Mối liên quan giữa nhiễm các loại HPV với tân sinh trong biểu mô cổ tử cung

Mục đích: so sánh tần suất lưu hành của HPV ở phụ nữ bị tân sinh trong biểu mô cổ tử cung với phụ nữ có cổ tử cung bình thường. Phương pháp nghiên cứu: nghiên cứu bệnh chứng; nhóm bệnh: 70 phụ nữ bị CIN, nhóm chứng: 70 phụ nữ có cổ tử cung bình thường được thử nghiệm HPV bằng phản ứng trùng hợp chuỗi (PCR). Sau đó những phụ nữ có HPV dương tính sẽ được định loại HPV bằng kỹ thuật ELISA.

MỐI LIÊN QUAN GIỮA NHIỄM CÁC LOẠI HPV VỚI TÂN SINH TRONG BIỂU MÔ CỔ TỬ CUNG Lê Thò Kiều Dung*, Trần Thò Lợi** TÓM TẮT Mục đích: so sánh tần suất lưu hành HPV phụ nữ bò tân sinh biểu mô cổ tử cung với phụ nữ có cổ tử cung bình thường Phương pháp nghiên cứu: nghiên cứu bệnh chứng; nhóm bệnh: 70 phụ nữ bò CIN, nhóm chứng: 70 phụ nữ có cổ tử cung bình thường thử nghiệm HPV phản ứng trùng hợp chuỗi (PCR) Sau phụ nữ có HPV dương tính đònh loại HPV kỹ thuật ELISA Kết quả: Tần suất nhiễm HPV phụ nữ có CTC bình thường 5,7% tần suất nhiễm HPV phụ nữ có tân sinh biểu mô cổ tử cung 74,3% Có mối liên quan chặt chẽ tình trạng nhiễm HPV với tân sinh biểu mô CTC Nguy bò tân sinh biểu mô CTC người nhiễm HPV cao gấp 47,83 lần so với người không nhiễm HPV (OR = 47,83).Tần suất nhiễm HPV tăng theo mức độ tân sinh biểu mô CTC.Trong số nhiễm HPV, type HPV16 thường gặp chiếm tỷ lệ 42,86% SUMMARY RELATIONSHIPS BETWEEN HUMAN PAPILLOMAVIRUS GENOTYPE AND CERVICAL INTRAEPITHELIAL NEOPLASIA Le Thi Kieu Dung, Tran Thi Loi * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol * Supplement of No * 2005: 130 – 134 Objectives: To compare the prevalence of Human Papillomavirus (HPV) in women with Cervical Intraepithelial Neoplasia (CIN) and in women with clinically normal cervix Methods: case-control study 70 women with CIN and 70 women with clinically normal cervix was examined for the presence of HPV by polymerase chain reaction (PCR) Further, women with HPV positive were used to determine the HPV genotypes by ELISA Results: prevalence of HPV in women with clinically normal cervix is 5,7% and in women with CIN is 74,3% There is the closed relationship between HPV and CIN The risk of CIN in the women with HPV is higher than women without HPV 47,83 time (OR = 47,83; CI) The prevalence of HPV increase parallel with the degree of cervical lesion, HPV16 was the most frequence type (42,86%) Keywords: Human papillomavirus (HPV), Cervical Intraepithelial Neoplasia (CIN) ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư cổ tử cung loại ung thư xếp hàng thứ hai số ung thư phổ biến phụ nữ toàn giới.