KẾT QUẢ NGHIÊN cứu độc TÍNH cấp và bán TRƯỜNG DIỄN của GOLDEN BEER TRÊN THỰC NGHIỆM

TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI BỘ MÔN DƯỢC LÝ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH CẤP VÀ BÁN TRƯỜNG DIỄN CỦA GOLDEN BEER TRÊN THỰC NGHIỆM Nơi tiến hành nghiên cứu: Bộ môn Dược lý Trường Đại học Y Hà Nội Thời gian nghiên cứu: 6/2018 – 10/2018 A ĐỘC TÍNH CẤP 1.1 Nguyên liệu đối tượng nghiên cứu 1.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu Thuốc nghiên cứu: Golden beer Cơng ty TNHH Hòa Bình sản xuất phù hợp Quy chuẩn Quốc gia Golden Beer gồm nước, malt đại mạch, hoa houblon, vẩy vàng nguyên chất với độ cồn 5,3% Thể tích chai Golden beer 330 ml Số CBCL 102/2016/YTHN-TNCB 1.1.2 Đối tượng nghiên cứu Chuột nhắt trắng chủng Swiss, giống, khoẻ mạnh, trọng lượng 18 – 22g Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương cung cấp Chuột ni phòng thí nghiệm Bộ mơn Dược lý 5-7 ngày trước nghiên cứu suốt thời gian nghiên cứu thức ăn chuẩn dành riêng cho chuột (do Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương cung cấp), uống nước tự 1.2 Máy móc phục vụ nghiên cứu - Cân điện tử Nhật, độ xác 0,001 gam - Kim đầu tù cho chuột uống - Cốc chia vạch, bơm kim tiêm 1ml 1.3 Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu độc tính cấp Golden beer theo đường uống chuột nhắt trắng Nghiên cứu độc tính cấp xác định LD50 Golden beer chuột nhắt trắng theo đường uống [1], [2], [3] Trước tiến hành thí nghiệm, cho chuột nhịn ăn qua đêm Chuột chia thành lô khác nhau, lô 10 Cho chuột uống Golden beer với liều tăng dần thể tích để xác định liều thấp gây chết 100% chuột liều cao không gây chết chuột (gây chết 0% chuột) Theo dõi tình trạng chung chuột, trình diễn biến bắt đầu có dấu hiệu nhiễm độc (như nơn, co giật, kích động, tiết…) số lượng chuột chết vòng 72 sau uống thuốc Tất chuột chết mổ để đánh giá tổn thương đại thể Từ xây dựng đồ thị tuyến tính để xác định LD 50 thuốc thử Sau tiếp tục theo dõi tình trạng chuột đến hết ngày thứ 14 sau uống Golden beer 1.4 Xử lý số liệu Các số liệu xử lý thống kê theo thuật toán thống kê T-test Student phần mềm Microsoft Excel Kết nghiên cứu Chuột nhắt trắng uống Golden beer từ liều thấp đến liều cao Lô chuột uống đến liều 75 ml/kg thể chuột tương đương 0,25 ml/10 g, lần 24 dung dịch đậm đặc Theo dõi khơng có chuột chết, khơng xuất triệu chứng bất thường 72 sau uống thuốc lần suốt 14 ngày Liều 75 ml/kg liều tối đa dùng đường uống để đánh giá độc tính cấp Golden beer Bảng 1: Kết nghiên cứu độc tính cấp theo liều Golden beer Lô chuột Lô Lô Lô Lô n 10 10 10 10 Liều (ml/kg) Tỷ lệ chết (%) 30 45 60 75 Dấu hiệu bất thường khác Không Không Không Không Kết luận: - Golden beer biểu độc tính cấp liều 75 ml/kg chuột nhắt trắng theo đường uống - Chưa xác định LD50 chuột nhắt trắng Golden beer đường uống [1], [2], [3] TÀI LIỆU THAM KHẢO Gerhard Vogel H (2012), Drug discovery and evaluation Pharmacological assays, Springer OECD (2001), Guidance Document on the Recognition, Assessment and Use of Clinical Signs as