Bài viết tiến hành khảo sát 48 dòng Thông đỏ (Taxus wallichana) mọc tự nhiên ở 4 vùng khác nhau tại Lâm Đồng và 01 dòng Thông đỏ (Taxus chinensis) ở Hòa Bình. Hàm lượng 10-deacetyl baccatin III (10-DAB) biến động lớn từ 0,0055 - 0,1924% (trung bình 0,07%) và taxol từ 0,00098 - 0,02% (trung bình 0,0089%) của T. wallichiana. T. Chinensis ở Hòa Bình có hàm lượng 10-DAB (0,0206%) và taxol (0,00083%) thấp hơn lần lượt là 3,5 lần và 10,7 lần so với T. wallichiana.
TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2014 - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CHƢƠNG TRÌNH KHCN KC.10/11-15 PHÁT TRIỂN NGUỒN GEN THÔNG ĐỎ (TAXUS WALLICHIANA ZUCC.) TẠI LÂM ĐỒNG TẠO NGUỒN NGUYÊN LIỆU SẢN XUẤT THUỐC UNG THƢ Vương Chí Hùng*; Nguyễn Tiến Hùng* Nguyễn Văn Tơn*; Trần Cơng Luận** TĨM TẮT Khảo sát 48 dòng Thơng đỏ (Taxus wallichana) mọc tự nhiên vùng khác Lâm Đồng 01 dòng Thơng đỏ (Taxus chinensis) Hòa Bình Hàm lượng 10-deacetyl baccatin III (10-DAB) biến động lớn từ 0,0055 - 0,1924% (trung bình 0,07%) taxol từ 0,00098 - 0,02% (trung bình 0,0089%) T wallichiana T Chinensis Hòa Bình có hàm lượng 10-DAB (0,0206%) taxol (0,00083%) thấp 3,5 lần 10,7 lần so với T wallichiana Tiếp đó, chọn dòng T wallichiana có hàm lượng cao để nhân giống, khảo nghiệm hệ nghiên cứu quy trình ni trồng, chăm sóc thu hái cho hàm lượng 10-DAB từ 0,1478 - 0,3103% (gấp 3.3 lần so với T wallichiana tự nhiên) taxol xấp xỉ Taxol phân lập từ T wallichiana trồng có hàm lượng 0,005 - 0,02% so với vỏ thân T brevifolia 0,01 - 0,04%, thấp gấp lần, thu khối lượng lớn Thông đỏ phục vụ sản xuất taxol quy mô lớn không làm chết kiểu khai thác taxol từ vỏ Đồng thời, thu lượng lớn 10-DAB từ 0,1478 0,3103%, cao gấp lần so với Taxus brevifolia (0,02 - 0,2%) * Từ khóa: Thơng đỏ; Gen; Thuốc chống ung thư DEVELOPMENT OF GENUS TAXUS WALLICHIANA ZUCC IN LAMDONG PROVINCE IN CREATING A SOURCE OF MATERIALS FOR ANTI-CANCEROUS DRUG PRODUCTION SUMMARY 48 Taxus Wallichiana growing naturally in different areas of Lamdong province and Taxus chinensis in Hoabinh were surveyed The content of 10-DAB and taxoid varied dynamically from 0.0055 - 0.1924% (median range: 0.07%) and 0.00098 - 0.02% (median range: 0.0089%), respectively Meanwhile, the content of 10-DAB and taxoid in Hoabinh is 3.5 times and 10.7 times lower than Taxus Wallichiana Afterward, Taxus Wallichiana species were chosen for multiplication; generation experiment and research on culturing procedures so that the content of 10-DAB and taxoid were corresponding to each other Taxoid extracted from the leaves of Taxus Wallichiana had its contents of 0.005 - 0.02% compared to the outer of T Brevifolia (0.01 - 0.04%) Although this content is twice lower, we can collect a great number of Taxus Wallichiana in order to produce taxoid in a large scale What’s more, we can also harvest a huge amount of 10-DAB (0.1478 - 0.3103%), which is twice higher than Taxus brevifolia (0.02 - 0.2%) * Key words: Taxus Wallichiana; Gene; Anti-cancerous drug * Đại học Y-Dược TP HCM ** Công ty Dược Vimedimec Ng-ời phản hồi: (Corresponding): Vng Chớ Hựng (vuongbaonhichau@yahoo.com.vn) Ngày nhận bài: 25/12/2013; Ngày phản biện đánh giá báo: 14/1/2014 Ngày báo đ-ợc đăng: 17/1/2014 TP CH Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2014 - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CHƢƠNG TRÌNH KHCN KC.10/11-15 ĐẶT VẤN ĐỀ Trong nguồn tài nguyên thực vật rừng Việt Nam, nhóm Thơng chiếm số lượng lồi khiêm tốn, song chúng lại có giá trị khoa học, nguồn gen kinh tế đáng lưu ý Theo kết nghiên cứu nước, tổng số 33 lồi Thơng xác định địa Việt Nam, có tới 14 lồi nằm danh sách bị đe doạ cấp toàn cầu 29 loài bị đe dọa cấp quốc gia [4] Trong đó, có nhóm Thông đỏ thuộc chi Thông đỏ (Taxus) họ Taxaceae Ở Việt Nam, có lồi Đó là: Thơng đỏ ngắn hay gọi Thơng đỏ bắc (Taxus chinensis Pilg.), phân bố rải rác số tỉnh miền núi phía Bắc Thơng đỏ dài hay gọi Thông đỏ nam (Taxus wallichiana Zucc.) [1, 2, 4] Đối với quần thể Thông đỏ dài (sau gọi Thông đỏ) tỉnh Lâm Đồng, khoảng 250 cá thể Trong đó, môi trường sống chúng bị thu hẹp nghiêm trọng Vì vậy, lồi bị nguy cấp mức cao nước ta (EN: Endangered) [1, 2, 4] Năm 2002, Thomas Nguyễn Đức Tố Lưu cho rằng: quần thể Thông đỏ Việt Nam điểm phân bố cuối phía Nam chi Taxus L lục địa châu Á Chúng phân bố biệt lập, cách xa điểm phân bố lồi phía Đơng Nam Trung Quốc vùng cận Himalaya, nên xuất xứ riêng Như vậy, giá trị nguồn gen, Thơng đỏ nhóm đối tượng quan tâm Việt Nam Về giá trị kinh tế, Thơng đỏ lồi cho gỗ tốt, có hoạt chất tự nhiên dùng làm thuốc chữa ung thư [1, 2, 4] Thuốc chống ung thư xuất xứ từ lồi Thơng đỏ thị trường có tên thương mại paclitaxel (taxol) Hãng Dược phẩm Bristol Myers Squibb (Mỹ) sản xuất docetaxel (taxotere) Công ty Sanofi - Aventis (Pháp) sản xuất Do có giá trị kinh tế cao, Thơng đỏ bị lạm dụng khai thác, đặc biệt vùng Himalaya Trung Quốc, nguồn dược liệu thiên nhiên trở nên khan hiếm, bị đe dọa tuyệt chủng 11 Taxol có số phËn lồi Thơng đỏ (Taxus spp), chủ yếu tập trung vỏ thân Người ta phát hợp chất 10-deacetyl baccatin III (10DAB) có loài hàm lượng hoạt chất cao vỏ 10-DAB tiền chất dùng để bán tổng hợp taxol Đây đường sản xuất taxol hay taxotere chủ yếu Như vậy, với phát