Củ bình vôi được sử dụng rộng rãi trong y học cổ truyền để điều trị chứng mất ngủ, đau đầu, an thần và lỵ. Tại An giang, loài Stephania cambodica thường được sử dụng điều trị chứng mất ngủ, lo âu, thành phần hóa học của loài này hầu như chưa được nghiên cứu. Nghiên cứu với mục tiêu chiết xuất và xác định cấu trúc các alkaloid phân lập từ dược liệu bình vôi.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CÁC ALKALOID KÉM PHÂN CỰC TRONG LỒI STEPHANIA CAMBODICA GAGNEP MENISPERMACEAE Mã Chí Thành*, Trần Hùng** TĨM TẮT Mở đầu: Củ bình vơi sử dụng rộng rãi y học cổ truyền để điều trị chứng ngủ, đau đầu, an thần lỵ(2,8,7) Tại An giang, loài Stephania cambodica thường sử dụng điều trị chứng ngủ, lo âu(6,8) Thành phần hóa học lồi chưa nghiên cứu Mục tiêu: Chiết xuất xác định cấu trúc alkaloid phân lập từ dược liệu Bình vơi Phương pháp nghiên cứu: Dược liệu Bình vơi chiết xuất với cồn citric 5% nhiệt độ phòng Dịch chiết cồn acid cô thu hồi dung môi áp suất giảm thu cao alcaloid toàn phần Các phân đoạn phân tách lắc phân bố lỏng-lỏng với dung môi CHCl3 sử dụng gradient pH Các hợp chất tinh khiết phân lập sắc ký qua cột chân không, cột cổ điển, kết tinh phân đoạn… Cấu trúc chất tinh khiết phân lập xác định liệu phổ MS, NMR Kết quả: từ 4,5 kg ngun liệu thơ củ Bình vơi Cam bốt, thu alcaloid toàn phần Cao chiết lắc phân bố với dung môi CHCl3 thu phân đoạn theo thứ tự A (167 g), B (85 g), C (13 g), D (14 g), E (22 g) F (102 g) Từ phân đoạn hợp chất tinh khiết phân lập Trong đó, cấu trúc chất xác định l-tetrahydropalmatin (3), crebanin (4), oxocrebanin (5), palmatin (6) jatrorrhizin (7) Riêng hợp chất (6) (7) đề cập báo trước đây(4) Kết luận: từ thành phần loài S cambodica, phân lập xác định cấu trúc hợp chất Trong hợp chất oxocrebanin lần phân lập chi Stephania Việt Nam Từ khóa: Bình vơi, Stephania cambodica, crebanin, oxocrebanin, aporphin alcaloid ABSTRACT ISOLATION AND IDENTIFICATION NON-POLAR ALKALOIDS FROM TUBERS OF STEPHANIA CAMBODICA GAGNEP MENISPERMACEAE Ma Chi Thanh, Tran Hung * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 18 - Supplement of No - 2014: 481 - 487 Background: The tuber of Stephania spp (Menispermaceae) is widely used in traditional medicine for the treatment of insomnia, headache and dysentery In An giang province the tuber of Stephania cambodica Gagnep (Menispermaceae) is used for treatment of insomnia, anxiety… Although it has been used in the traditional medicine for a long time, the chemical constituents of this plant are still unknown Objectives: To extract and determine the structure of alkaloids from tubers of S cambodica Methods: The powder of dried tubers Stephania cambodica was percolated with acidic alcohol (5% citric acid) at room temperature The solvent was evaporated under reduced pressure to obtaine a crude extract Fractions were separated by liquid-liquid distribution with CHCl3 using gradient pH Alkaloids were isolated by vacuum