Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm nghiên cứu tính an toàn của bài thuốc “Hạ áp-01” trên thực nghiệm. Phương pháp nghiên cứu là xác định độc tính cấp đường uống trên chuột nhắt trắng dòng Swiss theo phương pháp Litchfield – Wilcoxon và xác định độc tính bán trường diễn trên chuột cống trắng dòng Wistar theo quy định của Bộ Y tế Việt Nam.
Tạp chí y - dợc học quân số 2-2017 NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH CẤP VÀ BÁN TRƯỜNG DIỄN CỦA BÀI THUỐC “HẠ ÁP-01” TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM Huỳnh Thanh Ân*; Nguyễn Hồng Ngân**; Trần Quốc Bảo*** TĨM TẮT Mục tiêu: nghiên cứu tính an tồn thuốc “Hạ áp-01” thực nghiệm Phương pháp nghiên cứu: xác định độc tính cấp đường uống chuột nhắt trắng dòng Swiss theo phương pháp Litchfield – Wilcoxon xác định độc tính bán trường diễn chuột cống trắng dòng Wistar theo quy định Bộ Y tế Việt Nam Kết quả: chưa tìm thấy LD50 thuốc “Hạ áp-01” theo đường uống chuột nhắt trắng với mức liều cao cho chuột uống 24 216,0g/kg thể trọng Với liều 34,72 g/kg/24 liều 104,16 g/kg/24 cho chuột cống trắng uống liên tục 60 ngày, thuốc không ảnh hưởng lên trọng lượng thể điện tim; không gây thay đổi có ý nghĩa thống kê số huyết học, tiêu sinh hóa; khơng gây biến đổi mô bệnh học gan, lách, thận Kết luận: thuốc “Hạ áp-01” khơng gây độc tính cấp độc tính bán trường diễn động vật thực nghiệm * Từ khóa: Hạ áp-01; Độc tính cấp; Độc tính bán trường diễn; Tăng huyết áp; Động vật thực nghiệm Studying the Acute Toxicity and Semi-chronic Toxicity of Herbal Medicines “Ha ap-01” on Experimental Animals Summary Objectives: To study the safety of herbal medicines “Ha ap-01” on experimental animal Subjects and methods: The oral acute toxicity was evaluated on Swiss mice by the Litchfield Wilcoxon’s method, and the semi-chronic toxicity was evaluated on Wistar rats followed Viet Nam Health Ministry regulation Results: With the highest dose that mice could drink in 24 hours (216.0 g/kg bw), LD50 of “Ha ap-01” was not identified With the doses of 34.72 g/kg and 104.16 g/kg/per day for 60 consecutive days drinking, “Ha ap-01” did not effect on body weight and ECG of rats; did not cause any statistically significant changes in hematologies, blood chemistry indexes; did not cause any changes in histology of liver, spleen, kidney of experimental rats Conclusion: Herbal medicines “Ha ap-01” did not cause acute toxicity and semi-chronic toxicity on experimental animals * Key words: Ha ap-01; Acute toxicity; Semi-chronic toxicity; Hypertension; Experimental animal * ViƯn Y häc Cỉ trun TP Hå ChÝ Minh ** Học viện Quân y *** Bệnh viện Quân y 175 Người phản hồi (Corresponding): Nguyễn Hoàng Ngân (nguyenhoangngan@yahoo.com.vn) Ngày nhận bài: 05/12/2016; Ngày phản biện đánh giá báo: 02/12/2016 Ngày báo đăng: 16/01/2017 Tạp chí y - dợc học quân số 2-2017 ĐẶT VẤN ĐỀ Tăng huyết áp (THA) bệnh nguy hiểm có xu hướng ngày tăng Y học Cổ truyền có nhiều vị thuốc, nhiều thuốc hay điều trị THA có hiệu tính an tồn cao Việc nghiên cứu cách khoa học, có hệ thống thuốc cần thiết đắn cơng tác phát triển đại hóa Y học Cổ truyền Bài thuốc “Hạ áp-01” gồm 14 vị thuốc đông dược, Viện Y Dược học Dân tộc Thành phố Hồ Chí Minh phát triển đưa vào nghiên