minh công nghệ bán tổng hợp taxol từ 10-DAB chiết từ tránh tổn hại nặng nề đến lồi Thơng đỏ tự nhiên Chúng tơi triển khai việc nhân giống nghiên cứu nuôi trồng Thông đỏ Lâm Đồng, để tạo nguồn nguyên liệu phục vụ sản xuất thuốc ung thư xuất VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng vật liệu nghiên cứu Cây Thông đỏ (Taxus wallchiana Zucc), nhân giống kỹ thuật hom cành nuôi trồng đồng ruộng Phƣơng pháp nghiên cứu - Phương pháp điều tra theo tuyến ô tiêu chuẩn (theo Thái Văn Trừng, 1970) để thu thập dòng Thơng đỏ đặc điểm sinh học - Phương pháp bố trí thí nghiệm đồng ruộng để xây dựng quy trình nhân giống ni trồng Thơng đỏ - Phương pháp định tính sắc ký lớp mỏng định lượng sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN So sánh hàm lƣợng 10-DAB taxol vùng phân bố dòng - Thu thập 48 dòng Thông đỏ (Taxus wallichiana Zucc.) Lâm Đồng 01 dòng Thơng đỏ (Taxus chinensis) Hòa Bình TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2014 - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CHƢƠNG TRÌNH KHCN KC.10/11-15 Bảng 1: Hàm lượng (%) hoạt chất Thông đỏ theo vùng phân bố tự nhiên Pà Cò (Mai Châu - Hồ Bình) 0,0207 ± 0,0007 0,00083 ± 0,00012 Xuân Thọ (TP Đà Lạt) 0,0464 ± 0,0015 0,01425 ± 0,00076 Hồ Tiên (huyện Đơn Dương) 0,0641 ± 0,00058 0,01063 ± 0,00049 Bidoup (huyện Lạc Dương) 0,0942 ± 0,0015 0,00802 ± 0,0001 Núi Voi (huyện Đức Trọng) 0,0704 ± 0,00094 0,00856 ± 0,0001 IBA nhân giống Thông đỏ liều lượng 1,5% cho tỷ lệ rễ cao từ 90,2 - 93,4% thời gian rễ từ 55 65 ngày Mật độ trồng Khảo sát trồng mật độ: 0,7 x 0,7 m; x m; 1,2 x 1,2 m; lựa chọn mật độ trồng m x m, sở sinh trưởng chiều cao 18 tháng tuổi đường kính 45 tháng tuổi, suất Thơng đỏ sau 36 tháng trồng Ảnh hưởng mật độ đến đường kính (cm) Bảng 2: Hàm lượng (%) taxol 10-DAB 0,15153 ± 0,00283 0,01929 ± 0,00159 HT4 0,15567 ± 0,00728 0,01915 ± 0,00032 Dòng T Chinensis có hàm lượng taxol thấp (10 - 17,17 lần) so với dòng T wallichiana (p < 1%) vùng, chọn 02 dòng giống nghiên cứu sản xuất Nhân giống kỹ thuật hom cành Đường kính (mm) NV16 60 50 40 NT.I 30 NT.II 20 NT.III 10 13 18 21 25 30 35 40 45 Tháng tuổi Ảnh hưởng mật độ đến chiều cao (cm) Bảng 3: Tỷ lệ rễ theo biện pháp xử lý kích thích sinh trưởng mức nồng độ 120 (ngµy) IBA NAA 0,5 62 690,1/778 88,7 56 718,7/778 92,3 1,5 55 726,7/778 93,4 0,5 65 673/778 86,5 60 701,7/778 90,2 1,5 57 722/778 92,8 Số lượng hom rễ thời gian rễ xử lý NAA IBA khác biệt khơng có ý nghĩa Vì vậy, sử dụng loại NAA Chiều cao (cm) 100 80 NT.I 60 NT.II 40 NT.III 20 T.2 T.6 T.9 T.13 T.18 Tháng tuổi Hình 1: Ảnh hưởng mật độ đến đường kính (a) chiều cao (b) Thơng