Humane Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation, acute oral toxicity, Environmental Health and Safety Monograph Series on Testing and Assesment No 19 World Health Organization (2013), Working group on the safety and efficacy of herbal medicine, Report of regional office for the western pacific of the World Health Organization B ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 1.1.1 Thuốc hoá chất nghiên cứu 1.1.1.1 Thuốc nghiên cứu Thuốc nghiên cứu: Golden beer Công ty TNHH Hòa Bình sản xuất phù hợp Quy chuẩn Quốc gia Golden Beer gồm nước, malt đại mạch, hoa houblon, vẩy vàng nguyên chất với độ cồn 5,3% Thể tích chai Golden beer 330 ml Số CBCL 102/2016/YTHN-TNCB 1.1.1.2 Hoá chất nghiên cứu Kit định lượng enzym chất chuyển hoá máu: ALT (alanin aminotransferase); AST (aspartat aminotransferase); bilirubin toàn phần; albumin; cholesterol toàn phần; creatinin hãng Hospitex Diagnostics (Italy) hãng DIALAB GmbH (Áo), định lượng máy sinh hóa bán tự động Erba Ấn Độ Các dung dịch xét nghiệm máu hãng Exigo, định lượng máy Exigo - Boule Medical AB Thụy Điển Các hoá chất xét nghiệm làm tiêu mô bệnh học 1.1.2 Động vật thực nghiệm Chuột cống trắng chủng Wistar, hai giống, khoẻ mạnh, trọng lượng 180g ± 20g Động vật thí nghiệm ni ngày trước nghiên cứu suốt thời gian nghiên cứu điều kiện phòng thí nghiệm với đầy đủ thức ăn nước uống Bộ môn Dược lý - Trường Đại học Y Hà Nội 1.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nghiên cứu độc tính bán trường diễn Golden beer tiến hành chuột cống trắng theo đường uống [1], [2] Chuột cống trắng chia ngẫu nhiên làm lô: - Lô chứng (n=10): Uống nước cất 10 ml/kg/ngày - Lô trị (n=10): Uống Golden beer liều 10 ml/kg/ngày - Lô trị (n=10): Uống Golden beer liều 30 ml/kg/ngày Chuột uống nước cất thuốc thử 90 ngày liên tục, ngày vào buổi sáng Các tiêu theo dõi trước trình nghiên cứu: - Tình trạng chung, thể trọng chuột; - Đánh giá chức phận tạo máu thông qua số lượng hồng cầu, thể tích trung bình hồng cầu, hàm lượng hemoglobin, hematocrit, số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu số lượng tiểu cầu; - Đánh giá chức gan thông qua định lượng số chất chuyển hố máu: Bilirubin tồn phần, albumin cholesterol tồn phần; - Đánh giá mức độ hủy hoại tế bào gan thông qua định lượng hoạt độ enzym máu: ALT, AST; - Đánh giá chức thận thông qua định lượng nồng độ creatinin huyết Các thông số theo dõi kiểm tra vào trước lúc uống, sau 30 ngày, sau 60 ngày sau 90 ngày uống nước cất thuốc thử Mô bệnh học: Sau 90 ngày uống thuốc, chuột mổ để quan sát đại thể toàn quan Kiểm tra ngẫu nhiên cấu trúc vi thể gan, thận 30% số chuột lô Các xét nghiệm vi thể thực Trung tâm Nghiên cứu Phát sớm Ung thư (do PGS.TS Lê Đình Roanh đọc kết vi thể) 1.3 XỬ LÝ SỐ LIỆU Các số liệu nghiên cứu xử lý thống kê theo phương pháp t-test Student test trước - sau (Avant-après) Số liệu biểu diễn dạng: X ± SD Sự khác biệt có ý nghĩa p < 0,05 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 2.1 Tình trạng chung thay đổi thể trọng chuột 2.1.1 Tình trạng chung chuột Trong thời gian thí nghiệm, chuột lơ chứng