KẾT QUẢ NGHIÊN cứu độc TÍNH cấp và tác DỤNG hạ GLUCOSE HUYẾT của BERBERIN NANO TDCUT1TRÊN mô HÌNH đái THÁO ĐƯỜNG DẠNG TYP 2 THỰC NGHIỆM

TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI Bộ môn Dược lý KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH CẤP VÀ TÁC DỤNG HẠ GLUCOSE HUYẾT CỦA BERBERIN NANO TDCUT1 TRÊN MƠ HÌNH ĐÁI THÁO ĐƯỜNG DẠNG TYP THỰC NGHIỆM A ĐỘC TÍNH CẤP I NGUYÊN LIỆU VÀ ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 1.1 Nguyên liệu nghiên cứu Dạng viên nang Berberin nano TDCut1 Liều dùng dự kiến người: viên/ngày Sản phẩm viên nang Berberin nano TDCut1 công ty Sao Kim sản xuất đạt tiêu chuẩn sở Lấy 20 viên, nghiền cối sứ, thêm nước cất thành 50 ml vừa đủ Đây dung dịch cho chuột nhắt trắng uống kim chuyên dụng dùng để nghiên cứu độc tính cấp tính xác định LD50 1.1.2 Đối tượng nghiên cứu Chuột nhắt trắng chủng Swiss, giống, khoẻ mạnh, trọng lượng 18 – 22g Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương cung cấp Chuột ni phòng thí nghiệm Bộ mơn Dược lý 5-7 ngày trước nghiên cứu suốt thời gian nghiên cứu thức ăn chuẩn dành riêng cho chuột (do Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương cung cấp), uống nước tự 1.2 Máy móc phục vụ nghiên cứu - Cân điện tử Nhật, độ xác 0,001 gam - Kim đầu tù cho chuột uống - Cốc chia vạch, bơm kim tiêm 1ml 1.3 Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu độc tính cấp thuốc thử Berberin nano TD cut1 theo đường uống chuột nhắt trắng Nghiên cứu độc tính cấp xác định LD 50 thuốc thử Berberin nano TDcut1 chuột nhắt trắng theo đường uống [1], [2], [3] Trước tiến hành thí nghiệm, cho chuột nhịn ăn qua đêm Chuột chia thành lô khác nhau, lô 10 Cho chuột uống thuốc thử Berberin nano TDcut1 với liều tăng dần thể tích để xác định liều thấp gây chết 100% chuột liều cao không gây chết chuột (gây chết 0% chuột) Theo dõi tình trạng chung chuột, trình diễn biến bắt đầu có dấu hiệu nhiễm độc (như nơn, co giật, kích động, tiết…) số lượng chuột chết vòng 72 sau uống thuốc Tất chuột chết mổ để đánh giá tổn thương đại thể Từ xây dựng đồ thị tuyến tính để xác định LD50 thuốc thử Sau tiếp tục theo dõi tình trạng chuột đến hết ngày thứ sau uống thuốc Berberin nano TDcut1 1.4 Xử lý số liệu Các số liệu xử lý thống kê theo thuật toán thống kê T-test Student phần mềm Microsoft Excel Kết nghiên cứu Chuột nhắt trắng uống thuốc thử Berberin nano TDcut1 từ liều thấp đến liều cao Lô chuột uống đến liều tối đa 75 ml/Kg, 24 dung dịch tương đương 30 viên/kg, chuột chết vòng 72 Theo dõi tiếp đến hết ngày khơng có dấu hiệu bất thường xảy Bảng 1: Kết nghiên cứu độc tính cấp Thuốc thử Berberin nano TDcut1 Lô chuột n Lô Lô Lô 10 10 