đỏ 12 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2014 - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CHƢƠNG TRÌNH KHCN KC.10/11-15 Ảnh hưởng mật độ đến suất (kg/ha/năm) Năng suất khô (kg/ha/năm) 5000 4500 4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500 NT1 NT2 NT3 Năm Năm Năm Năm Hình 2: Ảnh hưởng mật độ đến suất khơ Chế độ phân bón Khảo sát chế độ phân bón (có đối chứng) Các chế độ phân NPK tăng dần theo tỷ lệ từ 1,1,1; 2,1,1; 3,1,1 đến 4,1,1 Bảng 4: Ảnh hưởng phân bón đến sinh trưởng suất tươi NghiÖm thøc I NghiÖm thøc II NghiÖm thøc III NghiÖm thøc IV NghiÖm thøc V Chiều cao (cm) 89,3 ± 3,51 101,6 ± 1,41 107,7 ± 2,28 99,4 ± 1,56 122,2 ± 4,89 Đường kính (mm) 29,1 ± 0,78 34,0 ± 0,49 35,5 ± 0,71 34,4 ± 0,36 35,4 ± 0,46 Năng suất tươi (kg/ha) 8603 ± 284 13564 ± 337 15010 ± 135 15250 ± 194 14830 ± 295 Khi có bón phân, suất tươi Thông đỏ cao từ 1,57 - 1,77 lần so với khơng bón phân (p < 1%) Giữa chế độ phân bón lại khơng có khác biệt Từ kết chiều cao, đường kính suất tươi theo chế độ phân bón trên, lựa chọn chế độ phân bón theo nghiệm thức III (318 kg N + 106 kg P + 106 kg K) để sử dụng quy trình chăm sóc Thời vụ thu hoạch Khảo sát thu hoạch lần/năm vào tháng 2, 4, 6, 8, 10 tháng 12 Bảng 5: Ảnh hưởng thời v thu hoch n suất t-ơi (tháng) Tháng Th¸ng Th¸ng Th¸ng Th¸ng 10 Th¸ng 12 10-DAB 0,244 ± 0,203 ± 0,213 ± 0,189 ± 0,272 ± 0,139 ± (%) 0,022 0,016 0,013 0,013 0,016 0,022 Taxol 0,0090 ± 0,0086 ± 0,0040 ± 0,0027 ± 0,0062 ± 0,0098 ± (%) 0,0021 0,0016 0,0012 0,0012 0,0016 0,0021 Năng suất tươi (kg/ha) 1765,96 ± 2263,32 ± 2690 ± 3141,51 ± 3643,85 ± 3087,04 ± 69,41 52,11 40,79 40,79 52,11 69,41 12 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2014 - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CHƢƠNG TRÌNH KHCN KC.10/11-15 Thu hoạch vào tháng 10 cho 10-DAB cao nhất, kế tháng giảm dần vào tháng 6, tháng 4, tháng thấp tháng 12 Hàm lượng 10-DAB trung bình thu hoạch lần/năm 0,21018% (p < 1%) Thu hoạch vào tháng 12 cho taxol cao nhất, tháng tháng 4, thu hoạch vào tháng cho hàm lượng thấp nhất, sau tháng tháng 10 Hàm lượng taxol trung bình thu hoạch lần/năm 0,00672% (p < 1%) Thu hoạch vào tháng 10 cho suất tươi cao nhất, tiếp tháng 8, tháng 12, tháng 6, tháng thấp thu hoạch vào tháng Năng suất thu hoạch lần/năm 16.593 kg tươi/ha (p < 1%) Hàm lƣợng 10-DAB taxol phận (lá, thân, rễ) theo tuổi Khảo sát cấp tuổi 15 cá thể phận lá, thân cành rễ Thông đỏ từ lúc bắt đầu trồng thu mẫu Bảng 6: Hàm lượng (%) 10-DAB taxol phận Thông đỏ theo tuổi Tuổi Lá Tuổi Lá 0,21945 ± 0,00444 0,00731 ± 0,00003 Tuổi Lá 0,19660 ± 0,00069 0,00808 ± 