1.1 Giới thiệu Cá chẽm (Lates calcarifer, Bloch 1790) là loài cá có giá trị kinh tế quan trọng ở vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới thuộc châu Á - Thái Bình Dương. Với đặc tính dễ nuôi và thời gian sinh trưởng nhanh, sau một năm thả nuôi từ cá giống cỡ 4 - 5 cm, cá có thể đạt khối lượng 1,5 - 3 kg. Hơn nữa, thịt cá chẽm thơm ngon, giá thành cao nên loài này đã được nuôi phổ biến ở nhiều nước trên thế giới như Thái Lan, Trung Quốc, Đài Loan, Ấn Độ, Indonesia, Australia… (Buendia, 1997). Trong những năm gần đây, thành công của những mô hình nuôi cá chẽm đã khẳng định đây là đối tượng nuôi có hiệu quả kinh tế cao. Nghề nuôi cá chẽm thương phẩm phát triển mạnh ở một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu Long (Lý Văn Khánh và ctv., 2016). Riêng tại tỉnh Thừa Thiên Huế, cá chẽm được nuôi khá phổ biến và mang lại hiệu quả kinh tế cao (Tôn Thất Chất và ctv., 2010; Trần Thị Cẩm Tú và ctv., 2017). Bệnh do Streptococcus iniae được báo cáo ở nhiều loài cá nước ngọt và cá biển ở 15 quốc gia khác nhau thuộc 4 châu lục, gồm châu Phi, châu Á, châu Úc và châu Âu. Bệnh đã và đang là mối đe dọa cho nhiều loài cá nuôi ở cả môi trường nước mặn, lợ và ngọt (Hossain et al., 2014). Trên cá chẽm, bệnh do S. iniae được báo cáo lần đầu tiên vào năm 1999 tại Úc (Bromage et al., 1999), sau đó bệnh tiếp tục xuất hiện trên cá chẽm nuôi tại Úc năm 2006 (Creeper và Buller, 2006), tại Thái Lan năm 2010 (Suanyuk et al., 2010). Bệnh do S. iniae trên cá chẽm gây xuất huyết trên da, vây và mắt lồi đục (Bromage et al., 1999). Một số dấu hiệu khác như lở loét ngoài da hay xuất huyết ở các gốc vây, nắp mang, hậu môn đã được quan sát trên cá chẽm và cá rô phi nhiễm S. iniae (Suanyuk et al., 2010). Bệnh do S. iniae có thể gây ra tỷ lệ chết lên đến 70% ở giai đoạn cá chẽm giống (Creeper và Buller, 2006). Ở Việt Nam, bệnh do S. iniae được báo cáo xuất hiện đầu tiên trên cá chẽm nuôi tại Khánh Hòa vào năm 2013 (Tran Vi Hich et al., 2013). Tại Thừa Thiên Huế, từ năm 2007, để hạn chế dịch bệnh và ô nhiễm môi trường do nuôi thâm canh tôm thẻ chân trắng gây ra, tỉnh đã phát triển nuôi các đối tượng cá nước mặn, lợ như cá mú, cá hồng, cá dìa, cá chẽm…, để thay thế các vùng nuôi tôm bị dịch bệnh. Trong đó, cá chẽm được người dân địa phương nuôi khá phổ biến và mang lại hiệu quả kinh tế cao (Tôn Thất Chất và ctv., 2010). Tuy nhiên, việc mở rộng diện tích mặt nước nuôi cá chẽm thiếu quy hoạch chặt chẽ đã làm nghề nuôi cá gặp rất nhiều khó khăn về môi trường và dịch bệnh, trong đó bệnh xuất huyết trên cá chẽm rất phổ biến. Thuốc kháng sinh thường được sử dụng để trị bệnh do vi khuẩn gây ra trên động vật thủy sản nuôi. Việc sử dụng kháng sinh để trị bệnh do vi khuẩn đã mang lại những thành công nhất định, nhưng cũng làm gia tăng những dòng vi khuẩn kháng thuốc (Weston, 1996; Tu Thanh Dung et al., 2008). Do đó nghiên cứu sử dụng vi khuẩn có khả năng kháng với vi khuẩn gây bệnh trên động vật thủy sản ngày càng được quan tâm. Trong đó có vi khuẩn lactic, có khả năng kháng vi khuẩn gây bệnh và có lợi với sức khỏe vật chủ khi được bổ sung đủ số lượng trong đường ruột (Nirunya et al., 2008). Vi khuẩn lactic sản xuất một số chất kháng khuẩn như axit hữu cơ, các hợp chất kháng nấm và bacteriocin để ức chế sự phát triển của mầm bệnh (Ringo et al., 2005; Gatesoupe, 2007). Vi khuẩn lactic có thể được phân lập từ nhiều nguồn khác nhau như từ các sản phẩm lên men, từ ruột gia súc và các loài động vật thủy sản. Một số nghiên cứu về vi sinh vật đường ruột của cá trong các môi trường sống khác nhau cho thấy vi khuẩn lactic tồn tại trong ruột cá nhưng không chiếm ưu thế trong hệ vi sinh đường ruột (Ringo et al., 2010). Do đó, có thể bổ sung vi khuẩn lactic vào khẩu phần ăn của cá để ức chế vi khuẩn gây bệnh và nâng cao sức đề kháng bệnh cho cá (Lauzon và Ringo, 2011). Tuy nhiên, cho đến nay vẫn chưa có các nghiên cứu về ảnh hưởng của việc bổ sung vi khuẩn lactic vào thức ăn đến các chỉ tiêu miễn dịch không đặc hiệu của cá chẽm. Xuất phát từ thực tiễn đó, thực hiện đề tài “Nghiên cứu bệnh do Streptococcus iniae gây ra trên cá chẽm (Lates calcarifer) và biện pháp phòng bệnh” nhằm cung cấp thông tin về bệnh do vi khuẩn S. iniae trên cá và góp phần phát triển nghề nuôi cá chẽm bền vững. 1.2 Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu chung: Cung cấp thông tin về bệnh do vi khuẩn S. iniae gây ra trên cá chẽm làm cơ sở khoa học cho việc quản lý dịch bệnh và góp phần phát triển nghề nuôi cá chẽm bền vững. Mục tiêu cụ thể: Xác định đặc điểm gây bệnh của vi khuẩn S. iniae trên cá chẽm và đề xuất giải pháp phòng bệnh làm cơ sở cho việc chẩn đoán và phòng bệnh xuất huyết trên cá chẽm.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ TRƯƠNG THỊ HOA NGHIÊN CỨU BỆNH DO Streptococcus iniae GÂY RA TRÊN CÁ CHẼM (Lates calcarifer) VÀ BIỆN PHÁP PHỊNG BỆNH LUẬN ÁN TIẾN SĨ NGÀNH NI TRỒNG THỦY SẢN Mã ngành 9620301 Cần Thơ, 2019 MỤC LỤC LỜI CẢM TẠ i TÓM TẮT ii ABSTRACT iv LỜI CAM KẾT vi MỤC LỤC vii DANH SÁCH BẢNG xi DANH SÁCH HÌNH xiii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT…………………………………………….