ĐÁNH GIÁ TÍNH PHÙ hợp mô của STENT PHỦ THUỐC EVEROLIMUS TRONG bộ DỤNG cụ CAN THIỆP TIM MẠCH DO CÔNG TY TNHH MTV NHÀ máy UNITED HEALTHCARE CHẾ tạo TRÊN THỰC NGHIỆM

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI ĐÀO THỊ TRANG ĐÁNH GIÁ TÍNH PHÙ HỢP MƠ CỦA STENT PHỦ THUỐC EVEROLIMUS TRONG BỘ DỤNG CỤ CAN THIỆP TIM MẠCH DO CÔNG TY TNHH MTV NHÀ MÁY UNITED HEALTHCARE CHẾ TẠO TRÊN THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP BÁC SỸ Y KHOA KHÓA 2011 - 2017 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: ThS.BS LÊ THỊ HỒNG NHUNG Hà Nội – 2017 LỜI CẢM ƠN Trong q trình học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận, ngồi cố gắng thân, tơi nhận hướng dẫn, giúp đỡ tận tình thầy cô, anh chị, bạn bè, Nhà trường người thân gia đình Trước tiên, tơi xin chân thành cảm ơn tới Phòng đào tạo đại học, Bộ môn Mô- Phôi trường Đại học Y Hà Nội nhận lời tạo điều kiện thuận lợi cho tơi tham gia làm khóa luận tốt nghiệp hồn thành khóa luận Đặc biệt, tơi xin bày tỏ lòng kính trọng, biết ơn sâu sắc đến ThS.BS Lê Thị Hồng Nhung, giảng viên Bộ môn Mô –Phôi, trường Đại học Y Hà Nội người trực tiếp giao đề tài, tận tình hướng dẫn, sửa đổi bổ sung cho nhiều kiến thức chuyên ngành quý báu tạo điện kiện thuận lợi cho tơi hồn thành khóa luận Tiếp theo, tơi xin gửi lời cảm ơn tới tồn thể thầy cô, anh chị môn Mô – Phơi, trường đại học Y Hà Nội đóng góp nhiều ý kiến, tạo điều kiện cho học tập tham gia nghiên cứu khoa Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn chân thành tới anh chị, bạn bè gia đình giúp đỡ tơi tháng ngày học tập, nghiên cứu hoàn thiện khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn ! Đào Thị Trang LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài nghiên cứu “Đánh giá tính phù hợp mô stent phủ thuốc everolimus dụng cụ can thiệp tim mạch công ty TNHH MTV nhà máy UNITED HEALTHCARE chế tạo thực nghiệm” đề tài thân thực Các kết khóa luận hồn tồn trung thực, chưa cơng bố nghiên cứu khác Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Đào Thị Trang MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN LỜI CAM ĐOAN MỤC LỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH VẼ ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Vật liệu sinh học 1.1.1 Giới thiệu chung vật liệu sinh học .3 1.1.2 Các loại vật liệu sinh học .3 1.1.3 Yêu cầu vật liệu sinh học 1.2 Tương hợp sinh học vật liệu ghép 1.3 Tính phù hợp mơ 1.3.1 Đáp ứng miễn dịch thể với vật liệu ghép 1.3.2 Quá trình phản ứng thể với vật liệu ghép 1.3.4 Kết trình ghép .9 1.4 Stents điều trị bệnh tim mạch .10 1.4.1 Khái niệm: 10 1.4.2 Sự phát triển stent 10 1.5 Một số nghiên cứu nước giới stents can thiệp tim mạch .14 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 16 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 16 2.1.2 Mẫu vật liệu thí nghiệm .16 2.2 Phương pháp nghiên cứu .17 2.3 Mơ hình nghiên cứu 17 2.4 Quy trình nghiên cứu 18 2.4.1 Chuẩn bị dụng cụ 18 2.4.2 Các bước tiến hành .18 2.4.3 Kĩ thuật nghiên cứu .20 2.5 Địa điểm nghiên cứu 20 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 21 3.1 Kết thử nghiệm mô thỏ .21 3.1.1 Đánh giá tình trạng tồn thân chỗ vật sau cấy stent .21 3.1.2 Đánh giá mặt đại thể vùng mô thỏ sau cấy stent 21 3.1.3 Đánh giá vi thể mô thỏ sau cấy ghép stent .23 3.2 Kết thử nghiệm động mạch chó 26 3.2.1 Tình trạng tồn thân chỗ ghép vật sau cấy stent 10 ngày 26 3.2.2 Hình ảnh đại thể động mạch chó sau đặt stent .27 3.2.3 Hình ảnh vi thể đoạn động mạch chó sau đặt stent 29 Chương 4: BÀN LUẬN .32 4.1 Động vật thực nghiệm 32 4.2 Vật liệu nghiên cứu .34 4.3 Mơ hình nghiên cứu 35 