0,00002 Tuổi Lá 0,15073 ± 0,00175 0,00996 ± 0,00011 Tuổi Lá 0,14005 ± 0,00019 0,01012 ± 0,00002 Tuổi Thân cành 0,01207 ± 0,00005 0,00411 ± 0,00001 Tuổi Thân cành 0,01267 ± 0,00002 0,00563 ± 0,00002 Tuổi Thân cành 0,00900 ± 0,00002 0,00518 ± 0,00001 Tuổi Thân cành 0,00377 ± 0,00002 0,00229 ± 0,00001 Tuổi Thân cành 0,00249 ± 0,00001 0,00215 ± 0,00001 Tuổi Rễ 0,01871 ± 0,00016 0,02091 ± 0,00008 Tuổi Rễ 0,01015 ± 0,00001 0,01738 ± 0,00002 Tuổi Rễ 0,01234 ± 0,00003 0,02197 ± 0,00004 Tuổi Rễ 0,01249 ± 0,00002 0,01603 ± 0,00006 Tuổi Rễ 0,01586 ± 0,00003 0,02375 ± 0,00004 0,24293 ± 0,00020 0,00767 ± 0,00003 - Ở lá: hàm lượng 10-DAB tỷ lệ nghịch theo tuổi cây, lớn hàm lượng giảm Ngược lại, hàm lượng taxol tăng tỷ lệ thuận theo tuổi cây, lớn hàm lượng tăng (p < 1%) - Ở thân cành: hàm lượng 10-DAB tỷ lệ nghịch theo tuổi cây, lớn hàm lượng giảm Hàm lượng taxol biến động không theo quy luật (p < 1%) 13 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2014 - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CHƢƠNG TRÌNH KHCN KC.10/11-15 - Ở rễ: hàm lượng 10-DAB biến động khơng theo quy luật, hàm lượng taxol có chiều hướng tăng theo tuổi (p < 1%) - Hàm lượng 10-DAB trung bình cấp tuổi cao thân cành 23,74 lần cao rễ 13,65 lần Hàm lượng taxol trung bình cấp tuổi cao thân cành 2,23 lần thấp rễ 2,31 lần - Ở tuổi, hàm lượng 10-DAB trung bình cao thân cành 20,12 lần cao rễ 12,98 lần Hàm lượng taxol trung bình cao thân cành 1,87 lần thấp so với rễ 2,72 lần - Ở tuổi, hàm lượng 10-DAB trung bình cao thân cành 56,24 lần cao rễ 8,83 lần Hàm lượng taxol trung bình cao thân cành 4,7 lần thấp so với rễ 2,35 lần Như vậy, ni trồng Thơng đỏ thu hoạch để vừa tách chiết 10-DAB taxol lớn tuổi, có triệu chứng già cỗi, suất thu ln để tách chiết taxol hiệu Mối quan hệ nhiệt độ, độ ẩm số nắng đến hàm lƣợng taxol suất Khảo sát mối quan hệ nhiệt độ, độ ẩm, số nắng với hàm lượng taxol suất tươi: Bảng 7: Mối liên hệ taxol suất với yếu tố khí hậu Đà Lạt NhiƯt ®é (X1) Số nắng (X3) X1X2X3 (3) (4) (5) m độ (X2) (1) (2) Taxol - 0,64 - 0,62 - 0,49 + 0,80 Năng suất tươi + 0,82 + 0,83 - 0,61 + 0,84 (1) Y1 = 0,044521 - 0,038485X1 Với r = -0,6395, R = 40,9%, p = 0,025 (2) Y1 = exp (3,13744 - 8,4368X2) Với r = -0,621017, R = 38,57%, p = 0,0311 (3) Y1 = 1/(617,6 - 378,3X3) Với r = -0,487, R2 = 23,69%, p = 0,108 Đối với hàm lƣợng taxol Thông đỏ: Giữa hàm lượng taxol (Y1) với nhiệt độ khơng khí (X1), độ ẩm khơng khí (X2), số nắng (X3) tồn mối quan hệ nghịch theo phương trình (1, 3) Y1 = -1,138 + 1,1644 X1 + 1,1967 X2 + 0,001796 X3 + 0,00179 X1X2 (4) Với R = 0,798665, R (hiệu chỉnh) = 0,683616 p = 0,0139 