sinh học lô uống thuốc thử hoạt động bình thường, nhanh nhẹn, mắt sáng, phân khơ Khơng thấy biểu đặc biệt lơ chuột cống trắng suốt thời gian nghiên cứu 2.1.2 Sự thay đổi thể trọng chuột Bảng 2.1 Ảnh hưởng Golden beer đến thể trọng chuột Lô chứng Thời gian Trọng lượng (g) % thay đổi trọng lượng Trước uống 192,50 ± thuốc Sau 30 ngày 7,17 209,50 uống thuốc ± 13,43 p trước – sau < 0,05 Sau 60 ngày 240,00 uống thuốc ± 14,91 p trước – sau < 0,05 Sau 90 ngày 252,00 ± uống thuốc 19,89 p trước – sau < 0,05 Lô trị Trọng lượng (g) lượng (g) đổi trọng 194,00 ± 8,76 student) > 0,05 > 0,05 < 0,05 > 0,05 < 0,05 247,00 264,00 ↑ 29,57 ↑ 36,42 ± 19,47 ± 18,83 < 0,05 p (t-test lượng 229,00 245,00 ↑ 20,25 ↑ 26,49 ± 16,47 ± 19,58 < 0,05 ↑ 30,92 trọng Trọng % thay 203,00 219,00 ↑ 6,59 ↑ 12,88 ± 12,74 ± 11,74 < 0,05 ↑ 24,71 đổi lượng 190,50 ± 7,98 ↑ 8,78 % thay Lô trị > 0,05 < 0,05 Kết bảng 2.1 cho thấy: Sau 30 ngày, 60 ngày 90 ngày uống Golden beer, trọng lượng chuột lô chứng tăng so với trước nghiên cứu, khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) 2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng Golden beer đến chức tạo máu Bảng 2.2 Ảnh hưởng Golden beer đến số lượng hồng cầu máu chuột Số lượng hồng cầu (T/l) Thời gian Lô chứng Lô trị Lô trị p (t-test student) Trước uống thuốc Sau 30 ngày uống thuốc p (trước - sau) Sau 60 ngày uống thuốc p (trước - sau) Sau 90 ngày uống thuốc p (trước - sau) 7,34 ± 0,44 7,36 ± 0,35 7,33 ± 0,33 > 0,05 7,51 ± 0,37 7,38 ± 0,37 7,34 ± 0,25 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 7,37 ± 0,38 7,28 ± 0,43 7,36 ± 0,42 > 0,05 > 0,05 > 0,05 7,41 ± 0,37 7,45 ± 0,40 7,47 ± 0,39 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Kết bảng 2.2 cho thấy: Sau 30 ngày, 60 ngày 90 ngày uống Golden beer, số lượng hồng cầu lô trị (uống thuốc thử liều 10 ml/kg/ngày) lô trị (uống thuốc thử liều 30 ml/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Bảng 2.3 Ảnh hưởng Golden beer đến hàm lượng huyết sắc tố máu chuột Thời gian Hàm lượng huyết sắc tố (g/dl) p Trước uống thuốc Sau 30 ngày uống thuốc p (trước - sau) Sau 60 ngày uống thuốc p (trước - sau) Sau 90 ngày uống thuốc p (trước - sau) (t-test Lô chứng Lô trị Lô trị 12,57 ± 0,48 12,58 ± 0,40 12,53 ± 0,49 > 0,05 12,63 ± 0,41 12,46 ± 0,49 12,54 ± 0,48 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 12,53 ± 0,43 12,35 ± 0,58 12,58 ± 0,41 > 0,05 > 0,05 > 0,05 12,51 ± 0,47 12,60 ± 0,42 12,63 ± 0,40 > 0,05 > 0,05 > 0,05 student) > 0,05 > 0,05 Kết bảng 2.3 cho thấy: Sau 30 ngày, 60 ngày 90 ngày uống Golden beer, hàm lượng huyết sắc tố lô trị (uống thuốc thử liều 10 ml/kg/ngày) lô trị (uống thuốc thử liều 30 ml/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Bảng 2.4 Ảnh hưởng Golden beer đến hematocrit máu chuột Hematocrit (%) Thời gian Lô chứng Lô trị p Lô trị (t-test student) Trước uống thuốc Sau 30 ngày uống thuốc p (trước - sau) Sau 60 ngày uống thuốc p (trước - sau) Sau 90 ngày uống thuốc p (trước - sau) 35,54 ± 1,72 35,70 ± 1,70 35,67 ± 1,67 > 0,05 36,02 ± 1,70 35,62 ± 1,74 35,85 ± 1,63 