Ở miền Nam Việt Nam, ung thư cổ tử cung chiếm tỷ lệ cao loại ung thư sinh dục nữ (11) Những yếu tố nguy ung thư cổ tử cung bao gồm: số bạn tình, tuổi lần giao hợp đầu tiên, * Bộ môn Sản Đại học Y Dược TP HCM 130 số con, hút thuốc lá, bệnh lây truyền qua đường tình dục, đặc biệt nhiễm HPV(6,11) HPV loại virus lây truyền qua đường tình dục, có mối liên hệ chặt chẽ loại HPV đặc hiệu với phát triển ung thư vùng hậu môn sinh dục Các tác giả cho thấy lợi ích thử nghiệm HPV lâm sàng vai trò hỗ trợ với tế bào Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập * Phụ Số * 2005 học chương trình sàng lọc ung thư CTC (6,9) Cho đến nay, công bố tần suất nhiễm HPV chưa nhiều Do đó, mục đích nghiên cứu đánh giá mối liên quan việc nhiễm loại HPV với tân sinh biểu mô cổ tử cung Phương pháp xử lý phân tích số liệu ĐỐI TƯNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Khảo sát đặc điểm mẫu nghiên cứu thống kê mô tả: tính tần số, phần trăm, độ lệch chuẩn, trung bình Tính tỷ số chênh OR để đánh giá nguy HPV nhóm nghiên cứu Thiết kế nghiên cứu Nghiên cứu bệnh chứng có bắt cặp Đối tượng nghiên cứu Những bệnh nhân đến khám theo dõi điều trò ngoại trú phòng khám phụ khoa phòng soi cổ tử cung bệnh viện Phụ Sản Từ Dũ thành phố Hồ Chí Minh từ 01/01/2004 đến 30/06/2004 Các số liệu thu thập mã hoá nhập vào máy vi tính với phần mềm SPSS, version 10.5 Windows Dùng phép kiểm χ2 với khoảng tin cậy 95% để kiểm đònh ý nghóa thống kê giá trò OR tìm Các phép kiểm thống kê có ý nghóa P< 0,05 Phân tích hồi quy đa biến sử dụng để khảo sát vai trò yếu tố gây nhiễu có liên quan đến ung thư CTC HPV Nhóm bệnh: 70 bệnh nhân có chẩn đoán CIN giải phẫu bệnh lý thực bệnh viện KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Nhóm chứng: 70 phụ nữ đến khám phòng khám phụ khoa bệnh viện khám lâm sàng, làm phết tế bào, soi CTC có kết luận CTC bình thường Qua khảo sát mối liên quan loại HPV tân sinh biểu mô cổ tử cung 140 phụ nữ đến khám phụ khoa phòng khám Bệnh viện Phụ Sản Từ Dũ từ 01/01/2004 đến 30/06/2004 ghi nhận kết sau: Cách chọn mẫu Ngẫu nhiên, bắt cặp theo yếu tố: tuổi bệnh nhân số lần mang thai Các bước thu thập số liệu Sau giải thích rõ mục đích nghiên cứu giới thiệu bảng thu thập số liệu, trực tiếp tiến hành vấn bệnh nhân theo bảng câu hỏi soạn, sau khám phụ khoa lấy mẫu Kỹ thuật lấy bệnh phẩm Bệnh phẩm dòch tiết vùng kênh CTC Dùng que gòn vô trùng đưa vào vùng chuyển tiếp kênh CTC quay nhiều vòng, sau lấy cho vào ống nhựa tiệt trùng Mẫu bệnh phẩm gửi đến Phòng Xét nghiệm Sinh học Phân tử Công ty Nam Khoa không sau lấy Mẫu trữ tủ lạnh -200C chờ ly trích Tuổi trung bình phụ nữ thuộc nhóm bệnh 37,40; trẻ 22 tuổi cao 66 tuổi Tập trung khoảng từ 30 – 49 tuổi (72,8%) Kết ghi nhận tương tự kết tác giả Lê Minh Nguyệt 2002(12), khảo sát 130 trường hợp nghòch