column chromatography, conventional column chromatography and purified by recrystallization Structures of isolated compounds were elucidated based on MS and NMR spectral data Results: From 4.5 kg of S cambodica tubers, total alkaloidal extract was obtained The extract was treated with CHCl3 to give six fractions namely, A (167 g), B (85 g), C (13 g), D (14 g), E (22 g) F (102 g) From * Labo hóa hợp chất tự nhiên Khoa Dược, Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh ** Bộ môn Dược liệu, Khoa Dược, Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: ThS Mã Chí Thành ĐT: 0988611055 Email: machithanh2002@yahoo.com Chuyên Đề Dược Học 481 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 these fractions, eight compounds were isolated by column chromatography on silica gel Among them, five compounds were identified as l-tetrahydropalmatine (3), crebanine (4), oxocrebanine (5), palmatine (6) and jatrorrhizine (7) Compounds (6) and (7) have already reported in previous paper(4) Conclusion: six compounds was isolated and identified from the tuber of Stephania cambodica in which oxocrebanine (5) was isolated for the first time from the genus Stephania in Vietnam Keywords: Stephania cambodica, crebanine, oxocrebanine, aporphine alkaloids ĐẶT VẤN ĐỀ Phương pháp nghiên cứu Củ Bình vơi sử dụng rộng rãi y học cổ truyền để điều trị chứng ngủ, đau đầu, an thần lỵ Trữ lượng loài Việt nam nhiều Tại khu vực phía Nam lồi Bình vơi tập trung tỉnh Nha Trang, Daklak, Lâm Đồng, Bình Thuận, Đồng Nai, Kiên Giang, An Giang,…Dưới tên Bình vơi lồi Stephania khác Trong có lồi Stephania cambodica (Bình vơi Cam bốt) phân bố vùng núi An Giang thường sử dụng điều trị chứng ngủ, lo âu Mặc dù loài sử dụng nhiều, chung với loài khác, thành phần hóa học lồi chưa biết đến Ngun liệu thơ củ Bình vơi chiết xuất với cồn citric 5% nhiệt độ phòng dịch chiết loại dung môi áp suất giảm thu cao alcaloid toàn phần Tiến hành lắc phân bố cao tồn phần với dung mơi CHCl theo tăng dần pH để thu phân đoạn alcaloid đơn giản Tiếp theo đó, phân đoạn thu sắc ký qua cột silica gel phân lập hợp chất tinh khiết Các chất phân lập kiểm tra mức độ tinh khiết sắc ký lớp mỏng nhiều hệ dung môi phương pháp phổ IR, MS Cấu trúc chất suy từ liệu phổ MS, NMR (1H, 1C, DEPT, COSYGP, NOESYGP, HMBC, HSQC) NGUYÊNLIỆU - PHƯƠNGPHÁP NGHIÊN CỨU KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Ngun liệu Củ Bình vơi (4.5 kg) chiết ngấm kiệt với cồn citric 5% nhiệt độ thường, dịch chiết cồn acid sau cô thu hồi dung môi đến cao đặc Cao cồn acid hồ lỗng với nước theo tỉ lệ (1:2) sau chiết phân bố với dung mơi CHCl theo gradient pH pH 2-, pH cuối pH 9-10 Dịch chiết CHCl cô thu hồi dung môi thu phân đoạn A (27 g), B (85 g), C (1 g), D (14 g), E (22 g) and F (102 g) Củ Bình vơi thu hái An giang (02/2007) thái nhỏ phơi mát khô xay nhỏ đến dạng bột thô (4,5 kg) Mẫu dược liệu lưu giữ Khoa dược – Đại Học Y Dược Tp.HCM Sắc ký cột cổ điển sắc ký