TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ BỘ MÔN DƯỢC LIỆU- DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH DƯỢC LIỆU KIỂM NGHIỆM TINH DẦU SẢ GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN: ThS Đỗ Văn Mãi TIỂU NHÓM – LIÊN THÔNG CĐ-ĐH DƯỢC 13A Nguyễn Lê Nhật Linh Trần Ngọc Thiên Vy Cần Thơ, 2019 Đặng Thị Thùy Dung Hồ Linh Phương Đỗ Công Hậu Dương Thị Ngọc Em I CƠ SỞ LÝ THUYẾT Đại cương tinh dầu sả citral Các lồi sả chia nhóm sả là: Sả chanh cho citral, Sả hoa hồng Sả cho citronellal Tinh dầu sả chanh tinh dầu thu cách cất lôi theo nước số loài sả [Cymbopogon citratus Stapf., C fexuosus Stapf Hay C pendulus (Ness ex Steud.) Wats., Poaceae] Tinh dầu sả chanh chất lỏng suốt, khơng màu hay màu vàng nhạt, có mùi thơm đặc trưng 10 Các số vật lý tinh dầu sả chanh: - Chỉ số khúc xạ 200C Năng suất cực quay 200C Tỉ trọng 200C : 1,4910 : -0.62 o : 0.8986 11 Thành phần chủ yếu tinh dầu sả chanh citral Citral hỗn hợp gồm đồng phân citral a (geranial) citral b (neral) Citral chất lỏng khơng màu, có mùi đặc biệt Kiểm định tinh dầu sả - Cảm quan - Xác định số vật lý - Thử tinh khiết - Định tính, định lượng thành phần tinh dầu sả (citral) 2.1 Tìm tạp chất: 12 Các tạp chất thưởng tìm kiểm nghiệm tinh dẩu nước, cồn vả chất bẻo Nước: Thường lẫn vảo phương pháp chiết ( cất kéo theo nước Phát 13 cách dựa vảo tính cháy ướt Na2SO4 khan chuyển sang mảu xanh cúa CUSO4 khan gặp nước 14 2.2 Định tính, định lượng citral: 15 Citral aldehyd khác tinh dầu sả phản ứng với NaHSO cho hợp chất cộng bisulfit; với hydroxylamin cho oxim; với semicarbazit, thiosemicarbazit hay phenylhydrazin cho semicarbazon, thiosemicarbazon hay phenylhydrazon chất kết tinh có điểm chảy xác định, dùng để định tính 16 Để định lượng citral aldehyd khác tinh dầu, người ta thường ảp dụng phương pháp Lagneau 17 Nguyên tắc: Citral (và hợp chất aldehyd, ceton khác) phản ứng với hydroxylamin hydroclorid cho aldoxim HCl HCl giải phóng định lượng dung dịch kiềm mạnh Từ lượng kiềm sử dụng suy lượng hydroxylamin hỵdroclorid tham gia phản ứng từ tính lượng aldehyd tồn phần có tinh dầu 18 C9H15-CHO + H2N-OH, HCl C9H15-CHN-OH + H2O + HCl 19 citral aldoxim Cơng thức tính hàm lượng % aldehyd tồn phần tính theo citral - 20 X (%) = 21 Trong : 22 n : số ml dung dịch KOH 0,5N mẫu thử 23 n’ : số ml dung dịch KOH 0,5N mẫu trắng 24 P : khối lượng tinh dầu sả (g) 25 X : hàm lượng % aldehyd tồn phần tính theo citral II NỘI DUNG THỰC HANH Nguyên vật liệu thí nghiệm - Na2SO4 khan, CuSO4 khan, cồn 96% - Dung dịch NaHSO3 hão hòa (mới pha) - Dung dịch hydroxylamin.HCl 0.5N/cồn 60% - Dung dịch methyl da cam 0.2%/cồn - Dung dịch KOH 0.5% cồn Dược liệu : Tinh dầu sả (Oleum Cymbopogoni citrati) 26 Kiểm nghiệm tạp chất 2.1 Tìm nước (Dùng lọ tinh dầu A) a Cho vào ống nghiệm thật khô 1ml tinh dầu, thêm bột tinh thể Na 2SO4 khan, lắc kỹ 27 28 29 Mô tả : bột Na2SO4 bị chảy ướt 30 Kết luận: tinh dầu có chứa tạp chất nước 31 b Cho vào ống nghiệm thật khô 1ml tinh dầu, thêm bột tinh thể CuSO khan, lắc kỹ 32 33 34 Mô tả: ta thấy CuSO4 từ màu lam nhạt chuyển sang màu xanh dương đậm 35 Kết luận: tinh dầu có chứa tạp chất nước 2.2 Tìm dầu mỡ (Dùng lọ tinh dầu B) a Nhỏ giọt tinh dầu lên miếng giấy mỏng (giấy lọc) Hơ nhẹ bếp điện cho bay hết tinh dầu 36 37 38 Mơ tả: Thấy tờ giấy lọc, lại vết mờ 39 Kết luận: tinh dầu có chứa dầu mỡ b Cho vào ống nghiệm 1ml tinh dầu 8ml cồn 96o, lắc 40 41 42 Mô tả: dung dịch bị đục so với dung dịch ban đầu 43 Kết luận: tinh dầu có chứa dầu mỡ 2.3 Tìm alcol (Dùng lọ tinh dầu C) Cho 1ml tinh dầu vào ống nghiệm khô Nút miệng ống nghiệm (khơng q chặt) miếng bơng gòn có chứa bột tinh thể fuschin Hơ nhẹ ống nghiệm đèn cồn cho hỗn hợp bốc (không đun sôi ống nghiệm) 44 45 46 Mô tả: ta thấy nút bơng có loang vết màu đỏ tím 47 Kết luận: tinh dầu có lẫn alcol Định tính aldehyd tinh dầu Cho vào ống nghiệm 2ml tinh dầu, 2ml dung dịch NaHSO bão hòa Đặt ống nghiệm vào hỗn hợp sinh hàn (chuẩn bị thau có hỗn hợp muối đá) khuấy kỹ vài phút 48 49 50 51 Mô tả: ta thấy hợp chất tạo sau phản ứng chất giống kem (sệt màu trắng đục) 52 Kết luận: tinh dầu sả có chứa aldehyd (do tạo hợp chất cộng bisulfit) Định lượng tinh dầu 53 Chuẩn bị ba bình nón 100ml 54 + Mẫu trắng: khơng có tinh dầu 55 + Mẫu thử 1: cân xác khoảng 1g tinh dầu sả bình nón 56 + Mẫu thử 2: cân xác khoảng 1g tinh dầu sả bình nón 57 58 59 60 Thêm 10ml cồn 96o 10ml hydroxylamin hydroclorid 0.5N/cồn 60% giọt methyl da cam 0.2%/cồn vào ba erlen 61 62 63 64 65 66 67 68 - Đậy nắp lắc phút Sau tiến hành định lượng dung dịch KOH 0.5N đến hỗn hợp chuyển thành màu vàng bền vững 15 phút 69 Kết sau định lượng đạt màu vàng bền vững 15 70 phút 71 Mẫu trắng: n’ = 0,3ml 72 Mẫu thử 1: n1 = 0,4ml 73 Mẫu thử 2: n2 = 0,4ml 74 75 X1 = = 0.7486% 76 X2 = = 0.7507% 77 Vậy hàm lượng % aldehyd tồn phần tính theo citral tinh dầu 78 X = = 0.7% 79