sản ung thư CTC chẩn đoán phòng khám Bệnh viện Phụ Sản Từ Dũ: 73% độ tuổi từ 30 – 49 tuổi Cũng tương tự, tác giả Nguyễn Thò Ánh Vân (2002)(14), khảo sát 109 trường hợp CIN chẩn đoán phòng khám Bệnh viện Hùng Vương, độ tuổi thường gặp từ 30 – 49 tuổi, chiếm 63% trường hợp So với tác giả nước ngoài, tuổi trung bình phát CIN chung 30 tuổi, tính riêng cho CIN III 35 tuổi độ tuổi thường gặp 20 – 40 tuổi (6,9); nhận thấy tuổi phát CIN thường trễ Chúng ghi nhận tần suất nhiễm HPV CTC phụ nữ thuộc nhóm bệnh 74,3% (52/70) tần 131 suất nhiễm HPV nhóm chứng 5,7% (4/70) So sánh nhóm thấy tỷ lệ HPV dương tính nhóm bệnh cao gấp 13 lần so với nhóm chứng, khác biệt có ý nghóa thống kê với giá trò P < 0,0005 Tỷ số chênh OR tính 47,83 (KTC 95%: 13,263 – 128,293) nói lên mối liên quan chặt chẽ tình trạng nhiễm HPV với tân sinh biểu mô cổ tử cung Phụ nữ có nhiễm HPV có nguy bò tân sinh biểu mô CTC cao gấp 47 lần so với phụ nữ không bò nhiễm HPV Đây nghiên cứu bệnh chứng không cho phép xác đònh mối quan hệ nhân tình trạng nhiễm HPV với tân sinh biểu mô CTC Tuy nhiên với giá trò tỷ số chênh OR=47,83; phủ nhận mối liên quan chặt chẽ Bảng 1: So sánh tần suất nhiễm HPV phụ nữ bình thường với nghiên cứu khác: Tác giả Tần suất (%) LTK Dung LM Nguyệt 5,7 (12) (13) NT Hieáu 11,1 (2) Herrero R Lazcane- Ponce (5) Matos 9,2 16 (4) 15 18 Theo keát nghiên cứu tác giả Lê Minh Nguyệt năm 2002(12), khảo sát tần suất nhiễm HPV 130 phụ nữ có CTC bình thường 130 phụ nữ có nghòch sản ung thư CTC, tần suất nhiễm HPV phụ nữ có CTC bình thường 9,2%; cao so với kết nghiên cứu 5,7% Tham khảo kết nghiên cứu “Tần suất nhiễm HPV phụ nữ thành phố Hồ Chí Minh” tác giả Nguyễn Trọng Hiếu cộng năm 1997(13), tỷ lệ phụ nữ nhiễm HPV 11,1% Từ nghiên cứu trên, ước tính tỷ lệ nhiễm HPV miền Nam dao động khoảng 10%, tỷ lệ phù hợp với dự đoán Tổ chức Y tế Thế giới tỷ lệ nhiễm HPV nước phát triển khoảng 11 – 15%(9) 132 Bảng 2: So sánh tần suất nhiễm HPV phụ nữ có CIN với nghiên cứu khác: Tác giả LTK Dung LM Nguyệt(12) Chan Joo kim(1) Tae Sook Hwang(7) Phillip(9) Woodman Collines(9) Tần suất (%) 74,3 35,4 75 74,1 85 88 Theo nghiên cứu chúng tôi, tần suất nhiễm HPV phụ nữ có tổn thương CIN 74,3% (52/70 trường hợp) So sánh với kết nghiên cứu Chan Joo Kim cộng (2001)(1), khảo sát 140 phụ nữ Hàn Quốc có tổn thương cổ tử cung ghi nhận 75% (105/140) trường hợp nhiễm HPV, tương tự kết nghiên cứu Nghiên cứu Tae Sook Hwang cộng (2002)(7), 212 phụ nữ Hàn Quốc có tổn thương cổ tử cung cho kết tương tự, tỷ lệ HPV dương tính 74,1% (157/212) trường hợp Một số nghiên cứu khác cho kết gần giống nghiên cứu chúng toâi: 85% theo Phillip J.