10 Liều Liều (viên/kg Tỷ lệ Dấu hiệu bất (ml/kg) 45 60 75 thể trọng) 18 24 30 chết (%) 0 thường khác Không Không Không Kết bảng cho thấy: lô chuột uống Berberin nano TDcut1 mức liều từ 18 viên/kg đến mức liều 30 viên/kg có biểu độc tính cấp khơng có chuột chết vòng 72 Kết luận: Thuốc thử Berberin nano TDcut1 khơng có biểu độc tính cấp liều 30 viên/kg Chưa xác định LD50 chuột nhắt trắng thuốc thử Berberin nano TDcut1 đường uống Liều dung nạp tối đa chuột nhắt trắng với Berberin nano TDcut1 gấp 62 lần liều dự kiến người khơng gây độc tính cấp TÀI LIỆU THAM KHẢO Gerhard Vogel H (2008), Drug discovery and evaluation Pharmacological assays, Springer OECD (2001), Guidance Document on the Recognition, Assessment and Use of Clinical Signs as Humane Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation, acute oral toxicity, Environmental Health and Safety Monograph Series on Testing and Assesment No 19 World Health Organization (2000), Working group on the safety and efficacy of herbal medicine, Report of regional office for the western pacific of the World Health Organization B TÁC DỤNG HẠ GLUCOSE MÁU ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU: 1.1 Đối tượng nghiên cứu: 1.1.1 Thuốc hoá chất nghiên cứu: 1.1.1.1 Thuốc nghiên cứu: Dạng viên nang Liều dùng dự kiến người: viên/ngày Sản phẩm viên nang Berberin nano TDCut1 công ty Sao Kim sản xuất đạt tiêu chuẩn sở 1.1.1.2 Hoá chất dụng cụ nghiên cứu: - Alloxan (ALX) lọ 10g hãng Sigma-Aldrich, Singapore - Diamicron (gliclazid) viên nang 30mg hãng Servier (France) sản xuất - Máy thử đường huyết On Call EZII hãng ACON Biotech, Mỹ - Kit định lượng glucose On Call Plus hãng ACON Biotech, Mỹ - Bộ kit đo triglycerid, HDL-C, cholesterol huyết hãng DIALAB GmbH (Áo) - Máy sinh hóa bán tự động XC-55 hãng Chemistry Analyzer (China) - Các hố chất xét nghiệm làm tiêu mơ bệnh học 1.1.2 Động vật thực nghiệm: Chuột nhắt trắng đực chủng Swiss, khoẻ mạnh trọng lượng trung bình 22 ± 2g Viện Vệ sinh dịch tễ trung ương cung cấp Chuột ni điều kiện phòng thí nghiệm ngày trước tiến hành nghiên cứu 1.2 Phương pháp nghiên cứu [1],[2],[3] Nghiên cứu gồm có giai đoạn: gây mơ hình ĐTĐ typ đánh giá tác dụng thuốc chứng thuốc thử mơ hình ĐTĐ typ * Gây mơ hình ĐTĐ typ 2: theo phương pháp Fabiola Srinivasan [1], [2] Bảng 1.1 Chế độ ăn NFD HFD tính 100g thức ăn Protein Chất béo no Carbonhydrat Tổng (gam) Năng lượng (kcal) Chế độ ăn bình thường Chế độ ăn giàu chất béo (%) (NFD) 28,05 12,14 59,81 100 467,5 (%)* (HFD) 18,23 42,89 38,88 100 614,5 *Siro fructose 55% (Daesang Corporation) trộn thêm thức ăn chuột nhắt có chế độ ăn HFD Chuột chia làm nhóm Tất chuột nhóm lấy