4.4 Về kết nghiên cứu 36 KẾT LUẬN 42 KHUYẾN NGHỊ 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO CÁC TỪ VIẾT TẮT ePTFE Expanded FDA Polytetrafluoroethylene Foot and Drug HE INH ISO Administration Hematoxylin Eosin Inhibility Neotimal International Tổ chức tiêu chuẩn hóa Organization for quốc tế IVUS Standardization Intra Vascular Ultra Siêu âm lòng MHC Sound Major mạch Phức hợp hòa hợp mơ Histocompatibility Complex Poly-l-lactic acid Swedish Coronary Trung tâm can thiệp Angiography and mạch vành Thụy Điển Angioplasty Registry Tumor Necrosis Factor World Health Yếu tố hoại tử u Tổ chức Y tế Thế giới PLLA SCAAR TNF WHO Organization Cục quản lí thực phẩm dược phẩm Hoa Kỳ DANH MỤC BẢN Bảng 1.1 Các phép thử đánh giá ban đầu để xem xét khả tương hợp sinh học vật liệu Bảng 2.1 Phân nhóm động vật thực nghiệm 16 YBảng 4.1 Theo Richard W Bianco (2013) nghiên cứu bốn thuộc tính quan trọng hệ tim mạch loài động vật người ………… 33 DANH MỤC HÌNH V Hình 1.1 Stent khơng phủ thuốc 11 Hình 1.2 Stent phủ thuốc hệ thứ 12 Hình 1.3 Stent phủ thuốc hệ thứ 13 Hình Mơ hình nghiên cứu 17 Hình 2 Các bước cấy stent vào mông thỏ .19 Hình Đặt stent thử nghiệm stent chứng vào động mạch đùi chó .19 Hình Vùng mơ thỏ sau cấy ghép tuần 21 Hình Mơ vùng đặt stent thử nghiệm nhà máy .22 Hình 3 Mô vùng đặt stent đối chứng 22 Hình Khối mơ thỏ (đã cố định) sau tuần cấy stent phủ thuốc everolimus (A) stent thử nghiệm rút khỏi mơ sau cấy (B) 23 Hình Mô mông thỏ vùng cấy stent phủ everolimus thực nghiệm stent chứng - tuần sau cấy 24 Hình Mô mông thỏ vùng cấy stent phủ everolimus thực nghiệm stent chứng- tuần sau cấy 24 Hình Mô mông thỏ vùng cấy stent phủ everolimus thực nghiệm stent chứng- tuần sau cấy 25 Hình Vùng chi chó sau đặt stent 10 ngày .26 Hình Đoạn động mạch chó sau đặt stent 10 ngày 27 Hình 10 Đoạn động mạch chứa stent cắt rời 28 Hình 11 Đoạn động mạch stent sau đặt thử nghiệm 10 ngày .28 Hình 12 Mặt thành đoạn động mạch sau 10 ngày đặt stent 29 Hình 13 Thành động mạch chó sau đặt stent thực nghiệm 30 Hình 14 Một số nơi stent ép sát màng ngăn chun .30 Hình 15 Khơng thấy khác biệt cấu trúc vi thể thành mạch đặt stent chứng stent thử nghiệm 31 ĐẶT VẤN ĐỀ Trong năm gần đây, tỷ lệ người mắc bệnh tim mạch giới ngày gia tăng Hiện nguyên nhân gây tử vong tàn phế hàng đầu nước phát triển có xu hướng gia tăng nước phát triển [1] Dù có nhiều phương pháp điều trị hữu hiệu tỉ lệ tử vong bệnh tim mạch cao, đồng thời chi phí cho chăm sóc, điều trị bệnh tim mạch gánh nặng đáng kể lên tới hàng trăm tỷ USD năm Theo thống kê WHO năm 2015 có đến 17,5 triệu người tử vong bệnh liên quan đến tim mạch, chiếm 31% số tử vong chung tồn cầu Trong có khoảng 7,4 triệu người tử vong liên quan đến bệnh lí mạch vành 6,7 triệu người đột qụy [2] Cũng nước phát triển khác, Việt Nam tỉ lệ bệnh động mạch vành tăng nhanh với phát triển kinh tế - xã hội trở thành vấn đề thời Theo thống kê Bộ Y tế năm 2014, tỉ lệ mắc bệnh tim mạch chiếm 10,46% tổng số mắc bệnh nước, đứng thứ sau bệnh lí hơ hấp, tỉ lệ tử vong đứng hàng đầu, chiếm 21,79% [3] Tuy nhiên, với gia tăng tỉ lệ bệnh tật phát triển y học, khoa học công nghệ nên ngày có nhiều phương pháp chẩn đốn điều trị lĩnh vực tim mạch, làm giảm gánh nặng bệnh tật, giảm di chứng tỉ lệ tử vong cho bệnh nhân Trong phương pháp điều trị bệnh động mạch vành can thiệp động mạch vành qua da kỹ thuật Mang lại hiệu điều trị cao mà không cần mở lồng ngực nhờ thiết bị chuyên môn đại Tại Việt Nam năm có hàng ngàn trường hợp sử dụng kỹ thuật can thiệp tim mạch Tuy nhiên dụng cụ can thiệp tim mạch thường phải nhập từ nước ngồi với giá thành cao