Góp phần khảo sát cơ chế di truyền của bệnh teo cơ tủy sống týp 1 (werdnig hoffmann)

Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu xác định tỉ lệ gen SMN1/SMN2 ở người lành mang gen bệnh werdnig-hoffmann. Nghiên cứu đưa ra kết quả này hỗ trợ cho quan điểm cho rằng mất đoạn (deletion) chứ không phải chuyển đổi đoạn (conversion) là cơ chế di truyền chính trong bệnh Werdnig-Hoffmann.

Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 12 * Số * 2008 Nghiên cứu Y học GÓP PHẦN KHẢO SÁT CƠ CHẾ DI TRUYỀN CỦA BỆNH TEO CƠ TỦY SỐNG TÝP I (WERDNIG-HOFFMANN) Trần Diệp Tuấn* TÓM TẮT Mục tiêu: Xác định tỉ lệ gen SMN1/SMN2 người lành mang gen bệnh Werdnig-Hoffmann Phương pháp: Chúng dùng phản ứng khuếch đại cạnh tranh tạo sản phẩm PCR SMN1 SMN2 Sau đó, làm đứt đoạn sản phẩm PCR gen SMN men Hinfl Sản phẩm thu chạy điện di gel, scan máy ảnh Polaroid tia cực tím, phân tích đậm độ (phần mềm 1.16/ppc NIH Image) hai dãi band 101 bp (SMN2) 78 bp (SMN1) Tỉ lệ gen SMN1/SMN2 xác định dựa tỉ lệ đậm độ đoạn 78 bp/101 bp Kết quả: 11 (73,3%) người có tỉ lệ SMN1/SMN2 0,5 1; bốn người lại (26,7%) có tỉ lệ 1/3 Kết luận: Kết hỗ trợ cho quan điểm cho đoạn (deletion) chuyển đổi đoạn (conversion) chế di truyền bệnh Werdnig-Hoffmann ABSTRACT THE GENE COPY RATIOS OF SMN1/SMN2 IN CARRIERS WITH TYPE I SPINAL MUSCULAR ATROPHY Tran Diep Tuan * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 12 - No - 2008: 75 – 80 Objective: To determine the SMN1/SMN2 ratios of carriers of Werdnig-Hoffmann disease Methods: We used competitive PCR to amplified SMN1 and SMN2 gene products The PCR products were digested by Hinfl The samples were run on gel, and scanned by Polaroid camera under UV-light Densitometric analysis was performed on the two bands that correspond to the 101 bp fragment of SMN2 and the 78 bp fragment of SMN1 The SMN1/SMN2 copy ratio was determined based on the 78 bp/101 bp ratio obtained from densitometric analysis Results: We found that the SMN1/SMN2 ratio was 0.5 or in 11 (73.3%) carriers; the remaining (26.7%) carriers had an SMN1/SMN2 ratio of 1/3 Conclusion: The finding supports the idea that deletion rather than conversion is the main genetic event in Werdnig-Hoffmann disease đỡ, bệnh nhân SMA type III (bệnh Kugelberg-Welander) MỞĐẦU SMA type II thể trung gian với yếu Bệnh teo tủy sống (SMA) bệnh di tiến triển chậm SMA type I Tần số mắc truyền gen lặn nhiễm sắc thể thường, SMA 10.000 lần sinh, với tần số đặc trưng yếu liệt teo tiến người lành mang gen bệnh 1/50(15) Gen triển thối hóa tế bào vận SMN gen gây bệnh SMA xác động sừng trước tủy sống SMA gồm định nằm nhiễm sắc thể 5q13(1,12) thể lâm sàng, phân loại dựa thời Không liên quan đến mức độ trầm trọng điểm khởi phát mức độ trầm trọng của bệnh, 90-98% bệnh nhân SMA có biểu lâm sàng(13) Bệnh nhân SMA type đồng hợp tử SMN1, exon I (còn gọi bệnh Werdnig-Hoffmann) hoặc hai(6,10,16,22) Phần lớn bệnh ngồi không giúp nhân người Trung Quốc, Hàn Quốc 75 * Bộ Môn Nhi, Đại Học Y Dược TPHCM Nghiên cứu Y học Nhật có đồng hợp tử exon gen SMN1(2,8,18) Gen protein ức chế tự chết tế bào thần