(9); 88% theo Woodman Collines(9) Qua kết nghiên cứu trên, nhận thấy có kết hợp chặt chẽ tình trạng nhiễm HPV với nhóm phụ nữ có tân sinh biểu mô cổ tử cung Bảng 3: So sánh tần suất nhiễm HPV mức độ tổn thương CIN với nghiên cứu khác: Tác giả CIN I (%) CIN II (%) CIN III (%) L T K Dung 50 71,3 93,1 L M Nguyeät(12) 20 28 58 Ingo Nindl 47 77 97 Wright(10) 70 83 90 Toshihiko(8) Matsukura 90 94 92 (3) Tần suất nhiễm HPV tăng dần theo mức độ tổn thương từ CIN I đến CIN III với tỷ lệ là: 50%; 71,3% 93,1% Sự khác biệt có ý nghóa thống kê với P= 0,0005 với tỷ số chênh (OR) là: 16,54; 41,30 223,22 Từ giá trò tỷ số chênh tính toán được, nhận thấy nguy tân sinh biểu mô cổ tử cung tăng lên theo tỷ lệ nhiễm HPV Kết phù hợp với kết số nghiên cứu khác: 47% cho nhóm CIN I, Chuyên đề Ngoại Sản Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập * Phụ Số * 2005 Nghiên cứu Y học 77% cho nhoùm CIN II, 97% cho nhoùm CIN III theo Ingo Nindl cộng (1998)(3); 70 – 78% cho nhoùm CIN I, 83 – 89% cho nhoùm CIN II/III theo Wright(2000), Manos (1999)(10) Bảng 4:Tần suất nhiễm loại HPV theo mức độ tổn thương CIN: Type HPV 16 CIN I CIN II (20%) (20%) CIN III Bình thường Tổng cộng 16 24 (75%) (59,3%) (42,86%) (14,8%) (7,15%) 31, 33, 35 (10%) (6,7%) (7,4%) (7,15%) 18 6-11 (40%) (25%) (8,93%) 11-16, 161 (10%) (6,7%) 18 (3,58%) 31-33, 392 (10%) 45 (13,3%) (14,8%) (12,5%) 6-11-16 (20%) (5,36%) 16-31-33 (6,7%) (1,79%) 16-39-45 (6,7%) (1,79%) 33-39-45 (6.7%) (1,79%) Không xác (10%) (3,7%) đònh (13,3%) Tổng cộng 10 (100%) (7,14%) 15 27 56 (100%) (100%) (100%) (100%) Bảng cho thấy tỷ lệ nhiễm type HPV theo mức độ tân sinh khác nhau: -Trong nhóm CIN I: tỷ lệ nhiễm HPV 50% (10/20) trường hợp Trong đó, nhiễm HPV6 HPV11 chiếm tỷ lệ cao nhất: 40% (4/10) trường hợp, loại HPV16: 20% (2/10) trường hợp, type 33, 16–18, 39–45, loại chiếm tỷ lệ 10% (1/10) trường hợp -Trong nhóm CIN II: tỷ lệ nhiễm HPV 71,43% (15/21) trường hợp Trong nhiễm HPV16 chiếm tỷ lệ cao nhất: 60% trường hợp (với ca nhiễm loại HPV16 đơn thuần, ca nhiễm loại: HPV11-16 ca nhiễm phối hợp loại: HPV6-11-16, HPV16-3133, HPV16-39-45) Kế đến HPV11 có ca (26,67%); ca nhiễm loại HPV11 đơn ca nhiễm phối hợp loại HPV6-11-16 Tiếp theo có trường hợp (26,67%) nhiễm HPV3945 (1 ca nhiễm loại: HPV39-45 ca nhiễm loại: HPV 16-39-45, HPV33-39-45) -Trong nhóm CIN III: tỷ lệ nhiễm HPV 93,1% (27/29) trường hợp nhiễm HPV16 chiếm tỷ lệ cao nhất: 59,3% (16/27) trường hợp Kế đến loại HPV18 chiếm 14,8% Tiếp theo loại HPV39-45 chiếm 11,1% 02 loại HPV31 HPV33, loại chiếm 3,7% So sánh với kết nghiên cứu Tae Sook Hwang cộng (2002)(7), khảo sát 243 phụ nữ Hàn Quốc có tân sinh biểu mô CTC, tỷ lệ nhiễm HPV dương tính 78%, có loại virus phát hiện: 16, 18, 31, 33, 35, 52, 58; type HPV16 chiếm tỷ lệ cao