Chính vậy, việc hạ thấp giá thành sản phẩm mà đạt chất lượng hiệu tốt điều trị nhu cầu cấp bách, yêu cầu Nhà nước phải đẩy mạnh nghiên cứu, chế tạo sản phẩm vật liệu sinh học thay nội địa: stent mạch máu, van tim nhân tạo, bóng nong mạch… Nhằm bước nội địa hóa sản phẩm nước theo tinh thần chung phủ, CƠNG TY TNHH MTV NHÀ MÁY UNITED HEALTHCARE phối hợp với công ty nước ngồi chế tạo đóng gói dụng cụ can thiệp tim mạch gồm số loại stent bóng nong mạch Trước đưa vào ứng dụng lâm sàng, vào tiêu chuẩn sở thời gian lưu lại thể thiết bị, phải tiến hành nghiên cứu đánh giá tính phù hợp mơ khả tương hợp sinh học sản phẩm nói để đảm bảo độ an toàn vật liệu đưa vào thể người nghiên cứu thực nghiệm động vật [4] Vì vậy, quy mơ đề tài tiến hành nghiên cứu “ Đánh giá tính phù hợp mơ stent phủ thuốc everolimus tronng dụng cụ can thiệp tim mạch công ty TNHH MTV nhà máy UNITED HEALTHCARE chế tạo thực nghiệm” Với mục tiêu nghiên cứu chúng tơi là: Đánh giá tính phù hợp mơ stent phủ thuốc everolimus thỏ chó thực nghiệm Kết thử nghiệm sở để đưa thiết bị vào thử nghiệm lâm sàng diện hẹp trước sử dụng rộng rãi cho bệnh nhân Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Vật liệu sinh học 1.1.1 Giới thiệu chung vật liệu sinh học 34 chức hệ tim mạch so với người [36] Ví dụ số lượng buồng tim buồng, hệ thống van tim tương đương với tim người Mạch máu kích thước nhỏ thành mỏng người đủ cấu trúc lớp, trình tái tạo nội mạch sau tổn thương có nhiều nét tương đồng Đồng thời, có tương đồng thành phần huyết thanh, trình đáp ứng phản ứng viêm thể Trong máu chuột thành phần chủ yếu tế bào lympho, lợn lại chủ yếu bạch cầu đa nhân trung tính giống với thể người Chuột Lợn Chó Thỏ + +++ +++ ++ Cấu trúc vi thể mạch máu ++ +++ ++ ++ Đáp ứng viêm hệ thống + ++ ++ ++ Sự lành hóa vết thương ++ ++ ++ ++ Cấu trúc tim Bảng Theo Richard W Bianco (2013) nghiên cứu bốn thuộc tính quan trọng hệ tim mạch loài động vật người [20] Theo bảng đánh giá lợn lồi vật có nhiều đặc điểm tương đồng so với thỏ chó Tuy nhiên, lợn lồi vật lớn, khó chăm sóc ni dưỡng phòng thí nghiệm, nên chúng tơi lựa chọn chó thỏ để thiết kế nghiên cứu đánh giá tính phù hợp mơ phù hợp với quy mô đề tài Bên cạnh thỏ lồi động vật nhỏ nên việc chăm sóc ni dưỡng dễ dàng thực thời gian nghiên cứu dài so với chó Vì vậy, chúng tơi định thực thời gian nghiên cứu thỏ tuần, kéo dài so với chó 10 ngày 35 Chúng hi vọng với lựa chọn kết nghiên cứu sát với phản ứng thực tế cấy ghép vật liệu vào thể người để dự tính khả tương hợp sinh học vật liệu nghiên cứu cách đáng tin cậy 4.2 Vật liệu nghiên cứu Các vật liệu sử dụng stent mạch vành phải linh hoạt, có khả mở rộng tương thích sinh học Thơng thường vật liệu cấy ghép vào thể người gây chấn thương, viêm, phản ứng miễn dịch cuối chữa lành / sẹo Các vật liệu khơng tương thích sinh học gây nhiều biến chứng, bao gồm tích tụ hóa chất gây độc cho tế bào quan hay phản ứng viêm mạn tính, thải loại vật ghép Các văn hướng dẫn cần phải thiết kế mẫu vật liệu có hình dạng, kích thước phù hợp với kích thước động vật mạch máu lựa chọn để tránh gây tổn thương mạch máu vị trí cấy ghép làm sai lệch, ảnh hưởng đến độ tin cậy kết [4] Theo nghiên cứu Schwartz (2008) mạch máu thỏ chó tỉ lệ đường kính stent đường kính vùng mạch máu cấy ghép nên khoảng từ 1,0- 1,1 [37] Đối với thỏ theo tiêu chuẩn ISO 1993 khuyến cáo kích thước mẫu vật liệu hình trụ kích thước khoảng 2×5 mm cấy vào mông Mặt cắt vật liệu phải nhẵn, không sần sùi thô giáp để tạo đáp ứng đồng thể vật chủ với vật liệu cấy ghép [4] Trong nghiên cứu này, sử dụng stent thực nghiệm có khung làm từ hợp kim khơng gỉ phủ thuốc