cứu đánh giá tính an tồn tác dụng điều trị bệnh THA Vì vậy, chúng tơi tiến hành đề tài nhằm: Nghiên cứu độc tính cấp độc tính bán trường diễn dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” động vật thực nghiệm ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng, vật liệu nghiên cứu * Thuốc nghiên cứu: thuốc “Hạ áp-01” Công thức thuốc “Hạ áp-01”: Thạch minh (Concha Haliotidis) 20 g, Thiên ma (Rhizoma Gastrodiae) 15 g, Chi tử (Fructus Gardeniae) 12 g, Bạch thược (Radix Paconiae alba) 25 g, Hoàng kỳ (Radix Astragali) 20 g, Ích mẫu thảo (Fructus Leonuri) 20 g, Ngưu tất (Radix Achyranthis bidentatae) 15 g, Trạch tả (Rhizoma Alismatis) 20 g, Viễn chí (Radix Polygalae) 10 g, Đan sâm (Radix Salviae militiorrhizae) 20 g, Trần bì (Pericarpium Citri Reticulatae) 10 g, Bán hạ chế (Rhizoma Pinelliae) 10 g, Hồng hoa (Flos Carthami) 10 g, Ngũ vị tử (Fructus Schisandrae chinenis) 10 g Thuốc chiết xuất Khoa Dược, Viện Y Dược học Dân tộc Thành phố Hồ Chí Minh thành dạng dịch chiết theo tỷ lệ - (1 ml cao chứa g dược liệu) Trong nghiên cứu thực nghiệm: dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” cô quay chân khơng đến độ đậm đặc cho chuột uống kim đầu tù chuyên dụng Cao đặc dung dịch thuốc pha loãng nồng độ khác dùng cho chuột uống nhằm đánh giá độc tính cấp bán trường diễn động vật thực nghiệm * Động vật nghiên cứu: Chuột nhắt trắng dòng Swiss, 40 con, cân nặng 18 - 22 g Chuột cống trắng dòng Wistar, 24 con, cân nặng 160 - 180 g Động vật Ban Cung cấp Động vật thí nghiệm, Học viện Quân y cung cấp, ni phòng ni động vật thí nghiệm tuần trước nghiên cứu thức ăn chuẩn dành cho động vật nghiên cứu, nước uống tự * Dụng cụ máy móc: Máy xét nghiệm sinh hoá tự động Chemix 180 (Hãng Sysmex); máy xét nghiệm huyết học tự động XE2100 (Hãng Sysmex); máy điện tim Fukuda FX 7102 (Fukuda, Nhật Bản); cân phân tích 10-4, model CP224S (Sartorius, Đức) Phương pháp nghiên cứu * Nghiên cứu độc tính cấp: Nghiên cứu độc tính cấp thuốc “Hạ áp-01” chuột nhắt trắng đường uống theo phương pháp Litchfield Wilcoxon [2] hướng dẫn Tổ chức Y tế Thế giới [5], quy chế đánh giá tính an tồn hiệu lực thuốc cổ truyền Bộ Y tế [1] Trước tiến hành thí nghiệm, cho chuột nhịn ăn 16 giờ, nước uống tự Sau 16 giờ, chia ngẫu nhiên chuột thành 05 lô, lô 08 Các lô thử cho ung thuc vi Tạp chí y - dợc học quân sù sè 2-2017 thể tích 0,2 ml/10 g/lần, lần/24 giờ, lần cách Mức liều uống lô tăng dần: 72,0 g/kg; 108,0 g/kg; 129/6 g/kg; 162,0 g/kg; 216,0 g/kg thể trọng Theo dõi tình trạng chung chuột số lượng chuột chết lô 72 sau chuột uống thuốc lần cuối Tìm liều cao khơng gây chết chuột (0%), liều thấp gây chết chuột hoàn toàn (100%) liều trung gian Từ xây dựng đồ thị tuyến tính để xác định LD50 thuốc thử (nếu có) Tiếp tục theo dõi tình trạng chung chuột (hoạt động, ăn uống, tiết…) lô hết ngày sau uống thuốc thể tích trung bình hồng cầu, hàm lượng hemoglobin, hematocrit, số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu số lượng tiểu cầu); sinh hóa đánh giá chức gan ( ALT, AST, bilirubin toàn phần, albumin cholesterol toàn phần) chức thận (nồng độ creatinin huyết thanh) [3, 4] Sau 60 ngày uống thuốc, mổ chuột để quan sát đại thể toàn quan Kiểm tra ngẫu nhiên cấu trúc vi thể gan, lách, thận 30% số chuột lô Thực xét