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 35,50 ± 1,61 35,45 ± 1,62 36,28 ± 1,69 > 0,05 > 0,05 > 0,05 35,58 ± 1,69 36,17 ± 1,65 36,29 ± 1,60 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Kết bảng 2.4 cho thấy: Sau 30 ngày, 60 ngày 90 ngày uống Golden beer, xét nghiệm đánh giá hematocrit lô trị (uống thuốc thử liều 10 ml/kg/ngày) lô trị (uống thuốc thử liều 30 ml/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Bảng 2.5 Ảnh hưởng Golden beer đến thể tích trung bình hồng cầu máu chuột Thể tích trung bình hồng cầu (fl) Thời gian Lơ chứng Trước uống thuốc 48,83 ± 1,25 Lô trị Lô trị p (t-test student) 48,93 ± 1,43 10 48,67 ± 1,29 > 0,05 Albumin (g/dl) Thời gian Lô chứng Lô trị p Lô trị (t-test student) Trước uống thuốc 3,81 ± 0,28 3,80 ± 0,27 3,78 ± 0,24 > 0,05 3,73 ± 0,30 3,73 ± 0,29 3,72 ± 0,27 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 3,79 ± 0,34 3,74 ± 0,31 3,75 ± 0,33 > 0,05 > 0,05 > 0,05 3,77 ± 0,36 3,76 ± 0,30 3,73 ± 0,30 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Sau 30 ngày uống thuốc p (trước - sau) Sau 60 ngày > 0,05 uống thuốc p (trước - sau) Sau 90 ngày uống thuốc p (trước - sau) > 0,05 Kết bảng 2.12 cho thấy: Sau 30 ngày, 60 ngày 90 ngày uống Golden beer, nồng độ albumin máu chuột lô trị (uống thuốc thử liều 10 ml/kg/ngày) lô trị (uống thuốc thử liều 30 ml/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lơ chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) Bảng 2.13 Ảnh hưởng Golden beer đến nồng độ cholesterol toàn phần máu chuột Thời gian Cholesterol toàn phần (mmol/l) 18 p Trước uống thuốc (t-test Lô chứng Lô trị Lô trị 1,55 ± 0,22 1,54 ± 0,22 1,52 ± 0,20 > 0,05 1,53 ± 0,19 1,52 ± 0,20 1,54 ± 0,24 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 1,54 ± 0,21 1,50 ± 0,23 1,55 ± 0,29 > 0,05 > 0,05 > 0,05 1,52 ± 0,27 1,49 ± 0,25 1,48 ± 0,23 > 0,05 > 0,05 > 0,05 student) Sau 30 ngày uống thuốc p (trước - sau) Sau 60 ngày > 0,05 uống thuốc p (trước - sau) Sau 90 ngày uống thuốc p (trước - sau) > 0,05 Kết bảng 2.13 cho thấy: Sau 30 ngày, 60 ngày 90 ngày uống Golden beer, nồng độ cholesterol toàn phần máu chuột lô trị (uống thuốc thử liều 10 ml/kg/ngày) lô trị (uống thuốc thử liều 30 ml/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lơ chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) 2.5 Nghiên cứu ảnh hưởng Golden beer chức thận Bảng 2.14 Ảnh hưởng Golden beer đến nồng độ creatinin máu chuột p Creatinin (mg/dl) Thời gian Lô chứng Lô trị Lô trị Trước uống thuốc 1,06 ± 0,05 1,05 ± 0,07 1,04 ± 0,05 19 (t-test student) > 0,05 Sau 30 ngày uống thuốc p (trước - sau) Sau 60 ngày uống thuốc p (trước - sau) Sau 90 ngày uống thuốc p (trước - sau) 1,04 ± 0,07 1,05 ± 0,05 1,06 ± 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 1,06 ± 0,08 1,06 ± 0,05 1,04 ± 0,08 > 0,05 > 0,05 > 0,05 1,07 ± 0,05 1,07 ± 0,07 1,05 ± 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Kết bảng 2.14 cho thấy: Sau 30 ngày, 60 ngày 90 ngày uống thuốc thử, lô trị uống thuốc thử liều 10 ml/kg/ngày lô trị uống thuốc thử liều 30 ml/kg/ngày, nồng độ creatinin