everolimus bên lòng Mẫu vật liệu chế tạo có kích thước phù hợp với động vật nghiên cứu để vùi sâu vào mông thỏ áp sát vào thành động mạch chó Sau cấy ghép stent lấy khơng bị ăn mòn, khơng bị biến dạng, khơng có tượng gỉ màu mơ xung quanh Chứng tỏ stent có độ bền 36 học tính trơ cao Có khả chịu đựng tác động môi trường bên thể, không bị thể đào thải, khả tương thích sinh học cao Làm giảm nguy biến chứng cấy ghép 4.3 Mơ hình nghiên cứu Theo tiêu chuẩn ISO-10993 phần Tổ chức Tiêu chuẩn Quốc tế nói “ Các thử nghiệm để đánh giá tác động chỗ mô cấy ghép vật liệu” quy định mơ hình thực nghiệm tiêu chuẩn sau [38]: Để kiểm tra tác động chỗ vật liệu thể sống cần đánh giá mức độ đại thể vi thể Việc cấy mẫu vật liệu vào bên thể vật phòng thí nghiệm biện pháp trực tiếp để đánh giá tác động tiềm vật liệu thiết bị y tế mơ sống xung quanh vật liệu [38] Sau đó, vào mốc thời gian khác nhau, từ vài tuần đến vài tháng, ta tiến hành kiểm tra vùng cấy ghép vật liệu Cần ý tới phản ứng chỗ với tượng xảy nhằm phản ứng lại với diện vật liệu thử nghiệm, đặc biệt vùng tiếp xúc trực tiếp vật liệu với mô sống [38] Để đánh giá phản ứng xuất thời gian ngắn, tiêu chuẩn ISO-10993 quy định đánh giá đáp ứng mô xung quanh vật liệu cấy ghép sau tuần, tuần, tuần 12 tuần Đối với đánh giá dài hạn, kiểm tra tiến hành vào khoảng 12, 24, 52 78 tuần [38] Nghiên cứu tiến hành theo tiêu chuẩn ISO-10993 quy định Mẫu vật liệu làm stent thực nghiệm cấy trực tiếp vào bên thể vật, cụ thể vào mông thỏ động mạch đùi chó Sau chúng tơi tiến hành đánh giá tình trạng tồn thân, chỗ vật lẫn tác động vật liệu mức độ đại thể vi thể lên vùng mô xung quanh sau mốc thời gian theo quy định tuần tuần với thỏ, sau 37 10 ngày với chó Đồng thời có đối chứng với mẫu stent chứng đưa vào ứng dụng lâm sang trước Để đánh giá xác tác động vật liệu lên mô sống xung quanh điều cần thiết phải đánh giá nhiều thời điểm khác Tuy nhiên, điều kiện quy mô đề tài không cho phép nên đánh giá vào thời điểm ngắn hạn Hi vọng kết phần chứng tỏ tính phù hợp mơ khả cấy ghép mẫu stent 4.4 Về kết nghiên cứu Sau thời gian cấy ghép, kết thu tình trạng tồn thân, vết mổ, hình ảnh đại thể, vi thể vùng mô thực nghiệm cho thấy stent thử nghiệm không gây biến đổi bất thường cho động vật thí nghiệm giống stent chứng Cả thỏ chó sau cấy ghép ăn uống, hoạt động bình thường Tại chỗ cấy ghép khơng thấy tượng nhiễm trùng chảy dịch, đùn đẩy vật liệu ngồi Vùng mơ mơng thỏ cấy stent thử nghiệm sau tuần hồn tồn bình thường Khơng có tượng biến đổi cấu trúc, hình thái, không thấy vùng hoại tử Màu sắc, độ đàn hồi tương tự vùng mô không cấy stent Vùng mô xung quanh vật liệu phát triển bình thường Chứng tỏ thể chấp nhận vật liệu ghép Qua việc khơng có tượng thải ghép phần chứng minh vật liệu làm stent thử nghiệm có tính an tồn khả tương hợp sinh học tương đối cao thể sống Trên chó, đoạn động mạch đặt stent khơng có tượng phồng, tắc Bộc lộ cắt rời để quan sát thấy màu sắc, cấu trúc bên hoàn tồn bình thường Rút stent quan sát mặt lòng mạch khơng thấy biểu tổn thương Vùng nuôi dưỡng xung quanh không thấy biểu thiếu máu, hoại tử Chứng tỏ, đoạn động mạch đặt stent giữ chức năng, nuôi dưỡng cấp máu tốt cho vùng chi thể chứa mạch máu 38 Nghiên cứu vùng mô thử stent mức vi thể cho thấy stent không làm biến đổi cấu trúc mô Trên thỏ, cấu trúc mô vân xung quanh vùng ghép khơng bị biến đổi Có xuất nguyên bào mạch máu tân tạo Đặc biệt sau thời gian tuần khơng xuất tế bào viêm lympho bào, tương bào, đại thực bào Trên chó, sau đặt stent thấy thành động mạch gồm lớp áo rõ, lớp áo có màng ngăn chun lượn sóng chạy theo hướng vòng, cấu trúc lớp áo