nghiệm vi thể Bộ môn Khoa Giải phẫu bệnh - Pháp y, Bệnh viện Quân y 103 * Xử lý số liệu: Tiến hành phẫu tích quan sát tình trạng tạng sau chuột chết (nếu có) để xác định nguyên nhân gây độc Theo phương pháp thống kê y sinh học, so sánh Anova test, sử dụng phần mềm SPSS 16.0 Biểu diễn số liệu * Nghiên cứu độc tính bán trường diễn: dạng ± SD Khác biệt có ý nghĩa thống kê p < 0,05 Theo quy định Bộ Y tế Việt Nam [1], hướng dẫn Tổ chức Y tế Thế giới [5] đánh giá tính an tồn hiệu lực thuốc Y học Cổ truyền Chia ngẫu nhiên 24 chuột cống trắng thành lô, lô 08 - Lô chứng: uống nước - Lô trị 1: uống thuốc “Hạ áp-01” liều 34,72 g dược liệu/kg/ngày (tương đương liều người) - Lô trị 2: uống thuốc “Hạ áp-01” liều 104,16 g dược liệu/kg/ngày (gấp 03 lần liều người) Cho chuột uống hàng ngày, 60 ngày kim đầu tù chuyên dụng Theo dõi tiêu vào trước lúc uống thuốc, sau 30 ngày 60 ngày uống thuốc, gồm: tình trạng chung, thể trọng chuột; ghi điện tim chuột đạo trình DII; huyết học (số lượng hồng cầu, KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN Kết nghiên cứu độc tính cấp Bảng 1: Độc tính cấp theo đường uống thuốc “Hạ áp-01” chuột nhắt trắng Lơ chuột Liều sử dụng tính Số theo g chuột dược liệu thí (g/kg trọng nghiệm lượng thể (TLCT)) Thể tích cho uống Số chuột sống/chết sau 72 Lô 08 72,0 0,2 ml x lần 8/0 Lô 08 108,0 0,2 ml x lần 8/0 Lô 08 129,6 0,2 ml x lần 8/0 Lô 08 162,0 0,2 ml x lần 8/0 Lô 08 216,0 0,2 ml x lần 8/0 Tạp chí y - dợc học quân sè 2-2017 Chuột nhắt trắng uống thuốc thử với mức liều khác từ liều thấp 72,0 g dược liệu/kg thể trọng đến liều cao 216,0 g dược liệu/kg thể trọng, 0,2 ml/10 g, lần 24 Chuột uống đến liều tối đa 216,0 g dược liệu/kg thể trọng dùng đường uống để đánh giá độc tính cấp thuốc thử, khơng có chuột chết, khơng xuất triệu chứng bất thường 72 sau uống thuốc lần cuối suốt ngày sau uống thuốc Kết luận: chưa tìm thấy LD50 dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” theo đường uống chuột nhắt trắng Với mức liều cao cho chuột uống 24 216,0 g dược liệu/kg thể trọng không xuất độc tính cấp Kết nghiên cứu độc tính bán trường diễn * Ảnh hưởng dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” lên tình trạng chung thay đổi thể trọng chuột cống trắng dùng dài ngày: - Tình trạng chung: Theo dõi chuột cống trắng hàng ngày tình trạng chung gồm hoạt động, ăn uống, tình trạng lơng, da, niêm mạc, chất tiết Chuột lô chứng lô dùng thuốc “Hạ áp-01” hoạt động bình thường Lơng mượt, da niêm mạc bình thường, ăn uống bình thường, phân thành khuôn - Sự thay đổi thể trọng điện tim chuột: Bảng 2: Ảnh hưởng thuốc “Hạ áp-01” thể trọng điện tim chuột Thời điểm thí nghiệm Lơ chứng (1) Lơ trị (2) Lô trị (3) p so sánh lô Thể trọng (g) Trước thí nghiệm (a) 168,50 ± 4,47 169,75 ± 5,52 168,13 ± 3,56 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 203,75 ± 8,26 204,13 ± 5,69 205,00 ± 4,38 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 226,38 ± 6,12 225,13 ± 4,64 224,63 ± 6,16 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm pb-a < 0,01; pc-a < 0,01; pc-b < 0,01 - Tần số tim (chu kỳ/phút, X ± SD) Trước thí nghiệm (a) 488,25 ± 14,90 484,25 ± 11,47 486,13 ± 13,16 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 488,63 ± 17,74 487,00 ± 12,34 485,88 ± 11,86 