ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư là một trong những căn bệnh nguy hiểm nhất trên toàn thế giới và là nguyên nhân phổ biển gây tử vong đứng thứ 2 sau tim mạch. Nó được định nghĩa là một nhóm bệnh đặc trưng bởi sự phát triển không kiểm soát và lây lan của các tế bào bất thường. Theo báo cáo của Hiệp hội ung thư Hoa kỳ có khoảng 1,7 triệu ca ung thư mới được chuẩn đoán năm 2016, trong đó có khoảng 600.000 người Mỹ chết vì ung thư. Theo báo cáo mới nhất của Viện nghiên cứu phòng chống ung thư Việt Nam, mỗi năm số bệnh nhân mới mắc ung thư ở Việt Nam là 150.000 người, trong đó có 75.000 người tử vong, con số này có xu hướng tăng trong những năm tiếp theo. Bởi vậy việc tìm kiếm thuốc đặc trị cũng như thuốc hỗ trợ điều trị và các tác nhân dự phòng hóa học là hết sức cần thiết và cấp bách. Các hợp chất tự nhiên đã được chứng minh là một nguồn nguyên liệu vô cùng tuyệt vời cho sự khám phá và phát triển các loại thuốc mới. Từ dịch chiết của các loại vi sinh vật, thực vật và sinh vật biển, các nhà khoa học đã tìm thấy rất nhiều đặc tính dược lý quý giá. Nhiều trong số đó đã được thử nghiệm lâm sàng trong điều trị các bệnh ở người và có thể phân loại thành nhóm các sản phẩm có nguồn gốc tự nhiên, bán tổng hợp hoặc tổng hợp toàn phần sử dụng trong thử nghiệm lâm sàng hoặc nghiên cứu các đặc tính dược lý mới. Từ năm 1981 đến năm 2014, có tớ i 73% thuốc chống ung thư có mặt trên thị trường hiện nay có nguồn gốc thiên nhiên hoặc được tổng hợp theo mẫu hình cấu trúc của hợp chất tự nhiên. Từ năm 1940 đến 2014 đã có 246 loại thuốc chống ung thư đã được phê duyệt và trong số này có 207 loại được thiết kế dựa trên những dạng có cấu trúc phân tử nhỏ, loại trừ các thuốc có kích thước phân tử lớn và vacxin. Hơn nữa 77,3% (160 trong 207) những loại thuốc chống ung thư này có nguồn gốc từ tự nhiên, cho thấy rằng các hợp chất tự nhiên là nguồn nguyên liệu đóng góp chính cho nghiên cứu các loại thuốc chống ung thư. Ưu điểm của các hợp chất tự nhiên biển so với những phân tử tổng hợp là chúng được hình thành bên trong hệ thống sống và tạo ra phục vụ mục đích sinh tồn, bảo vệ cơ thể và lợi thế cạnh tra nh trong hệ sinh thái của chúng, do đó các hợp chất này thể hiện hoạt tính dược lý thú vị. Hơn nữa, các hợp chất này có cấu trúc hóa học rất độc đáo trong hầu hết các loại sinh vật biển, điều này cho thấy điều kiện sống khắc nghiệt trong môi trường biển có thể đã tạo nên những hợp chất này. Cho tới nay, đã có gần 25.000 hợp chất đã được phân lập từ sinh vật biển và công bố khoa học, trong đó có hơn 10.000 có hoạt tính sinh học, các hoạt chất này có nguồn gốc từ hải miên, da gai, san hô mềm, động vật thân mề m. Do vậy, sàng lọc tìm kiếm các hoạt chất có tác dụng diệt tế bào ung thư là bước đi đầu tiên nhưng là bắt buộc đối với quá trình phát triển thuốc mới. Thông qua các bước sàng lọc hoạt tính sinh học có thể chọn ra những đối tượng có triển vọng để nghiên cứu tiếp theo (chiết tách hoạt chất, nghiên cứu cấu trúc, các nghiên cứu in vitro, các nghiên