không bị đảo lộn, không bị tăng sinh, khơng có tế bào viêm xâm nhập lympho bào, đại thực bào, tương bào Kết nghiên cứu stent thực nghiệm stent chứng Mặc dù vật liệu cấy ghép vào vật lạ với thể thấy không gây đảo lộn cấu trúc mô, không ảnh hưởng chức quan, đáp ứng miễn dịch xảy không mạnh phản ứng giảm nhanh chóng theo thời gian Điều cho thấy stent thử nghiệm dần thể chấp nhận Qua cho thấy stent có tính tương hợp sinh học, khả phù hơp mô cao Theo Pidhorz L cộng (1975) tiêu chuẩn hàng đầu vật liệu ghép phải đạt Sự thích nghi thể sống vật liệu chứng minh qua giảm dần độ dày mô liên kết bao xung quanh vật liệu Mặc dù không bị đào thải dù mảnh stent thử nghiệm đóng vai trò dị vật thể Vì vậy, việc xuất mơ liên kết chủ yếu mơ xơ đóng vai trò hàng rào bảo vệ cô lập vật liệu Thời gian sau hàng rào mỏng dần thể chấp nhận sống chung với vật cấy ghép Trong kết chúng tôi, mô liên kết bao quanh vật liệu sau tuần mỏng rõ rệt so với lúc tuần Điều chứng tỏ, thể dần chấp nhận diện mẫu stent thử 39 Kết qủa nghiên cứu chúng tơi hồn tồn phù hợp với nghiên cứu Robert S.Schwartz (2008) tiến hành nghiên cứu tính tương thích sinh học khả hồi phục lòng mạch sau đặt stent kim loại có phủ thuốc everolimus sirolimus vào động mạch vành lợn động mạch chậu thỏ Kết sau tuần cho thấy stent đặt lòng động mạch vành lợn không làm biến đổi cấu trúc giải phẫu mạch, q trình tái tạo lớp nội mơ diễn bình thường, khơng bị q sản lớp nội mạch gây tái hẹp trở lại Không gây huyết khối, không làm ảnh hưởng đến chức mô tim [37] Trước đó, nghiên cứu khác Suzuki (2001) có nghiên cứu mơ hình động mạch vành lợn chó Theo đó, 47 stent bao gồm stent phủ thuốc sirolimus stent kim loại cấy vào 16 lợn 31 chó Kết sau ngày có đáp ứng viêm xảy Nhưng đến ngày thứ 7, phát triển tổ chức hạt mô liên kết xung quanh stent giảm 50%- 60% Theo dõi kéo dài sau 60 ngày, phản ứng gần hồn tồn, lòng mạch lưu thơng trở lại lúc đầu Ngồi ra, nghiên cứu cho thấy Sirolimus có hiệu làm giảm tăng sản nội mạc stent cách ức chế tăng sinh tế bào Sau 28 ngày bề dày lớp nội mạc stent phủ thuốc trung bình 2,47 ± 1,04 mm, mỏng đáng kể so với stent kim loại trần 5,06 ± 1,88mm (P < 0,0001) [39] Cũng tương tự vậy, Carter (2004) nghiên cứu tác động lâu dài loại stents mơ hình động mạch vành lợn, kết sau 30 ngày cho thấy stent phủ thuốc sirolimus paclitaxel có tác dụng chống tái hẹp tốt so với nhóm chứng stent kim loại trần Tuy nhiên tác dụng giảm sau theo dõi đến tháng tháng Điều giải thích giảm dần nồng độ thuốc giải phóng stent q trình tổn thương xơ hóa lắng đọng lòng mạch tăng lên theo thời gian gây hẹp.[29] 40 Ngoài ra, nghiên cứu khác thực stent phủ thuốc nhóm ức chế miễn dịch giống với everolimus có kết tương tự Waksman R cộng (2007) nghiên cứu đánh giá hiệu tính an tồn stent kim loại phủ thuốc pimecrolimus động mạch vành 20 lợn Kết sau tháng chụp mạch vành kiểm tra cho thấy đường kính lòng mạch hồn tồn bình thường so với nhóm chứng Hình ảnh vi thể có phản ứng viêm nhẹ Tuy nhiên sau tháng phản ứng viêm giảm rõ rệt, kích thước lòng mạch lớn đáng kể so với nhóm stent kim loại trần stent PLLA Điều cho thấy, stent phủ thuốc pimecrolimus có tính an tồn cao, ức chế phản ứng viêm, làm giảm nguy tái hẹp trở lại [40] Nakazawa (2007) sử dụng mơ hình động mạch vành động mạch chậu lợn thỏ để đánh giá đáp ứng viêm phản ứng nội mô mạch máu sau cấy ghép loại stent phủ sirolimus, paclitaxel rotalimus Kết thỏ sau 28 ngày cho thấy phản ứng viêm xảy mạnh stent phủ thuốc rotalimus so với sirolimus paclitaxel Sau 30 ngày động mạch chó cho kết stent phủ sirolimus gây viêm lớp nội mạc tăng sinh chậm so với rotalimus paclitaxel