kinh (neuronal apoptosis inhibitory protein: NAIP) gen nằm gần với gen SMN Chúng bị đoạn 50% bệnh nhân bị SMA type I(17) Tần suất bị gen NAIP bệnh SMA thể nhẹ xảy so với bệnh SMA type I, điều có lẽ phản ảnh mức độ rộng đoạn nhiễm sắc thể SMA(21,25) Gen SMN gen cần cho tồn sống tế bào thần kinh vận động tủy sống Gen SMN gồm hai gen giống nhau, SMN1 SMN2 nhiễm sắc thể 5q13 Cả hai gen có độ dài khoảng 20 kb khác có nucleotide Ở bệnh nhân bị SMA, có gen SMN2 sót lại Người bình thường có gen SMN1 gen SMN2 nhiễm sắc thể, đó, tỉ lệ SMN1/SMN2 Tỉ lệ gen SMN1/SMN2 cha mẹ bệnh nhân sử dụng để phân tích vai trò số gen SMN2 độ nặng bệnh SMA McAndrew cs, Velasco cs nhận thấy người Tây Ban Nha, Mỹ Canada cha mẹ bệnh nhân bị SMA type II III có tỉ lệ SMN1/SMN2 nhỏ so với cha mẹ bệnh nhân SMA type I(11,22) Tuy nhiên, Schwartz cs(20) lại khơng ghi nhận tượng gia đình bệnh nhân người Scandinavi Ngược lại, Nishio cs lại ghi nhận tỉ lệ SMN1/SMN2 hai số bốn người lành mang gen bệnh, họ cha mẹ hai bệnh nhi người Nhật bị SMA type I(14) Tác giả tiên đoán tần suất tỉ lệ SMN1/SMN2 người lành mang gen bệnh dân Nhật cao so với dân phương Tây(14) Chúng tơi muốn tìm hiểu liệu tiên đốn có khơng Do đó, chúng tơi tiến hành xác định tỉ lệ SMN1/SMN2 15 người Nhật người lành mang gen bệnh SMA type I Để xác định tỉ lệ SMN1/SMN2, điều quan trọng phải phân biệt hai loại gen Chúng dùng phản ứng khuếch đại cạnh tranh (competitive polymerase chain reaction: competitive PCR) cách dùng Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 12 * Số * 2008 mồi ghép cặp sai (mismatch primer) để tạo nên vị trí hạn chế khác (restriction site) (xem thêm phần Đối Tượng Phương Pháp Nghiên Cứu) gen SMN1 SMN2 Điều cho phép phân biệt SMN1 với SMN2, qua xác định tỉ lệ SMN1/SMN2 ĐỐI TƢỢNG - PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng nghiên cứu Đối tượng 14 cha mẹ người em ruột bình thường lâm sàng gia đình với bệnh nhân bị SMA type I Bảy gia đình khơng có mối liên hệ huyết thống với Tất bệnh nhân xếp loại SMA type I theo tuổi khởi phát mốc vận động đạt trẻ dựa tiêu chuẩn International SMA (13) Consortium Tất bệnh nhân có đồng hợp tử đoạn exon 8(18) Phân tích haplotype tất bệnh nhân thành viên gia đình cho thấy tất 14 cha mẹ người em ruột người lành mang gen bệnh (xem them chi tiết tài liệu tham khảo 3) Ngồi ra, nhóm chứng gồm 19 người tình nguyện bình thường tham gia nghiên cứu Phƣơng pháp xác định tỉ lệ gen SMN1/SMN2 Chúng dùng phản ứng khuếch đại cạnh tranh (competitive PCR: PCR cạnh tranh) dựa mồi SMN ghép cặp sai mô tả Wirth cs(25) Mồi ghép cặp sai tạo vị trí hạn chế HinfI khác SMN1 SMN2 Mồi theo chiều xuôi (forward primer) mồi ghép cặp sai thiết kế dựa trình tự nucleotid SMN1 exon (SMN7F: 5’CTTCCTTTTATTTTCCTTACAGGGATT3’), mồi ngược (reverse primer) intron (SMN7R: 5’TCCACAAACCATAAAGTTTTAC-3’) Sản phẩm PCR gen SMN có chiều dài 76 Nghiên cứu Y học 135 bp Phản ứng PCR cạnh tranh thực 20 µl hỗn hợp phản ứng, bao gồm 30 ng DNA gen (genomic DNA), x Perkin-Elmer dung dịch đệm PCR, 200 µM dNTP, 0,6 U Taq polymerase (Perkin-Elmer), 10 pmol cho mồi SMN7F SMN7R Các điều