cứu về độ an toàn, cơ chế tác dụng dược lý…) lựa chọn được dược liệu và hoạt chất sạch cho những nghiên cứu lâm sàng sâu hơn, toàn diện hơn. Trong hơn 30 năm qua, các nghiên cứu về các hợp chất chuyển hóa thứ cấp từ sinh vật biển đã được nghiên cứu rộng rãi, đã tìm ra rất nhiều hợp chất có cấu trúc và hoạt tính sinh học. Cho đến nay đã có rất nhiều thuốc mới điều trị ung thư có nguồn gốc sinh vật biển đã được FDA Hoa Kỳ chứng nhận và bán trên thị trường do các hãng lớn trên thế giới cung cấp như thuốc điều trị ung thư có tên thương mại như Prialt ® (Ziconotide), Halaven ® (Eribulin mesylate), Yondelis® (Trabectedin). Đại dương là nơi sinh sống của 34 trong 36 ngành sinh vật trên trái đất với hơn 300.000 loài động thực vật đã được biết đến. Đây chính là nguồn cung cấp vô số các sản phẩm tự nhiên quý giá từ các loài sinh vật biển như rong biển, ruột khoang, rêu biển, thân mềm, da gai và từ các loài vi khuẩn biển. Việt Nam nằm trong khu vực biển Thái Bình Dương, sở hữu hơn 1 triệu km 2 vùng biển. Với bờ biển dài trên 3.260 km từ Bắc xuống Nam, đứng thứ 27 trong số 157 quốc gia ven biển, các quốc đảo và các lãnh thổ trên thế giới. Kết quả thống kê đến na y đã thô ng báo có trên 12.000 loài động thực vật biển ở Việt Nam, trong đó có rất nhiều loài có độc tố hoặc có hoạt tính sinh học tốt. Do vậy, hướng nghiên cứu các công nghệ chiết xuất, phân lập các hoạt chất theo định hướng hoạt tính sinh học từ các nguồn dược liệu biển có trữ lượng lớn như rong biển, hải sâm, san hô mềm được quan tâm đặc biệt. Các nghiên cứu trước đây đã cho thấy, vùng biển nước ta là một trong số các vùng biển có hệ đa dạng sinh học phong phú nhất. Đồng thời, san hô mềm có sự phân bố rất dồi dào và đa dạng, tuy nhiên cho tới nay, ở nước ta các công trình nghiên cứu các hợp chất thứ cấp từ các loài san hô mềm vẫn còn ở mức độ khiêm tốn. Do đó, chúng tôi quyết định lựa chọn đề tài trong khuôn khổ luận án Tiến sỹ: “Nghiên cứu tìm kiếm các hoạt chất gây độc tế bào ung thƣ từ loài san hô mềm Menella woodin ở vùng biển Cô Tô” Mục tiêu nghiên cứu chí nh của đề tài luận án gồm: - Đánh giá một số hoạt tính sinh học của dịch chiết tổng nhằm định hướng cho các nghiên cứu tiếp theo. - Nghiên cứu tách chiết, xác định cấu trúc hóa học và hoạt tính gây độc tế bào ung thư của một số hợp chất sạch phân lập được từ loài san hô mềm Menella woodin thu thập ở vùng biển Cô Tô - Quảng Ninh.
viện HàN LÂM khoa học công nghệ việt nam ViƯn c«ng nghƯ sinh häc CHÂU NGỌC ĐIỆP NGHIÊN CỨU TÌM KIẾM CÁC HOẠT CHẤT GÂY ĐỘC TẾ BÀO UNG THƯ TỪ LỒI SAN HƠ MỀM MENELLA WOODIN Ở VÙNG BIỂN CÔ TÔ LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC HÀ NỘI, 2019 MỤC LỤC Lời cảm ơn………………………………………………………………………………………… i Lời cam đoan……………………………………………………………………………………… ii MỤC LỤC………………………………………………………………………………………… iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT…………………………… vii DANH MỤC CÁC BẢNG …………………………………………………………………… x DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ xi ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Đặc