TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ BỘ MÔN DƯỢC LIỆU- DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH DƯỢC LIỆU ĐỊNH LƯỢNG TINH DẦU TRONG DƯỢC LIỆU KIỂM NGHIỆM TINH DẦU BẰNG SĂC KÝ LỚP MỎNG GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN: ThS Đỗ Văn Mãi TIỂU NHÓM – LIÊN THÔNG CĐ-ĐH DƯỢC 13A Nguyễn Lê Nhật Linh Trần Ngọc Thiên Vy Đặng Thị Thùy Dung Cần Thơ, 2019 Hồ Linh Phương Đỗ Công Hậu Dương Thị Ngọc Em I CƠ SỞ LÝ THUYẾT Tách tinh dầu khỏi dược liệu phương pháp cấtt lôi theo nước Từ lượng tinh dầu (gam hay milỉlit) thu lượng dược liệu xác định tính hàm lượng phần trăm (kl/kl hay tt/kl) tinh dầu có dược liệu Việc tách tinh dầu khỏi dược liệu dựa nguyên tắc: nước tinh dẩu hai chất lỏng bay khơng đồng tan với tạo với hỗn hợp đẳng phí (hằng phị) Tại điểm sơi hỗn họp, pha có tỉ lệ nước tinh dẩu khác với trạng thái lỏng (trong trường hợp này, tỉ lệ tinh dầu hỗn hợp cao lượng tinh dẩu có nước trạng thái lỏng) Khi ngưng tụ hỗn hợp này, nước tinh dầu tách trở lại thành hai pha riêng biệt Xác định lượng tinh dầu tách khỏi hỗn hợp ngưng tụ biết lượng tinh dầu có dược liệu II NỘI DUNG THỰC HÀNH Xác định hàm lượng tinh dầu sả phương pháp cất kéo theo nước Chuẩn bị: − Bộ dụng cụ chiết tinh dầu − Dược liệu: Sả mua chợ Cái Răng Cầm Thơ Tiến hành: Cân 320g sả bào, cho vào bình cầu, thêm nước ngậm mặt dược liệu, lắp vào chiết lôi theo nước Đun giữ hỗn hợp sôi 2h Hơi nước tinh dầu bốc lên gặp lạnh ngưng tụ lại rơi xuống ống hứng, tinh dầu tách khỏi lớp nước Phần sinh hàn Phần phân tách Ống hứng Ống hồi lưu khắc vạch Bình cầu Bếp nun Để nguội, đọc thể tích tinh dầu ống hứng Hàm lượng tinh dầu (X) sả tính theo cơng thức dược liệu tươi X= % a: thể tích tinh dầu đọc (ml) b: khối lượng dược liệu tươi (g) X = = 0,59% So sánh với hàm lượng tinh dầu Sả Hà Nội 0,46 – 0,55% tinh dầu Sả mua chợ Cái Răng Cầm Thơ có hàm lương tinh dầu cao Kiểm nghiệm tinh dầu sả sắc ký lớp mỏng 2.1 Dịch chấm sắc ký − Tinh dầu sả chiết (C) − Tinh dầu sả mua (M) 2.2 Chuẩn bị mỏng Bản sắc ký dùng mỏng silica gel F254 tráng sẵn II.3 Chuẩn bị dung môi Pha hệ dung môi gồm Ether dầu hỏa – Etyl acetat (9:1), để yên 15-30 phút cho bão hòa dung mơi II.4 Khai triển Dùng mao quản chấm mẫu thử lên mỏng silicagel, chấm vạch gồm mẫu C M, chấm điểm gồm mẫu C M Đặt mỏng vào bình sắc ký để khai triển Khi dung mơi cách mép khoảng 1cm lấy mỏng để bay dung mơi II.5 Phát vết tính giá trị Rf Nhúng với thuốc thử vanilin - sulfuric với tỷ lệ 1:1 Sấy 110oC 2-3 phút - Ta có hệ số Rf Rf (C) = Rf (M) = Mơ tả: xuất vết có màu từ xanh đến đỏ tím Nhận xét: − Kích thước vết màu tím C to đậm so với M => thành phần citral C nhiều M − M có nhiều vết phổ nhiều màu C => hàm lượng tinh dầu M có nhiều tạp chất