Tuy nhiên sau tháng theo dõi, thấy khơng có khác biệt độ dày lớp nội mạc loại stent Điều cho thấy sirolimus số thuốc nhóm everolimus giai đoạn đầu ức chế trình gây viêm tăng sinh nội mạc tốt Cần tiến hành thêm nghiên cứu theo dõi dài ngày để đánh giá thêm tác động [28] Nghiên cứu Ma GS ( 2008) đánh giá tương hợp sinh học stents kim loại có phủ Tetramethylpyrazine cách theo dõi đáp ứng thể huyết khối động mạch vành lợn thông thường phương pháp chụp động mạch vành (IVUS) mô bệnh học Kết tất stent cấy ghép thành công Sự tương hợp sinh học mơ hình ngày thứ 28 tương đối tốt chấp nhận Rất tế bào viêm tìm thấy thành động mạch 41 vành nhóm, khơng thấy biểu huyết khối hay tan máu, không rối loạn chức gan thận [41] Trong nghiên cứu gần Việt Nam, kết tương tự Ngơ Duy Thìn (2015) tiến hành nghiên cứu thực nghiệm động vật stent phủ thuốc sirolimus công ty TNHH MTV nhà máy United Healthcare sản xuất Kết cho thấy thiết bị có tính tương thích sinh học cao, khơng làm biến đổi mơ vùng tiếp xúc, không làm ảnh hưởng chức tạo máu, chức gan, thận, không làm tăng yếu tố gây huyết khối, tan máu, không gây độc cho tế bào nuôi cấy Các số nghiên cứu tương đương thiết bị chứng [33] Và để đánh giá xem nghiên cứu động vật thực nghiệm thực làm chứng để ứng dụng thể người hay khơng, giới có nghiên cứu tiến hành so sánh phản ứng thể động vật với người nhằm dự đoán khả ứng dụng lâm sàng nghiên cứu tiến hành thực nghiệm động vật Nghiên cứu Virmani (2003) tiến hành so sánh thời gian kéo dài phản ứng viêm, trình sửa chữa thành động mạch sau đặt stent lợn thỏ so với người Kết cho thấy đáp ứng viêm thể người động vật bắt đầu xảy sau 1-3 ngày cấy ghép, thành phần tham gia tương đối giống gồm đại thực bào, lympho bào…Tuy nhiên, động vật trình viêm kéo dài 7- 14 ngày, thể người kéo dài đến tháng Lớp mô liên kết bao quanh vật liệu ghép tăng sinh dày sau ghép 7-14 ngày dần ổn định trở lúc đầu sau 28 ngày lợn thỏ thể người thời gian từ tháng đến năm Từ cho kết luận mơ hình stent động vật dự đốn phản ứng người, giai đoạn chữa bệnh giống Khác biệt đặc trưng thời gian để chữa bệnh kéo dài đáng kể người Việc lí giải qua chênh lệch tuổi thọ 42 người động vật Tuổi thọ điển hình người 70 năm Ngược lại, lợn có tuổi thọ 16 năm, thỏ 5-6 năm Một lời giải thích rõ ràng cho khác biệt can thiệp động mạch động vật thường thực động vật trưởng thành stents thường đặt mạch máu bình thường mà khơng bị viêm, khơng có mảng xơ vữa nên phản ứng hồi phục diễn nhanh Ngược lại người, thường 70% tiến hành động mạch có mảng xơ vữa sẵn [42] Điều cho thấy mơ hình nghiên cứu động vật khơng hồn tồn mơ xác q trình phản ứng thực thể người chúng có cần thiết để đánh giá tính an tồn, khả phù hợp mơ, tương thích sinh học thiết bị can thiệp trước đưa vào sử dụng thể người Vì vậy, kết nghiên cứu chúng tơi tính phù hợp mơ stent thử nghiệm mơ hình động vật có ý nghĩa ứng dụng lâm sàng 43 KẾT LUẬN Thử nghiệm có đối chứng tính phù hợp mơ stent phủ thuốc everolimus công ty TNHH MTV nhà máy United Healthcare chế tạo đóng gói phương pháp cấy vào mơ thỏ đặt lòng động mạch đùi chó tơi nhận xét sau: - Động vật thử nghiệm sống 100% ăn uống, sinh hoạt bình thường Vết mổ để cấy đặt stent khơ, khơng rò rỉ dịch, khơng đùn đẩy vật liệu ngồi Vùng đùi chó phía ngoại vi đoạn đặt stent không thấy biểu thiếu máu: nhiệt độ, màu sắc, cử động bình thường, không sưng, đau - Stent không làm biến đổi vùng mô cấy ghép đại thể: màu sắc, độ đàn hồi, Khơng thấy khác biệt nhóm stent thử nghiệm stent chứng - Stent không làm biến đổi vùng mô cấy ghép vi thể: Không thấy tập trung tế bào viêm, mô sợi quanh vật liệu giảm dần