điểm chung san hô mềm 1.1.1 Đặc điểm sinh học san hô mềm 1.1.2 Đặc điểm sinh sản 1.1.3 Đặc điểm phân bố 1.2 Tình hình nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính gây độc tế bào ung thƣ giống Menela 1.2.1 Tình hình nghiên cứu giới 1.2.2 Tình hình nghiên cứu số lồi san hơ mềm Việt Nam 17 1.3 Giới thiệu lồi san hơ mềm Menella woodin 20 CHƢƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Vật liệu nghiên cứu 22 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 22 2.2.1 Phương pháp xử lý mẫu, tạo dịch chiết 22 2.2.2 Phương pháp phân lập xác định cấu trúc hóa học 25 2.2.3 Phương pháp thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ung thư 27 2.2.4 Phương pháp xác định hoạt tính ức chế sản sinh ROS 29 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 31 3.1 Thu mẫu, xử lý mẫu, tạo dịch chiết 31 3.2 Sàng lọc hoạt tính gây độc tế bào ung thƣ mẫu dịch chiết thô 33 3.3 Phân lập hợp chất từ loài Menella woodin 33 iii 3.4 Thông số vật lý kiện phổ hợp chất phân lập đƣợc 3.4.1 Hợp chất MW1 (Menellsteroid E): 1β,3β,5α,11β tetrahydroxycholestan-6-one (chất mới) 3.4.2 38 Hợp chất MW3 (Menellsteroid G): 24-methylcholest-24(28)-ene-3β, 5α,6β,11β-tetraol (chất mới) 3.4.4 37 Hợp chất MW2 (Menellsteroid F): Cholest-24-ene-3β,5α,6β,11βtetraol (chất mới) 3.4.3 37 39 Hợp chất MW4 (Menellsteroid H): 24-Norcholest-22(E)-ene 3β,5α,6β,11β-tetraol (chất mới) 40 3.4.5 Hợp chất MW5: cholest-3β,5α,6β,11β-tetraol 41 3.4.6 Hợp chất MW6: Menellsteroid B 41 3.4.7 Hợp chất MW7: (22E,24S)-24-methyl-5α-cholesta-7,22 diene3β,5α,6β,9-tetraol 3.4.8 Hợp chất MW8: (1S,2R,8S,10R)-1,8-epoxy-2-hydroxy-guaian-3,5,7trien-12,8-olide (chất mới) 3.4.9 42 42 Hợp chất MW9: (1R,2S,8S,10R)-1,2-dihydroxy-8-methoxy-guaian3,5,7-trien-12,8-olide (chất mới) 43 3.4.10 Hợp chất MW10: Menelloide F (chất mới) 44 3.4.11 Hợp chất MW11: Menelloide G (chất mới) 45 3.4.12 Hợp chất MW12: Menverin A 46 3.4.13 Hợp chất MW13: Menverin B 46 3.4.14 Hợp chất MW14: Menverin C 46 3.4.15 Hợp chất MW15: Menverin F 47 3.4.16 Hợp chất MW16: Menelloide B 47 3.4.17 Hợp chất MW17: 1S*,4S*,5S*,10R*-4,10-Guaianediol 48 3.5 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thƣ hợp chất phân lập đƣợc 48 3.6 Xác định hoạt tính ức chế sản sinh ROS 49 CHƢƠNG 4: BÀN LUẬN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 51 iv 4.1 Hoạt tính gây độc tế bào dịch chiết thô 51 4.2 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập đƣợc 51 4.2.1 Hợp chất MW1: Menellateroid E (1β,3β,5α,11β tetrahydroxycholestan-6-one) (chất mới) 4.2.2 Hợp chất MW2: Menellsteroid F (Cholest-24-ene-3β,5α,6β,11βtetraol) (chất mới) 4.2.3 53 Hợp chất MW3: Menellsteroid G (24-methylcholest-24 (28)-ene3β,5α,6β,11β-tetraol) (chất mới) 4.2.4 51 54 Hợp chất MW4: Menellsteroid H (24-Norcholest-22(E)-ene3β,5α,6β,11β-tetraol) (chất mới) 55 4.2.5 Hợp chất MW5: cholest-3β,5α,6β,11β-tetraol 56 4.2.6 Hợp chất MW6: Menellsteroid B (cholest-22-ene-3β,5α,6β,11βtetraol) 58 4.2.7 Hợp chất MW7: (22E,24S)-24-methyl-5α-cholesta-7,22-diene3β,5α,6β, 