… xv Chương GIỚI THIỆU 1.1 Giới thiệu 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Phạm vi nghiên cứu 1.4 Nội dung nghiên cứu 1.5 Ý nghĩa nghiên cứu 1.6 Điểm luận án Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tình hình ni cá chẽm giới Việt Nam 2.1.1 Trên giới 2.1.2 Ở Việt Nam 2.2 Một số bệnh thường gặp cá chẽm 2.2.1 Bệnh virus 2.2.2 Bệnh vi khuẩn 2.2.3 Bệnh ký sinh trùng 10 2.3 Tổng quan bệnh vi khuẩn S iniae cá 11 2.3.1 Tình hình dịch bệnh vi khuẩn S iniae cá 11 2.3.1.1 Trên giới 11 2.3.1.2 Ở Việt Nam 12 2.3.2 Đặc điểm hình thái, sinh lý sinh hóa S iniae 13 2.3.2.1 Hệ thống phân loại 13 2.3.2.2 Đặc điểm hình thái 13 2.3.2.3 Đặc điểm sinh lý sinh hóa 15 2.3.3 Đặc điểm bệnh lý 17 vii 2.3.4 Con đường lan truyền xâm nhập vi khuẩn S iniae cá 20 2.3.5 Độc lực chế gây bệnh 21 2.3.6 Các yếu tố ảnh hưởng đến khả gây bệnh vi khuẩn S iniae 22 2.3.7 Phương pháp chẩn đoán 23 2.3.8 Biện pháp phòng trị bệnh 24 2.4 Hệ miễn dịch không đặc hiệu cá 26 2.4.1 Hàng rào vật lý 26 2.4.2 Hàng rào hóa học 27 2.4.3 Hàng rào tế bào 27 2.5 Đặc điểm huyết học cá 28 2.5.1 Hồng cầu 29 2.5.2 Bạch cầu 29 2.5.3 Tiểu cầu 30 2.6 Tình hình nghiên cứu sử dụng vi khuẩn lactic để phòng bệnh cá 31 2.6.1 Đặc điểm hình thái, sinh lý sinh hóa vi khuẩn lactic 31 2.6.2 Vai trò chế tác động vi khuẩn lactic 34 2.6.3 Tình hình nghiên cứu sử dụng vi khuẩn lactic để phòng bệnh vi khuẩn gây cá 36 2.6.3.1 Một số vi khuẩn lactic phân lập từ ruột cá có khả kháng vi khuẩn gây bệnh cá 36 2.6.3.2 Sử dụng vi khuẩn lactic để phòng bệnh cá… ………… 38 Chương PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ……………………… ……40 3.1 Đối tượng nghiên cứu 40 3.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 40 3.3 Phương tiện nghiên cứu 40 3.3.1 Dụng cụ thiết bị 40 3.3.2 Hóa chất môi trường 41 3.4 Phương pháp nghiên cứu 42 3.4.1 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm gây bệnh vi khuẩn S iniae cá chẽm 42 3.4.1.1 Phân lập định danh vi khuẩn S iniae gây bệnh xuất huyết cá chẽm 42 viii 3.4.1.2 Xác định khả gây bệnh thực nghiệm vi khuẩn S iniae 48 3.4.1.3 Xác định đặc điểm mô bệnh học cá chẽm cảm nhiễm S iniae 51 3.4.2 Phân lập tuyển chọn vi khuẩn lactic từ ruột số lồi cá nước lợ có khả ức chế vi khuẩn S iniae 51 3.4.2.1 Phân lập chủng vi khuẩn lactic từ ruột cá chẽm, cá dìa cá rơ phi 52 3.4.2.2 Xác định khả đối kháng với vi khuẩn S iniae vi khuẩn lactic 54 3.4.2.3 Định danh chủng vi khuẩn lactic có khả đối kháng mạnh với vi khuẩn S iniae 54 3.4.3 Nghiên cứu xác định ảnh hưởng việc bổ sung chủng vi khuẩn lactic vào thức ăn đến số tiêu huyết học khả ức chế vi khuẩn S iniae huyết cá chẽm 55 3.4.3.1 Cá chẽm thí nghiệm 55 3.4.3.2 Chuẩn bị vi khuẩn thí nghiệm…………………………… …55 3.4.3.3 Bố trí thí nghiệm 56 3.4.3.4 Phương pháp xác định tiêu huyết học 57 3.4.3.5 Xác định khả ức chế vi khuẩn S iniae huyết 59 3.4.3.6 Xác định hoạt tính lysozyme huyết 59 3.4.3.7 Phương pháp xác định tỷ lệ sống cá 60 3.5 Xử lý số liệu 60 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 61 4.1 Đặc điểm gây bệnh vi khuẩn S iniae cá chẽm 61 4.1.1 Kết phân lập vi khuẩn S iniae cá chẽm 61 4.1.1.1 Kết phân lập vi khuẩn 61 4.1.1.2 Đặc điểm hình thái, sinh lý sinh hóa chủng vi khuẩn gây bệnh xuất huyết cá chẽm 63 4.1.2 Khả gây bệnh thực nghiệm S iniae cá chẽm 67 4.1.2.1 Kết xác định độc lực vi khuẩn 67 4.1.2.2 Kết xác định LD50 S iniae cá chẽm .68 4.1.2.3 Kết gây bệnh thực nghiệm 68 ix 4.1.2.4 Đặc điểm mô bệnh học cá chẽm cảm nhiễm S iniae 71 4.2 Phân lập tuyển chọn vi khuẩn lactic có khả đối kháng vi khuẩn S iniae từ ruột số loài cá nước lợ 77 4.2.1 Kết phân lập chủng vi khuẩn lactic 77 4.2.2 Kết xác định khả đối kháng với vi khuẩn S iniae vi khuẩn lactic 80 4.2.3 Kết định danh chủng vi khuẩn lactic có khả đối kháng mạnh với vi khuẩn S iniae 82 4.3 Ảnh hưởng việc bổ sung chủng vi khuẩn lactic vào thức ăn đến số tiêu huyết học khả ức chế vi khuẩn S iniae huyết cá chẽm 83 4.3.1 Kết xác định tiêu huyết học cá chẽm 83 4.3.1.1 Số lượng hồng cầu máu cá chẽm 83 4.3.1.2 Số lượng tổng bạch cầu máu cá chẽm………………… 86 4.3.1.3 Số lượng loại bạch cầu máu cá chẽm 88 4.3.1.4 Số lượng tiểu cầu máu cá chẽm 92 4.3.2 Khả ức chế vi khuẩn S iniae huyết cá chẽm 94 4.3.3 Hoạt tính lysozyme huyết 96 4.3.4 Tỷ lệ sống cá 97 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 100 5.1 Kết luận 100 5.2 Đề xuất 100 TÀI LIỆU THAM KHẢO 101 PHỤ LỤC 115 x DANH SÁCH BẢNG Bảng 2.1: Lịch sử xuất đặc điểm phân bố bệnh S iniae cá giới 12 Bảng 2.2: Lịch sử xuất đặc điểm phân bố bệnh S iniae cá Việt Nam 13 Bảng 2.3: Một số đặc điểm sinh hóa vi khuẩn S iniae 16 Bảng 2.4 Một số giống vi khuẩn lactic đặc điểm để phân biệt giống 32 Bảng 2.5 Đặc điểm sinh hóa số loài thuộc giống Lactobacillus phân lập từ động vật thủy sản 34 Bảng 2.6: Một số vi khuẩn lactic phân lập từ ruột cá có khả kháng vi khuẩn gây bệnh động vật thủy sản 37 Bảng 2.7: Một số vi khuẩn lactic sử dụng nuôi cá nước lợ 38 Bảng 3.1: Số mẫu cá chẽm bị bệnh xuất huyết thu tỉnh Thừa Thiên Huế 43 Bảng 3.2 Thuốc thử cách đọc kết kít