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 486,75 ± 19.47 489,25 ± 14,78 488,00 ± 15,88 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm pb-a > 0,05; pc-b > 0,05; pc-a > 0,05 - Biên độ (mV, X ± SD) Trước thí nghiệm (a) 0,315 ± 0,025 0,315 ± 0,055 0.316 ± 0,038 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 0,315 ± 0,031 0,316 ± 0,041 0,318 ± 0,026 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 0,316 ± 0,040 0,316 ± 0,045 0,316 ± 0,036 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm Sóng bất thường 10 pb-a > 0,05; pc-b > 0,05; pc-a > 0,05 Khụng Khụng Khụng - Tạp chí y - dợc häc qu©n sù sè 2-2017 So sánh thời điểm sau so với trước thấy thể trọng chuột lơ nghiên cứu tăng, thay đổi có ý nghĩa thống kê (p < 0,01) So với lô chứng sinh lý, tất thời điểm đo, thể trọng chuột hai lô uống dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” với mức liều thời gian sử dụng nghiên cứu chưa thấy gây thay đổi đến phát triển thể trọng chuột So sánh lô với thời điểm so sánh lơ thời điểm thí nghiệm, tần số biên độ điện tim chuột không thay đổi có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Khơng có sóng bất thường điện tim chuột thời điểm nghiên cứu Như vậy, dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” với mức liều thời gian sử dụng chưa thấy gây thay đổi điện tim chuột * Ảnh hưởng dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” số tiêu huyết học chuột: Bảng 3: Thời điểm thí nghiệm Lơ chứng (1) Lơ trị (2) Lô trị (3) p so sánh lô 12 Số lượng hồng cầu chuột (x10 g/l) Trước thí nghiệm (a) 7,39 ± 1,07 7,20 ± 0,77 7,32 ± 0,64 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 7,10 ± 0,48 7,13 ± 0,45 7,06 ± 0,68 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 7,26 ± 0,97 7,10 ± 0,61 7,19 ± 0,040 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm pb-a > 0,05; pc-b > 0,05; pc-a > 0,05 - Hàm lượng huyết sắc tố máu chuột (g/dl) Trước thí nghiệm (a) 13,58 ± 2,32 12,85 ± 1,43 13,65 ± 0,82 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 12,89 ± 1,19 12,94 ± 0,87 12,83 ± 0,75 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 12,98 ± 1,44 12,94 ± 1,16 12,89 ± 0,77 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm pb-a > 0,05; pc-b > 0,05; pc-a > 0,05 - Hematocrit (%) Trước thí nghiệm (a) 35,09 ± 6,54 32,35 ± 2,92 33,71 ± 1,81 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 32,41 ± 3,65 32,78 ± 2,35 31,05 ± 2,92 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 33,94 ± 2,97 33,75 ± 3,46 32,30 ± 0,99 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm pb-a > 0,05; pc-b > 0,05; pc-a > 0,05 - Thể tích trung bình hồng cầu (fl) Trước thí nghiệm (a) 47,29 ± 2,44 44,56 ± 2,11 46,20 ± 2,77 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 45,56 ± 3,34 45,96 ± 2,23 47,93 ± 3,40 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 46,99 ± 3,10 47,48 ± 1,52 44,98 ± 1,89 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm pb-a > 0,05; pc-b > 0,05; pc-a > 0,05 - 11 Tạp chí y - dợc häc qu©n sù sè 2-2017 Số lượng bạch cầu (G/l) Trước thí nghiệm (a) 7,21 ± 1,45 7,31 ± 3,69 7,30 ± 2,75 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 7,46 ± 3,76 7,29 ± 4,35 7,76 ± 1,92 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 