9-tetraol 4.2.8 Hợp chất MW8: (1S,2R,8S,10R)-1,8-epoxy-2-hydroxy-guaian-3,5,7trien-12,8-olide (chất mới) 4.2.9 59 61 Hợp chất MW9: (1R,2S,8S,10R)-1,2-dihydroxy-8-methoxy-guaian-3, 5,7-trien-12,8-olide (chất mới) 64 4.2.10 Hợp chất MW10: Menelloide F (chất mới) 67 4.2.11 Hợp chất MW11: Menelloide G (chất mới) 69 4.2.12 Hợp chất MW12: Menverin A 71 4.2.13 Hợp chất MW13: Menverin B 72 4.2.14 Hợp chất MW14: Menverin C 73 4.2.15 Hợp chất MW15: Menverin F 74 4.2.16 Hợp chất MW16: Menelloide B 76 4.2.17 Hợp chất MW17: 1S*,4S*,5S*,10R*-4,10-Guaianediol 77 4.3 Hoạt tính gây độc tế bào ung thƣ hợp chất phân lập đƣợc 80 4.4 Hoạt tính ức chế sản sinh ROS 80 v KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 82 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CỦA LUẬN ÁN 83 TĨM TẮT LUẬN ÁN BẰNG TIẾNG ANH 84 TÀI LIỆU THAM KHẢO 89 PHỤ LỤC vi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chú thích Ac Acethyl CC Column Chromatography Circular Dichroism CD Spectroscopy CH2Cl2 Dichloroform CHCl3 Choloroform 13 C-NMR Phổ nhị sắc tròn Carbon-13 Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance Spectroscopy cacbon 13 Phổ tương tác hai chiều 1 H- H COSY Correlation Spectroscopy Công thức phân tử CTPT DEPT proton Distortionless Enhancement by Phổ DEPT Polarisation Transfer Electron Spray Ionization Mass Phổ khối ion hóa phun mù Spectrometry điện tử Et Ethyl C2 H5 EtOAc Ethyl acetate ESI-MS Human hepatocellular Hep-G2 carcinoma Ung thư gan Human promyelocytic HL-60 HMBC H-NMR leukemia Ung thư máu cấp tính Heteronuclear Multiple Bond Phổ tương tác dị hạt nhân qua Correlation nhiều liên kết Proton Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance Spectroscopy proton vii High Performance Liquid HPLC Chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao High Resolution - Electron Spray Ionization - Mass Phổ khối phân giải cao ion hóa HR-ESI-MS Spectrometry phun mù điện tử IC50 Inhibitory Concentration 50% Nồng độ ức chế tối thiểu 50% IR Infrared Spectroscopy Phổ hồng ngoại Hằng số tương tác tính J (Hz) Hz KB Human epidermoid carcinoma Ung thư biểu mô LD50 Lethal Dose 50% Liều gây chết 50% Human prostate LNCaP adenocarcinoma Ung thư tiền liệt tuyến Human bronchogenic LU-1 carcinoma Ung thư phổi MCF-7 Human breast adenocarcinoma Ung thư vú Me Methyl MeOH Methanol Mp Melting point Điểm chảy Medium Performance Liquid MPLC Chromatography n-Hexane n-Hexane NIH/3T3 Human Normal cell Sắc ký lỏng trung bình Tế bào lành Nuclear Overhauser Effect NOESY Spectroscopy Phổ NOESY OD Optical Density Mật độ quang OMe Methoxy viii Ph Phenyl SK-Mel-2 Human melanoma carcinoma SRB Sulforhodamine B TLC Thin Layer Chromatography TMS Tetramethyl silane UV Ultraviolet Spectroscopy Ung thư da Sắc ký mỏng Phổ tử ngoại Độ chuyển dịch hóa học (tính δ (ppm) (ppm = part per million) [α]D phần triệu) Độ quay cực s singlet d double q quartet dt double triplet dd double doublet t triplet br broad quint quintet m multiplet ix DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Các loại thuốc điều trị ung thư FDA chứng nhận thương mại có nguồn gốc từ sinh vật biển 16 Bảng 1.2 Một số hợp chất tiềm cho trị liệu ung thư từ san hô mềm 16 Bảng 3.1 Kết xác định giá trị IC50 mẫu MW 33 Bảng 3.2 Số liệu phổ NMR hợp chất MW1 37 Bảng 3.3 Số liệu phổ NMR hợp chất MW2 38 Bảng 3.4 Số liệu phổ NMR hợp chất MW3 39 Bảng 3.5 Số liệu phổ NMR hợp chất MW4 40 Bảng 3.6 Số liệu phổ NMR hợp chất MW8 43 Bảng 3.7 Số liệu phổ NMR hợp chất MW9 43 Bảng 3.8 Số liệu phổ NMR hợp chất MW10 44 Bảng 3.9 Số liệu phổ NMR hợp chất MW11 45 Bảng 3.10 Kết xác định giá trị IC50 hợp chất lựa chọn 49 Bảng 4.1 Số liệu phổ NMR hợp chất MW5 57 Bảng 4.2 Số liệu phổ NMR hợp chất MW6 58 Bảng 4.3 Số liệu phổ NMR hợp chất MW7 60 Bảng 4.4 Số liệu phổ NMR hợp chất MW12 71 Bảng 4.5 Số liệu phổ NMR hợp chất MW13 72 Bảng 4.6 Số liệu phổ NMR hợp chất MW14 74 Bảng 4.7 Số liệu phổ NMR hợp chất MW15 75 Bảng 4.8 Số liệu phổ NMR hợp chất MW16 76 Bảng 4.9 Số liệu phổ NMR hợp chất MW17 77 x DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Sơ đồ phả hệ giống Menella Hình 1.2 Các dạng tập đồn san hơ mềm chủ yếu Hình 1.3 Cấu trúc hóa học hợp chất (1-8) Hình 1.4 Cấu trúc hóa học hợp chất (9-17) Hình 1.5 Cấu trúc hóa học hợp chất (18-23) 10 Hình 1.6 Cấu trúc hóa học hợp chất (24), (25) (26) 10 Hình 1.7 Cấu trúc hóa học hợp chất (27), (28), (29), (30), (31), (32) 11 Hình 1.8 Cấu trúc hóa học hợp chất (33), (34), (35), (36), (37), (38) (39) 11 Cấu trúc hóa học hợp chất (40-66) 12 Hình 1.10 Cấu trúc hóa học hợp chất (67-75) 13 Hình 1.11 Cấu trúc hợp chất cholest-1β,3β,5α,6β-tetrol (80) 15 Hình 1.9 Hình 1.12 Cấu trúc hóa học hợp chất (93-100) phân lập từ loài Cladiella sp 18 Hình 1.13 Cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ loài Lobophytum sp loài Lobophytum leavigatum 18 Hình 1.14 Cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ loài Sinularia leptoclados 19 Hình 1.15 Cấu trúc vi xương lồi Menella woodin 21 Hình 2.1 Mẫu san hô mềm Menella woodin thu thập quần đảo Cơ Tơ 22 Hình 2.2 Sơ đồ tạo dịch chiết thô dịch chiết phân đoạn 24 Hình 3.1 Sơ đồ đồ phân bố san hô mềm quần đảo Cô Tô 31 Hình 3.2 Sơ đồ phân bố san hô mềm theo độ sâu cồn ngầm Bắc Hồng Vàn dải đá ngầm Vàn Chảy Cô Tô 32 Hình 3.3 Mơ tả lồi Menella woodin 32 Hình 3.4 Sơ đồ chiết phân đoạn mẫu san hô mềm Menella woodin 34 Hình 3.5 Sơ đồ phân lập hợp chất từ phân đoạn H3 35 xi Phổ COSY hợp chất MW13 Phổ ROESY hợp chất MW13 54 Phụ lục 14: Dữ kiện phổ hợp chất: Menverin C (MW14) Phổ 1H-NMR hợp chất MW14 Phổ 13C-NMR hợp chất MW14 55 Bảng số liệu phổ NMR hợp chất MW14 C Cb,c 85,2 85,23 - 34,2 34,26 1,73 m/2,40 m 3, 4, 29,8 29,84 2,47 m/2,59 m 1, 4, 154,2 154,23 42,8 42,84 3,13 m 26,4 26,38 2,73 ddd (3,0, 12,5, 18,5) C a Hb,d (J = Hz) HMBC - 1, 5, 7, 8, 11 2,92 dd (4,0, 18,5) 148,3 147,97 - 149,2 149,26 - 116,3 116,30 5,65 s 10 73,5 73,55 - 11 127,6 127,66 - 12 169,9 169,86 - 13 8,9 8,91 14 107,1 107,14 1,94 s 4,93 dd (2,0, 4,0) 1, 7, 15 7, 11, 12 3, 5,09 dd (2,0, 4,0) 15 26,1 26,14 