Bài viết trình bày đánh giá sự tương hợp tình trạng Her2 trong carcinôm tuyến dạ dày giữa mẫu mô nội soi sinh thiết và bệnh phẩm mổ cắt dạ dày trên cùng một bệnh nhân.
Y Học TP Hồ Chí Minh * PB Tập 21 * Số * 2017 Nghiên cứu Y học SO SÁNH TÌNH TRẠNG HER2 TRONG CARCINƠM TUYẾN DẠ DÀY GIỮA MẪU MÔ NỘI SOI SINH THIẾT VÀ BỆNH PHẨM MỔ CẮT DẠ DÀY Phạm Hùng Cường*, Trần Nữ Hoàng Yến** TĨMTẮT Mục đích: Đánh giá tương hợp tình trạng Her2 carcinôm tuyến dày mẫu mô nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ cắt dày bệnh nhân Bệnh nhân phương pháp: Nghiên cứu mô tả loạt ca 52 trường hợp carcinôm dày nội soi dày, cắt dày khảo sát tình trạng Her2 (hố mơ miễn dịch (HMMD) lai chỗ huỳnh quang (FISH)) Bệnh viện Ung Bướu TP HCM từ 06/2014 đến 07/2016 Her2 dương tính HMMD 3+, HMMD 2+ FISH (+) Kết quả: + Tình trạng Her2 dương tính qua khảo sát 9,6% + Tỉ lệ tương hợp tình trạng Her2 mẫu mơ nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ cắt dày 98% (Kappa=0,879) Kết luận: + Tình trạng Her2 carcinơm tuyến dày mẫu nội soi sinh thiết có tương hợp cao với tình trạng Her2 mẫu bệnh phẩm mổ cắt dày Có thể dùng kết đánh giá tình trạng Her2 carcinơm tuyến dày mẫu nội soi sinh thiết để định điều trị trastuzumab trường hợp carcinôm dày tiến xa Từ khóa: HER2, carcinơm tuyến dày ABSTRACT COMPARISON OF HER2 STATUS IN GASTRIC ADENOCARCINOMA PATIENTS BETWEEN GASTRECTOMY SPECIMENS AND MATCHED ENDOSCOPIC SPECIMENS Pham Hung Cuong, Tran Nu Hoang Yen * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Supplement Vol 21 - No - 2017: 307 - 312 Purpose: To evaluate the concordance between HER2 status in both surgical specimens and matched endoscopic specimens of gastric adenocarcinoma patients Patients and Methods : Records of 52 patients with gastric adenocarcinoma diagnosed by upper GI endoscopy, treated by gastrectomy and Her2 status assessed (by immunohistochemistry (IHC) and fluorescence in situ hybridisation (FISH)) from Juin, 2014 through July, 2016 in HCMC Oncology Hospital were studied and presented in case series Her2-positive status was defined by a score 3+ in IHC, or 2+ with a positive FISH test Results : + Her2-positive status was identified in 9.6% + The concordance of Her2 status between endoscopic biopsy and surgical specimens was 98% (Kappa=0.879) Conclusion: There was a very high concordance between the Her2 status results performed on surgical specimens and matched endoscopic specimens + Her2 status assessed on endoscopic biopsy specimens could be reliable for treatment decisions using anti-Her2 agents in patients with advanced gastric carcinoma Keywords: Her2, gastric adenocarcinoma * Bộ môn Phẫu thuật Thực hành Đại học Y Dược TP HCM, Khoa Ngoại BV Ung Bướu TP HCM ** Khoa Xạ 3, BV Ung Bướu, TPHCM Tác giả liên lạc: PGS.TS.BS Phạm Hùng Cường ĐT: 0905922299 Email: phcuongvn@yahoo.com Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy năm 2017 307 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * PB Tập 21 * Số * 2017 ĐẶTVẤNĐỀ ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Theo Globocan 2012, ung thư dày bốn loại ung thư thường gặp Việt Nam(8) Theo kết ghi nhận ung thư quần thể TP HCM năm 2014, ung thư dày ung thư thường gặp đứng hàng thứ tư nam giới với xuất độ chuẩn-tuổi 