cột chân không dùng silica gel 60 (Merck, 40-6 Ɔm) Sắc ký lớp mỏng dùng mỏng Silica gel F254 tráng sẳn (Art.1.05554, Merck) phát vết đèn UV 254/65 nm thuốc thử Dragendorff Phổ IR thực máy FT-IR 8201PC (Shimadzu) phương pháp dập viên KBr Phổ MS thực máy Quattro Micro API (Waters) Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Phổ NMR thực máy Bruker AM500 FT-NMR Phòng cấu trúc, Viện hố học, Trung tâm Khoa học Công nghệ quốc gia, Hà Nội, sử dụng tetramethylsilan (TMS) chất chuẩn nội 482 Phân đoạn A (8 g) sắc ký với cột silica gel (Merck, 40-6 Ɔm) giảm hoạt 10% nước, sấy lại nhiệt độ 110 oC giờ, khai triển với hệ dung môi benzen-aceton với tăng dần tỉ lệ aceton thu phân đoạn (A1-A5) Trong phân đoạn A2, A kết tinh dung môi MeOH cho chất (2 mg), (70 mg) Phân đoạn B phân lập từ phân đoạn I cô quay thu hồi dung môi, hoà tan lại EtOH để lạnh thu tinh thể thô (6,9 g) Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 (986 mg) chất (12 mg) Kết tinh thô sắc ký qua cột silica gel cổ điển thu với hệ dung môi PE-CH2Cl2 (9:1), (8:2), (6:4) thu chất (10,2 mg) chất (66 mg) Phân đoạn F sau cô quay áp suất giảm thu kết tinh thô khoảng 102 g từ kết tinh thơ qua q trình kết tinh nhiều lần thu chất (12,85 g) Phân đoạn C (1 g) D (14 g) tiếp tục phân tách thành phân đoạn đơn giản sắc ký cột chân không với chất hấp phụ silica gel, hệ dung môi CH2Cl2 với tăng dần tỉ lệ MeOH Từ phân đoạn C thu 10 phân đoạn (C1 – C10), phân đoạn D thu 1 phân đoạn (D1 – D1) Phân đoạn D4 kết tinh lại MeOH thu chất (8,8 mg) Phân đoạn C7 D8 thu chất kết tinh tương ứng chất Xác định cấu trúc hợp chất phân lập dựa liệu phổ (IR, MS, 1H NMR 1C NMR, sử dụng kỹ thuật DEPT, COSYGP, HSQC, HMBC, NOESYGP) cách so sánh liệu phổ với tài liệu xuất O O 3a Nghiên cứu Y học 3a 5 1 O 6a 1b N O 11a 1b 11a 7 7a 11 O 7a 11 N 1a CH3 1a 6a 10 10 9 OCH3 OCH3 H3CO R1O 4a OCH3 OCH3 N 4a + H3CO 13b 13a R2O 13 8a 13b 13a OCH3 12a N 8a OCH3 12a 9 12 12 10 10 11 11 OCH3 R1 R2 -CH -CH -H -CH 13 OCH3 l-tetrahydropalmatin (3): Hợp chất tinh thể hình khối, khơng màu, tan tốt benzen, CHCl, CH2Cl2, tan MeOH tan MeOH Phổ 1H xem bảng 1; 1 C Kiểm tra hợp chất sắc ký lớp mỏng với rotundin chuẩn nhiều hệ dung môi cho thấy tinh thể kết tinh có Rf trùng với Rf rotundin chuẩn (l-tetrahydropalmatin) Phổ ESI-MS positive cho biết hợp chất có pic (M+H)+ m/z = 56 tương ứng với công thức nguyên C21H25NO4 Các phân mảnh m/z = 192,16 (C11H1NO2)+; m/z = 165,11 (C9H10NO2)+ cho thấy chúng phù hợp với cấu trúc ltetra-hydropalmatin bị cắt đứt vị trí vòng C (Hình 1) Crebanin (4): tinh thể hình kim màu trắng, tan tốt benzen, aceton, CH2Cl2, CDCl, Hình 1: Cấu trúc rotundin Phổ ESI-MS positive hợp chất cho ion có m/z = 40,22 (M+H)+ tương ứng với công thức nguyên C20H21NO4; có phân mảnh m/z =09,14 (M-OCH)+; phân mảnh m/z = 278,14 (MOCH)+ phân mảnh m/z = 25,24 (M(OCH2O))+ Dữ liệu phổ 1C-NMR, DEPT cho thấy Chuyên Đề Dược Học 483 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 