7,34 ± 2,24 7,23 ± 3,50 7,53 ± 3,32 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm pb-a > 0,05;pc-b > 0,05;pc-a > 0,05 - Số lượng tiểu cầu (G/l) Trước thí nghiệm (a) 498,38 ± 182,74 459,25 ± 113,64 484,75 ± 107,58 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 512,13 ± 141,35 505,75 ± 102,94 456,00 ± 117,10 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 519,88 ± 179,52 489,75 ± 108,35 467,88 ± 134,58 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm pb-a > 0,05; pc-b > 0,05; pc-a > 0,05 - So sánh lô với thời điểm so sánh lô thời điểm thí nghiệm, số huyết học (số lượng hồng cầu, hàm lượng huyết sắc tố, hematocrit, thể tích trung bình hồng cầu, số lượng bạch cầu số lượng tiểu cầu) thay đổi khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Như vậy, dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” với mức liều thời gian sử dụng chưa gây thay đổi tiêu huyết học chuột * Ảnh hưởng dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” số tiêu sinh hóa: Bảng 4: Thời điểm thí nghiệm Lơ chứng (1) Lô trị (2) Lô trị (3) p so sánh lơ Trước thí nghiệm (a) 213,50 ± 56,85 218,93 ± 67,38 220,60 ± 48,60 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 219,39 ± 45,88 219,18 ± 57,08 224,63 ± 60,59 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 201,36 ± 58,61 204,81 ± 40,50 227,11 ± 51,28 p3-1 > 0,05 Hoạt độ AST (UI/l) p so sánh thời điểm pb-a > 0,05; pc-b > 0,05; pc-a > 0,05 - Hoạt độ ALT (UI/l) Trước thí nghiệm (a) 78,79 ±51,99 82,31 ± 17,71 81,41 ± 24,80 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 89,74 ± 26,41 87,09 ± 59,04 78,45 ± 16,56 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 75,75 ± 24,87 65,18 ± 12,61 75,14 ± 19,02 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm pb-a > 0,05; pc-b > 0,05; pc-a > 0,05 - Albumin huyết tương (g/l) Trước thí nghiệm (a) 22,03 ± 2,49 20,59 ± 3,35 22,94 ± 2,54 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 23,43 ± 2,16 22,19 ± 1,78 21,75 ± 4,74 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 22,20 ± 4,41 22,08 ± 1,59 24,15 ± 2,11 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm 12 pb-a > 0,05; pc-b > 0,05; pc-a > 0,05 - T¹p chÝ y - dợc học quân số 2-2017 Cholesterol ton phn (mmol/l) Trước thí nghiệm (a) 2,21 ± 0,40 2,03 ± 0,70 2,10 ± 0,73 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 2,19 ± 0,51 1,98 ± 0,52 2,05 ± 0,43 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 2,16 ± 0,71 2,11 ± 0,68 2,14 ± 0,73 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm pb-a > 0,05; pc-b > 0,05; pc-a > 0,05 - Bilirubin tồn phần (µmol/l) Trước thí nghiệm (a) 48,49 ± 12,46 55,79 ± 15,68 54,19 ± 14,83 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 50,06 ± 14,59 54,61 ± 17,00 56,06 ± 15,23 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 49,75 ± 19,42 51,00 ± 13,34 53,81 ± 19,72 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm pb-a > 0,05; pc-b > 0,05; pc-a > 0,05 - Creatinin (µmol/l) Trước thí nghiệm (a) 76,69 ± 23,23 83,13 ± 9,98 88,84 ± 7,83 p2-1 > 0,05 Sau 30 ngày (b) 96,73 ± 20,94 84,03 ± 14,28 73,49 ± 19,76 p3-2 > 0,05 Sau 60 ngày (c) 85,91 ± 12,48 84,86 ± 10,75 86,18 ± 17,73 p3-1 > 0,05 p so sánh thời điểm pb-a > 