9,2/100.000 dân(9) Đối tượng nghiên cứu Ung thư dày, chủ yếu carcinôm tuyến, thường nhập viện giai đoạn trễ; ung thư xâm lấn chỗ di xa Các bệnh nhân giai đoạn trễ khơng định mổ, mà hố trị chăm sóc giảm nhẹ Với nhiều phác đồ hoá trị đại, trung vị thời gian sống bệnh nhân tốt 11,2 tháng(2) Mới đây, thuốc điều trị nhắm đích trastuzumab dùng phối hợp với hố chất giúp nâng trung vị thời gian sống bệnh nhân carcinôm tuyến dày giai đoạn trễ lên 16 tháng(2) Chỉ bệnh nhân carcinơm dày có biểu HER2 dương tính hưởng lợi từ thuốc trastuzumab, phần lớn bệnh nhân carcinôm dày giai đoạn trễ xét nghiệm tình trạng HER2 dựa bệnh phẩm có từ nội soi dày Tại Việt Nam, có cơng trình nghiên cứu tình trạng biểu Her2 bệnh nhân carcinôm dày công bố(4,10,11,14,15,16,17,20) Các cơng trình nghiên cứu biểu HER2 riêng bệnh phẩm mổ mẫu mô nội soi bệnh nhân carcinơm dày Chưa có nghiên cứu so sánh tình trạng HER2 carcinơm tuyến dày mẫu mô nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ cắt dày bệnh nhân Do vậy, thực khảo sát nhằm mục tiêu: Đánh giá tương hợp tình trạng HER2 carcinôm tuyến dày mẫu mô nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ cắt dày bệnh nhân Đối tượng nghiên cứu bệnh nhân carcinôm dày nội soi dày, mổ bụng khảo sát tình trạng HER2 (HMMD lai chỗ huỳnh quang (FISH)) Bệnh viện Ung Bướu TP HCM từ 06/2014 đến 07/2016 Tiêu chuẩn chọn mẫu - Các bệnh phẩm mổ mẫu mô nội soi sinh thiết dày bệnh nhân có chẩn đốn carcinơm tuyến - Mẫu mơ có đủ mô ung thư để xét nghiệm HMMD FISH Tiêu chuẩn loại trừ - Bệnh nhân có điều trị hố xạ trước - Bệnh nhân khơng đồng ý tham gia nghiên cứu Biến số khảo sát Tình trạng HER2: biến định tính, có giá trị: dương tính âm tính HER2 dương tính: HMMD 3+, HMMD 2+ FISH (+) HER2 âm tính: HMMD 0, 1+, HMMD 2+ FISH (-)(3) + Quy trình xét nghiệm xác định tình trạng HER2 trình bày Hình + Cách đọc kết HMMD: Chấm điểm HMMD biểu protein HER2 mẫu theo hướng dẫn đọc kết HER2 dành cho mẫu nội soi (Bảng 1) cho bệnh phẩm mổ (Bảng 2) + Cách đọc kết FISH: Dựa khuyến cáo đánh giá kết FISH theo ASCO/CAP 2013(25) Xử lý số liệu Số liệu ghi nhận vào phiếu thu thập liệu Nhập xử lý số liệu phần mềm SPSS 16.0 for Windows 308 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy năm 2017 Y Học TP Hồ Chí Minh * PB Tập 21 * Số * 2017 + Các biến số định tính đếm tần xuất diện có khơng + Các biến số định lượng tính giá trị trung bình độ lệch chuẩn + Mức độ tương hợp biểu Her2 mẫu bệnh phẩm mổ cắt dày mẫu nội soi sinh thiết đánh giá số Cohen’s Kappa Các phép kiểm chọn p < 0,05 có ý nghĩa thống kê, với độ tin cậy 95% Nghiên cứu Y học Điểm HMMD Trên bệnh phẩm mổ 3+ Toàn tế bào bướu bắt màu cường độ (dương tính) mạnh thấy >10% tế bào bướu KẾTQUẢ Đặc điểm nhóm bệnh nhân khảo sát Mẫu nghiên cứu gồm 52 bệnh nhân Đặc điểm nhóm bệnh nhân khảo sát trình bày Bảng Bảng : Đặc điểm nhóm bệnh nhân khảo sát Tuổi Giới 57 ± 10 tuổi (35-78 tuổi) Nam/Nữ : 3,3 Tâm vị : ca (6%) Vị trí bướu Thân vị : 13 ca (25%) Hang-môn vị : 36 ca (69%) Grad 1: ca (10%) Grad mô học Grad 2: 23 ca (44%) Grad 3: 24 ca (46%) Tuyến ruột: 20 ca (38%) Loại mô học (theo Lauren) Lan tỏa: 13 ca (25%) Hỗn hợp: 19 ca (37%) Tình trạng HER2 mẫu mô nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ cắt dày: Hình 1: Sơ đồ quy trình xét nghiệm