nhất: 30,2% Kết phù hợp với nghiên cứu Một nghiên cứu khác Chan Joo Kim cộng (2001)(1), 140 phụ nữ Hàn Quốc có tổn thương CIN ghi nhận tỷ lệ nhiễm HPV chung 75%, type HPV tìm thấy là: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 51, 52, 56, 58, 69, 68, 11, 34, 40 vaø 43 Trong nhiễm HPV16 chiếm tỉ lệ cao nhất: 32,1%, HPV35 (10,7%), HPV56 (10,7%), HPV18 (9,3%), HPV58 (8,6%) loại lại có tỉ lệ thay đổi từ 0,7 – 5,7% Kết phù hợp với nghiên cứu tỉ lệ nhiễm HPV chung cho phụ nữ có tân sinh biểu mô cổ tử cung tỉ lệ loại HPV16 cao Ingo Nindi (1999) (3), khảo sát phân bố 14 type HPV nguy cao bệnh nhân có CIN Đức cho thấy: tỷ lệ HPV nguy cao 47% nhóm CIN I, 77% nhóm CIN II 97% nhóm CIN III Trong nhóm CIN I, tỷ lệ type HPV39, 51, 56, 58 2%, HPV16 12% HPV31 2% Trong nhóm CIN II tỷ lệ type HPV16 35%, HPV31 21% Trong nhóm CIN III tỷ lệ type HPV16 74% HPV31 13% Kết phù hợp với kết nghiên cứu KẾT LUẬN Tuổi thường gặp tân sinh biểu mô CTC 133 mẫu nghiên cứu khoảng 39 đến 49 tuổi (72,8%) Tần suất nhiễm HPV phụ nữ có CTC bình thường 5,7% tần suất nhiễm HPV phụ nữ có tân sinh biểu mô cổ tử cung 74,3% Có mối liên quan chặt chẽ tình trạng nhiễm HPV với tân sinh biểu mô CTC Nguy bò tân sinh biểu mô CTC người nhiễm HPV cao gấp 47,83 lần so với người không nhiễm HPV (OR = 47,83; khoảng tin cậy 95%) Tần suất nhiễm HPV tăng theo mức độ tân sinh biểu mô CTC: -Tần suất nhiễm HPV nhóm CIN I 50% phụ nữ bò nhiễm HPV có nguy bò CIN I tăng gấp 16,5 lần so với người không bò nhiễm -Tần suất nhiễm HPV nhóm CIN II 71,43% phụ nữ bò nhiễm HPV có nguy bò CIN II tăng gấp 41,3 lần so với phụ nữ không bò nhiễm -Tần suất nhiễm HPV nhóm CIN III 93,1% phụ nữ bò nhiễm HPV có nguy bò CIN III tăng gấp 223 lần so với người không bò nhiễm Trong số nhiễm HPV, type HPV16 thường gặp chiếm tỷ lệ 42,86% Kế đến nhóm HPV39 – 45 với tỷ lệ 10,71%, nhóm HPV6–11, HPV18 với tỷ lệ 8,93% 7,14% hạn chế kinh phí thời gian Chúng mong có nhiều nghiên cứu đầy đủ hoàn thiện để xác đònh lại yếu tố liên quan với tình trạng nhiễm HPV xác đònh vai trò thử nghiệm chẩn đoán HPV sàng lọc ung thư CTC TÀI LIỆU THAM KHẢO Phân bố số loại nhiễm HPV theo nhóm CIN ghi nhận: -Nhóm CIN I: có 30% nhiễm type HPV 60% nhiễm type HPV -Nhóm CIN II: có 26,7% nhiễm type HPV; 20% nhiễm type HPV 40% nhiễm type HPV 10 -Nhóm CIN III: 81,4% nhiễm type HPV 14,8% nhiễm type HPV; trường hợp nhiễm type HPV Để kết luận, nên phối hợp phết mỏng CTC xét nghiệm xác đònh HPV kỹ thuật PCR cho đối tượng có nguy cơ, đặc biệt độ tuổi từ 30 – 49 tuổi nhằm giúp chương trình sàng lọc ung thư CTC ngày hiệu Nghiên cứu nhiều giới hạn 134 11 12 13 14 Chan Joo Kim, et al: HPV oligonucleotide microarraybased detection of HPV genotypes in