0,05; pc-b > 0,05; pc-a > 0,05 - So sánh lô với thời điểm so sánh lô thời điểm thí nghiệm, số sinh hóa máu chuột (AST, ALT, albumin, cholesterol toàn phần, bilirubin toàn phần, creatinin) thay đổi khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Như vậy, dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” với mức liều thời gian sử dụng không làm thay đổi số sinh hóa máu chuột * Kết mơ bệnh học tạng chuột thí nghiệm: Quan sát đại thể mắt thường kính lúp có độ phóng đại 25 lần thấy: màu sắc, hình thái gan, lách thận hai lô dùng dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” không khác so với lô chứng a b c Ảnh 1: Hình ảnh đại thể gan, lách, thận chuột lô chứng (a), lô trị (b), lơ trị (c) 13 T¹p chÝ y - dợc học quân số 2-2017 nh 2: Hỡnh nh mô bệnh học gan (G), lách (L), thận (T) chuột lô chứng (a), lô trị (b) lô trị (c) sau 60 ngày uống thuốc Các tiêu mô bệnh học (HE x 400) đọc Bộ môn Khoa Giải phẫu bệnh - Pháp y, Bệnh viện Quân y 103 Kết nghiên cứu mô bệnh học gan, lách, thận chuột cho thấy dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” dùng đường uống với liều 34,72 g dược liệu/kg chuột/24 liều 104,16g dược liệu/kg chuột/24 liên tục 60 ngày không gây tổn thương gan, thận, lách chuột KẾT LUẬN - Độc tính cấp: chưa tìm thấy LD50 dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” theo đường uống chuột nhắt trắng Với mức liều cao cho chuột uống 216,0 g dược liệu/kg thể trọng, khơng 14 có biểu độc tính cấp, chứng tỏ thuốc có tính an tồn cao - Độc tính bán trường diễn: với liều 34,72 g dược liệu/kg chuột/24 liều 104,16 g dược liệu/kg chuột/24 giờ, liên tục 60 ngày, dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” T¹p chÝ y - dợc học quân số 2-2017 khụng gõy nh hưởng lên trọng lượng điện tim chuột; không làm thay đổi số huyết học (hồng cầu, huyết sắc tố, hematocrit, thể tích trung bình hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu) sinh hóa máu (AST, ALT, bilirubin tồn phần, albumin, cholesterol tồn phần, creatinin), khơng gây tổn thương mô bệnh học gan, lách, thận Như vậy, thuốc “Hạ áp-01” an toàn mức liều thời gian dùng Đỗ Trung Đàm Phương pháp xác định độc tính thuốc Nhà xuất Y học 2014 Nguyễn Thế Khánh; Phạm Tử Dương Xét nghiệm sử dụng lâm sàng Nhà xuất Y học 2001 Vũ Đình Vinh Hướng dẫn sử dụng xét nghiệm sinh hoá Nhà xuất Y học 2001, tr.115-287 World Health Organization Working TÀI LIỆU THAM KHẢO group on the safety and efficacy of herbal Bộ Y Tế Quy chế đánh giá tính an tồn hiệu lực thuốc cổ truyền Quyết định số 371/BYT-QĐ ngày 12/3/1996 1996 medicine Report of regional office for the western pacific of the World Health Organization 2000 15 ... độc tính cấp độc tính bán trường diễn dịch chiết thuốc “Hạ áp-01” động vật thực nghiệm ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng, vật liệu nghiên cứu * Thuốc nghiên cứu: thuốc “Hạ. .. giá độc tính cấp bán trường diễn động vật thực nghiệm * Động vật nghiên cứu: Chuột nhắt trắng dòng Swiss, 40 con, cân nặng 18 - 22 g Chuột cống trắng dòng Wistar, 24 con, cân nặng 160 - 180 g Động. .. 160 - 180 g Động vật Ban Cung cấp Động vật thí nghiệm, Học viện Quân y cung cấp, ni phòng ni động vật thí nghiệm tuần trước nghiên cứu thức ăn chuẩn dành cho động vật nghiên cứu, nước uống tự