API 20 Strep………… 46 Bảng 3.3: Thiết kế thí nghiệm xác định LD50 vi khuẩn S iniae cá chẽm 50 Bảng 3.4: Thiết kế thí nghiệm xác định khả gây bệnh chủng HTA1 HTA3 cá chẽm 51 Bảng 3.5: Kết thu mẫu để phân lập vi khuẩn lactic 52 Bảng 3.6: Thiết kế thí nghiệm xác định ảnh hưởng L fermentum đến tiêu huyết học khả kháng S iniae 57 Bảng 4.1: Tỷ lệ % số chủng vi khuẩn phân lập từ mô cá chẽm bị bệnh xuất huyết nuôi tỉnh Thừa Thiên Huế 63 Bảng 4.2: Một số đặc điểm hình thái sinh hóa chủng vi khuẩn phân lập từ cá chẽm so sánh với chủng S iniae theo Bromage et al (1999) 65 Bảng 4.3: Kết xác định số đặc điểm sinh hóa chủng vi khuẩn phân lập từ cá chẽm kít API 20 Strep, so với chủng S iniae Bromage et al (1999) chủng S iniae Rahmatullah et al (2017) 66 Bảng 4.4: Kết thí nghiệm xác định độc lực vi khuẩn 67 Bảng 4.5: Kết thí nghiệm xác định LD50 hai chủng S iniae HTA1 HTA3 cá chẽm 68 xi Bảng 4.6: Kết so sánh mức độ tương đồng trình tự vi khuẩn phân lập cá chẽm bị bệnh xuất huyết với vi khuẩn ngân hàng liệu gen NCBI 77 Bảng 4.7: Kết phân lập vi khuẩn lactic từ cá chẽm, cá rơ phi cá dìa 78 Bảng 4.8 Một số đặc điểm hình thái, sinh lý sinh hóa chủng vi khuẩn lactic phân lập từ ruột cá dìa, cá chẽm cá rô phi 79 Bảng 4.9: Kết xác định khả đối kháng với vi khuẩn S iniae HTA1 chủng vi khuẩn lactic 81 Bảng 4.10: Khả ức chế vi khuẩn S iniae huyết cá chẽm 95 xii DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1 Hình dạng Streptococcus sp kính hiển vi điện tử 14 Hình 2.2 Hình dạng vi khuẩn S iniae sau nhuộm Gram (100X) 15 Hình 2.3 Dấu hiệu bệnh lý cá hồng mỹ bị bệnh xuất huyết S iniae 18 Hình 2.4 Dấu hiệu bệnh lý cá chẽm bị bệnh xuất huyết S iniae 18 Hình 2.5 Mơ bệnh cá rơ phi bị bệnh xuất huyết S iniae 19 Hình 2.6 Hình dạng vi khuẩn lactic 33 Hình 2.7 Hình dạng vi khuẩn Lactobacillus plantarum 33 Hình 3.1 Sơ đồ khối nội dung nghiên cứu 42 Hình 3.2 Bộ test sinh hóa định danh vi khuẩn 46 Hình 3.3 Sơ đồ phương pháp tuyển chọn vi khuẩn lactic……………… ….52 Hình 4.1 Cá chẽm bị bệnh xuất huyết vi khuẩn 62 Hình 4.2 Hình dạng khuẩn lạc nhuộm Gram vi khuẩn S iniae 64 Hình 4.3 Khuẩn lạc S iniae môi trường BA+ sau 48 ni cấy 64 Hình 4.4 Kết xác định số đặc điểm sinh hóa 02 chủng vi khuẩn HTA1 HTA3 kít API 20Strep 66 Hình 4.5 Cá chẽm trước sau thí nghiệm cảm nhiễm S iniae 69 Hình 4.6 Tỷ lệ chết tích lũy cá chẽm 14 ngày cảm nhiễm hai chủng S iniae HTA1 HTA3 70 Hình 4.7 Mô gan cá chẽm cảm nhiễm vi khuẩn S iniae…………………….72 Hình 4.8 Mơ thận cá chẽm cảm nhiễm vi khuẩn S iniae………………… 74 Hình 4.9 Mơ lách cá chẽm cảm nhiễm vi khuẩn S iniae………………… 75 Hình 4.10 Mơ não cá chẽm cảm nhiễm vi khuẩn S iniae………………… 76 Hình 4.11 Ảnh điện di sản phẩm PCR đoạn gen 16S rRNA tách chiết từ hai chủng vi khuẩn HTA1 HTA3 gel 2% agarose 77 Hình 4.12 Hình dạng khuẩn lạc vi khuẩn lactic môi trường MRS agar sau 24 nuôi cấy 79 Hình 4.13 Hình dạng vi khuẩn lactic sau nhuộm Gram (100X) 80 Hình 4.14 Kết thử nghiệm khả đối kháng chủng D7 với vi khuẩn S iniae sau 48 ni cấy (A B thể đường kính vòng kháng khuẩn) 81 Hình 4.15 Ảnh điện di kiểm tra sản phẩm PCR gel 2% agarose 82 xiii Hình 4.16 Cây thể mối quan hệ di truyền chủng C21, D1 D7 so với chủng ngân hàng gen 83 Hình 4.17 Hình dạng tế bào hồng cầu máu cá chẽm 85 Hình 4.18 Biến động số lượng hồng cầu máu cá chẽm 85 Hình 4.19 Biến động số lượng tổng bạch cầu máu cá chẽm 86 Hình 4.20 Hình dạng tế bào lympho máu cá chẽm 88 Hình 4.21 Biến động số lượng tế bào lympho máu cá chẽm 89 Hình 4.22 Hình dạng bạch cầu đơn nhân máu cá chẽm 90 Hình 4.23 Biến động số lượng bạch cầu đơn nhân máu cá chẽm 90 Hình 4.24 Hình dạng bạch cầu trung tính máu cá chẽm 91 Hình 4.25 Biến động số lượng bạch cầu trung tính máu cá chẽm 92 Hình 4.26 Hình dạng tiểu cầu máu cá chẽm 93 Hình 4.27 Biến động số tiểu cầu máu cá chẽm 93 Hình 4.28 Hoạt tính lysozyme huyết cá chẽm 97 Hình 4.29 Tỷ lệ sống cá sau cảm nhiễm S iniae 98 Hình 4.30 Kết cảm nhiễm S iniae cá chẽm 99 xiv DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT ADH Arginine dihydrolase ARA Arabinose AMD Amygdalin BA Blood Agar BA+ Mơi trường BA có bổ sung 1,5% NaCl BLAST Basic Local Alignment Search Tool CFU Colony forming unit DNA Deoxyribonucleic acid ĐC Đối chứng ESC Hydrolysis of Esculin GLYG Glycogen INU Inulin H&E Hematoxylin Eosin HIP Hydrolysis of Hippurate LAP Leucine arylamidase LAC Lactose LCD lysine decarboxylase LD50 Lethal dose 50 MRS De Man, Rogosa and Sharpe MRSA De Man, Rogosa and Sharpe Agar MAN Mannitol NCBI National Center for Biotechnology Information NMSL Nước muối sinh lý NT Nghiệm thức OD Optical Density PCR Polymerase Chain Reaction PYRA Pyrrolidonyl arylamidase PAL Alkaline phosphatase RAF Raffinose xv Levene's Test of Equality of Error Variancesa Dependent Variable: tong bach cau F df1 2.879 df2 Sig 15 32 006 Tests the null hypothesis that the error variance of the dependent variable is equal across groups a Design: Intercept + nghiemthuc + + nghiemthuc * Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: tong bach cau Source Type III Sum of df Mean Square F Sig Squares Partial Eta