kiện tiến hành phản ứng theo chu mô tả Wirth cs(25) với chút thay đổi, mẫu khuếch đại với 35 chu kỳ Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 12 * Số * 2008 phẩm chạy điện di gel polyacrylamide 16% điện 100 V giờ, nhuộm ethidium bromide, scan gel máy ảnh Polaroid tia cực tím, phân tích đậm độ phần mềm 1.16/ppc NIH Image Phân tích đậm độ thực hai dải band cùng, tương ứng với đoạn 101 bp SMN2 đoạn 78 bp SMN1 (Hình 1) Tỉ lệ gen SMN1/SMN2 xác định dựa tỉ lệ đậm độ đoạn 78 bp/101 bp Để kiểm tra tính khả thi việc xác định tỉ lệ gen SMN1/SMN2 phân tích tỉ lệ đậm độ, xác lập khoảng chuẩn tỉ lệ đậm độ cách xử dụng hỗn hợp biết trước với tỉ lệ SMN1/SMN2 khác Gen SMN1 SMN2 khuếch đại hai phản ứng PCR riêng rẻ Một PCR để khuếch đại SMN1 từ bệnh nhân với bệnh lý thần kinh khác, người có SMN1 mà khơng có SMN2 Trong SMN2 khuếch đại từ mẫu Hình Sản phẩm PCR sau ủ với men HinfI điện di gel polyacrylamide 16% Hai dải band cùng, tương ứng với đoạn 101 bp SMN2 đoạn 78 bp SMN1 Tỉ lệ gen SMN1/SMN2 xác định dựa tỉ lệ đậm độ đoạn 78 bp/101 bp Chúng ta thấy người lành mang gen bệnh đủ gen SMN1 SMN2, người cha (F) mẹ (M) Trong bệnh nhân (P) khơng có gen SMN1 gen SMN2 Sau có sản phẩm PCR SMN, chúng tơi ủ 10 µl sản phẩm PCR với 15 U men HinfI (Toyobo) nhiệt độ 37°C giờ, để làm đứt đoạn gen SMN Do sản phẩm PCR SMN2 có vị trí hạn chế HinfI nên chúng bị cắt thành hai đoạn với chiều dài 101 34 bp, sản phẩm PCR SMN1 có hai vị trí hạn chế HinfI nên chúng bị cắt thành ba đoạn có chiều dài 78, 34, 23 bp Sau sản bệnh nhân SMA, người gen SMN1 SMN2 Sản phẩm hai PCR làm tinh khiết gel agarose với kit chiết xuất ADN SupreTM -02 -01 (Takara-Biochemicals) Các khuôn mẫu (template) pha trộn 9000 (copies) SMN1 với số lượng khác SMN2 để tạo tỉ lệ SMN1/SMN2 khác 2, 1, 0,5 1/3 Phản ứng PCR cạnh tranh với tỉ lệ SMN1/SMN2 khác tiến hành tương tự nêu KẾT QUẢ Để kiểm tra tính khả thi việc xác định tỉ lệ gen SMN1/SMN2 tỉ lệ đậm độ, xác lập khoảng chuẩn đường biểu diễn tỉ lệ đậm độ cách 77 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 12 * Số * 2008 Nghiên cứu Y học dùng hỗn hợp khuôn mẫu với tỉ lệ SMN1/SMN2 khác biết trước Chúng thấy có mối tương quan dương tính rõ rệt tỉ lể phân tử (tỉ lệ khuôn mẫu SMN1/SMN2) tỉ lệ sản phẩm PCR (tỉ lệ đậm độ SMN1/SMN2) khoảng 0-2 (Hình 2), với hệ số tương quan r = 0,959 Điều chứng tỏ tỉ lệ gen SMN1/SMN2 xác định cách phân tích đậm độ sản phẩm PCR Tỉ lệ đậm độ Sau đó, chúng tơi tiến hành xác định tỉ lệ gen SMN1/SMN2 15 người lành mang gen bệnh 19 người chứng bình thường Tỉ lệ SMN1/SMN2 người rơi vào bốn nhóm 1/3, 0,5, 2, mà khơng có trùng lắp Điều chứng tỏ cách tương ứng số gen SMN1 1/3, phân nửa, gấp đôi số gen SMN2 Bốn người lành mang gen bệnh (26,7%) có tỉ lệ 1/3, sáu người (40%, có người em) có tỉ lệ 0,5, năm người (33,3%) có tỉ lệ (Bảng Bảng 2) Khơng có người lành mang gen bệnh có tỉ lệ khơng có gen SMN2 Ở nhóm chứng, người (10,5%), 12 người (63,2%) người (26,3%) có tỉ lệ tương ứng 0,5, Khơng có người chứng có tỉ lệ 1/3 Bảng Tỉ lệ SMN1/SMN2 người lành mang gen bệnh SMA type I (NLMGB SMA I) người chứng bình thường (NCBT) Tỉ lệ SMN1/SMN2 1/3 0,5 Tổng cộng Phạm vi tỉ lệ NLMGB SMA đậm độ I 0,86 – 0.90 (26,7)* 0,98 – 1,04 (40.0) 1,06 – 1,15 (33,3) 1,17 – 1,25 15 NCBT (10,5) 12 (63,2) (26,3) 19 * Số ngoặc đơn giá trị phần trăm Bảng Phân bố tỉ lệ SMN1/SMN2 người lành mang gen bệnh SMA type I (NLMGB SMA I); F: cha; M: mẹ S: em; Gia đình thứ NLMGB SMA I 1/3 SMN1/SMN2 0,5 M F M, S F F, M F M F, M F, M F, M BÀNLUẬN Tỉ lệ SMN1/SMN2 Hình Đường biểu diễn chuẩn PCR cạnh tranh Trục hoành tỉ lệ hỗn hợp khuôn mẫu với tỉ lệ SMN1/SMN2 khác biết trước (1/3, 0,5, 2) Trục tung tỉ lệ đậm độ sản phẩm PCR cạnh tranh từ khuôn mẫu với tỉ lệ SMN1/SMN2 khác Hệ số tương quan r 0,959 Bệnh nhân SMA có nhiều kiểu hình lâm sàng khác nhau, từ thể nhẹ thể nặng Tất thể có gen SMN1 đồng hợp tử, khơng có đột biến chun biệt gen SMN1 giải thích cho thể lâm sàng khác nhau(1,6,10,12) Nghiên cứu Wirth cs cho thấy kích thước đoạn liên quan đến độ nặng bệnh(24), số gen lân cận SMN1 xem có vai trò bù trừ điều chỉnh thể lâm sàng SMA, ví dụ gen SARF1 btfp44(19) Do đó, đoạn rộng thể lâm sàng nặng Gen SMN2 gen nằm gần với SMN1 vùng SMA nhiễm sắc thể 78 Nghiên cứu Y học 5q13, giống gần hoàn toàn với SMN1 Có nhiều protein xuất phát từ gen SMN2, có kết nối vị trí khác q trình giải mã(4,5) Trong số đó, chủ yếu protein khơng có axit amin mã hóa exon 7, số lượng nhỏ protein với chiều dài đầy đủ giống hoàn toàn với protein SMN1, số protein khác với tỉ lệ khác Chính lượng nhỏ protein có chiều dài đầy đủ có vai trò bù trừ quan trọng bị gen SMN1(4,23) Ngoài ra, Hsieh-Li cs chứng minh có tương quan mạnh mẽ số lượng gen SMN2 thể lâm sàng SMA chuột(7) Nghiên cứu cho thấy bệnh nhân bị SMA type I có tần suất đoạn vùng SMA rộng 5q13(3,9) Tất điều chứng tỏ có kèm theo gen bù trừ lân cận bệnh SMA type I Nếu người lành mang gen bệnh SMA type I có đoạn rộng, SMN1 SMN2 nhiễm sắc thể bệnh, tỉ lệ SMN1/SMN2 họ 1/1 họ có SMN1 SMN2 nhiễm sắc thể bình thường Một người lành mang gen bệnh có tỉ lệ SMN1/SMN2 1:2 nhiễm sắc thể bệnh bị đoạn ngắn chứa SMN1 Vì phần lớn bệnh nhân SMA type I lô nghiên cứu chúng tơi có đoạn rộng(3,9), chúng tơi mong đợi tỉ lệ SMN1/SMN2 không lớn phần lớn người lành mang gen bệnh Kết nghiên cứu cho thấy tất người lành mang gen bệnh nghiên cứu có tỉ lệ nhỏ Mặc dù Nishio cs cho tỉ lệ SMN1/SMN2 bệnh nhân SMA type I đặc trưng bệnh SMA người Nhật(14), kết nghiên cứu không ủng hộ nhận xét Ngược lại, kết phù hợp với kết nghiên cứu thực nước phương Tây Velasco cs nhận thấy khơng có người 112 cha mẹ bệnh nhận SMA type I người Tây Ban Nha có tỉ lệ SMN1/SMN2 2(22) Schwartz cs không ghi nhận trường hợp Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 12 * Số * 2008 có tỉ lệ 60 cha mẹ bệnh nhân người Scandinavi(20) McAndrew cs ghi nhận trường hợp (1,3%) tổng số 79 cha mẹ có tỉ lệ SMN1/SMN2 người Mỹ Canada(11) Nghiên cứu không ghi nhận trường hợp có tỉ lệ SMN1/SMN2 Để kết luận, có nghiên cứu cho sở di truyền học bệnh SMA bệnh nhân người Nhật khác với người phương Tây, kết nghiên cứu cho thấy tỉ lệ SMN1/SMN2 người lành Nhật mang gen bệnh SMA type I phù hợp với kết nghiên cứu thực người