Quan hệ hàm lượng taxol Thông đỏ (Y1) với nhiệt độ trung bình/tháng (X1), độ ẩm trung bình/tháng (X2) số nắng trung b×nh (X3) tồn theo dạng phương trình (4) Đối với suất tươi trung bình Thơng đỏ (Y2): (5) Y2 = 7,781X1 4,609 (6) Y2 = -10.540 + 13.042X2 (7) Y2 = 4.728 - 2.254X3 14 Với r = 0,82036, R = 67,3%, p = 0,00108 Với r = 0,83, R = 68,03%, p = 0,00096 Với r = -0,61, R = 37,23%, p = 0,035 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2014 - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CHƢƠNG TRÌNH KHCN KC.10/11-15 Giữa suất tươi (Y2) với nhiệt độ khơng khí (X1), độ ẩm khơng khí (X2), với số nắng (X3) tồn mối quan hệ thuận theo phương trình (5, 7) Y2 = 56.611 - 0,000629 X1 - 0,000612 X2 - 74,42 X3 - 69972 X1X2 (8) Với R2 = 0,8393, R2 (hiệu chỉnh dành cho độ tự do) = 0,7475 p= 0,0065 Quan hệ suất tươi trung bình Thơng đỏ (Y2) với nhiệt độ trung bình/tháng (X1), độ ẩm trung bình/tháng (X2) số nắng trung bình (X3) tồn theo dạng phương trình (8) + Vào mùa khơ (nhiệt độ 20,410C, lượng mưa 46,7 mm.tháng, độ ẩm 74,83% số nắng 219,5 giờ/tháng), tích luỹ hàm lượng taxol diễn cao so với mùa mưa (nhiệt độ 21,510C, lượng mưa 222.33 mm/tháng), độ ẩm 85,3% số nắng 151,83 giờ/tháng) Điều cho thấy, hàm lượng taxol tích luỹ cao nhiệt độ, lượng mưa độ ẩm thấp, số nắng cao Ngược lại, tích lũy hàm lượng taxol diễn thấp nhiệt độ, lượng mưa độ ẩm cao, số nắng thấp - Năng suất cao diễn nhiệt độ, lượng mưa độ ẩm cao, số nắng thấp, lượng mưa thấp số nắng cao làm thiếu nước suất thấp Vì thế, để nâng cao suất, phải tưới bổ sung vào mùa khô lượng nước tương đương 150 - 200 mm/tháng để độ ẩm đạt > 80% + Với kết trên, lựa chọn thu hoạch năm để thu nhận 10-DAB Nếu muốn thu taxol cao phải thu vào mùa khô cần phải tưới nước bổ sung mùa khơ để có sut lỏ cao KT LUN Từ kết nghiên cứu đề tài rút số kết luận sau: - Chọn lọc dòng Thơng đỏ NV16 HT4 để làm giống nghiên cứu sản xuất Trong nhân giống Thông đỏ, sử dụng NAA IBA nồng độ 1,5% cho tỷ lệ rễ > 90% - Chọn mật độ trồng Thông đỏ với khoảng cách m x m (10.000 cây/ha) Chế độ phân bón 20 phân hữu + 318 kg N + 106 kg P + 106 kg K hiệu để bón cho Thơng đỏ - Thời vụ thu hoạch 10-DAB vào mùa mưa cho hàm lượng cao mùa khô ngược lại, thu hoạch mùa khô cho hàm lượng taxol cao mùa mưa - Hàm lượng 10-DAB giảm dần tuổi lớn taxol tăng dần lớn, cao so với rễ thân cành Hàm lượng 10-DAB taxol thân cành thấp rễ Hàm lượng taxol rễ tăng tuổi lớn Vì thế, nên trồng Thơng đỏ để thu có dấu hiệu cằn cỗi, sau đó, thu cho hiệu tốt TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Tiến Bân CS Sách Đỏ Việt Nam Phần II - Thực vật NXB Khoa học