Squared Corrected Model a 242157629061.310 15 16143841937.421 7.907 000 788 Intercept 4703627555152.045 4703627555152.045 2303.783 000 986 65432724414.472 21810908138.157 10.683 000 500 nghiemthuc 141250438482.391 47083479494.130 23.061 000 684 nghiemthuc * 35474466164.446 3941607351.605 1.931 083 352 Error 65334311084.156 32 2041697221.380 Total 5011119495297.513 48 307491940145.466 47 Corrected Total a R Squared = 788 (Adjusted R Squared = 688) Multiple Comparisons Dependent Variable: tong bach cau (I) (J) nghiem nghiem thuc Tukey HSD LSD Std Error Sig (I-J) 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound thuc Mean Difference -34085.892440 18446.7577159 -79732.775877 * -92733.633335* 270 -84064.830674 15893.045794 18446.7577159 001 -129711.714112 -29753.837643 18446.7577159 000 -142712.571569 -42754.695100 34085.892440 18446.7577159 270 -15893.045794 84064.830674 -45646.883437 18446.7577159 083 -95625.821671 4332.054797 -58647.740894* 18446.7577159 016 -108626.679129 -8668.802660 79732.775877* 18446.7577159 001 29753.837643 129711.714112 45646.883437 18446.7577159 083 -4332.054797 95625.821671 -13000.857457 18446.7577159 894 -62979.795691 36978.080777 92733.633335* 18446.7577159 000 42754.695100 142712.571569 58647.740894* 18446.7577159 016 8668.802660 108626.679129 13000.857457 18446.7577159 894 -36978.080777 62979.795691 -34085.892440 18446.7577159 074 -71660.708310 3488.923430 -79732.775877* 18446.7577159 000 -117307.591748 -42157.960007 -92733.633335* 18446.7577159 000 -130308.449205 -55158.817464 34085.892440 18446.7577159 074 -3488.923430 71660.708310 -45646.883437* 18446.7577159 019 -83221.699308 -8072.067567 -58647.740894* 18446.7577159 003 -96222.556765 -21072.925024 79732.775877* 18446.7577159 000 45646.883437* 18446.7577159 019 127 42157.960007 117307.591748 8072.067567 83221.699308 4 -13000.857457 18446.7577159 486 92733.633335* 18446.7577159 000 -50575.673327 55158.817464 130308.449205 24573.958413 58647.740894* 18446.7577159 003 21072.925024 96222.556765 13000.857457 18446.7577159 486 -24573.958413 50575.673327 Based on observed means The error term is Mean Square(Error) = 2041697221.380 * The mean difference is significant at the 05 level Phụ lục C.3 Kết phân tích thống kê ảnh hưởng việc bổ sung vi khuẩn L fermentum C21 vào thức ăn cảm nhiễm vi khuẩn S iniae đến biến động số lượng tế bào lympho máu cá chẽm thí nghiệm Between-Subjects Factors N Nghiem thuc Ngay 12 12 12 12 12 14 12 21 12 28 12 Descriptive Statistics Dependent Variable: Te bao Lympho Nghiem thuc Total Ngay Mean Std Deviation N 114421.705716 30082.1741527 14 114090.539667 31972.7029674 21 126309.566667 3919.9310202 28 138954.241667 16112.9876383 Total 123444.013429 22678.3328371 12 121139.121530 26269.9391938 14 126249.379167 7173.5165989 21 159529.523333 11414.5353687 28 205246.858333 30602.6960709 Total 153041.220591 39457.6775201 12 109675.958250 30491.2708981 14 171348.357000 16005.7342459 21 196577.030000 39997.5214314 28 201594.573333 33106.0888927 Total 169798.979646 46513.9647029 12 115092.274647 31572.6533300 14 173533.668000 6877.6820481 21 249465.078333 26010.7418441 28 245620.125333 5240.3922677 Total 195927.786578 60760.8207561 12 115082.265036 25659.0303082 12 128 14 146305.485958 31880.6105845 12 21 182970.299583 52174.4084395 12 28 197853.949667 44820.3970749 12 Total 160553.000061 50621.1341298 48 Levene's Test of Equality of Error Variancesa Dependent Variable: Te bao Lympho F 2.761 df1 df2 15 Sig 32 008 Tests the null hypothesis that the error variance of the dependent variable is equal across groups a Design: Intercept + Nghiemthuc + Ngay + Nghiemthuc * Ngay Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Te bao Lympho Source Type III Sum of df Mean Square Squares Corrected Model 101156579047.515a 15 6743771936.501 Intercept 1237308759773.031 1237308759773.031 Nghiemthuc 33244408551.701 11081469517.234 Ngay 49973706734.263 16657902244.754 Nghiemthuc * Ngay 17938463761.551 1993162640.172 Error 19280884319.943 32 Total 1357746223140.491 48 120437463367.458 47 Corrected Total F Sig 11.192 2053.530 18.392 27.647 3.308 000 000 000 000 006 602527634.998 a R Squared = 840 (Adjusted R Squared = 765) Multiple Comparisons Dependent Variable: Te bao Lympho (I) (J) Mean Std Error Sig Nghiem Nghie Difference (I-J) thuc m thuc -29597.207162* 10021.0414878 028 * -46354.966217 10021.0414878 000 -72483.773150* 10021.0414878 000 29597.207162* 10021.0414878 028 -16757.759055 10021.0414878 355 -42886.565988* 10021.0414878 001 Tukey HSD 46354.966217* 10021.0414878 000 16757.759055 10021.0414878 355 -26128.806933 10021.0414878 063 72483.773150* 10021.0414878 000 * 42886.565988 10021.0414878 001 26128.806933 10021.0414878 063 -29597.207162* 10021.0414878 006 * -46354.966217 10021.0414878 000 -72483.773150* 10021.0414878 000 LSD 29597.207162* 10021.0414878 006 -16757.759055 10021.0414878 104 -42886.565988* 10021.0414878 000 46354.966217* 10021.0414878 000 129 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound -56747.832831 -73505.591886 -99634.398819 2446.581493 -43908.384724 -70037.191657 19204.340548 -10392.866614 -53279.432602 45333.147480 15735.940318 -1021.818737 -50009.400705 -66767.159760 -92895.966692 9185.013619 -37169.952598 -63298.759530 25942.772674 -2446.581493 -19204.340548 -45333.147480 56747.832831 10392.866614 -15735.940318 73505.591886 43908.384724 1021.818737 99634.398819 70037.191657 53279.432602 -9185.013619 -25942.772674 -52071.579607 50009.400705 3654.434488 -22474.372445 66767.159760 16757.759055 10021.0414878 -26128.806933* 10021.0414878 72483.773150* 10021.0414878 42886.565988* 10021.0414878 26128.806933* 10021.0414878 Based on observed means The error term is Mean Square(Error) = 602527634.998 * The mean difference is significant at the 05 level .104 014 000 000 014 -3654.434488 -46541.000475 52071.579607 22474.372445 5716.613390 37169.952598 -5716.613390 92895.966692 63298.759530 46541.000475 Phụ lục C.4 Kết phân tích thống kê ảnh hưởng việc bổ sung vi khuẩn L fermentum C21 vào thức ăn cảm nhiễm vi khuẩn S iniae đến biến động số lượng bạch cầu đơn nhân máu cá chẽm thí nghiệm Between-Subjects Factors N Nghiem thuc Ngay 12 12 12 12 12 14 12 21 12 28 12 Descriptive Statistics Dependent Variable: BC don nhan Nghiem thuc Total Ngay Mean Std Deviation N 4767.293232 590.3823224 14 5475.113301 1769.4724994 21 6092.070606 504.0432294 28 7053.956872 1848.8712485 Total 5847.108503 1438.6404558 12 4998.664076 1028.3994199 14 5059.023352 1574.5239854 21 9497.626466 213.0635585 28 9862.795182 1226.2856771 Total 7354.527269 2616.0856031 12 5181.211774 1292.7174062 14 6467.873414 2508.7208318 21 9501.806930 748.5379701 28 12521.709820 1623.2575235 Total 8418.150484 3291.9286320 12 5378.636814 894.2566079 14 7019.469850 1148.5577121 21 12855.556620 1050.2107121 28 13539.025626 555.3589885 Total 9698.172227 3798.6323211 12 5081.451474 872.0613431 12 14 6005.369979 1750.4078394 12 130 21 9486.765156 2568.0655663 12 28 10744.371875 2889.2757892 12 7829.489621 3168.6864039 48 Total Variancesa Levene's Test of Equality of Error Dependent Variable: BC don nhan F df1 df2 Sig 2.499 15 32 015 Tests the null hypothesis that the error variance of the dependent variable is equal across groups a Design: Intercept + Nghiemthuc + Ngay + Nghiemthuc * Ngay Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: BC don nhan Source Type III Sum of df Mean Square Squares Corrected Model 418050573.945a 15 27870038.263 Intercept 2942443570.691 2942443570.691 Nghiemthuc 95927045.148 31975681.716 Ngay 265466722.523 88488907.508 Nghiemthuc * Ngay 56656806.274 6295200.697 Error 53856381.804 32 Total 3414350526.440 48 471906955.749 47 Corrected Total F 16.560 1748.320 18.999 52.578 3.740 Sig .000 000 000 000 003 1683011.931 a R Squared = 886 (Adjusted R Squared = 832) Multiple Comparisons Dependent Variable: BC don nhan (I) Nghiem (J) Mean Std Error thuc Nghiem Difference (I-J) thuc -1507.418766* 529.6243844 -2571.041982* 529.6243844 -3851.063725* 529.6243844 1507.418766* 529.6243844 -1063.623215 529.6243844 -2343.644958* 529.6243844 Tukey HSD 2571.041982* 529.6243844 1063.623215 529.6243844 -1280.021743 529.6243844 3851.063725* 529.6243844 2343.644958* 529.6243844 1280.021743 529.6243844 -1507.418766* 529.6243844 -2571.041982* 529.6243844 -3851.063725* 529.6243844 1507.418766* 529.6243844 -1063.623215 529.6243844 -2343.644958* 529.6243844 LSD 2571.041982* 529.6243844 1063.623215 529.6243844 -1280.021743* 529.6243844 3851.063725* 529.6243844 2343.644958* 529.6243844 1280.021743* 529.6243844 131 Sig 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound 037 000 000 037 206 001 000 206 094 000 001 094 008 000 000 008 053 000 000 053 022 000 000 022 -2942.362771 -4005.985987 -5286.007730 72.474761 -2498.567220 -3778.588963 1136.097977 -371.320789 -2714.965748 2416.119720 908.700953 -154.922262 -2586.228334 -3649.851550 -4929.873293 428.609198 -2142.432784 -3422.454526 1492.232414 -15.186353 -2358.831311 2772.254156 1264.835390 201.212175 -72.474761 -1136.097977 -2416.119720 2942.362771 371.320789 -908.700953 4005.985987 2498.567220 154.922262 5286.007730 3778.588963 2714.965748 -428.609198 -1492.232414 -2772.254156 2586.228334 15.186353 -1264.835390 3649.851550 2142.432784 -201.212175 4929.873293 3422.454526 2358.831311 Based on observed means The error term is Mean Square(Error) = 1683011.931 * The mean difference is significant at the 05 level Phụ lục C.5 Kết phân tích thống kê ảnh hưởng việc bổ sung vi khuẩn L fermentum C21 vào thức ăn cảm nhiễm vi khuẩn S iniae đến biến động số lượng bạch cầu trung tính máu cá chẽm thí nghiệm Between-Subjects Factors N Nghiem thuc Ngay 12 12 12 12 12 14 12 21 12 28 12 Descriptive Statistics Dependent Variable: BC trung tinh Nghiem thuc Total Ngay Mean Std Deviation N 9630.576161 714.5067378 14 10525.160977 1421.4685011 21 11020.608828 736.9195567 28 11905.662243 810.4290592 Total 10770.502052 1190.6519434 12 10067.662598 1108.8072266 14 10672.969285 1861.3271902 21 13446.539497 1047.3692392 28 12814.026596 2926.0456737 Total 