phương Tây Kết hổ trợ cho quan điểm cho đoạn chuyển đổi đoạn chế di truyền bệnh SMA type I TÀI LIỆU THAM KHẢO Brzustowicz LM, Lehner T, Castilla LH, Penchaszadeh GK, Wilhelmsen KC, Daniels R, et al (1990) Genetic mapping of chronic childhood-onset spinal muscular atrophy to chromosome 5q11.2-13.3 Nature 344:540541 Chang JG, Jong YJ, Huang JM, Wang WS, Yang TY, Chang CP, et al (1995) Molecular basis of spinal muscular atrophy in Chinese Am Hum Genet 57:15031505 Diep Tran T, Kroepfl T, Saito M, Nagura M, Ichiseki H, Kubota M, Toda T, Sakakihara Y (2001) The gene copy ratios of SMN1/SMN2 in Japanese carriers with type I spinal muscular atrophy Brain Dev.; 23(5):321-6 Gavrulev DK, Shi X, Das K, Gilliam TC, Wang CH (1998) Differential SMN2 expression associated with SMA severity Nat Genet 20:230-231 (Letter) Gennarelli M, Lucarelli M, Capon F, Pizzuti A, Merlini L, Angelini C, et al (1995) Survival motor neuron gene transcript analysis in muscles from spinal muscular atrophy patients Biochem Biophys Res Commun 213:342-348 Hahnen E, Forkert R, Merke C, Rudnik-Schoneborn S, Schonling J, Zerres K, et al (1995) Molecular analysis of candidate genes on chromosome 5q13 in autosomal recessive spinal muscular atrophy: evidence of homozygous deletions of the SMN gene in unaffected individuals Hum Mol Genet 4:1927-1933 Hsieh-Li HM, Chang JG, Jong YJ, Wu MH, Wang NM, Tsai CH, et al (2000) A mouse model for spinal muscular atrophy Nat Genet 24:66-70 (Letter) Ishikawa Y, Ishikawa Y, Minami R (1996) Survival motor neuron and neuronal apoptosis inhibitory protein gene deletion analysis of childhood spinal 79 Nghiên cứu Y học 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 muscular atrophy, Noto Hattatsu; 28:450-453 In Japanese Kroepfl T, Tuan TD, Saito M, Sakakihara Y (1999) A high incidence of large scale deletion in Japanese patients with Werdnig-Hoffmann disease Acutulle NeuropaÈdiatrue Nuernberg: Novartis Pharma Verlag, pp 302-307 Lefebvre S, Burglen L, Reboullet S, Clermont O, Burlet P, Viollet L, et al (1995) Identification and characterization of a spinal muscular atrophydetermining gene Cell 80:155-165 McAndrew PE, Parsons DW, Simard LR, Rochette C, Ray PN, Mendell JR, et al (1997) Identification of proximal spinal muscular atrophy carriers and patients by analysis of SMNT and SMNc gene copy number Am J Hum Genet 60:1411-1422 Melki J, Abdelhak S, Sheth P, Bachelot MF, Burlet P, Marcadet A, et al (1990) Gene for chronic proximal spinal muscular atrophies maps to chromosomes 5q Nature 344:767-768 Munsat TL, Davies KE (1992) Meeting report: International SMA Consortium meeting Neuromusc Disord 2:423-428 Nishio H, Ishikawa J, Lee MJ, Takeshima Y, Wada H, Takeda S, et al (1999) High incidence of a survival motor neuron gene/cBCD 541 gene ratio of in Japanese parents of spinal muscular atrophy patients: a characteristic background of spinal muscular atrophy in Japan? J Neurol 246:48-52 Pearn J (1980) Classification of spinal muscular atrophies Lancet 1:919-922 Rodrigues NR, Owen N, Talbot K, Ignatius J, Dobowitz V, Davies KE (1995) Deletions in the survival motor neuron gene on 5q13 in autosomal recessive spinal muscular atrophy Hum Mol Genet 4:631-634 Roy N, Mahadevan MS, McLean M, Shutler G, Yaraghi Z, Farahani R, et al (1995) The gene for neuronal apoptosis inhibitory protein is partially deleted in individuals with spinal muscular atrophy; 80:167-178 Saitoh M, Sakakihara Y, Kobayashi S, Hayashi Y, Yanagisawa M (1997) Correlation between deletion patterns of SMN and NAIP genes and the clinical features of spinal muscular atrophy in Japanese patients Acta Pediatr Jpn 39:584-589 Scharf JM, Endrizzi MG, Wetter A, Huang S, Thompson TG, Zerres K, et al (1998) Identification of a candidate modifying gene for spinal muscular atrophy by comparative genomics Nat Genet; 20:83-86 Schwartz M, Sorensen N, Hansen FJ, Hertz JM, Norby S, Tranebjaerg L, et al (1997) Quanti®cation, by solidphase minisequencing, of the telomeric and centromeric copies of the survival motor neuron gene in families with spinal muscular atrophy Hum Mol Genet 6:99-104 Simard LR, Vanasse M, Rochette C, Morgan K, Lemieux B, Melancon SB, et al (1992) Linkage study of chronic childhood-onset spinal muscular atrophy (SMA): confirmation of close linkage to D5S39 in French Canadian families Genomics 14:188-190 Velasco E, Valero C, Valero A, Moreno F, HernandezChico C (1996) Molecular analysis of the SMN and NAIP genes in Spanish spinal muscular atrophy (SMA) families and correlation between number of copies of Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 12 * Số * 2008 23 24 25 cBCD541 and SMA phenotype Hum Mol Genet 5:257263 Vitali T, Siossi V, Tiziano F, Zappata S, Giuli A, Paravatou-Petsotas M, et al (1999) Detection of the survival motor neuron (SMN) genes by FISH: further evidence for a role for SMN2 in the modulation of disease severity in SMA patients Hum Mol Genet 8:2525-2532 Wirth B, Hahnen E, Morgan K, DiDonato CJ, Dadze A, Rudnik-Schoneborn S, et al (1995) Allelic association and deletions in autosomal recessive proximal spinal muscular atrophy: association of marker genotype with disease severity and candidate cDNAs Hum Mol Genet 4: 1273-1284 Wirth B, Herz M, Wetter A, Moskau S, Hahnen E, Rudnik Schoneborn S, et al (1999) Quantitative analysis of survival motor neuron copies: identification of subtle SMN1 mutations in patients with spinal muscular atrophy, genotype-phenotype correlation, and implication for genetic counseling Am J Hum Genet 64:1340-1356 80 ... SMN1/SMN2 1/ 3 0,5 Tổng cộng Phạm vi tỉ lệ NLMGB SMA đậm độ I 0,86 – 0.90 (26,7)* 0,98 – 1, 04 (40.0) 1, 06 – 1, 15 (33,3) 1, 17 – 1, 25 15 NCBT (10 ,5) 12 (63,2) (26,3) 19 * Số ngoặc đơn giá trị phần. .. Y, Minami R (19 96) Survival motor neuron and neuronal apoptosis inhibitory protein gene deletion analysis of childhood spinal 79 Nghiên cứu Y học 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 muscular... sắc thể bệnh, tỉ lệ SMN1/SMN2 họ 1/ 1 họ có SMN1 SMN2 nhiễm sắc thể bình thường Một người lành mang gen bệnh có tỉ lệ SMN1/SMN2 1: 2 nhiễm sắc thể bệnh bị đoạn ngắn chứa SMN1 Vì phần lớn bệnh nhân