HER2 nghiên cứu Bảng 1: Hướng dẫn đọc kết HMMD HER2 mẫu nội soi sinh thiết(21) Điểm HMMD (âm tính) Trên mẫu nội soi sinh thiết Không phản ứng nhuộm màng bào tương tế bào bướu Các đám tế bào bướu bắt màu nhạt bất chấp 1+ tỉ lệ (tuy nhiên đám phải có tế (âm tính) bào) 2+ Các đám tế bào bướu bắt màu hồn tồn từ (khơng rõ yếu đến vừa màng tế bào mặt đáy- bên ràng) mặt bên, bất chấp tỉ lệ 3+ Các đám tế bào bướu bắt màu đậm hoàn toàn (dương mặt đáy- bên mặt bên, bất chấp tỉ lệ tính) Bảng 2: Hướng dẫn đọc kết HMMD HER2 mẫu bệnh phẩm mổ(21) Điểm HMMD Trên bệnh phẩm mổ 0-10% tế bào bướu bắt màu hóa mơ (âm tính) miễn dịch 1+ >10% tế bào bướu bắt màu (âm tính) bắt màu nhạt phần tế bào Toàn tế bào bướu bắt màu 2+ cường độ bắt màu từ yếu đến trung bình (khơng rõ ràng) thấy >10% tế bào bướu Tương hợp tình trạng HER2 mẫu mơ nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ cắt dày trình bày Bảng Bảng 4: Tương hợp tình trạng Her2 mẫu mô nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ Tình trạng HER2 nội soi sinh thiết Âm tính Dương tính Tổng Tình trạng Her2 bệnh phẩm mổ Tổng Âm tính Dương tính 47 48 4 47 52 (9,6%) Tình trạng HER2 dương tính khảo sát 9,6% (KTC 95%: 1,6-17,6%) Tỉ lệ tương hợp tình trạng HER2 mẫu mô nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ cắt dày 98%, với số Cohen’s Kappa 0,879 (p0,05) Sự tương hợp tình trạng Her2 mẫu mơ nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ Y văn ghi nhận có tương hợp cao tình trạng HER2 mẫu mơ nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ cắt dày (Bảng 8) Bảng 8: Sự tương hợp tình trạng HER2 mẫu mô nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ Tác giả Pirrelli M (18) Grillo F (5) Wang T (22) Năm Cỡ mẫu 2012 61 2013 103 2014 128 Huang S-C (7) 2016 180 Tỉ lệ tương hợp 92% 89% 96% 96% Khảo sát ghi nhận tương hợp cao tình trạng HER2 mẫu mô nội soi sinh thiết bệnh phẩm cắt dày (98%, Kappa=0,879); không khác biệt với y văn Ngun nhân khơng có tương hợp 100% tình trạng HER2 mẫu mơ nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ chủ yếu biểu HER2 không đồng carcinôm tuyến dày(5,7,18,22) Trong nghiên cứu Hamburg, khảo sát 109 bệnh phẩm mổ carcinơm tuyến dày 5-9 vị trí khác bướu nguyên phát, 11 bướu có tình trạng HER2 dương tính đồng nhất, bướu có tình trạng HER2 dương tính 1/6 đến 6/9 vị trí khảo sát(19) Trong khảo sát này, trường hợp có mẫu mơ nội soi HER2 âm tính bệnh phẩm cắt dày HER2 dương tính có loại mơ học theo Lauren loại hỗn hợp, vốn thường có biểu HER2 không đồng Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy năm 2017 Y Học TP Hồ Chí Minh * PB Tập 21 * Số * 2017 Để phản ảnh tình trạng HER2 bệnh nhân carcinơm dày có tình trạng HER2 âm tính khơng thể mổ cắt dày, biện pháp sau đề xuất: + Nội soi dày sinh thiết lại với số mẫu sinh thiết nhiều hơn, đặc biệt vị trí bướu tâm vị loại mô học theo Lauren loại tuyến ruột(18) Park S.R nội soi sinh thiết lại 183 bệnh nhân carcinơm tuyến dày có tình trạng HER2 âm tính với số mẫu sinh thiết trung bình 10, kết có thêm 16 trường hợp HER2 dương tính (8,7%)(12) + Sinh thiết vị trí di căn, có thể(23) Peng Z.