cervical neoplastic lesions 12 December 2001 Gynecologic Oncology 2003; 89:210-217 Herrero R., Hildesheim A., Bratti C et al Populationbased study of human papillomavirus infection and cervical neoplasia in rural Costa Rica J Natl Cancer Inst 2000;92:464-74 Ingo Nindl, et al: distribution of 14 high risk HPV types in cervical intraepithelial neoplasia detected by a non-radioactive general primer PCR mediated enzyme immunoassay 25 August 1998 J Clin Pathol 1999; 52:17-22 Lazcano-Ponce E., Herrero R., Mudoz N et al Epidemiology of HPV infection among Mexican women with normal cervical cytology Int J Cancer 2001;91:41220 Matos E., Loria D., Amestoy GM et al Prevalence of human papillomavirus (HPV) infection among women in Concordia, Argentina: a population-based study Int J Cancer (submitted) Novak (1998): “Carvial Intraepithelial Neoplasia in Novak’s textbook of Gynecology”, 643-675 Tae Sook Hwang, et al: Detection and typing of HPV genotypes in various cervical lesions by HPV oligonucleotide microarray 11 June 2002 Gynecologic Oncology 2003; 90:51-56 Toshihiko Matsukura and Motoyasu Sugaset Relationships between 80 Human Papillomavirus Gonotypes and Different Grades of Cervical Intraepithelial Neoplasia: Association and Causality Academic press 2001; 42: 139-147 World Heath Organization: Genital human papillomavirus infections and cancer: Memorandum from a WHO meeting Bull WHO 65:817, 1987 Wright TC, Denny L, Kuhn L, et al: HPV DNA testing of selft-collected vaginal samples compared with cytologic screening to detect cervical cancer, JAMA 2000;283:81 Bộ môn sản trường Đại Học Y Dược “Nghòch sản cổ tử cung”, Sản Phụ Khoa tập II, trang 906-907 Lê Minh Nguyệt Cs (2002): “Mối liên quan tình trạng nhiễm HPV với nghòch sản ung thư cổ tử cung”, luận án tốt nghiệp chuyên khoa II Nguyễn Trọng Hiếu Cs (1997): “Tần suất nhiễm HPV phụ nữ thành phố Hồ Chí Minh”, thời Y Dược học 08/2004 Nguyễn Thò Ánh Vân (2002): “Vai trò phết tế bào âm đạo soi cổ tử cung chẩn đoán ung thư cổ tử cung giai đoạn sớm”, tiểu luận tốt nghiệp Chuyên khoa I Chuyên đề Ngoại Sản ... suất nhiễm HPV phụ nữ có CTC bình thường 5,7% tần suất nhiễm HPV phụ nữ có tân sinh biểu mô cổ tử cung 74,3% Có mối liên quan chặt chẽ tình trạng nhiễm HPV với tân sinh biểu mô CTC Nguy bò tân sinh. .. thống kê với giá trò P < 0,0005 Tỷ số chênh OR tính 47,83 (KTC 95%: 13,263 – 128,293) nói lên mối liên quan chặt chẽ tình trạng nhiễm HPV với tân sinh biểu mô cổ tử cung Phụ nữ có nhiễm HPV có... nguy bò tân sinh biểu mô CTC cao gấp 47 lần so với phụ nữ không bò nhiễm HPV Đây nghiên cứu bệnh chứng không cho phép xác đònh mối quan hệ nhân tình trạng nhiễm HPV với tân sinh biểu mô CTC Tuy