1,55 s 1, 9, 10 C menverin C (Zhang W, 2004), bđo CDCl3, c125 MHz, d500 MHz a 56 Phổ HSQC hợp chất MW14 Phổ HMBC hợp chất MW14 57 Phụ lục 15: Dữ kiện phổ hợp chất: Menverin F (MW15) Phổ 1H-NMR hợp chất MW15 Phổ 13C-NMR hợp chất MW15 58 Bảng số liệu phổ NMR hợp chất MW15 C Cb,c 83,7 83,63 - 35,8 35,69 1,96 m/1,99 m 3, 4, 28,3 28,30 2,54e 1, 4, 152,6 151,88 46,8 46,42 2,51e 28,2 21,89 2,21 t (13,0)/2,80 dd (2,5, C a Hb,d (J = Hz) HMBC - 1, 5, 7, 8, 11 13,5) 156,9 157,89 - 105,9 105,25 - 65,4 65,39 3,42 s 10 62,5 62,50 - 11 126,2 125,92 - 12 171,0 171,73 - 13 8,7 8,66 14 107,3 107,08 15 19,7 19,71 1,86 s 4,93 d (2,0)/5,06 dd (2,0, 5,0) 1,50 s 1, 7, 15 7, 11, 12 3, 1, 9, 10 C menverin F (Li L, 2008), bđo CDCl3, c125 MHz, d500 MHz, etín hiệu a bị chồng lấp 59 Phổ HSQC hợp chất MW15 Phổ HMBC hợp chất MW15 60 Phụ lục 16: Dữ kiện phổ hợp chất: Menelloide B (MW16) Phổ 1H-NMR hợp chất MW16 Phổ 13C-NMR hợp chất MW16 61 Bảng số liệu phổ NMR hợp chất MW16 C Cb,c 49,5 50,95 2,86 m 29,0 30,20 1,79 m/1,94 m 32,2 33,29 2,40 m/2,51 m 155,3 157,04 45,8 47,29 2,70 br dd (10,5, 12,5) 29,0 29,67 2,25 br t (12,5)/2,60 br d C a Hb,d (J = Hz) HMBC (H C) - 1, 5, 7, 8, 11 (12,5) 161,0 163,18 - 103,6 106,57 - 45,1 45,53 2,44 br d (13,0)/2,93 br d 1, 7, 8, 10, 15 (13,0) 10 142,8 144,24 - 11 123,5 124,24 - 12 171,9 174,64 - 13 8,0 7,88 14 107,2 107,19 5,03/5,05e 3, 4, 15 117,5 117,29 5,04e 1, 9, 10 1,84 s 7, 11, 12 C menelloide B (Kao SY, 2011), bđo CD3OD, c125 MHz, d500 MHz, etín a hiệu bị chồng lấp 62 Phổ HSQC hợp chất MW16 Phổ HMBC hợp chất MW16 63 Phụ lục 17: Dữ kiện phổ hợp chất: 1S*,4S*,5S*,10R*-4,10-Guaianediol (MW17) Hình 4.130 Phổ 1H-NMR hợp chất MW17 Hình 4.131 Phổ 13C-NMR hợp chất MW17 64 Bảng số liệu phổ NMR hợp chất MW17 C Cb,c 50,7 50,70 1,88 m 21,5 21,54 1,65 m/1,77 m 40,4 40,48 1,63 m/1,70 m 80,2 80,23 - 50,3 50,33 2,17 m 121,3 121,34 5,50 br d (2,0) 149,6 149,65 - 25,1 25,09 1,94 m/2,19 m 42,6 42,62 1,48 m/1,81 m 10 75,2 75,29 - 11 37,3 37,31 2,24 m 12 21,4 21,39 0,98 d (7,0) 7, 11, 13 13 21,3 21,20 0,98 d (7,0) 7, 11, 12 14 22,5 22,56 1,21 s 3, 4, 15 21,2 21,44 1,29 s 1, 9, 10 C a a Hb,d (J = Hz) HMBC (H C) 1, 4, 8, 11 1, 7, 8, 10, 15 C 1S*,4S*,5S*,10R*-4,10-guaianediol (Zhang GW, 2006a), bđo in CDCl3, c125 MHz, d500 MHz 65 Phổ HSQC hợp chất MW17 Phổ HMBC hợp chất MW17 66 Phụ lục 18: Một số hình ảnh thu thập mẫu quần đảo Cô Tô (Tháng 04/2014) 67 ... học hoạt tính gây độc tế bào ung thư số hợp chất phân lập từ lồi san hơ mềm Menella woodin thu thập vùng biển Cô Tô - Quảng Ninh 4 CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đặc điểm chung san hô mềm. .. 2016) từ loài Menella sp phân lập Cả hợp chất (20) (21) thể hoạt tính gây độc tế bào hai dòng tế bào ung thư thực quản Eca9706 tế bào ung thư tử cung HeLa người Trong hợp chất (21) thể hoạt tính... lobocrassolide (103) từ loài san hô mềm Lobophytum sp Ba hợp chất thể hoạt tính gây độc tế bào hai dòng tế bào ung thư người thử nghiệm A-549 (ung thư phổi) HT-29 (ung thư ruột) với giá trị IC50 từ 1,8 đến