cấu trúc hợp chất có 20 carbon bao gồm nhóm có chuyển dịch hóa học đặc trưng nhóm CH, nhóm CH2, nhóm CH, carbon nhóm chức methoxy (δC 60,7 ppm, δH ,87 ppm, s; bậc IV Tất carbon bậc IV chuyển dịch 8-OCH); (δC 55,8 ppm, δH ,89 ppm, s; 9-OCH) vùng trường thấp (δC từ 116 – 152 ppm) đặc nhóm N-CH (δC 44,0 ppm, δH 2,57 ppm, s) trưng carbon lai hóa sp2 Trong số có Vị trí nhóm methylendioxy carbon mang dị tố oxy (δC 152,1; 146,6; 145,9 nhóm methoxy giá trị chuyển dịch 142,1 ppm) Độ bất bão hòa cấu trúc 11 carbon proton phân tử chất xác chứng tỏ cấu trúc có vòng với vòng thơm định tương tác H-H H-C quan sát Trong số carbon bậc III, có carbon đứng phổ COSY HMBC Như cấu kế cận (δC 12,1 ; δH 7,80 (1H, d) 110,; δH 6,87 trúc hợp chất xác định crebanin, (1H, d) ppm) số ghép J=8,5 Hz proton alcaloid phân lập trước carbon carbon lại đứng riêng rẽ số loài thuộc chi Stephania phổ proton carbon (δC 106,8) đỉnh Chuyển dịch proton tham khảo đơn phổ 1H NMR với δH 6,52 ppm (1H, s) tài liệu(1) phù hợp với kết thực carbon vị trí δC 61,9 ppm có proton nghiệm cấu trúc hợp chất đỉnh đa (δH ,07, 1H, m) Phổ C NMR hợp chất cho thấy 1 tín hiệu carbon methylen có Các giá trị chuyển dịch hóa học proton carbon hợp chất 4, so sánh với tài liệu trình bày Bảng nhóm methylendioxy (δC 100,6 ppm) vốn thường Oxocrebanin (5): Hợp chất tinh thể hình gặp alcaloid chi Stephania carbon khối màu đỏ cam, tan tốt dung môi mang nối đơn đặc trưng cấu trúc phân cực CHCl, CH2Cl2, aceton, tan dihydroquinolein với carbon gắn trực tiếp với MeOH Cho phản ứng dương tính với nitơ (δC 5,7 ppm 29,2 ppm) Carbon lại thuốc thử Dragendorff, hợp chất (5) xuất vùng trường cao δC 27,0 ppm dự đoán alcaloid Sắc ký lớp mỏng hợp chất carbon methylen vị trí C-7 quan sát UV 65 nm cho vết màu đỏ cam Trong ba nhóm methyl hợp chất 4, có Bảng 1: Dữ liệu phổ 1H-NMR (500 MHz) 13C-NMR (125 MHz, CDCl3) hợp chất so sánh với crebanin C 3a 6a 6b 7a 484 4/CDCl3 δH (J, Hz) HMBC COSY δC – 142,1 – 146,6 6,52 (1H, s) 106,8 C-1, C-2, C-3a, C-4, C-6b – 126,7 2,62 (1H; dd; 3,5; 16 Hz) 29,2 C-3, C-3a, C-5, C-6b 3,12 (1H, br t) 3,04 (1H, m) 53,7 C-3a, N-CH3 2,52 (1H; ddd; 3,5; 11,5; 15 Hz) 3,07 (1H, m) 61,9 C-3a, C-6b H-7 – 126,6 2,29 (1H; t; 14,5 Hz) C-6a, C-6b 27,0 H-6a 3,67 (1H; dd; 4,5; 14,5 Hz) C-7a, C-8 – 129,9 – 152,1 Crebanin/CDCl3 (1) δH (J, Hz) – – 6,50 (1H, s) – 2,62 (1H; td; 3,5 Hz) 3,11 br t 3,06 (1H, m) 2,54 (1H; td; 3,5; 11,6 Hz) 3,15 br d – 2,31 (1H; dd; 14,3 Hz) 3,66 (1H; dd; 4,3; 14,6 Hz) – – δC 142,1 146,8 106,8 128,8 28,9 53,5 61,8 126,4 26,7 129,6 152,0 Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 C 10 11 11a 11b 12 8-OMe 9-OMe N-CH3 δH (J, Hz) – 6,87 (1H; d; 8,5 Hz) 7,80 (1H; d; 8,5 Hz) – – 6,06 (1H; d; 1,5 Hz) 5,91 (1H; d; 1,5 Hz) 3,87 (3H, s) 3,90 (3H, s) 2,57 (3H, s) 4/CDCl3 δC 145,9 110,4 123,1 124,7 116,6 HMBC COSY 7a, 8, 9, 11a C-7a, C-9, C-11 H-11 H-10 100,6 C-1, C-2 60,7 55,8 44,0 C-8 C-9 C-5, C-6a Phổ ESI-MS positive