máu đi, định lượng glucose máu lần bắt đầu tham gia nghiên cứu (nhịn đói qua đêm) Chuột nhóm ni chế độ ăn NFD (normal fat diet), chuột nhóm nuôi chế độ HFD (high fat diet) tuần liên tục Sau tuần, tất chuột lấy máu đuôi, định lượng glucose máu lần (nhịn đói qua đêm) Tiêm ALX liều 200mg/kg cho chuột nhóm 2, riêng chuột nhóm tiêm dung môi pha ALX nước muối sinh lý 72 sau tiêm ALX, định lượng glucose máu lần 3, chọn chuột nhóm tiêm ALX bị đái tháo đường (có mức glucose lúc đói 10 mmol/l) để tham gia nghiên cứu * Đánh giá tác dụng hạ glucose máu thuốc chứng thuốc thử: Chuột nhóm đưa vào lơ (lơ chứng sinh học) Các chuột đạt tiêu chuẩn đái tháo đường nhóm chia thành lơ Các lơ thí nghiệm cụ thể sau: Lơ (n=10): uống nước cất Lô (n=10): uống nước cất Lô (n=10): uống gliclazid liều 80 mg/kg Lô (n=10): uống Berberin nano TDCut1 liều 0,48 viên/kg/ngày (liều tương đương liều lâm sàng, hệ số 12 chuột nhắt) Lô (n=10): uống Berberin nano TDCut1 liều 1,44 viên/kg/ngày (liều gấp lần liều lâm sàng) - Tiến hành: Chuột lô uống nước cất liên tục tuần Chuột lô đến uống thuốc chứng thuốc thử liên tục tuần Chuột nhịn ăn qua đêm, lấy máu tồn phần từ chuột, tiến hành định lượng glucose máu thời điểm to (chưa uống thuốc), t1(sau tuần uống thuốc), t2 (sau tuần uống thuốc), số lipid máu thời điểm t (sau tuần uống thuốc), đồng thời mổ chuột lấy gan, tụy để đánh giá cân nặng, quan sát đại thể, làm tiêu cấu trúc vi thể 30% số chuột lô Các xét nghiệm vi thể thực Trung tâm Nghiên cứu phát sớm ung thư (do PGS.TS Lê Đình Roanh đọc kết vi thể) XN XN XN to t1 t2 Tuần Uốngdung mơi thuốc thử tương ứng Hình 1.1 Sơ đồ nghiên cứu tác dụng hạ glucose máu Berberin nano TDCut1 chuột nhắt ĐTĐ typ 1.3 Địa điểm nghiên cứu: Bộ môn Dược lý – Trường Đại học Y Hà Nội 1.4 Xử lý số liệu: số liệu nhập xử lý phần mềm Microsoft Excel Các số liệu nghiên cứu xử lý thống kê theo phương pháp t-test Student, test trước – sau Số liệu biểu diễn dạng: ± SD Sự khác biệt có ý nghĩa p < 0,05 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Bảng 2.1 Sự thay đổi trọng lượng chuột thời điểm nghiên cứu Trọng lượng (g) p so với lô Lô chứng sinh học Lô ăn béo Trước nghiên cứu 22,05 ± 1,36 22,40± 2,57 > 0,05 Sau tuần 33,25 ± 4,08*** 35,40 ± 6,01*** >0,05 % tăng 50,8 58,0 Sau tuần 35,60 ± 4,09*** 40,23± 6,14*** < 0,05 % tăng 61,5 79,6 Sau tuần 38,20 ± 4,47*** 43,33 ± 6,11*** 0,05 ) - Mức tăng cân nặng sau tuần sau tuần lô ăn chế độ béo tăng so với lô chứng thời điểm, khác biệt lơ có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Bảng 2.2 Sự biến đổi nồng độ glucose máu chuột sau tuần ăn thức ăn giàu chất béo Glucose máu (mmol/l) P so với Thời gian (X ± SD) lô Lô (Chứng sinh học) Lô (Mô hình) Trước nghiên cứu 4,97± 1,02 5,31± 0,88 > 0,05 Sau tuần 5,74± 0,66 7,18± 1,31 < 0,01 h (∆∆∆) Sau tiêm ALX 72 5,56± 1,13 16,22 ± 5,50*** < 0,001 ***: p < 0,001: p so với trước nghiên cứu (∆∆∆) : p < 0,001: p so với thời điểm sau tuần Nhận xét: - Nồng độ glucose máu tất thời điểm nghiên cứu chuột lơ thay đổi khơng có khác biệt - Sau ăn thức ăn giàu chất béo tuần nồng độ glucose máu chuột lô 2tăng so với nồng độ glucose máu lô (p < 0,01) - Sau 72 tiêm ALX, nồng độ glucose máu lô tăng cao rõ rệt so với lô (p < 0,001) so với thời điểm trước tiêm ALX (p 0,05 ↓9,1 ↓16,0 16,94 ± 3,49 p4-2 > 0,05 p4-3> 0,05 ↑3,3 ↓6,4 19,96 ± 5,63 p5-2 > 0,05 p5-3> 0,05 p5-4 > 0,05 ↑24,3 ↑10,3 18,37 ± 5,21 p2-1 < 0,001 ↑12,0 13,70 ± 3,39 p3-2 < 0,05 ↓18,1 ↓25,4 16,08 ± 4,68 p4-2 > 0,05 p4-3 > 0,05 ↓2,0 ↓12,5 19,83 ± 4,70 p5-2 < 0,05 p5-3< 0,01 p5-4 > 0,05 ↑23,5 ↑7,9 16,73 ± 5,04 p3-1 < 0,001 16,40 ± 4,44 p4-1 < 0,001 16,06 ± 3,97 p5-1 < 0,001 % thay đổi so với T0 % thay đổi so với mơ hình Kết cho thấy: - Gliclazid 80mg/kg/ngày thời điểm sau uống thuốc tuần có xu hướng làm giảm nồng độ glucose máu so với lơ mơ hình khác biệt chưa có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Ở thời điểm sau tuần gliclazid làm giảm nồng độ glucose máu so với lơ mơ hình, khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 - Berberin nano TDCut1 liều 0,48 viên/kg có xu hướng giảm nồng độ glucose máu so với lô mô hình thời điểm sau tuần tuần uống thuốc khác biệt chưa có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) - Berberin nano TDCut1 liều 1,44 viên/kg khơng có tác dụng giảm nồng độ glucsoe máu so với lơ mơ hình thời điểm nghiên cứu Bảng 2.4 Ảnh hưởng Berberin nano TDCut1 lên nồng độlipid máu chuột nhắt trắng đái tháo đường typ sau tuần uống thuốc Nồng độ lipid máu Lô chuột mmol/l (X ± SD) TG HDL-C TC LDL-C Lơ 1: Chuột bình thường 1,57 ±0,16 Nước cất Lô 2: Chuột ĐTĐ 2,15± 0,35 Nước cất Lô 3: Chuột ĐTĐ Gliclazid liều 80mg/kg p so lô mơ hình Lơ 4: Chuột ĐTĐ Berberin nano TDCut1 liều 0,48 viên/kg/ngày p so lơ mơ hình Lơ 5: Chuột ĐTĐ Berberin nano TDCut1 liều 1,44 viên/kg/ngày p so lô mơ hình P so liều thấp 0,84 ± 0,10 0,86 ± 0,20 0,33 ± 0,14 0,94± 0,19 *** 2,06 ± 0,25 *** p > 0,05 0,88 ± 0,21 0,90 ± 0,23 p > 0,05 2,21 ± 0,38 *** p > 0,05 p > 0,05 0,84 ± 0,28 0,81 ± 0,14 p > 0,05 2,16 ± 0,31 *** 0,95± 0,27 p > 0,05 0,84 ± 0,25 0,86 ± 0,12 p > 0,05 p > 0,05 p > 0,05 p > 0,05 p > 0,05 p > 0,05 ***: p < 0,001: p so với lô chứng 0,77± 0,21 *** 0,76 ± 0,23 *** p > 0,05 1,02 ± 0,36 *** p > 0,05 0,92 ± 0,30 *** p > 0,05 p < 0,05 Nhận xét: - Nồng độ cholesterol máu toàn phần LDL-Ccủa