Tự nhiên Công nghệ 2007 Võ Văn Chi Từ điển thực vật thông dụng NXB Khoa häc vµ Kü thuËt 1999, tập 2, tr.24122413 Phan Hiếu Hiền Phương pháp bố trí thí nghiệm xử lý số liệu thực nghiệm Giáo trình Trường Đại học Nông lâm 1996 Nguyễn Tiến Hiệp, Phan Kế Lộc, Nguyễn Đức Tố Lưu, Philip Ian Thomas, Aljos Farjon, Leonid Averyanov Jacinto Regalata Jr Thông Việt Nam: Nghiên cứu trạng bảo tồn; Quỹ Darwin Chương trình nhiệt đới cộng đồng châu Âu xuất 2005, tr.110-113 Nguyễn Hoàng Quỳnh Hương, Nguyễn Ngọc Song Trâm, Bùi Thế Vinh, Trần Cơng Luận Xây dựng quy trình định lượng 10-DAB taxol Thông đỏ (Taxus wallichiana Zucc.) Tạp chí Y học TP.HCM 2008, tập12, phụ số 4, tr.105-111 Vương Chí Hùng Nghiên cứu đặc điểm sinh thái kỹ thuật trồng thông đỏ (Taxus wallichiana Zucc.) nguyên liệu thuốc chống ung thư Tạp chí KHKT Nơng Lâm nghiệp 2006, số 3, tr.50-58 15 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2014 - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CHƢƠNG TRÌNH KHCN KC.10/11-15 Vương Chí Hùng, Nguyễn Tập, Nguyễn Hồng Nghĩa Kết điều tra Thông đỏ dài tỉnh Lâm Đồng Tạp chí Dược liệu 2010, số 6, tập 15, tr.333-338 Bùi Thế Vinh, Trần Công Luận, Vương Chí Hùng, Nguyễn Tiến Hùng Studies on the dynamic variation of 10-DAB and taxol contents of Taxus wallichiana needles cultivated in Lâm Đồng province PHARMA INDOCHINA VI The Development of Indochina Pharmacy in the Context of Global Economic Recession 15 - 18/12/2009, tr.621-624 16 Vương Chí Hùng, Nguyễn Hoàng Nghĩa Nghiên cứu số đặc điểm lâm học Thông đỏ dài (Taxus wallichiana Zucc.) Lâm Đồng Tạp chí Khoa học Lâm nghiệp số 1/2011, tr.1710-1715 10 Vương Chí Hùng Nghiên cứu đặc điểm sinh thái kỹ thuật trồng thông đỏ (Taxus wallichiana Zucc.) nguyên liệu thuốc chống ung thư Tạp chí KHKT Nơng Lâm nghiệp 2006, số 3, tr.50-58 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2014 - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CHƢƠNG TRÌNH KHCN KC.10/11-15 17 ... nặng nề đến lồi Thơng đỏ tự nhiên Chúng triển khai việc nhân giống nghiên cứu nuôi trồng Thông đỏ Lâm Đồng, để tạo nguồn nguyên liệu phục vụ sản xuất thuốc ung thư xuất VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP... giá trị nguồn gen, Thông đỏ nhóm đối tượng quan tâm Việt Nam Về giá trị kinh tế, Thơng đỏ lồi cho gỗ tốt, có hoạt chất tự nhiên dùng làm thuốc chữa ung thư [1, 2, 4] Thuốc chống ung thư xuất xứ... Chí Hùng Nghiên cứu đặc điểm sinh thái kỹ thuật trồng thông đỏ (Taxus wallichiana Zucc.) nguyên liệu thuốc chống ung thư Tạp chí KHKT Nơng Lâm nghiệp 2006, số 3, tr.50-58 15 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC