (2009) Sách Ký Sinh Trùng NXB Giáo Dục Việt Nam, Hà Nội, tr 254-276 Pham Van Linh, Truong Quang Anh, Ton Nu Phuong Anh, Tran Duc Thai, Nguyen Thi Hoa (2008) 12 13 Cladophialophora bantiana and Candida albicans mixed infection in cerebral abscess of an HIV- negative patient J Infect Developing Countries 2(3): p 245-248 Roger D (1999) Indoor air quality and airborne microorganisms, Current Issues in occupational and environmental health UK and Canada WHO (2000) Ambient air quality monitoring and assessment Guidelines for Air quality, Geneva p 82-104 Chuyên Đề Dược Khoa ...Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học KHẢO SÁT MỨC ĐỘ NHIỄM NẤM MỐC TRONG KHÔNG KHÍ Ở PHỊNG LÀM VIỆC KHƠNG DÙNG MÁY LẠNH CỦA TRƯỜNG HỌC TẠI QUẬN BÌNH THẠNH-THÀNH PHỐ HỒ... 10 phòng khảo sát khơng dùng máy lạnh ô nhiễm gây làm gia tăng mức độ nhiễm bên phòng KẾT LUẬN Theo tham khảo quy định mức độ nhiễm nấm nước cho thấy 100% phòng khảo sát với mức độ nhiễm nấm. .. Mức độ nhiễm nấm 10 phòng khảo sát không dùng máy lạnh cao nhiều so với phòng dùng máy lạnh (200 – 530 CFU/m3 khơng khí) cơng trình chúng tơi khảo sát trước Thật khu vực khảo sát khác nhau: phòng