chuột lơ có chế độ ăn giàu lipid tăng cao rõ so với lô chứng (p < 0,001) - Gliclazid liều 80mg/kg Berberin nano TDCut1 liều uống liên tục tuầnkhông có tác dụng giảm số cholesterol máu tồn phần LDL-C so với lơ mơ hình Bảng 2.5 Trọng lượng gan chuột ĐTĐ typ sau tuần uống thuốc Trọng lượng % tính theo Lơ chuột gan(g) cân nặng Lô 1: Chứng sinh học (Nước cất) Lô 2: Chuột ĐTĐ (Nước cất) ( ± SD) 1,75 ± 0,20 1,99 ± 0,37 ( ± SD) 4,23 ± 0,65 5,32 ± 0,56 10 P so với lô p < 0,001 Hình 2.3 Hình ảnh đại thể gan chuột lơ uống gliclazid 80mg/kg/ngày Hình 2.4 Hình ảnh đại thể gan chuột lô uống Berberin nano TDCut1 0,48 viên/kg/ngày 15 Hình 2.5 Hình ảnh đại thể gan chuột lơ uống Berberin nano TDCut1 1,44 viên/kg/ngày + Vi thể: Lô nghiên cứu Lô chứng (NFD + nước cất) Vi thể gan sau tuần uống thuốc 3/3 mẫu bệnh phẩm gan bình thường: tế bào gan kích thước đều, khơng có ổ hoại tử viêm Tĩnh mạch trung tâm không xung huyết Bào tương tế bào bắt màu hồng mịn, nhân tế bào tròn, rõ Lơ mơ hình (HFD + - 2/3 mẫu bệnh phẩm có tình trạng thối hóa mỡ nhẹ: ALX 200mg/kg) bào tương tế bào gan có hốc sáng nhỏ - 1/3 mẫu bệnh phẩm gan bình thường Lơ chứng dương (HFD - 2/3 mẫu bệnh phẩm có tình trạng thối hóa mỡ nhẹ: + ALX 200mg/kg + bào tương tế bào gan có hốc sáng nhỏ gliclazid 80mg/kg) - 1/3 mẫu bệnh phẩm gan bình thường Lơ trị (HFD + ALX - 2/3 mẫu bệnh phẩm có tình trạng thối hóa mỡ nhẹ: 200mg/kg + Berberin bào tương tế bào gan có hốc sáng nhỏ nano TDCut1 0,48 - 1/3 mẫu bệnh phẩm gan bình thường viên/kg/ngày) Lơ trị (HFD + ALX - 2/3 mẫu bệnh phẩm có tình trạng thối hóa mỡ nhẹ: 200mg/kg + Berberin bào tương tế bào gan có hốc sáng nhỏ nano TDCut1 1,44 - 1/3 mẫu bệnh phẩm gan bình thường viên/kg/ngày) 1 Tế bào gan bình thường 16 Hình 2.5 Hình thái vi thể gan chuột lơ chứng (chuột số 3) (HE x 400) (HE x 400: Nhuộm Hematoxylin - Eosin, độ phóng đại 400 lần) 1 Tế bào gan bình thường Hình 2.6 Hình thái vi thể gan chuột lô mô hình (chuột số 13) (HE x 400) 1 Tế bào gan thối hóa mỡ nhẹ 17 Hình 2.7 Hình thái vi thể gan chuột lô mô hình (chuột số 17) (HE x 400) 1 Tế bào gan bình thường Hình 2.8 Hình thái vi thể gan chuột lô uống gliclazid 80mg/kg (chuột số 22) (HE x 400) Tế bào gan thối hóa mỡ nhẹ Hình 2.9 Hình thái vi thể gan chuột lô uống gliclazid 80mg/kg 18 (chuột số 27) (HE x 400) 1 Tế bào gan bình thường Hình 2.10 Hình thái vi thể gan chuột lơ uống Berberin nano TDCut1 liều 0,48 viên/kg/ngày (chuột số 36) (HE x 400) Tế bào gan thối hóa mỡ nhẹ 19 Hình 2.11 Hình thái vi thể gan chuột lô uống Berberin nano TDCut1 liều 0,48 viên/kg/ngày (chuột số 39) (HE x 400) 1 Tế bào gan bình thường Hình 2.12 Hình thái vi thể gan chuột lô