theo thời gian (giai đoạn tuần tuần) Khơng thấy khác biệt nhóm stent thử nghiệm stent chứng - Stent nghiên cứu nguyên vẹn, không bị biến dạng, đổi màu, không bị ăn mòn Do vậy, bước đầu kết luận stent phủ thuốc everolimus công ty TNHH MTV nhà máy HEALTHCARE chế tạo có tính phù hợp mơ cao 44 KHUYẾN NGHỊ Từ kết nghiên cứu xin đưa số khuyến nghị sau:  Để đánh giá tồn diện tính an toàn mặt sinh học vật liệu trước đưa vào ứng dụng lâm sàng ngồi đánh giá tính phù hợp mơ quy mơ đề tài này, cần tiến hành thêm thử nghiệm sinh học khác dựa tiêu chuẩn ISO-10993 như: khả gây độc tế bào; khả gây huyết khối, tan máu; ảnh hưởng đến quan tạo máu, chức gan, thận  Cần tiến hành theo dõi nghiên cứu thời gian dài để đánh giá xác ảnh hưởng, tác động lâu dài vật liệu ghép lên thể vật chủ như: đáp ứng viêm mạn tính, nguy đột biến gen, sinh ung thư…  Nên tiến hành nghiên cứu nhiều mơ hình động vật khác với kích thước từ nhỏ đến lớn khác như: chuột, lợn, dê, cừu, bò…để so sánh đáp ứng khác vật liệu loài Điều làm tăng mức độ tin cậy kết nghiên cứu, giảm thiểu rủi ro trước đưa vào thử nghiệm thể người TÀI LIỆU THAM KHẢO The World Health Organization (WHO) (Updated January 2017) The top 10 causes of death, , 03/05 The World Health Organization (WHO) (2015) Cardiovascular diseases (CVDs), , 03/05 Bộ Y tế (2014) Cơ cấu bệnh tật tử vong theo chương, Niên giám thống kê năm 2014, Nhà xuất y học, 193 Tiêu chuẩn quốc gia (2005) Phần 1: Đánh giá thử nghiệm, TCVN 7391 /ISO 10993: Đánh giá sinh học trang thiết bị y tế Bộ Khoa học Công nghệ, Williams D.F (2009) On the nature of biomaterials Biomaterials, 30, 5897-5909 Bergmann C.P S A (2013) Biomaterials Dental Ceramics, Springer Berlin Heidelberg, Berlin, 9-13 Migonney V (2014) History of Biomaterials Materials, John Wiley & Sons, Inc, 1-10 Mihov D Katerska B (2010) Some biocompatible Materials used in Medical Practice Trakia Journal of Sciences.8(2), 119-125 Buddy D Ratter, Allan S Hoffman Jack E Lemons (1996) An Introduction to Materials in Medicine Biomaterials science, Academic Press, Inc, 1, 11-21 10 Trần Lê Bảo Hà (2012) Công nghệ vật liệu sinh học, Nhà xuất giáo dục Việt Nam 11 Hoàng Thị Quỳnh Như (2015) Đánh giá tính phù hợp mơ vật liệu Ti-5Al-2,5Fe Viện công nghệ- Bộ Công Thương chế tạo thực nghiệm, Khóa luận tốt nghiệp BSDK, Trường Đại học Y Hà Nội 12 Williams D.F (1987) Biomaterials Biocompatibility in Health Problems Definitions in Biomaterials, Med Prog Technol, 4, 31-42 13 Elshahawy W (2011) Biocompatibility, INTECH Open Access Publisher 15 14 Black J (2005) Biologiacal Performance of Materials : Fundamentals of Biocompatibility CRP Press 15 Eberhart R C., HuoH Nelson K (1991) Cardiovascular Materials, MRS Bulletin, 17th edition 16 Marchant R E., Wang I (1994) Physical and chemical aspects of biomaterials used in humans The Host Response and Biomedical Devices, Implantation Biology, 13-38 17 Anderson J.M (2001) Biological responses to Materials Annual Review of Materials Research, 31 (1), 81-110 18 Trần Thị Chính (2012) Sinh lí bệnh học, Trường Đại học Y Hà Nội, Nhà xuất Y học, Hà Nội, 209-230 19 Lê Đình Roanh (2009) Bệnh học viêm bệnh nhiễm khuẩn, Nhà xuất y học, Hà Nội 20 Hurst JW (1986) The first coronary angioplasty as described by Andreas Gruentzig Am J Cardiol, 57, 185-186 21 Spencer B King III (1998) The Development of Interventional Cardiology, Journal of the American College of Cardiology, 31 (4), 64-88 22 Serruys PW, Kutryk MJB Ong ATL (2006) Coronary-artery stents N Engl J Med, 354 (483-95) 23 Diana Vishnevetsky, Payal Patel, Hector Tijerino cộng (2004) Sirolimus-Eluting Coronary