(13), phân tích gộp 18 nghiên cứu 1867 bệnh nhân carcinôm tuyến dày, tương hợp tình trạng Her2 mẫu mơ sinh thiết vị trí di bệnh phẩm cắt dày 93% (thay đổi từ 76 đến 98%) Park S.R sinh thiết sang thương di 175 bệnh nhân carcinơm tuyến dày có tình trạng HER2 âm tính, kết có thêm 10 trường hợp HER2 dương tính (5,7%)(12) 10 11 KẾTLUẬN + Tình trạng HER2 carcinôm tuyến dày mẫu nội soi sinh thiết có tương hợp cao với tình trạng HER2 mẫu bệnh phẩm mổ (98%, Kappa=0,879) + Có thể dùng kết đánh giá tình trạng HER2 carcinôm tuyến dày mẫu nội soi sinh thiết để định điều trị trastuzumab trường hợp carcinôm dày tiến xa 12 13 14 TÀILIỆUTHAMKHẢO Ahn S., Ahn S., van Vranckel M., Lee M et al (2015), “Ideal number of biosy tumor fragments for predicting Her2 status in gastric carcinoma resection specimens”, Oncotarget, 35 (6), pp 38372-38380 Bang Y., Van Cutsem E., Feyereislova A., Chung H et al (2010), “Trastuzumab in combination with chemotheraphy versus chemotheraphy alone for treatment of HER2 positive advanced gastric or gastrooesophageal junction cancer (ToGA): a phase 3, open 15 16 Nghiên cứu Y học label, randomised controlled trial”, Lancet, 376, pp 687697 Boku N (2014), "HER2-positive gastric cancer", Gastric Cancer, 17, pp 1-12 Đoàn Trọng Nghĩa (2014), “Xác định tỉ lệ đột biến Her2 carcinôm tuyến dày”, Đại học Y Dược TP.HCM, Luận văn Tốt nghiệp Bác sĩ Nội Trú Grillo F., Fassan M., Ceccaroli C., Giacometti C et al (2013), "The Reliability of Endoscopic Biopsies in Assessing Her2 Status in Gastric and Gastroesophageal Junction Cancer: A Study Comparing Biopsies with Surgical Samples", Translational Oncology, (1), pp.10- 16 Hoffmann M., Stoss O., Shi D., Buttner R et al (2008), "Asessment of Her2 scoring system for gastric cancer: results from a validation study", Histopathology, 52 (7), pp.797- 805 Huang S-C, Ng K-F, Lee S-E, Chen K-H et al (2016), “Her2 testing in paired biopsy and excison specimens of gastric cancer: the reliability of the scoring system and the clinicopathological factors relevant to discordance”, Gastric Cancer, 19, pp 176-182 International Agency for Research on Cancer (2012), "Estimated Cancer Incidence, Mortality and Prevalence WorldWide in 2012", World Health Orgazination, Globocan 2012 (http://globocan.iarc.fr) Lê Hoàng Minh, Phạm Xuân Dũng, Đặng Huy Quốc Thịnh, Bùi Đức Tùng cs (2016), "Kết ghi nhận ung thư quần thể thành phố Hồ Chí Minh năm 2014", Tạp chí Ung thư học Việt Nam, số 3, tr.13- 21 Lê Viết Nho, Trần Văn Huy, Đặng Công Thuận (2011), "Nghiên cứu biểu lộ Her2 bệnh nhân ung thư dày", Tạp chí Y học Thành phố Hồ Chí Minh, tập15 (phụ số 2), tr 48-54 Nguyễn Văn Thành, Lâm Thanh Cầm (2011), "Đặc điểm biểu Her2 bệnh nhân carcinôm tuyến dày", Tạp chí Y học Thành phố Hồ Chí Minh, tập 15 (phụ số 2), tr 43- 47 Park S.R., Park Y.S., Ryu M-H., Ryoo B-Y et al (2016), “Extra-gain of HER2-positive cases through HER2 reassessment in primary and metastatic sites in advanced gastric cancer with initially HER2-negative primary tumours: Results of GASTric cancer HER2 reassessment study (GASTHER1)”, Eur J Cancer 53, pp 42-50 Peng Z., Zou J., Zhang X., Yang Y et al (2015), “HER2 discordance between paired primary gastric cancer and metastasis: a meta-analysis”, Chin J Cancer Res, 27 (2), pp 163-171 Phan Đặng Anh Thư, Hứa Thị Ngọc Hà cs (2013), "Đánh giá biểu protein Her2 ung thư dày hóa mơ miễn dịch", Tạp chí Y học thành phố Hồ Chí