11750.299494 2188.9680914 12 10787.178710 1051.0735205 14 12286.818932 2393.8931704 21 14496.446235 2292.1647979 28 15880.682891 2336.5211714 Total 13362.781692 2719.4084649 12 10366.235680 811.3916215 14 12536.527539 1388.7587175 21 15526.759724 2044.5561034 28 17085.243326 1548.2645606 Total 13878.691567 3011.1797793 12 10212.913287 911.8751397 12 14 11505.369183 1815.8874800 12 21 13622.588571 2250.6743297 12 28 14421.403764 2837.4836226 12 Total 12440.568701 2623.9447079 48 Levene's Test of Equality of Error Dependent Variable: BC trung tinh Variancesa 132 F df1 df2 Sig 1.441 15 32 188 Tests the null hypothesis that the error variance of the dependent variable is equal across groups a Design: Intercept + Nghiemthuc + Ngay + Nghiemthuc * Ngay Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: BC trung tinh Source Type III Sum of df Mean Square Squares Corrected Model 234005380.213a 15 15600358.681 Intercept 7428851981.470 7428851981.470 Nghiemthuc 74211220.423 24737073.474 Ngay 133895103.588 44631701.196 Nghiemthuc * Ngay 25899056.202 2877672.911 Error 89593653.807 32 2799801.681 Total Corrected Total 7752451015.489 48 323599034.020 47 a R Squared = 723 (Adjusted R Squared = 593) Multiple Comparisons Dependent Variable: BC trung tinh (I) (J) Mean Difference Std Error Sig Nghiem Nghiem (I-J) thuc thuc -979.797442 683.1058583 488 -2592.279640* 683.1058583 003 -3108.189515* 683.1058583 000 979.797442 683.1058583 488 -1612.482198 683.1058583 106 -2128.392073* 683.1058583 019 Tukey HSD 2592.279640* 683.1058583 003 1612.482198 683.1058583 106 -515.909875 683.1058583 874 3108.189515* 683.1058583 000 2128.392073* 683.1058583 019 515.909875 683.1058583 874 -979.797442 683.1058583 161 -2592.279640* 683.1058583 001 -3108.189515* 683.1058583 000 979.797442 683.1058583 161 -1612.482198* 683.1058583 025 -2128.392073* 683.1058583 004 LSD 2592.279640* 683.1058583 001 1612.482198* 683.1058583 025 -515.909875 683.1058583 456 3108.189515* 683.1058583 000 2128.392073* 683.1058583 004 515.909875 683.1058583 456 Based on observed means The error term is Mean Square(Error) = 2799801.681 * The mean difference is significant at the 05 level F 5.572 2653.349 8.835 15.941 1.028 Sig .000 000 000 000 440 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound -2830.578269 870.983385 -4443.060466 -741.498813 -4958.970342 -1257.408688 -870.983385 2830.578269 -3463.263025 238.298629 -3979.172900 -277.611247 741.498813 4443.060466 -238.298629 3463.263025 -2366.690702 1334.870951 1257.408688 4958.970342 277.611247 3979.172900 -1334.870951 2366.690702 -2371.238542 411.643658 -3983.720739 -1200.838540 -4499.630615 -1716.748415 -411.643658 2371.238542 -3003.923298 -221.041098 -3519.833173 -736.950974 1200.838540 3983.720739 221.041098 3003.923298 -1907.350975 875.531224 1716.748415 4499.630615 736.950974 3519.833173 -875.531224 1907.350975 Phụ lục C.6 Kết phân tích thống kê ảnh hưởng việc bổ sung vi khuẩn L fermentum C21 vào thức ăn cảm nhiễm vi khuẩn S iniae đến biến động số lượng tiểu cầu máu cá chẽm thí nghiệm Between-Subjects Factors N 133 Nghiem thuc Ngay 12 12 12 12 12 14 12 21 12 28 12 Descriptive Statistics Dependent Variable: Tieu cau Nghiem thuc Total Ngay Mean Std Deviation N 106274.515405 2929.4659867 14 118622.827833 44036.5409145 21 125996.666667 8698.8959859 28 137957.168333 14612.7001421 Total 122212.794560 23474.0859023 12 103164.351916 19505.3341030 14 111290.424667 21870.4928851 21 126159.326667 9918.4528829 28 147362.095000 14815.6886611 Total 121994.049562 22850.0065592 12 104320.005145 10212.8801895 14 151385.433667 14458.3810952 21 172923.160000 30227.1712832 28 177483.748333 22864.1651462 Total 151528.086786 35135.8478084 12 100912.262349 43223.6954718 14 151899.927667 26339.7682841 21 154910.749206 6490.4269120 28 155509.541764 14595.4803275 Total 140808.120247 33061.4038698 12 103667.783704 20820.5788853 12 14 133299.653458 31274.9829884 12 21 144997.475635 25301.4163509 12 28 154578.138358 21104.1889000 12 Total 134135.762789 30958.8735460 48 Levene's Test of Equality of Error Variancesa Dependent Variable: Tieu cau F df1 df2 Sig 2.822 15 32 007 Tests the null hypothesis that the error variance of the dependent variable is equal across groups a Design: Intercept + Nghiemthuc + Ngay + Nghiemthuc * Ngay 134 Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Tieu cau Source Type III Sum of df Mean Square Squares Corrected Model 29085873153.331a 15 1939058210.222 863635337228.14 Intercept 863635337228.147 Nghiemthuc 7639099914.601 2546366638.200 Ngay 17578372238.186 5859457412.729 Nghiemthuc * Ngay 3868401000.545 429822333.394 Error 15961363854.714 32 Total 908682574236.193 48 45047237008.045 47 Corrected Total F 3.888 1731.45 5.105 11.747 862 Sig .001 000 005 000 005 498792620.460 a R Squared = 646 (Adjusted R Squared = 480) Multiple Comparisons Dependent Variable: Tieu cau (I) (J) Mean Difference Std Error Sig Nghiem Nghiem (I-J) thuc thuc 218.744997 9117.6808131 1.000 * -29315.292227 9117.6808131 015 -18595.325687 9117.6808131 195 -218.744997 9117.6808131 1.000 -29534.037224* 9117.6808131 014 -18814.070684 9117.6808131 187 Tukey * HSD 29315.292227 9117.6808131 015 29534.037224* 9117.6808131 014 10719.966540 9117.6808131 646 18595.325687 9117.6808131 195 18814.070684 9117.6808131 187 -10719.966540 9117.6808131 646 218.744997 9117.6808131 981 * -29315.292227 9117.6808131 003 -18595.325687* 9117.6808131 050 -218.744997 9117.6808131 981 * -29534.037224 9117.6808131 003 -18814.070684* 9117.6808131 047 LSD 29315.292227* 9117.6808131 003 * 29534.037224 9117.6808131 003 10719.966540 9117.6808131 248 * 18595.325687 9117.6808131 050 18814.070684* 9117.6808131 047 -10719.966540 9117.6808131 248 Based on observed means The error term is Mean Square(Error) = 498792620.460 * The mean difference is significant at the 05 level 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound -24484.349889 24921.839883 -54018.387113 -4612.197341 -43298.420573 6107.769199 -24921.839883 24484.349889 -54237.132110 -4830.942338 -43517.165570 5889.024202 4612.197341 54018.387113 4830.942338 54237.132110 -13983.128346 35423.061426 -6107.769199 43298.420573 -5889.024202 43517.165570 -35423.061426 13983.128346 -18353.363066 18790.853060 -47887.400290 -10743.184164 -37167.433750 -23.217624 -18790.853060 18353.363066 -48106.145287 -10961.929161 -37386.178748 -241.962621 10743.184164 47887.400290 10961.929161 48106.145287 -7852.141524 29292.074603 23.217624 37167.433750 241.962621 37386.178748 -29292.074603 7852.141524 Phụ lục C.7 Kết phân tích tương quan tiêu huyết học máu cá chẽm Correlations Hong tong BC don BC Te bao Tieu cau bach nhan trung Lympho cau cau 135 tinh Pearson Correlation Hong cau bach cau BC don nhan BC trung tinh Pearson Correlation Sig (2-tailed) Lympho N Pearson Correlation Sig (2-tailed) N Pearson Correlation Sig (2-tailed) Pearson Correlation Sig (2-tailed) N Pearson Correlation Tieu cau 500** 494** 720** 000 002 000 000 000 48 48 48 48 48 48 610** 792** 762** 963** 912** 000 000 000 000 48 48 48 48 837** 820** 645** 000 000 000 48 48 48 767** 667** 000 000 000 N Te bao 441** Sig (2-tailed) N tong 610** Sig (2-tailed) N 48 48 441** 792** 002 000 48 48 48 500** 762** 837** 000 000 000 48 48 48 48 48 48 494** 963** 820** 767** 772** 000 000 000 000 48 48 48 48 48 48 720** 912** 645** 667** 772** 000 000 000 000 000 48 48 48 48 48 000 48 ** Correlation is significant at the 0.01 level (2-tailed) Phụ lục C.8 Kết phân tích thống kê ảnh hưởng việc bổ sung vi khuẩn L fermentum C21 vào thức ăn cảm nhiễm vi khuẩn S iniae đến khả ức chế vi khuẩn huyết Between-Subjects Factors N Nghiem thuc Ngày 12 12 12 12 12 14 12 21 12 28 12 Descriptive Statistics Dependent Variable: Uc che VK Nghiem thuc Ngày Mean Std Deviation N 21.33 3.215 14 26.67 1.528 21 31.00 4.583 28 35.00 5.000 Total 28.50 6.230 12 136 Total 24.67 5.033 14 30.00 5.568 21 43.00 3.000 28 46.33 3.512 Total 36.00 10.072 12 26.00 4.000 14 32.33 8.021 21 55.00 5.000 28 60.67 1.155 Total 43.50 15.917 12 24.67 2.887 14 34.33 4.726 21 74.00 2.646 28 64.33 2.082 Total 49.33 21.500 12 24.17 3.762 12 14 30.83 5.540 12 21 50.75 16.923 12 28 51.58 12.537 12 Total 39.33 16.220 48 Levene's Test of Equality of Error Variancesa Dependent Variable: Uc che VK F df1 2.177 df2 15 Sig 32 032 Tests the null hypothesis that the error variance of the dependent variable is equal across groups a Design: Intercept + Nghimthc + Ngày Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Uc che VK Source Type III Sum of df Mean Square F Sig Squares Corrected Model 9942.167a 1657.028 28.045 000 Intercept 74261.333 74261.333 1256.848 000 Nghimthc 2950.000 983.333 16.643 000 Ngày 6992.167 2330.722 39.447 000 Error 2422.500 41 59.085 Total 86626.000 48 Corrected Total 12364.667 47 a R Squared = 804 (Adjusted R Squared = 775) Multiple Comparisons Dependent Variable: Uc che VK (I) Nghiem (J) Nghiem thuc thuc Tukey Mean Difference (I-J) -7.50 Std Error Sig 3.138 095 137 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound -15.90 90 -15.00* 3.138 -20.83* 3.138 7.50 3.138 -7.50 3.138 -13.33* 3.138 15.00* 3.138 7.50 3.138 -5.83 3.138 20.83* 3.138 13.33* 3.138 5.83 3.138 -7.50* 3.138 -15.00* 3.138 -20.83* 3.138 7.50* 3.138 -7.50* 3.138 -13.33* 3.138 LSD 15.00* 3.138 7.50* 3.138 -5.83 3.138 20.83* 3.138 13.33* 3.138 5.83 3.138 Based on observed means The error term is Mean Square(Error) = 59.085 * The mean difference is significant at the 05 level HSD 000 000 095 095 001 000 095 261 000 001 261 022 000 000 022 022 000 000 022 070 000 000 070 -23.40 -29.24 -.90 -15.90 -21.74 6.60 -.90 -14.24 12.43 4.93 -2.57 -13.84 -21.34 -27.17 1.16 -13.84 -19.67 8.66 1.16 -12.17 14.50 7.00 -.50 -6.60 -12.43 15.90 90 -4.93 23.40 15.90 2.57 29.24 21.74 14.24 -1.16 -8.66 -14.50 13.84 -1.16 -7.00 21.34 13.84 50 27.17 19.67 12.17 Phụ lục C.9 Kết phân tích thống kê ảnh hưởng việc bổ sung vi khuẩn L fermentum C21 vào thức ăn cảm nhiễm vi khuẩn S iniae đến hoạt tính lysozyme huyết Between-Subjects Factors N 12 12 12 12 12 14 12 21 12 28 12 Nghiem thuc Ngay