máu chuột khơng có thay đổi khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lơ chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) 2.6 Nghiên cứu ảnh hưởng thuốc thử lên hình thái cấu trúc vi thể gan, thận chuột 2.6.1 Đại thể: Trên tất chuột thực nghiệm (cả lô chứng lô dùng thuốc thử), không quan sát thấy thay đổi bệnh lý đại thể quan tim, phổi, gan lách, tụy, thận hệ thống tiêu hóa chuột 2.6.2 Vi thể: Sau 90 ngày uống thuốc thử: Bảng 2.15 Hình ảnh vi thể gan thận chuột cống sau 90 ngày uống Golden beer Lô nghiên cứu Lô chứng Vi thể gan Vi thể thận 3/3 mẫu bệnh phẩm có hình 3/3 mẫu bệnh phẩm có ảnh tế bào gan bình thường hình ảnh thận bình thường Lô trị 1: Uống - 2/3 mẫu bệnh phẩm có hình 3/3 mẫu bệnh phẩm có Golden beer liều ảnh tế bào gan thối hóa nhẹ 10 ml/kg/ngày - 1/3 mẫu bệnh phẩm có hình 20 hình ảnh thận bình thường Lơ trị 2: Uống Golden beer liều 30 ml/kg/ngày ảnh tế bào gan bình thường - 2/3 mẫu bệnh phẩm có hình ảnh tế bào gan thối hóa nhẹ 3/3 mẫu bệnh phẩm có - 1/3 mẫu bệnh phẩm có hình hình ảnh thận bình thường ảnh tế bào gan bình thường Hình thái vi thể gan: Ảnh 2.1 Hình thái vi thể gan chuột lơ chứng (chuột số 02) (HE x 400) (HE x 400: Nhuộm Hematoxylin - Eosin, độ phóng đại 400 lần) Tế bào gan bình thường 21 Ảnh 2.2 Hình thái vi thể gan chuột lô chứng (chuột số 08) (HE x 400) Tế bào gan bình thường Ảnh 2.3 Hình thái vi thể gan chuột lô chứng (chuột số 10) (HE x 400) Tế bào gan bình thường Ảnh 2.4 Hình thái vi thể gan chuột lô trị (chuột số 14) (HE x 400) Bào tương tế bào gan có hốc sáng nhỏ 22 Tế bào gan thối hóa nhẹ Ảnh 2.5 Hình thái vi thể gan chuột lơ trị (chuột số 15) (HE x 400) Tế bào gan bình thường Ảnh 2.6 Hình thái vi thể gan chuột lơ trị (chuột số 17) (HE x 400) Bào tương tế bào gan có hốc sáng nhỏ Tế bào gan thối hóa nhẹ 23 Ảnh 2.7 Hình thái vi thể gan chuột lô trị (chuột số 24) (HE x 400) Bào tương tế bào gan có hốc sáng nhỏ Tế bào gan thối hóa nhẹ Ảnh 2.8 Hình thái vi thể gan chuột lơ trị (chuột số 26) (HE x 400) Tế bào gan bình thường 24 Ảnh 2.9 Hình thái vi thể gan chuột lơ trị (chuột số 28) (HE x 400) Bào tương tế bào gan có hốc sáng nhỏ Tế bào gan thối hóa nhẹ 25 Hình thái vi thể thận: Ảnh 2.10 Hình thái vi thể thận chuột lơ chứng (chuột số 02) (HE x 400) (HE x 400: Nhuộm Hematoxylin - Eosin, độ phóng đại 400 lần) Tế bào thận bình thường Ảnh 2.11 Hình thái vi thể thận chuột lô chứng (chuột số 08) (HE x 400) Tế bào thận bình thường 26 Ảnh 2.12 Hình thái vi thể thận chuột lô chứng (chuột số 10) (HE x 400) Tế bào thận bình thường Ảnh 2.13 Hình thái vi thể thận chuột lô trị (chuột số 14) (HE x 400) Tế bào thận bình thường 27 Ảnh 2.14 Hình thái vi thể thận chuột lơ trị (chuột số 15) (HE x 400) Tế bào thận bình thường Ảnh 2.15 Hình thái vi thể thận chuột lơ trị (chuột số 17) (HE x 400) Tế bào thận bình thường 28 Ảnh 2.16 Hình thái vi thể thận chuột lô trị (chuột số 24) (HE x 400) Tế bào thận bình thường Ảnh 2.17 Hình thái vi thể thận chuột lô trị (chuột số 26) (HE x 400) Tế bào thận bình thường 29 Ảnh 2.18 Hình thái vi thể thận chuột lơ trị (chuột số 