chất cho ion m/z = 6,56 (M+H)+ Do khối lượng phân tử hợp chất 5 tương ứng với công thức Nghiên cứu Y học Crebanin/CDCl3 (1) δH (J, Hz) – 6,85 (1H; d; 8,6 Hz) 7,78 (1H; d; 8,6 Hz) – – 6,04 (1H; d; 1,5 Hz) 5,89 (1H; d; 1,5 Hz) 3,79 (3H, s) 3,87 (3H, s) 2,53 (3H, s) δC 145,8 110,3 123,1 124,5 116,5 100,6 60,7 55,7 43,4 proton methylen đặc trưng nhóm methylendioxy Một proton dạng đỉnh đơn quan sát δH 7,02 ppm trúc hợp chất có nhóm methoxy Phổ 1C-NMR cho thấy tín hiệu carbon methylendioxy quan sát δC 102,0 ppm tín hiệu nhóm methyl vùng từ 55-60 ppm tín hiệu nhóm methoxy δc 61,4 ppm δC 56, ppm Tín hiệu nhóm carbonyl vị trí δC 181,6 ppm tín hiệu carbon C-7 cấu trúc nhóm methylendioxy Độ bất bão hoà cấu Trên liệu phổ COSY cho tín hiệu trúc 14 Điều xác nhận liệu tương tác cặp proton kế cận nhau, NMR Phổ 1C-NMR, DEPT xác nhận cấu có cặp proton kế cận vòng trúc hợp chất có 19 carbon bao gồm carbon pyridin thơm nguyên C19H1NO4 Ngoài có phân mảnh có m/z 18,88 = (M+H)+- (O), m/z 05,994 = (M+H)+ – (-OCH), m/z 292,480 = (M+H)+ - (OCH2-O), m/z 27,99 = (M+H)+ – (-OCH) – (OCH) Các liệu cho thấy cấu nhóm carbonyl, proton gắn với vòng thơm, Phổ HMBC hợp chất cho thấy proton nhóm methoxy nhóm methylendioxy H-4 vị trí δH 7,6 ppm vòng pyridin Kết phân tích liệu phổ so sánh với thơm cho tương tác với carbon có δC 102,2 ppm tài liệu tham khảo cho thấy cấu trúc hợp chất (C-), tương tự proton H- vị trí δH 7,02 ppm phù hợp với cấu trúc thuộc nhóm oxoaporphin có tương tác với carbon δC 12,8 ppm Phổ 1H-NMR cho biết cấu trúc chất hợp chất có 21 proton với đỉnh đơi vị trí δH 8,78 ppm (1H) δH 7,6 ppm (1H) có số ghép Hz 2, 3J proton thơm vòng pyridin Hai tín hiệu đỉnh đơn quan sát δ 4,01 δ ,95 ppm với proton cho đỉnh cho tín hiệu nhóm methoxy vòng thơm Hai đỉnh đôi δH 8,28 7,16 ppm ứng với vị trí proton có số ghép Hz cho proton vị trí ortho vòng thơm Tín hiệu đỉnh đơn quan sát vị trí 6,0 ppm ứng với proton (carbon C4) vòng pyridin thơm Chuyên Đề Dược Học carbon C-1 C-2 Tín hiệu proton thuộc nhóm methylendioxy cho tương tác với carbon C-1, C-2 So sánh liệu phổ với chất cơng bố liệu chất hoàn toàn trùng khớp với cấu trúc oxocrebanin(,5) Cấu trúc hợp chất chuyển dịch hóa học carbon proton phân tử xác định cách chắn liệu phổ NMR chiều 485 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học Bảng 2: Dữ liệu phổ 1H-NMR (500 MHz) 13C-NMR (125 MHz, CDCl3) hợp chất so sánh với oxocrebanin C (5)/CDCl3 δC 146,4 151,7 δH (J, Hz) 7,02 (1H, s) 3a 6a 6b 7a 10 11 11a 11b -OCH2O8-OMe 9-OMe HMBC C-1, C-2, C-3a, C4, C-6b 102,2 146,2 123,4 144,6 135,4 122,0 181,6 125,7 151,3 153,7 117,2 123,8 126,7 108,6 7,63 (1H; d; 5,5 Hz) 8,78 (1H; d; Hz) 7,16 (1H; d; Hz) 8,28 (1H; d; Hz) Oxocrebanin(3) CDCl3 Oxocrebanin(5) CDCl3 COSY δH (J, Hz) δH (J, Hz) 3, 5, 6b 3a, 4, 6a H-5 H-4 7,63 (1H; d; Hz) 8,76 (1H; d; Hz) 7,61; d; Hz 8,77; d; Hz 8, 9, 11a 7a, 8, 9, 11b H-11 H-10 7,13 (1H; d; 8,5 Hz) 8,25 (1H; d; 8,5 Hz) 7,11 (1H; d; 