uống Berberin nano TDCut1 liều 1,44 viên/kg/ngày (chuột số 34) (HE x 400) Tế bào gan thối hóa mỡ nhẹ Hình 2.13 Hình thái vi thể gan chuột lô uống Berberin nano TDCut1 liều 1,44 viên/kg/ngày 20 (chuột số 29) (HE x 400) * Về tụy: + Đại thể: Lô nghiên cứu Đại thể tụy sau tuần uống thuốc Lô chứng Màu hồng nhạt, mật độ dai Không xung (NFD + nước cất) huyết, không thấy tổn thương đại thể Lô mô hình (HFD + ALX Màu hồng nhạt, mật độ dai Không xung 200mg/kg) Lô chứng dương (HFD + ALX huyết, không thấy tổn thương đại thể Màu hồng nhạt, mật độ dai Không xung 200mg/kg + gliclazid 80mg/kg) huyết, không thấy tổn thương đại thể Lô trị (HFD + ALX 200mg/kg + Màu hồng nhạt, mật độ dai Không xung Berberin nano TDCut1 0,48 viên/kg/ngày) Lô trị (HFD + ALX 200mg/kg + Berberin nano TDCut1 1,44 viên/kg/ngày) huyết, không thấy tổn thương đại thể Màu hồng nhạt, mật độ dai Không xung huyết, không thấy tổn thương đại thể Hình 2.14 Hình ảnh tụy chuột lơ chứng 21 Hình 2.15 Hình ảnh tụy chuột lơ mơ hình Hình 2.16 Hình ảnh tụy chuột lơ uống gliclazid 80mg/kg 22 Hình 2.17 Hình ảnh tụy chuột lơ uống Berberin nano TDCut1 0,48 viên/kg/ngày Hình 2.18 Hình ảnh tụy chuột lô uống Berberin nano TDCut1 1,44 viên/kg/ngày + Vi thể: Lô nghiên cứu Lô chứng (NFD + nước cất) Vi thể tụy sau tuần uống thuốc - 3/3 mẫu bệnh phẩm tụy có cấu trúc bình thường: Mật độ tiểu đảo tụy bình thường Các tế bào tiểu đảo có hình thái kích thước bình thường, phân 23 bố đều, không thấy tổn thương - 3/3 mẫu bệnh phẩm tụy bị thối hóa: mật độ tiểu Lô mô hình (HFD + đảo tụy giảm Đảo tụy biến dạng, giảm kích ALX 200mg/kg) thước, tế bào tiểu đảo tụy thối hóa, teo lại - 1/3 mẫu bệnh phẩm tụy có dấu hiệu hồi phục cấu Lơ chứng dương (HFD trúc gần bình thường + ALX 200mg/kg + - 2/3 mẫu bệnh phẩm tụy có tượng thối hóa nhẹ gliclazid 80mg/kg) tế bào đảo tụy, tiểu đảo tụy giảm nhẹ kích thước, mật độ tiểu đảo so với bình thường Lơ trị (HFD + ALX - 3/3 mẫu bệnh phẩm tụy có tượng thối hóa 200mg/kg + Berberin tế bào đảo tụy, tiểu đảo tụy giảm nhẹ kích nano TDCut1 0,48 thước, mật độ tiểu đảo so với bình thường viên/kg/ngày) Lơ trị (HFD + ALX - 3/3 mẫu bệnh phẩm tụy có tượng thối hóa 200mg/kg + Berberin tế bào đảo tụy, tiểu đảo tụy giảm nhẹ kích nano TDCut1 1,44 thước, mật độ tiểu đảo so với bình thường viên/kg/ngày) 1 Tế bào đảo tụy bình thường Đảo tụy kích thước bình thường Hình 2.19 Hình thái vi thể tụy chuột lô chứng (chuột số 7) (HE x 400) (HE x 400: Nhuộm Hematoxylin - Eosin, độ phóng đại 400 lần) 24 1 Tế bào đảo tụy thối hóa Đảo tụy biến dạng giảm kích thước Hình 2.20 Hình thái vi thể tụy chuột lô mô hình (chuột số 13) (HE x 400) Tế bào đảo tụy phục hồi bình thường