Minh, 17 (3), tr 83-88 Phan Đặng Anh Thư, Lý Thanh Thiện, Đặng Hoàng Minh, Nguyễn Thị Bé Phương cs (2015), "Đánh giá tình trạng gen Her2 ung thư dày phương pháp lai chỗ", Tạp chí Y học thành phố Hồ Chí Minh, 19 (5), tr 164-170 Phan Đặng Anh Thư, Đặng Hoàng Minh, Nguyễn Vũ Thiện cs (2015), "Mối tương quan biểu protein Her2 đặc điểm giải phẫu bệnh ung thư dày", Tạp chí Y học thành phố Hồ Chí Minh, 19 (5), tr 158-163 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy năm 2017 311 Nghiên cứu Y học 17 18 19 20 21 22 312 Y Học TP Hồ Chí Minh * PB Tập 21 * Số * 2017 Phạm Hùng Cường (2016), "Xác định tình trạng Her2 carcinơm tuyến dày mẫu nội soi sinh thiết", Tạp chí Y học thành phố Hồ Chí Minh, 20 (3), tr 155-161 Pirrelli M., Caruso M.L., Di Maggio M., Armentano R et al (2013), “Are Biopsy Specimens Predictive of Her2 Status in Gastric Cancer Patients ?”, Dig Dis Sci, 58, pp 397- 404 Stahl P., Seeschaff C., Lebok P., Kutup A et al (2015), “Heterogeneity of Amplification of HER2, EGFR, CCND1 and MYC in Gastric Cancer”, BMC Gastroenterol, 15: Thái Anh Tú, Cao Ngọc Tuyết Nga, Trần Thị Ngọc Mỹ, Nguyễn Văn Thành cs (2011), Đánh giá tình trạng protein gen HER2 ung thư dày phương pháp hố mơ miễn dịch lai huỳnh quang chỗ xếp dãy mơ”, Tạp chí Ung thư học Việt Nam, số 3, tr 349-354 Trịnh Tuấn Dũng, Hứa Thị Ngọc Hà (2013), "Quy trình nhuộm hóa mơ miễn dịch ung thư dày", Hướng dẫn xét nghiệm Her2 ung thư vú ung thư dày, Nhà Xuất Bản Y Học, tr 9-17 Wang T., Hsieh E.T., Henry P., Hanna W et al (2014), “Matched biopsy and resection specimens of gastric and gastroesophageal adenocarcinoma show high concordance in Her2 status”, Hum Pathol, 45 (5), pp 970975 23 24 25 Warneke V.S, Behrens H M., Böger C., Becker T et al (2013), "Her2/neu testing in gastric cancer: evaluating the risk of sampling errors", Ann Oncol, 24, pp 725-733 Watson S., Validire P., Cervera P., Zorkani N et al (2013), "Comparison of Her2 expression in paired biopsies and surgical specimens of gastric and esophgeal adenocarcinoma: Impact of neoadjuvant chemotherapy", J Clin Oncol, 31 (suppl; abstr 4069) Wolff A.C., Hammond M.E.H., Hicks D.G., Dowsett M et al (2013), "Recommendations for Human Epidermal Growth Factor Receptor Testing in Breast Cancer: American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists Clinical Practice Guideline Update", J Clin Oncol, ASCO special article, pp 1- 18 Ngày nhận báo: 07/12/2016 Ngày phản biện nhận xét báo: 15/12/2016 Ngày báo đăng: 05/04/2017 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện Chợ Rẫy năm 2017 ... Tương hợp tình trạng HER2 mẫu mơ nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ cắt dày trình bày Bảng Bảng 4: Tương hợp tình trạng Her2 mẫu mô nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ Tình trạng HER2 nội soi sinh thiết. .. hợp tình trạng Her2 mẫu mơ nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ Y văn ghi nhận có tương hợp cao tình trạng HER2 mẫu mơ nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ cắt dày (Bảng 8) Bảng 8: Sự tương hợp tình trạng. .. so sánh tình trạng HER2 carcinơm tuyến dày mẫu mô nội soi sinh thiết bệnh phẩm mổ cắt dày bệnh nhân Do vậy, thực khảo sát nhằm mục tiêu: Đánh giá tương hợp tình trạng HER2 carcinôm tuyến dày mẫu