28) (HE x 400) Tế bào thận bình thường NHẬN XÉT Trên hai lô chuột cống trắng, uống thuốc thử Golden beer liều 10 ml/kg/ngày, lô uống thuốc thử Golden beer liều 30 ml/kg/ngày, kết cho thấy: - Cả hai liều thuốc thử khơng làm ảnh hưởng đến tình trạng chung, mức độ tăng trọng lượng chuột so với lô chứng - Không làm thay đổi kết xét nghiệm đánh giá chức tạo máu (số lượng hồng cầu, hàm lượng huyết sắc tố, hematocrit, thể tích trung bình hồng cầu, số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu, số lượng tiểu cầu) so với lô chứng - Không làm thay đổi kết xét nghiệm đánh giá chức gan (nồng độ bilirubin toàn phần, albumin cholesterol tồn phần máu chuột) so với lơ chứng - Không gây hủy hoại tế bào gan (hoạt độ AST, ALT máu chuột) so với lô chứng - Không làm thay đổi kết xét nghiệm creatinin máu chuột sau 90 ngày uống thuốc thử liên tục so với lô chứng - Không gây tổn thương mặt hình thái quan sát đại thể quan chuột so với lô chứng - Cấu trúc vi thể gan, thận chuột: khơng có khác biệt rõ rệt tổn thương cấu trúc vi thể gan, thận so với lô chứng sau 90 ngày uống thuốc thử 30 KẾT LUẬN Thuốc thử Golden beer Cơng ty TNHH Hòa Bình sản xuất giao cho Bộ môn Dược lý - Trường Đại học Y Hà Nội yêu cầu thử độc tính bán trường diễn động vật thực nghiệm theo đường uống, kết cho thấy: Thuốc thử Golden beer khơng gây độc tính bán trường diễn chuột cống trắng uống Golden beer liều 10 ml/kg/ngày liều 30 ml/kg/ngày liên tục 90 ngày Tất số theo dõi tình trạng chung, cân nặng, chức tạo máu, chức gan, mức độ hủy hoại tế bào gan, chức thận mô bệnh học gan, thận nằm giới hạn bình thường, khơng có khác biệt rõ rệt so với lô chứng [3], [4] 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO Organisation for Economic Co-operation and Development (2008), Guidelines for the testing of chemicals repeated dose oral toxicity study in rodents, Environmental Health and Safety Monograph Series on Testing and Assesment No 407 World Health Organization (2013), Working group on the safety and efficacy of herbal medicine, Report of regional office for the western pacific of the World Health Organization Nguyễn Thế Khánh, Phạm Tử Dương (2001), Xét nghiệm sử dụng lâm sàng, Nhà xuất Y học Vũ Đình Vinh (2001), Hướng dẫn sử dụng xét nghiệm sinh hoá, Nhà xuất Y học, tr 115-287 Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Trưởng nhóm nghiên cứu PGS.TS Phạm Thị Vân Anh Trường Đại học Y Hà Nội xác nhận chữ ký PGS.TS Phạm Thị Vân Anh Trưởng phòng Tổ chức Cán 32 ... Organization B ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 1.1.1 Thuốc hoá chất nghiên cứu 1.1.1.1 Thuốc nghiên cứu Thuốc nghiên cứu: Golden beer Công ty... ngày Liều 75 ml/kg liều tối đa dùng đường uống để đánh giá độc tính cấp Golden beer Bảng 1: Kết nghiên cứu độc tính cấp theo liều Golden beer Lô chuột Lô Lô Lô Lô n 10 10 10 10 Liều (ml/kg) Tỷ lệ...A ĐỘC TÍNH CẤP 1.1 Nguyên liệu đối tượng nghiên cứu 1.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu Thuốc nghiên cứu: Golden beer Cơng ty TNHH Hòa Bình sản xuất phù hợp Quy chuẩn Quốc gia Golden Beer gồm