Đảo tụy kích thước gần bình thường Hình 2.21 Hình thái vi thể tụy chuột lô uống gliclazid 80mg/kg (chuột số 23) (HE x 400) 25 Tế bào đảo tụy thối hóa nhẹ Đảo tụy giảm nhẹ kích thước Hình 2.22 Hình thái vi thể tụy chuột lô uống gliclazid 80mg/kg (chuột số 25) (HE x 400) Tế bào đảo tụy thoái hóa nhẹ Đảo tụy giảm kích thước Hình 2.23 Hình thái vi thể tụy chuột lô uống Berberin nano TDCut1 liều 0,48 viên/kg/ngày (chuột số 39) (HE x 400) 26 Tế bào đảo tụy thối hóa nhẹ Đảo tụy giảm kích thước Hình 2.24 Hình thái vi thể tụy chuột lơ uống Berberin nano TDCut1 liều 1,44 viên/kg/ngày (chuột số 32) (HE x 400) 27 NHẬN XÉT VÀ KẾT LUẬN: - Berberin nano TDCut1 liều 0,48 viên/kg/ngày (liều tương đương liều lâm sàng) liều 1,44 viên/kg/ngày (liều gấp liều lâm sàng) có xu hướng làm hạ glucose máu chuột nhắt gây mơ hình đái tháo đường dạng typ cho uống liên tục tuần Tuy nhiên khác biệt chưa có ý nghĩa thống kê - Berberin nano TDCut1 liều0,48 viên/kg/ngày 1,44 viên/kg/ngày uống liên tục tuần chưa có tác dụng làm giảm nồng độ TC, LDL-C so với lô mơ hình - Berberin nano TDCut1 liều 0,48 viên/kg/ngày 1,44 viên/kg/ngày chưa thể ró rệt tác dụng cải thiện cấu trúc vi thể gan, tụy chuột gây mơ hình đái tháo đường dạng typ cho uống liên tục tuần 28 TÀI LIỆU THAM KHẢO Rivera R.F., Escalona C.N., Garduno S.L et al (2011), ”Antiobesity and hypoglycaemic effects of aqueous extract of Ibervillea sonorae in mice fed a high fat diet with fructose”, Journal of Biomedicine and Biotechnology, Epub 2011 Nov 17,doi: 10.1155/2011/968984 Srinivasan K., Ramarao P (2007), ”Animal models in type diabetes research: An over view”, Indian Journal of Medicine Research 125, pp 451 – 472 Tang LQ., Wei W., Chen LM et al (2006), “Effects of berberin on diabetes induced by aloxan and a high-fat/high-cholesterol diet in rats”, J.Ethnopharmacol, 108(1), pp109-15 Hà Nội, ngày 20 tháng 03 năm 2018 Trưởng Bộ môn PGS.TS Phạm Thị Vân Anh Trường Đại học Y Hà Nội xác nhận Chữ ký PGS.TS Phạm Thị Vân Anh là Trưởng phòng Tổ chức Cán 29 ... phòng thí nghiệm ngày trước tiến hành nghiên cứu 1 .2 Phương pháp nghiên cứu [1], [2] ,[3] Nghiên cứu gồm có giai đoạn: gây mơ hình ĐTĐ typ đánh giá tác dụng thuốc chứng thuốc thử mơ hình ĐTĐ typ *... độc tính cấp thuốc thử Berberin nano TD cut1 theo đường uống chuột nhắt trắng Nghiên cứu độc tính cấp xác định LD 50 thuốc thử Berberin nano TDcut1 chuột nhắt trắng theo đường uống [1], [2] ,...A ĐỘC TÍNH CẤP I NGUYÊN LIỆU VÀ ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 1.1 Nguyên liệu nghiên cứu Dạng viên nang Berberin nano TDCut1 Liều dùng dự kiến người: viên/ngày Sản phẩm viên nang Berberin nano TDCut1