Stent Am J Health Syst Pharm, 61 (5) 24 Nordmann A, Briel M Bucher H (2006) Safety of Drug Eluting Stents: Insights from a meta-analysis European Society of Cardiology, Barcelona 25 Holmes R, Martin B, Jeffrey W cộng (2004) Analysis of 1-Year Clinical Outcomes in the SIRIUS Trial Circulation, 109, 634-640 26 Sigmund S Antonio C ( 2009) Final 5-Year Results of the TAXUS II Trial Circulation, 120, 1498-1504 27 FDA (2016) Circulatory system devices panel, Center for devices and radiological health medical devices advisory committee, 28 G Nakazawa, A V Finn, M C John cộng (2007) The significance of preclinical evaluation of sirolimus-, paclitaxel-, and zotarolimus-eluting stents Am J Cardiol, 100 (8B), 36M-44M 29 A J Carter, M Aggarwal, G A Kopia cộng (2004) Long-term effects of polymer-based, slow-release, sirolimus-eluting stents in a porcine coronary model Cardiovasc Res, 63 (4), 617-624 30 Diletti R (2012 ) ABSORB II randomized controlled trial Am J Cardiol, 164 (5), 654-663 31 Masahiro M, Akihiro H Shinzo T (1998) Experimental Study of the Histocompatibility of Covered Expandable Metallic Stents in the TracheaExperimental Study of the Histocompatibility of Covered Expandable Metallic Stents in the Trachea American College of Chest Physicians, 114 (1), 110-114 32 Stefan K (2009) Long-Term Safety and Efficacy of Drug-Eluting versus Bare-Metal Stents in Sweden, N Engl J Med, 360, 1933-1945 33 Ngơ Duy Thìn (2015) Tính tương hợp sinh học stent phủ thuốc sirolimus, stent phủ thuốc paclitaxel, stent khơng phủ thuốc, bóng nong mạch có phủ thuốc bóng nong mạch khơng phủ thuốc 34 Nguyễn Quốc Thái Nguyễn Lân Việt (2011) Nghiên cứu hiệu stent phủ thuốc điều trị nhồi máu tim câp Tạp chí Y học thực hành, (751), 77-80 35 Pearce A.I., Richards R.G., Milz S cộng (2007) Animal models for implant biomaterial research in bone: a reveiw Eur Cell Mater, 13, 1-10 36 Richard W Bianco (2013) Large Animal Models in Cardiac and Vascular Biomaterials Research and Assessment Biomaterials Science: An Introduction to Materials, Elsevier Inc, 24, 653-676 37 Schwartz S (2008) Drug-Eluting Stents in Preclinical Studies Updated Consensus Recommendations for Preclinical Evaluation Circ Cardiovasc Interv, (2), 43-53 38 International Organization for Standardization( ISO) (2016) Part 6: Tests for local effects after implantation Biological evaluation of medical devices, 6, 29 39 Suzuki T Kopia G (2001) Stent-based delivery of sirolimus reduces neointimal formation in a porcine coronary model Circ Cardiovasc Interv, 104 (10), 1188-1193 40 Waksman R., Pakala R al ( 2007) Efficacy and safety of pimecrolimus-eluting stents in porcine coronary arteries Cardiovasc Revasc Med, (4), 259-274 41 Ma GS, Chen LJ Chen Z (2008 ) Biocompatibility of tetramethylpyrazine-eluting stents in normal porcine coronary arteries Biomed Pharmacother, 62 (2), 125-129 42 Virmari R., Kolodgie F.D Farb A (2003) Drug eluting stents: are human and animal studies comparable? Hearts, 89, 133-138 ... đề tài nghiên cứu Đánh giá tính phù hợp mô stent phủ thuốc everolimus dụng cụ can thiệp tim mạch công ty TNHH MTV nhà máy UNITED HEALTHCARE chế tạo thực nghiệm đề tài thân thực Các kết khóa... cứu thực nghiệm động vật [4] Vì vậy, quy mô đề tài tiến hành nghiên cứu “ Đánh giá tính phù hợp mơ stent phủ thuốc everolimus tronng dụng cụ can thiệp tim mạch công ty TNHH MTV nhà máy UNITED HEALTHCARE. .. toàn mạch vành trở lại bình thường sau nội mạc hóa Hình 1.3 Stent phủ thuốc hệ thứ Stent phủ thuốc everolimus nằm thiết bị can thiệp mạch máu công ty TNHH MTV nhà máy United Healthcare chế tạo