8,8 Hz) 8,21 (1H; d; 8,8 Hz) 102,0 1, 6,30 (2H; s) 6,30 (2H; s) 4,01 (3H; s) 3,95 (3H; s) 61,4 56,3 4,01 (3H; s) 3,94 (3H; s) 4,02 (3H; s) 3,96 (3H; s) 2.62 dd J= 3.5 Hz 16 Hz H H 3.13 m H H O 29.2 106.8 146.6 53.7 126.7 5.91 d J=1.5Hz H 126.6 61.9 116.6 H N CH3 151.7 27.0 O 8.28 d J=9 Hz 3.07 m H 129.9 H 123.1 H H 102.2 123.4 H 8.78 d J= Hz 144.6 146.2 N 122.0 44.0 2.57 s H 124.7 7.63 d J= 5.5 Hz 102.0 H O 7.80 d J=8.5 Hz O H 2.52 ddd J= 3.5 Hz 11.5 Hz 15 Hz 100.6 142.1 7.02 s 3.04 m H 6.30 s H 6,98 (1H; s) 6,30 (2H; s) 6.52 s 6.06 d J=1.5Hz 7,06 (1H, s) 146.4 108.6 H 3.67 dd J=4.5Hz 15 Hz 126.7 181.6 125.7 123.8 2.29 t J=14.5 Hz 135.6 117.2 O 151.3 145.9 110.3 152.1 H OCH3 6.87 d J= 8.5 Hz OCH3 60.7 3.81 s 7.16 d J= Hz H OCH3 153.7 61.4 4.01 s OCH3 55.8 3.90 s 56.3 3.95 s Crebanin Oxocrebanin Tương tác H-H COSY Tương tác xa H-C HMBC 486 Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 KẾT LUẬN Đây lần chất báo cáo có thành phần lồi S cambodica Trong đó, oxocrebanin lần phân lập chi Stephania Việt Nam Ngoài ra, liệu phổ NMR đầy đủ oxocrebanin ghi nhận báo cáo báo Việc phân lập xác định cấu trúc alcaloid khác tiến hành TÀI LIỆU THAM KHẢO Blanchfield JT, Sands DPA, Kennard CHL, Byriel KA, Kitching W (200), “Characterisation of alkaloids from some Australian Stephania (Menispermaceae) species”, Phytochemistry, 6, 711–720 Đỗ Tất Lợi (2000), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y Học, Hà Nội, tr 512–515, 779–781 Guinaudeau H (198), “Aporphinoid Alkaloids III”, Journal of Natural Products, Vol 46 No 6, pp 761-85 Chuyên Đề Dược Học Nghiên cứu Y học Mã Chí Thành, Trần Hùng (2011), Phân lập hai protoberberin alkaloid từ lồi Bình vơi Cam bốt (Stephania cambodica Gagnep Menispermaceae), Tạp chí y học Thành phố phụ số 1, 565570 Pung T (2000), The isolation of natural products from plant extracts, Master of Science In Chemistry, Virginia Polytechnic Institute and State University Viện Dược liệu (200), “Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, NXB Khoa học Kỹ thuật, TPHCM, tr 210 – 215(I), 547–548(I), 161–16 (II) Võ Văn Chi (1991), “Cây thuốc An Giang”, NXB Khoa Học Kỹ thuật An Giang, tr 98–99 Võ Văn Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y Học, Hà Nội, tr 25–27 Ngày nhận báo: Ngày phản biện nhận xét báo: 14.12.2012 27.12.2012 Ngày báo đăng: 10.03.2014 487 ... cáo có thành phần lồi S cambodica Trong đó, oxocrebanin lần phân lập chi Stephania Việt Nam Ngoài ra, liệu phổ NMR đầy đủ oxocrebanin ghi nhận báo cáo báo Việc phân lập xác định cấu trúc alcaloid... Từ phân đoạn C thu 10 phân đoạn (C1 – C10), phân đoạn D thu 1 phân đoạn (D1 – D1) Phân đoạn D4 kết tinh lại MeOH thu chất (8,8 mg) Phân đoạn C7 D8 thu chất kết tinh tương ứng chất Xác định. .. lắc phân bố cao tồn phần với dung mơi CHCl theo tăng dần pH để thu phân đoạn alcaloid đơn giản Tiếp theo đó, phân đoạn thu sắc ký qua cột silica gel phân lập hợp chất tinh khiết Các chất phân lập