Descriptive Statistics Dependent Variable: Lysozyme Nghiem thuc Ngay Mean Std Deviation N 725.267 68.1046 14 785.867 41.6791 21 840.233 35.0363 28 823.700 46.2762 138 Total Total 793.767 62.4633 12 731.467 24.7114 14 864.167 42.9886 21 1179.567 28.5157 28 1133.933 59.1950 Total 977.283 197.6196 12 751.567 21.3388 14 946.500 112.7527 21 1230.433 55.1947 28 1171.033 40.0761 Total 1024.883 206.4884 12 768.200 60.0422 14 1021.400 41.5293 21 1283.500 66.5333 28 1010.467 108.2953 Total 1020.892 200.3960 12 744.125 44.7937 12 14 904.483 108.4757 12 21 1133.433 185.6434 12 28 1034.783 153.3225 12 954.206 196.3415 48 Total Levene's Test of Equality of Error Variancesa Dependent Variable: Lysozyme F df1 1.321 df2 15 Sig 32 247 Tests the null hypothesis that the error variance of the dependent variable is equal across groups a Design: Intercept + Nghiemthuc + Ngay + Nghiemthuc * Ngay Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Lysozyme Source Type III Sum of df Mean Square F Sig Squares Corrected Model 1700198.855a 15 113346.590 32.486 000 Intercept 43704459.242 43704459.242 12525.990 000 428587.279 142862.426 40.945 000 1022658.166 340886.055 97.700 000 Nghiemthuc * Ngay 248953.410 27661.490 7.928 000 Error 111651.273 32 3489.102 Total 45516309.370 48 Nghiemthuc Ngay 139 Corrected Total 1811850.128 47 a R Squared = 938 (Adjusted R Squared = 909) Multiple Comparisons Dependent Variable: Lysozyme (I) (J) Nghiem Nghiem thuc thuc Mean Std Error Sig 95% Confidence Difference Interval (I-J) Lower Upper Bound Bound -183.517* 24.1147 000 -248.852 -118.181 -231.117* 24.1147 000 -296.452 -165.781 -227.125* 24.1147 000 -292.460 -161.790 183.517* 24.1147 000 118.181 248.852 -47.600 24.1147 219 -112.935 17.735 Tukey -43.608 24.1147 288 -108.944 21.727 HSD 231.117* 24.1147 000 165.781 296.452 47.600 24.1147 219 -17.735 112.935 3.992 24.1147 998 -61.344 69.327 227.125* 24.1147 000 161.790 292.460 43.608 24.1147 288 -21.727 108.944 -3.992 24.1147 998 -69.327 61.344 -183.517* 24.1147 000 -232.637 -134.397 -231.117* 24.1147 000 -280.237 -181.997 -227.125* 24.1147 000 -276.245 -178.005 183.517* 24.1147 000 134.397 232.637 -47.600 24.1147 057 -96.720 1.520 -43.608 24.1147 080 -92.728 5.512 231.117* 24.1147 000 181.997 280.237 47.600 24.1147 057 -1.520 96.720 3.992 24.1147 870 -45.128 53.112 227.125* 24.1147 000 178.005 276.245 43.608 24.1147 080 -5.512 92.728 -3.992 24.1147 870 -53.112 45.128 LSD Based on observed means The error term is Mean Square(Error) = 3489.102 * The mean difference is significant at the 05 level Phụ lục C.10 Kết phân tích thống kê ảnh hưởng việc bổ sung vi khuẩn L fermentum C21 vào thức ăn cảm nhiễm vi khuẩn S iniae đến tỷ lệ sống cá chẽm thí nghiệm Levene's Test of Equality of Error Variancesa Dependent Variable: Ty le song F df1 df2 Sig 140 6.298 55 112 000 Tests the null hypothesis that the error variance of the dependent variable is equal across groups a Design: Intercept + Nghiemthuc + Ngay + Nghiemthuc * Ngay Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Ty le song Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Corrected Model 139962.185a 55 2544.767 243.048 Intercept 1027892.149 1027892.149 98172.758 Nghiemthuc 88723.589 29574.530 2824.628 Ngay 24293.101 13 1868.700 178.477 Nghiemthuc * Ngay 26945.494 39 690.910 65.988 Error 1172.667 112 Total 1169027.000 168 141134.851 167 Corrected Total a R Squared = 992 (Adjusted R Squared = 988) Multiple Comparisons Dependent Variable: Ty le song (I) (J) Mean Std Sig Nghiem Nghiem Difference Error thuc thuc (I-J) 53.93* 706 00 706 33.19* 706 -53.93* 706 * -53.93 706 -20.74* 706 Tukey HSD 00 706 53.93* 706 * 33.19 706 -33.19* 706 20.74* 706 -33.19* 706 53.93* 706 00 706 * 33.19 706 -53.93* 706 -53.93* 706 -20.74* 706 LSD 00 706 * 53.93 706 33.19* 706 -33.19* 706 20.74* 706 * -33.19 706 Based on observed means The error term is Mean Square(Error) = 10.470 * The mean difference is significant at the 05 level 141 000 1.000 000 000 000 000 1.000 000 000 000 000 000 000 1.000 000 000 000 000 1.000 000 000 000 000 000 10.470 95% Confidence Interval Lower Upper Bound Bound 52.09 55.77 -1.84 1.84 31.35 35.03 -55.77 -52.09 -55.77 -52.09 -22.58 -18.90 -1.84 1.84 52.09 55.77 31.35 35.03 -35.03 -31.35 18.90 22.58 -35.03 -31.35 52.53 55.33 -1.40 1.40 31.79 34.59 -55.33 -52.53 -55.33 -52.53 -22.14 -19.34 -1.40 1.40 52.53 55.33 31.79 34.59 -34.59 -31.79 19.34 22.14 -34.59 -31.79 Sig .000 000 000 000 000 ... thường gây bệnh cá chẽm Cryptocaryon irritans 10 gây bệnh đốm trắng cá, bệnh gây tỷ lệ chết đến 50% Ichthyobodo, Trypanosoma, Henneguya Trichodina báo cáo gây bệnh cá chẽm Bệnh trùng đơn bào gây. .. đề xuất giải pháp phòng bệnh làm sở cho việc chẩn đốn phòng bệnh xuất huyết cá chẽm 1.3 Phạm vi nghiên cứu Nghiên cứu tập trung tìm hiểu bệnh xuất huyết vi khuẩn S iniae gây cá chẽm nuôi tỉnh... Phương pháp nghiên cứu 42 3.4.1 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm gây bệnh vi khuẩn S iniae cá chẽm 42 3.4.1.1 Phân lập định danh vi khuẩn S iniae gây bệnh xuất huyết cá chẽm